全 文 :中国生态农业学报 2008 年 11 月 第 16 卷 第 6 期
Chinese Journal of Eco唱Agriculture,Nov.2008,16(6):1523 -1527
DOI:10.3724/SP.J.1011.2008.01523
倡倡
蛋氨酸铜对西门塔尔牛日粮养分消化代谢及血液指标的影响倡 倡
王 聪 董宽虎 刘 强倡倡 黄应祥 裴 华 刘 曦
(山西农业大学动物科技学院 太谷 030801)
摘 要 选用 16 头平均体重 420 kg、年龄 2.5 岁的中国西门塔尔牛阉牛,采用随机区组设计分为 4 组,以混合
精料和风干玉米秸秆为基础日粮,以蛋氨酸铜为铜源,在基础日粮中分别添加铜 0 mg· kg -1、8 mg· kg -1、16
mg· kg -1和 24 mg· kg -1,研究蛋氨酸铜对西门塔尔牛营养物质消化代谢和血液指标的影响。 结果表明:添加
铜处理可显著提高有机物质(OM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)和无氮浸出物(NFE)消化率(P <0.05)。
8 mg· kg -1和 16 mg· kg -1处理组显著提高中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)消化率(P <0.05)。
蛋氨酸铜补充组显著提高消化氮(DN)、沉积氮(RN)和 RN/DN。 8 ~16 mg· kg -1蛋氨酸铜补充组较 0 mg·
kg -1组显著增加血清甘油三酯 ( TG)、葡萄糖 (GLU)、总胆固醇 ( TC)、白蛋白 (ALB)和总蛋白 ( TP)含量
(P <0.05)。 24 mg· kg -1处理组血清尿素氮(SUN)明显低于对照组(P <0.05)。 随着蛋氨酸铜添加水平的
提高,各组间血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶
(LDH)差异均不显著(P >0.05),血清铜蓝蛋白(Cp)逐渐增加(P <0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘
肽过氧化物酶(GSH唱px)活性显著提高(P <0.05),丙二醛(MDA)呈下降趋势(P <0.05)。 16 mg· kg -1和 24
mg· kg -1处理组血清铜含量显著高于对照和 8 mg· kg -1处理组(P <0.05)。 根据试验结果,蛋氨酸铜添加量
以 8 ~16 mg· kg -1为宜。
关键词 西门塔尔牛 蛋氨酸铜 消化率 氮平衡 生化指标
中图分类号:S816.79 文献标识码:A 文章编号:1671-3990(2008)06-1523-05
Effect of copper methionine on nutrient metabolism and serum physico唱chemical
parameters in Simmental steer
WANG Cong, DONG Kuan唱Hu, LIU Qiang, HUANG Ying唱Xiang, PEI Hua, LIU Xi
(College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, China)
Abstract Sixteen Simmental steers on corn straw diet were stratified by weight and randomly assigned in a block design experi唱
ment,which consisted of 0 mg (control), 8 mg, 16 mg or 24 mg of supplemental Cu (as copper methionine) per kg dry matter
(DM) diet, to evaluate the effect of different copper methionine levels on nutrient digestibility, nitrogen balance and serum pa唱
rameter.The results show that the digestibility of organic matter, crude protein, ether extract and nitrogen free extract in supple唱
mented Cu treatments increases significantly (P <0.05).The digestibility of neutral detergent and acid detergent fiber in groups
supplemented with 8 mg and 16 mg Cu per kg DM diet are higher than those of the control (P <0.05).Digestible nitrogen, re唱
tention nitrogen and the utilization of nitrogen in Cu treatments increase significantly (P <0.05).The concentration of serum tri唱
glycerides, glucose, total cholesterol, albumin and total protein increases significantly (P <0.05).Serum urine nitrogen con唱
centration in groups supplemented with 24 mg Cu per kg DM diet decreases significantly (P <0.05).The activity of serum glu唱
tamate oxaloacetate transaminase, glutamate pyruvate transaminase, alkaline phosphatase, acid phosphatase and lactate dehydro唱
genase is not significantly affected.The activity of serum ceruloplasmin increases significantly (P <0.05).The activity of serum
SOD and GSH唱px as well increases significantly (P <0.05).Serum maleic dialdehyde concentration decreases significantly
(P <0.05).Serum Cu concentration in groups supplemented 16 mg and 24 mg Cu per kg DM diet significantly increases over
those of the control and 8 mg Cu per kg group (P <0.05).Optimum Cu supplemented dose is 8 ~16 mg Cu per kg DM diet.
Key words Simmental steer, Copper methionine, Digestibility, Nitrogen balance, Physico唱chemical parameter
倡 山西省科技攻关项目(2007031054)及山西省青年科技研究基金项目(2007021034)资助
通讯作者:刘强(1971 ~) ,男,博士,副教授,主要从事动物营养与饲料科学研究。 E唱mail: liuqiangabc@163.com
王聪(1973 ~) ,女,博士,副教授,主要从事反刍动物营养研究。 E唱mail: wangdx0321@163.com
收稿日期:2007-09-13 接受日期:2008-01-21
中国生态农业学报 2008 第 16卷
(Received Sept.13, 2007; accepted Jan.21, 2008)
铜是牛体内铜蓝蛋白、超氧化物歧化酶等多种
酶的组成成分和激活剂,主要参与血红蛋白的形
成、骨骼的构成及被毛色素的沉着等。 铜不足或过
量均会引起体内代谢紊乱,导致生产性能降低 [1] 。
目前在牛饲料中添加的铜源主要是硫酸铜,在瘤胃
内溶解为铜离子和硫酸根,铜离子与饲料中的硫酸
盐或含硫氨基酸经过瘤胃微生物作用转化产生的
S2 -及饲料中钼形成的钼离子相互作用形成氧硫钼
酸铜或硫代钼酸铜,铜的利用率低下,粪铜排泄多,
对环境造成污染[2] 。 而有机铜可避免与钼、硫互作
形成难溶解的盐,排除铜离子对瘤胃微生物的抑制
作用,提高铜的生物学利用率,减少对环境的污
染 [3] 。 因此研究日粮添加蛋氨酸铜对西门塔尔牛
营养物质代谢和血液指标的影响有着重要意义。
刘强等[ 4]研究了蛋氨酸铜对西门塔尔牛瘤胃发酵
及尿嘌呤衍生物的影响,杨文平等[ 5]研究了蛋氨酸
铜对绵羊增重及体内代谢的影响。 到目前为止,铜
的研究多集中在硫酸铜与螯合铜对生产性能、瘤胃
发酵等方面的研究[6 -9] ,关于蛋氨酸铜对西门塔尔
牛营养物质代谢和血液指标的影响未见报道。 本
试验以劣质粗饲料玉米秸秆为日粮,研究蛋氨酸铜
对西门塔尔牛营养物质代谢和血液指标的影响,以
探讨反刍家畜日粮中蛋氨酸铜的适宜添加量。
1 材料与方法
1.1 试验动物和试验设计
选用 16 头平均体重 420 kg,年龄 2.5 岁西门
塔尔牛阉牛,采用随机区组设计分为 4 组,各组均
以混合精料和风干玉米秸秆为基础日粮,以蛋氨
酸铜为铜源,在基础日粮中分别添加铜 0 mg ·
kg -1 、8 mg· kg -1 、16 mg· kg -1和 24 mg· kg -1 。
本试验所用蛋氨酸铜 (Copper methionise)为广州
天科科技有限公司提供的 DL -蛋氨酸螯合铜,饲
料级,含 Cu 17%、氨基酸 80%。 试验预试期 15 d,
正试期 10 d。
1.2 试验日粮及饲养管理
试验基础日粮组成和实际营养水平见表 1。 试
验牛每日饲喂 3 次 (7:00,15:00,23:00),单槽饲
养,专人负责,每头牛每天喂精料 3 kg,玉米秸秆 6
kg,自由饮水。
表 1 试验基础日粮组成和营养水平
Tab.1 Ingredient and nutrient composition of basal diet
日粮组成 Ingredient (%) 日粮营养水平 Nutrient level
玉米秸秆 Corn straw 60.0 综合净能 NEmf (MJ· kg -1 ) 2) 6.54
玉米 Corn grain 20.8 粗蛋白质 Crude protein (%) 10.74
麸皮 Wheat bran 4.0 中性洗涤纤维 Neutral detergent fiber (%) 56.51
豆粕 Soybean meal 6.6 酸性洗涤纤维 Acid detergent fiber (%) 35.59
棉粕 Cottonseed cake 4.8 钙 Calcium (%) 0.75
菜粕 Rapeseed meal 2.0 磷 Phosphorus (%) 0.52
石粉 Calcium carbonate 0.5 铜 Copper (mg· kg -1 ) 5.87
食盐 Salt 0.4
磷酸氢钙 Dicalcium phosphate 0.35
预混料 Mineral and vitamin mix1) 0.55
1)每千克预混料含维生素 A 150 000 国际单位,维生素 D 60 000 国际单位,维生素 E 750 国际单位,铁 1 500 mg,锌 1 500 mg,锰 2 000 mg,
碘 12.5 mg,硒 15 mg,钴 5 mg.One kilogram mineral and vitamin mix containes VA 150 000 IU, VD 60 000 IU, VE 750 IU, Fe 1 500 mg, Zn 1 500
mg, Mn 2 000 mg, I 12.5 mg, Se 15 mg, Co 5 mg.2)综合净能(Net energy of maintain and finishing, NEmf )根据原料组成计算所得,其余为实测
值。 NEmf is calculated value.Other nutrient levels are measured values.
1.3 样品采集与分析
试验期详细记录每头牛的采食量、剩草料量、排
泄粪量和排泄尿量。 每天采集精料与玉米秸秆样品,
每天粪、尿样品均按 2%比例采集,粪样取 2 份,其中
1 份鲜粪定氮,另 1 份于 65 ~70 ℃测定初水后制成
风干样品保存;尿样低温保存,连续 10 d 的样品制成
混合样。 样品干物质(DM)、有机物质(OM)、粗蛋白
质(CP)、钙(Ca)、磷(P)含量采用实验室常规方法测
定[10] ;中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)
采用 Van Soest方法测定[11] ;样品铜(Cu)采用国标法
用 AA -2610 原子吸收分光光度计测定。
试验期最后 1 d 于早饲前颈静脉采血 40 mL,
凝血后 2 500 r· min -1离心 10 min,分离血清样品,
分装于 Eppendorf 管中于 -40 ℃冰柜保存。 血糖
(Glucose,GLU)、总蛋白(Total protein,TP)、白蛋白
(Albumin, ALB )、 尿素氮 ( Serum urine nitrogen,
4251
第 6期 王 聪等:蛋氨酸铜对西门塔尔牛日粮养分消化代谢及血液指标的影响
SUN)、甘油三酯( Total triglyceride,TG)、总胆固醇
(Total cholesterol,TC)、丙二醛 (Maleic dialdehyde,
MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶 ( Glutathione peroxi唱
dase,GSH -px)、超氧化物歧化酶 ( Superoxide dis唱
mutase,SOD)、铜蓝蛋白 (Ceruloplasmin,Cp)、乳酸
脱氢酶 ( Lactate dehydrogenase,LDH)、碱性磷酸酶
(Alkaline phosphatase, AKP )、酸性磷酸酶 ( Acid
phosphatase,ACP)、谷丙转氨酶(Glutamate pyruvate
transaminase,GPT)、谷草转氨酶(Glutamate oxaloac唱
etate transaminase,GOT)和谷胱甘肽 (Glutathione,
GSH)试剂盒购自南京建成生物工程研究所,用 UV
-2100 紫外 -可见分光光度计测定。
1.4 数据处理及统计分析
试验数据应用 SPSS10.0 统计分析软件的 One唱
way唱anova 进行方差分析和 LSD 多重比较。 试验结
果以平均数±标准误表示。
2 结果与分析
2.1 蛋氨酸铜对西门塔尔牛日粮养分表观消化率
的影响
由表 2 可见,添加蛋氨酸铜处理组 OM、CP、EE
和 NFE 消化率显著高于对照组(P <0.05),但处理
组间差异不显著(P >0.05);8 mg· kg -1和 16 mg·
kg -1处理组 NDF 和 ADF 消化率显著高于对照组
(P <0.05),24 mg· kg -1处理组与对照差异不显著
( P >0.05)。
表 2 日粮添加蛋氨酸铜水平对西门塔尔牛日粮养分表观消化率的影响
Tab.2 Effects of copper methionine supplemental levels on nutrient apparent digestibility in Simmental steer %
项目
Item
铜添加量 Supplemental copper (mg· kg -1 )
0 8 16 24
有机物质 Organic matter 56.24 ±0.92b 66.12 ±1.77a 67.94 ±1.16a 62.48 ±1.58a
粗蛋白质 Crude protein 52.87 ±1.58b 59.02 ±0.58a 64.17 ±0.42a 64.04 ±0.76a
粗脂肪 Ether extract 43.21 ±2.32b 51.39 ±3.43a 53.02 ±3.45a 52.35 ±1.22a
无氮浸出物 Nitrogen free extract 53.01 ±2.14b 62.77 ±0.36a 63.81 ±0.67a 62.03 ±0.96a
中性洗涤纤维 Neutral detergent fiber 48.65 ±1.41b 56.42 ±2.07a 59.01 ±1.21a 55.01 ±2.24ab
酸性洗涤纤维 Acid detergent fiber 44.32 ±0.87b 55.76 ±2.23a 56.84 ±1.05a 48.20 ±2.69b
表中同行不同小写字母表示差异显著 ( P <0.05) ,下同。 Different small letters in the same row show significant difference ( P <0.05 ).The
same below.
2.2 蛋氨酸铜对西门塔尔牛日粮氮平衡的影响
由表 3 可见,日粮添加蛋氨酸铜对食入氮影响
不显著(P >0.05),但处理组粪氮和尿氮显著降低
(P <0.05);处理组 DN、RN 和 RN/DN 显著高于对
照组(P <0.05),24 mg· kg -1组显著高于 8 mg·
kg -1组(P <0.05)。
表 3 日粮添加蛋氨酸铜水平对西门塔尔牛日粮氮平衡的影响
Tab.3 Effects of copper methionine supplemental levels on the nitrogen balance in Simmental steer
项目
Item
铜添加量 Supplemental copper (mg· kg -1 )
0 8 16 24
食入氮 Intake nitrogen ( g· d -1 ) 120.99 ±2.35a 118.40 ±1.86a 120.61 ±2.14a 127.39 ±2.63
粪 氮 Feces nitrogen ( g· d -1 ) 55.32 ±1.03a 48.52 ±1.24b 45.63 ±1.18b 45.43 ±0.82b
尿 氮 Urine nitrogen ( g· d -1 ) 39.41 ±0.65a 38.13 ±0.87b 35.94 ±1.20b 34.19 ±0.97b
可消化氮 Digestible nitrogen ( g· d -1 ) 65.67 ±1.34c 69.88 ±0.99b 74.98 ±1.32ab 81.96 ±1.19a
沉积氮 Retenion nitrogen ( g· d -1 ) 26.26 ±0.58c 31.75 ±1.02b 39.04 ±0.49ab 47.77 ±0.52a
沉积氮/消化氮 RN/DN (%) 39.99 ±0.85c 45.44 ±0.59b 52.07 ±0.62ab 58.28 ±0.45a
2.3 蛋氨酸铜对西门塔尔牛血液指标的影响
由表 4 可见,日粮添加蛋氨酸铜西门塔尔牛血清
甘油三酯、血糖、总胆固醇、白蛋白和总蛋白含量显著
增加(P <0.05);血清尿素氮呈下降趋势,24 mg·
kg -1处理组明显低于对照组和 8 mg· kg -1组(P <
0.05),但与 16 mg· kg -1组差异不显著(P >0.05);
血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸
酶、乳酸脱氢酶各组差异均不显著(P >0.05);铜蓝
蛋白活性逐渐增加,差异显著(P <0.05);超氧化物
歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性呈上升趋势,显著
提高(P <0.05);丙二醛含量呈下降趋势,差异显著
(P <0.05),但处理组间差异不显著(P >0.05);16
mg· kg -1和 24 mg· kg -1组血清铜含量显著高于对
照和 8 mg· kg -1组(P <0.05)。
5251
中国生态农业学报 2008 第 16卷
表 4 日粮添加蛋氨酸铜水平对西门塔尔牛血液指标的影响
Tab.4 Effects of copper methionine supplemental levels on serum parameter in Simmental steer
项目
Item
铜添加量 Supplemental copper (mg· kg -1 )
0 8 16 24
甘油三酯 Total triglyceride (mmol· L -1 ) 0.45 ±0.02b 0.65 ±0.04a 0.60 ±0.03a 0.52 ±0.02a
血糖 Glucose (mmol· L -1 ) 2.87 ±0.23b 3.90 ±0.09a 3.97 ±0.06a 3.85 ±0.08a
总胆固醇 Total cholesterol (mmol· L -1 ) 2.81 ±0.08b 3.73 ±0.06a 3.90 ±0.10a 3.79 ±0.08a
白蛋白 Albumin ( g· L -1 ) 30.87 ±2.35b 37.99 ±1.83a 39.44 ±2.77a 41.09 ±2.53a
总蛋白 Total protein ( g· L -1 ) 46.89 ±1.52b 52.96 ±0.74a 53.41 ±3.37a 58.33 ±2.96a
尿素氮 Urine nitrogen (mmol· L -1 ) 4.12 ±0.25a 3.96 ±0.42a 3.79 ±0.39ab 2.74 ±0.24b
谷丙转氨酶 Glutamate pyruvate transaminase ( IU· L -1 ) 7.26 ±1.09a 7.03 ±1.48a 6.41 ±1.54a 8.29 ±1.32a
谷草转氨酶 Glutamate oxaloacetate transaminase ( IU· L -1 ) 14.16 ±0.65a 15.01 ±6.02a 15.27 ±1.07a 15.12 ±1.26a
碱性磷酸酶 Alkaline phosphatase (U· dL -1 ) 13.47 ±0.96a 14.68 ±0.65a 12.71 ±0.59a 13.51 ±0.39a
酸性磷酸酶 Acid phosphatase (U· dL -1 ) 2.65 ±0.17a 2.33 ±0.11a 2.92 ±0.25a 2.97 ±0.41a
乳酸脱氢酶 Lactate dehydrogenase (U· L -1 ) 8.95 ±0.41a 9.13 ±2.50a 8.58 ±2.15a 8.57 ±0.10a
铜蓝蛋白 Ceruloplasmin (U· L -1 ) 19.79 ±2.27b 25.64 ±4.73a 25.23 ±2.53a 23.00 ±3.09a
超氧化物歧化酶 Superoxide dismutase (U· mL -1 ) 77.93 ±2.77c 89.49 ±4.66b 89.62 ±3.96b 101.69 ±3.19a
谷胱甘肽过氧化物酶 Glutathione peroxidase (U· mL -1 ) 37.36 ±2.72c 62.69 ±2.75b 75.04 ±4.72a 78.21 ±3.03a
丙二醛 Maleic dialdehyde ( nmol· mL -1 ) 7.78 ±3.81a 2.87 ±0.39b 2.94 ±0.58b 2.23 ±0.46b
铜 Copper (μg· dL -1 ) 115.76 ±12.45b 137.78 ±12.63b 151.36 ±10.32a 174.47 ±15.78a
3 小结与讨论
动物体内有许多含铜酶,日粮中添加适量的铜
可通过酶促进营养物质的消化利用。 本试验日粮
添加蛋氨酸铜,处理组有机物质、粗蛋白质、粗脂肪
和无氮浸出物消化率显著高于对照组,但处理组之
间差异不显著;这与 Engle 等[ 12]研究结果一致。 8
mg· kg -1和 16 mg· kg -1处理组中性洗涤纤维和酸
性洗涤纤维消化率显著高于对照组,24 mg· kg -1组
与对照差异不显著。 蛋氨酸铜对食入氮影响不显
著,但加铜组粪氮和尿氮显著降低;加铜组可消化
氮、沉积氮和沉积氮/可消化氮显著高于对照组,24
mg· kg -1组显著高于 8 mg· kg -1组。 这说明适量
铜可以促进氮的吸收和利用,减少氮的排泄。
血清甘油三酯和总胆固醇含量的增减可作为
脂肪代谢和肝功能指标,本试验中随着日粮铜水平
的增加,血清甘油三酯和总胆固醇含量增加,说明
日粮添加蛋氨酸铜提高了脂类代谢。 血清血糖、白
蛋白和总蛋白含量的增减可作为糖和蛋白质代谢
的指标,本试验中随着日粮铜水平的增加,血清血
糖、白蛋白和总蛋白含量增加,说明日粮添加蛋氨
酸铜提高了糖和蛋白质代谢[12] ,这与营养物质消化
率测定结果一致。 本研究血清尿素氮呈下降趋势,
24 mg· kg -1组明显低于对照组和 8 mg· kg -1组,说
明高铜可通过加速蛋白质的合成或减缓蛋白质的
降解而提高机体内氮的存留。 谷丙转氨酶和谷草
转氨酶的活性是反映肝脏和心脏功能的重要指标,
它们的活性升高或降低均可反映出肝脏和心脏可
能有所损伤,本研究发现不同处理谷丙转氨酶和谷
草转氨酶活性差异不显著,说明添加蛋氨酸铜促进
了氨基酸代谢和蛋白质、脂肪及糖的转换。 碱性磷
酸酶活性增高表明软骨细胞的分化能力增强[ 13] ,本
试验结果表明碱性磷酸酶和酸性磷酸酶没有显著
变化。 乳酸脱氢酶呈现下降趋势,但差异不显著,
说明蛋氨酸铜的添加未对肝脏造成损伤。 铜蓝蛋
白能减少超氧阴离子自由基的生成,本试验随着日
粮铜添加水平的增加,血清铜蓝蛋白活性逐渐增
加,饲粮添加铜可提高抗氧化酶的活性,从而使机
体排除超氧阴离子自由基的能力增加 [14] ,增强机体
的适应能力,保持内分泌系统的稳定,本试验中超
氧化物歧化酶呈增加趋势,Lauridsen 等[15] 认为铜
有助于改善组织抗氧化能力,高铜对超氧化物歧化
酶活性有极显著影响。 冯杰等 [16]的研究说明超氧
化物歧化酶有利于提高氧的利用率。 GSH唱px 的主
要作用是清除脂质过氧化物和 H2O2 ,减轻细胞膜中
不饱和脂肪酸的过氧化作用,减少自由基的产生,
本试验的结果也验证了这一点,随铜浓度的升高,
GSH唱px 的活性增强。 丙二醛是生物体内自由基的
指示物[17] ,本试验中丙二醛呈明显下降趋势,说明
添加蛋氨酸铜后,由于铜蓝蛋白显著增强,超氧化
物歧化酶和 GSH唱px 活性增强,体内自由基减少,过
氧化作用减弱,丙二醛含量减少。 证明适当补铜可
降低体内的过氧化程度,减少脂质过氧化物对机体
的损害。 血清铜含量反映铜在体内的代谢状况和
饲料铜的利用率,血清铜浓度随日粮铜水平增加而
6251
第 6期 王 聪等:蛋氨酸铜对西门塔尔牛日粮养分消化代谢及血液指标的影响
增加,表明饲料铜的吸收增加,体内铜的代谢过程
旺盛。 本试验中 16 mg· kg -1和 24 mg· kg -1组血
清铜含量显著高于对照和 8 mg· kg -1组。
日粮添加蛋氨酸铜后,有机物质、粗蛋白质、无
氮浸出物、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维表观消化
率、氮的消化率和利用率及矿物质表观存留率以添
加蛋氨酸铜 8 ~16 mg· kg -1为佳。 添加蛋氨酸铜
8 ~16 mg· kg -1可明显提高抗氧化能力,且吸收率
最佳。 考虑基础日粮含铜量,建议日粮铜水平为
13.87 ~21.87 mg· kg -1 。
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