全 文 ：　 　 倡 海南省重点科技计划项目 （０６１２１）和海南省教育厅高校科学研究项目 （Hj Kj２００７２０）资助
　 　 倡倡 通讯作者
收稿日期 ：２００６唱０３唱０９ 　 改回日期 ：２００６唱０６唱０８
泰国产方斑东风螺养殖群体遗传多样性的 RAPD 分析 倡
黄 　海 　王永强 　尹绍武 倡倡 雷从改 　冯永勤 　陈国华 　张 　本
（海南大学热带生物资源教育部重点实验室 ，海南大学海洋学院 　海口 　 ５７０２２８）
摘 　 要 　 用随机扩增多态性 DNA（RAPD）技术对泰国产方斑东风螺养殖群体的遗传多样性进行检测 ，从 １００个随机引物
中筛选出 ２１个引物对方斑东风螺的 DNA进行扩增 ，结果表明 ：２１个引物共检测到 ２２２条清晰且重复性好的条带 ，每个引
物可扩增出 ４ ～ １６ 条带 ，分子量在 ２００ ～ ２２００bp之间 ，其中多态位点为 １５６ 个 ，占 ７０畅２７ ％ ；群体的 Shannon 多样性指数为
０畅２８１８ ，Nei基因多样性指数为 ０畅２４９１ ；个体间最大遗传距离为 ０畅２９１ ，最小遗传距离为 ０畅０６６ 。通过与其他贝类遗传多样
性的研究结果比较 ，可初步判断泰国产方斑东风螺养殖群体的遗传多样性比较丰富 。
关键词 　 方斑东风螺 　 遗传多样性 　 随机扩增多态性 DNA（RAPD） 　 遗传距离
Genetic diversity analyse of Thailand Babylonia areolata with RAPD markers ．HUANG Hai ，WANG Yong唱Qiang ，YIN Shao唱
Wu ，LEI Cong唱Gai ，FENG Yong唱Qin ，CHEN Guo唱Hua ，ZHANG Ben（Key Lab for Tropical Biology Resources of Ministry of Ed唱
ucation ，College of Oceanography ，Hainan University ，Haikou ５７０２２８ ，China） ，CJEA ，２００７ ，１５（６） ：１２６ ～ １３０
Abstract 　 Random Amplified Polymorphic DNA（RAPD）technique was applied to detect DNA polymorphism in ２０ indi唱
viduals of an ar tificially grown population of Babylonia areolata impor ted from Thailand ．２１ random primers were used
from which a total of ２２２ bands were generated ．Each primer used in the detection has ４ ～ １６ bands ，w ith DNA fragment
lengths ranging from ２００ to ２２００bp ．Observed total amount and percentage of the polymorphic fragments are １５６ and
７０ ．２７ ％ ，and the Shannon and Nei index of phenotypic and gene diversity of raised population are ０ ．２８１８ and ０ ．２４９１ re唱
spectively ．Genetic distance among individuals ranges from ０ ．０６６ to ０ ．２９１ ．Comparing genetic diversit y of B ．areolata
with that of other shellfish reveals a heft y genetic diversit y of B ．areolata ．
Key words 　 Babylonia areolata ，Genetic diversit y ，Random Amplified Polymorphic DNA（RAPD） ，Genetic distance
（Received March ９ ，２００６ ；revised June ８ ，２００６）
方斑东风螺［ Babylonia areolata（Lamarck）］属腹足纲 ，新腹足目 ，娥螺科 ，身体呈长卵圆形 ，螺旋部呈圆
锥状 ，体螺层膨大 ，壳质厚而坚实 ，壳表光滑 ，色白具褐黄色方形的斑块 ，生活于水深 ７ ～ ３０m 的砂质海底［１］ ，
是热带 、亚热带贝类品种 ，在泰国 、日本 、中国均有分布 ，我国主要分布在福建 、广东和广西 、海南 、台湾沿
海［２ ，３］ 。 方斑东风螺生长速度快 ，抗病能力强 ，肉质细嫩且味美 ，具有较高的经济和营养价值 ，已发展为一个
新兴的海水养殖品种 。 目前 ，福建 、广东 、海南 、台湾等地已初步实现方斑东风螺人工育苗规模化和养殖产
业化 。 国内外学者对东风螺的繁殖生物学 、生态学 、繁殖技术 、养殖技术等已作了较多的研究［２ ～ ７］ ，但尚未
见东风螺遗传多样性的研究报道 。
随机扩增多态性 DNA（Random Amplified Polymorphic DNA ，简称 RAPD）技术具有快速 、灵敏 、简便等特
点［１６ ，１７］ ，已被广泛应用于遗传多样性检测及品系鉴定等多个方面 。 本研究采用 RAPD技术 ，对目前在海南省已
实现规模化养殖的泰国产方斑东风螺的遗传多样性进行分析 ，研究其遗传背景 ，以期从 DNA 水平了解方斑东
风螺养殖群体的遗传资源现状 ，为其资源的合理利用和保护提供依据 ，促进其产业化的健康和可持续发展 。
1 　 实验材料与方法
实验所用方斑东风螺养殖群体样本（ N ＝ ５０）于 ２００５ 年 ６ 月由海南定大养殖有限公司提供 ，体重为６８ ～
１４０g ，运回实验室暂养于水族缸中供提取 DNA 用 。 基因组 DNA 的提取采用酚唱氯仿提取法 。 随机取方斑东
风螺样本 ２０ 只 ，各取新鲜腹足 ０畅１g 左右 ，用灭菌的 ０畅８ ％ 生理盐水漂洗 １ ～ ２min ，再用小剪刀剪碎腹足 ，加
第 １５卷第 ６ 期 中 国 生 态 农 业 学 报 Vol ．１５ 　 No ．６
２ ０ ０ ７年 １ １月 Chinese Journal of Eco唱Agriculture Nov ．，　 ２００７
入 ５００μL DNA 提取液 、SDS（１０ ％ ）４０μL ，轻松摇匀后在 ３７ ℃ 下水浴 ２ ～ ３min ；之后再加入 ２５mg／mL 蛋白酶
K ４０μL 、Rase酶 ２μL摇匀后于 ５５ ℃ 下水浴消化过夜（大约 １８ ～ １９h） 。 加入等体积饱和酚抽提 ２０min 后 ，于
４ ℃ 下 １２０００r／min 离心 １５min ；取上清液加入等体积酚∶氯仿∶异戊醇（２５∶２４∶１）抽提 １０min 后在 ４ ℃ 下
１２０００r／min离心 １５min ；取上清液加入等体积的氯仿∶异戊醇抽提 １０min 后在 ４ ℃ 下 １２０００r／min 离心
１５min ；加入灭菌的 ２畅５mol／L的 NaCl使 NaCl的终浓度为 ０畅３mol／L ，摇匀后加入大于 ２ 倍体积的无水乙醇 ，
在 － ２０ ℃ 下放置 １５min ，然后在 ４ ℃ 下 １４０００r／min 离心 ２０min ；沉淀用 ７０ ％ 乙醇洗涤 ２ 次 ，自然晾干后加入
２００μL TE液溶解 ，置于 ４ ℃ 保存备用 。 然后用 ０畅８ ％ 琼脂糖凝胶电泳检测 DNA ，估计其分子量的大小 ，在核酸
蛋白测定仪上测其含量及纯度 。
RAPD 反应总体积为 ２５μL ，其中内含 １０ × PCR 反应缓冲液 ２畅５μL 、MgCl２ （２５mol／L）２畅５μL 、模板 DNA
１μL（约 ８０ ～ ２００ng） 、Taq酶（５U）０畅３μL 、dN TP ５μL（均为 １畅０mol／L） 、引物 １畅５μL（约 １５ng） 。 PCR 反应在德
国 Eppendof 公司的 Mastercycler 型扩增仪上进行 ，９４ ℃ 预变性 １０min 后进行 ４０ 个循环 ，每个循环包括
９４ ℃ 、１min → ３７ ℃ 、１min → ７２ ℃ 、２min ，最后于 ７２ ℃ 再延伸 １０min 。 反应结束后 ４ ℃ 保存 ，每次反应设不含模
板 DNA 的空白对照 。 扩增产物用含有溴化乙锭的 １畅４ ％ 的琼脂糖凝胶电泳 ，用 AlphamagerT M ２２００ 凝胶成
像系统拍照 、观察记录 。
根据观察结果 ，扩增条带有且清晰记为 １ ，否则记为 ０ ，构建原始数据表征矩阵 ，并据此统计位点总数和
多态位点比例 ，分析和计算群体的遗传多样性参数 。 计算公式如下 ：
多态位点比例 P ＝ 多态位点数／位点总数 （１）
Shannon多样性指数 H ＝ － ∑ Pi log２ Pi ／ N （２）
式中 ，Pi 为第 i条扩增条带存在的频率 ，N 为检测到的位点数 。
Nei基因多样性指数 He ＝ ∑ （１ － ∑ P２i ）／ n （３）
式中 ，Pi 为单个位点上等位基因的频率 ，n为所检测到的位点［１８］ 。任意两个体间遗传相似率和遗传距离用下式计算 ：
F ＝ ２ Nxy／（ Nx ＋ Ny） （４）
P ＝ １ － F （５）
式中 ，F 为两个体间遗传相似率 ，P
为两个体间遗传距离 ，Nx 和 Ny 分别
为 x 和 y 个体拥有的 RAPD 标记总
数 ，Nxy是 x 和 y 两个体共享 RAPD
标记数［１９ F］ 。
2 　 结果与分析
根据个体间扩增产物的一致性 ，
从 １００ 个 １０bp随机引物中选取 ２１ 个
随机引物对方斑东风螺的基因组
DNA 进行扩增（见表 １） 。 每个引物
扩增出 ４ ～ １６ 条清晰可辨且重复性强
的条带 ，共计 ２２２ 条 ，平均每个引物扩
增出 １０畅５７ 条 ，其中 １５６ 条带表现为
多态 ，多态比例为 ７０畅２７ ％ 。 筛选出
的 ２１ 个随机引物均为多态性引物 ，通
过对全部扩增产物进行统计 ，任何两
个个体所拥有的遗传标记不完全相
同 ，即任意两个个体间均具有遗传差
异 。不同引物所得扩增片段的数量 、
所揭示的多态性各不相同 。 图 １ 和图
２ 分别是引物 S７３ 和 S９８ 对方斑东风
螺养殖群体的 RAPD 扩增结果 。
表 1 　 21 个引物在方斑东风螺养殖群体中的 RAPD 扩增结果
Tab ．１ 　 RAPD results of raised population of B ．areolata with ２１ random primers
引 　 物
Primer
引物序列 （５′唱３′）
Sequences o f
primers（５′唱３′）
位点总数
T otal no ．o f
RAPD loci
多态位点数
T otal no ．o f
polymorphic loci
多态位点百分数／ ％
Percentage o f
polymorphic loci
S５ T GCGCCCT TC １３ ９ ６９畅２３
S６ T GCTC T GCCC １３ １１ ８４畅６２
S８ G TCCACACGG ６ ６ １００畅００
S２３ AG TCAGCCAC ９ ３ ３３畅３３
S４８ G TG T GCC CAA １１ ９ ８１畅８２
S５０ GG TC TACACC ９ ５ ５５畅５６
S６２ G T GAGGCG T C １２ ７ ５８畅３３
S６８ T GGACCGGT G ４ ２ ５０畅００
S６９ C TCACCGT CC ７ ７ １００畅００
S７１ AAAGCT GCGG ９ ８ ８８畅８９
S７３ AAGCC TCGT C １１ ８ ７２畅７３
S７５ GACGGAT CAG １１ １１ １００畅００
S７６ CACACTC CAG １６ １２ ７５畅００
S７９ G TT GCCAGCC １３ １１ ８４畅６２
S８２ GGCAC T GAGG １２ ６ ５０畅００
S８３ GAGCCCT CCA １６ １１ ６８畅７５
S８９ CT GACGT CAC １１ ７ ６３畅６４
S９４ GGA TGAGAC C ８ ７ ８７畅５０
S９５ ACT GGGAC TC ８ ６ ７５畅００
S９７ ACGACCGACA １３ ４ ３０畅７７
S９８ GGCTCA TG T G １０ ６ ６０畅００
合计 ２２２ １５６
平均 １０畅５７ ７畅４３ ７０畅２７
第 ６期 黄 　 海等 ：泰国产方斑东风螺养殖群体遗传多样性的 RAPD分析 １２７　
图 1 　 引物 S73 对方斑东风螺养殖群体的 RAPD 扩增结果倡
Fig ．１ 　 RAPD results of raised population of B ．areolata with primer S７３
倡 M 为标准分子量标记 ，下同 。
图 2 　 引物 S98 对方斑东风螺养殖群体的 RAPD 扩增结果
Fig ．２ 　 RAPD results of raised population of B ．areolata with primer S９８
　 　 根据建立的二维空间数据矩阵 ，计算得到 ２０ 个个体的遗传距离与遗传相似率矩阵（见表 ２） 。 该养殖群
体的遗传相似率为 ０畅７９２ ；其中任意两个个体间的遗传相似率在 ０畅９３４ ～ ０畅７０９ 之间 ，遗传距离为 ０畅２０８ ，其
中任意两个个体间的遗传距离在 ０畅０６６ ～ ０畅２９１ 之间 。 同时由 ２１ 个随机引物所检测的表型频率计算的
Shannon 多样性指数为 ０畅２８１８ ，Nei基因多样性指数为 ０畅２４９１ 。
表 2 　 方斑东风螺养殖群体各个体之间的遗传相似率（对角线以上）和遗传距离（对角线以下）
Tab ．２ 　 Genetic distances （below diagonal）and genetic similarit y index（above diagonal）among ２０ individuals of B ．areolata
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ １１ １２ １３ １４ １５ １６ １７ １８ １９ ２０
１ ０畅７９３ ０畅８００ ０畅８５７ ０畅７９０ ０畅８１０ ０畅７７１ ０畅７６２ ０畅８３８ ０畅８３８ ０畅７２４ ０畅７７２ ０畅８１０ ０畅７５２ ０畅７３３ ０畅７９０ ０畅７４３ ０畅８００ ０畅７６２ ０畅７２４
２ ０畅２０７ ０畅７５８ ０畅７１９ ０畅７６６ ０畅７３４ ０畅７１９ ０畅７６２ ０畅７８１ ０畅７８９ ０畅７３４ ０畅７５０ ０畅８２０ ０畅８４０ ０畅７８９ ０畅７７４ ０畅７１１ ０畅７５８ ０畅７６６ ０畅７４３
３ ０畅２００ ０畅２４２ ０畅８１０ ０畅８００ ０畅７２４ ０畅７７４ ０畅７５３ ０畅７９３ ０畅８１２ ０畅７４７ ０畅７５６ ０畅７８８ ０畅８０１ ０畅７７３ ０畅７９７ ０畅７９７ ０畅８２５ ０畅８０７ ０畅７６９
４ ０畅１４３ ０畅２８１ ０畅１９０ ０畅７６４ ０畅７６５ ０畅７８７ ０畅７４７ ０畅７５８ ０畅７７９ ０畅７４７ ０畅７５９ ０畅８３３ ０畅８１３ ０畅７４６ ０畅７５０ ０畅７７４ ０畅７８３ ０畅７５６ ０畅７４１
５ ０畅２１０ ０畅２３４ ０畅２００ ０畅２３６ ０畅８２１ ０畅８４０ ０畅８０４ ０畅８５０ ０畅８７２ ０畅７０９ ０畅７７０ ０畅８３８ ０畅８７７ ０畅７７０ ０畅８１３ ０畅７８７ ０畅８７９ ０畅８２９ ０畅８１０
６ ０畅１９０ ０畅２６６ ０畅２７６ ０畅２３５ ０畅１７９ ０畅８４９ ０畅８８０ ０畅８３６ ０畅８３８ ０畅７５９ ０畅７８２ ０畅８００ ０畅８４７ ０畅７９７ ０畅８２４ ０畅７９２ ０畅８１８ ０畅７７１ ０畅９３４
７ ０畅２２９ ０畅２８１ ０畅２２６ ０畅２１３ ０畅１６０ ０畅１５１ ０畅８１５ ０畅８２４ ０畅８３５ ０畅７２８ ０畅７９１ ０畅８２２ ０畅７８９ ０畅７８６ ０畅８０１ ０畅７２２ ０畅７６８ ０畅８１５ ０畅７２３
８ ０畅２３８ ０畅２３８ ０畅２４７ ０畅２５３ ０畅１９６ ０畅１２０ ０畅１８５ ０畅９０４ ０畅８７９ ０畅７５５ ０畅８３０ ０畅７８４ ０畅８１０ ０畅７７９ ０畅８０１ ０畅７１４ ０畅７８１ ０畅７９９ ０畅７２５
９ ０畅１６２ ０畅２１９ ０畅２０７ ０畅２４２ ０畅１５０ ０畅１６４ ０畅１７６ ０畅０９６ ０畅８８６ ０畅７８４ ０畅７５７ ０畅９１３ ０畅８３６ ０畅７９１ ０畅７９３ ０畅８８８ ０畅８１４ ０畅８１７ ０畅７５８
１０ ０畅１６２ ０畅２１１ ０畅１８８ ０畅２２１ ０畅１２８ ０畅１６２ ０畅１６５ ０畅１２１ ０畅１１４ ０畅８０８ ０畅８１３ ０畅８４３ ０畅７７３ ０畅７７０ ０畅８５５ ０畅７８５ ０畅８７２ ０畅８７０ ０畅７３４
１１ ０畅２７６ ０畅２６６ ０畅２５３ ０畅２５３ ０畅２０１ ０畅２４１ ０畅２７２ ０畅２４５ ０畅２１６ ０畅１９２ ０畅７９１ ０畅７４２ ０畅８０３ ０畅７９２ ０畅７９２ ０畅７８３ ０畅７４７ ０畅７９９ ０畅７１８
１２ ０畅２２８ ０畅２５０ ０畅２４４ ０畅２４１ ０畅２３０ ０畅２１８ ０畅２０９ ０畅１７０ ０畅２４３ ０畅１８７ ０畅２０９ ０畅８９８ ０畅８０１ ０畅７８５ ０畅８１６ ０畅７９３ ０畅７９３ ０畅８４１ ０畅７１８
１３ ０畅１９０ ０畅１８０ ０畅２１２ ０畅１６７ ０畅１６２ ０畅２００ ０畅１７８ ０畅２１６ ０畅０８７ ０畅１５７ ０畅２５８ ０畅１０２ ０畅８５２ ０畅７９７ ０畅８５４ ０畅８０９ ０畅８５０ ０畅８３３ ０畅７７４
１４ ０畅２４８ ０畅１６０ ０畅１９９ ０畅１８７ ０畅１２３ ０畅１５３ ０畅２１１ ０畅１９０ ０畅１６４ ０畅２２７ ０畅１９７ ０畅１９９ ０畅１４８ ０畅８２７ ０畅７７９ ０畅７６９ ０畅７８５ ０畅７８９ ０畅７５６
１５ ０畅２６７ ０畅２１１ ０畅２２７ ０畅２５４ ０畅２３０ ０畅２０３ ０畅２１４ ０畅２２１ ０畅２０９ ０畅２３０ ０畅２０８ ０畅２１５ ０畅２０３ ０畅１７３ ０畅７７８ ０畅８１９ ０畅７６４ ０畅７７０ ０畅７３０
１６ ０畅２１０ ０畅２２６ ０畅２０３ ０畅２５０ ０畅１８７ ０畅１７６ ０畅１９９ ０畅１９９ ０畅２０７ ０畅１４５ ０畅２０６ ０畅１８４ ０畅１４６ ０畅２２１ ０畅２２２ ０畅７５５ ０畅８２４ ０畅８３５ ０畅７２９
１７ ０畅２５７ ０畅２８９ ０畅２０３ ０畅２２６ ０畅２１３ ０畅２０８ ０畅２７８ ０畅２８６ ０畅１１２ ０畅２１５ ０畅２０８ ０畅２０７ ０畅１９１ ０畅２３１ ０畅１８１ ０畅２４５ ０畅７８３ ０畅７２６ ０畅８００
１８ ０畅２００ ０畅２４２ ０畅１７５ ０畅２１７ ０畅１２１ ０畅１８２ ０畅２３２ ０畅２１９ ０畅１８６ ０畅１２６ ０畅２５３ ０畅２０７ ０畅１５０ ０畅２１５ ０畅２３６ ０畅１７６ ０畅２１７ ０畅８８７ ０畅７４８
１９ ０畅２３８ ０畅２３４ ０畅１９３ ０畅２４４ ０畅１７１ ０畅２２９ ０畅１８５ ０畅２０１ ０畅１８３ ０畅１３０ ０畅２０１ ０畅１５９ ０畅１６７ ０畅２１１ ０畅２３０ ０畅１６５ ０畅２７４ ０畅１１３ ０畅７５５
２０ ０畅２７６ ０畅２５７ ０畅２３１ ０畅２５９ ０畅１９０ ０畅０６６ ０畅２７７ ０畅２７５ ０畅２４２ ０畅２６６ ０畅２８２ ０畅２８２ ０畅２２６ ０畅２４４ ０畅２７０ ０畅２７１ ０畅２００ ０畅２５２ ０畅２４５
3 　 小结与讨论
生物多样性是物种适应多变的生存环境而得以维持生存 、发展和进化的基础 。 从遗传学和进化角度来
１２８　 中 国 生 态 农 业 学 报 第 １５ 卷
讲 ，一个物种的遗传多样性的高低与其适应能力 、生存能力和进化潜力密切相关 。 物种的遗传多样性越丰
富 ，其适应能力 、生存能力和进化潜力就越大 ，或者说遗传多样性为物种的适应能力 、生存能力和进化潜力
提供了潜在的遗传基础和储备 。 反之 ，遗传多样性的降低可导致其适应能力 、生存能力降低 ，物种退化 ，极
端情况下甚至威胁物种生存［８］ 。 保护生物多样性的核心是保护种质资源 。 因此 ，最大限度地维持种内遗传
多样性水平 ，是持续利用种质资源的前提和基础 。
在 RAPD 分析中 ，多态位点比率 、遗传相似率 、遗传距离 、Shannon 多样性指数 、Nei基因多样性指数等
都是评价物种遗传多样性的重要参数 。 鱼 、虾 、贝类等养殖群体往往由于人为因素的干扰作用 ，群体遗传多
样性水平下降 ，进而导致生长率 、抗病性 、繁殖力等性能下降 ，甚至危及到种群的生存 。 由于国内外对东风
螺的遗传多样性的研究几乎空白 ，因而无法判定现有养殖群体受到养殖压力的影响程度 。 但有关其他经济
贝类的研究数据却有不少报道 。 李太武等［９］利用 RAPD检测皱纹盘鲍和杂色鲍的遗传多样性 ，结果表明其
多态比例分别为 ４３畅６６ ％ 、５３畅０５ ％ ，平均遗传杂合度为 ０畅１５５７ 、０畅１６８６ 。 宋林生等［１０］检测到栉孔扇贝野生
种群和养殖群体的多态位点比例分别为 ７５畅８２ ％ 、７３畅４７ ％ ，遗传杂合度分别为 ０畅２７ 和 ０畅２６ 。 王爱民等［１１］
对海南三亚 、广东大亚湾和广西北海 ３ 个野生种群马氏珠母贝遗传多样性的 RAPD 分析发现 ，种群内的遗
传相似性指数分别为 ０畅６４２ 、０畅７６２ 和 ０畅６８８ ，Shannon 多样性指数分别为 ０畅２６６ 、０畅２１１ 和 ０畅１７４ 。 Beth
等［２０］应用 RAPD 技术对 １ 个养殖群体和 ４ 个野生群体的牡蛎（ Crassost rea vi rgin ica）遗传多样性进行了研
究 ，结果表明 ，野生群体多态位点比例为 ７４ ％ ，明显高于养殖群体（５４ ％ ） 。 阎冰等［１２］以 RAPD 研究广西山
口 、北海 、犀牛角 、东兴文蛤种群的遗传多样性 ，结果表明山口 、北海 、犀牛角 、东兴文蛤种群的遗传多样性指
数分别为 ０畅１９９５ 、０畅２０３９ 、０畅１７７３ 、０畅１９３６ ，多态位点比例分别为 ８６畅３２ ％ 、９０畅６３ ％ 、８１畅０５ ％ 、８８畅００ ％ 。 杜晓
东等［１３］对广东和广西两省海区的 ７ 个野生文蛤（ Meretr ix meret r ix）群体进行遗传多样性研究 ，结果表明各
群体的多样性指数为 ０畅２０８８ ～ ０畅２５９４ ，多态位点比例为 ８５畅７１ ％ ～ ９４畅７４ ％ 。 李太武等［１４］采用 RAPD 技术
对 ５ 个泥蚶群体的遗传多样性进行了研究 ，结果表明福建 、韩国 、山东 、温岭 、泰化泥蚶群体的多态性比率分
别为 ８２畅１９ ％ 、８４畅００ ％ 、８３畅５６ ％ 、７３畅４３ ％ 、７９畅８６ ％ ，平均遗传杂合度分别为 ０畅２６２８ 、０畅２６８３ 、０畅２６８２ 、
０畅２５１３ 、０畅２５３２ 。 潘宝平等［１５］探讨光滑狭口螺 、长角涵螺 、纹沼螺 、赤豆螺 、大沼螺 、梨形环棱螺 ６ 种淡水螺
类亲缘关系时 ，检测到 ６ 种螺的平均多态性比率为 ７６ ％ 。 本实验结果与上述其他贝类的多态位点百分率 、
杂合度等参数比较发现 ，方斑东风螺的多态位点比率高于皱纹盘鲍 、杂色鲍 、珠母贝 、牡蛎养殖群体 ，与扇
贝 、淡水螺 、牡蛎野生群体相当 ，略低于文哈 、泥蚶 ；平均遗传杂合度较高 ，高于皱纹盘鲍 、杂色鲍 ，略低于扇
贝 ；基因多样性指数也较高 ，高于珠母贝 、泥蚶 、文蛤 。 可初步判断泰国产方斑东风螺养殖群体仍具有较高
的遗传多样性 。
本实验以泰国产方斑东风螺养殖群体为研究对象 ，利用 RAPD 技术分析其遗传多样性 。 结果表明所分
析的 ２１ 个随机引物都为多态性引物 ，平均多态位点比率高达 ７０畅２７ ％ ，Shannon 多样性指数为 ０畅２８１８ ，Nei
基因多样性指数（平均遗传杂合度）为 ０畅２４９１ ；任意两个个体的扩增条带均不完全相同 ，任意两个个体间的
遗传距离在 ０畅０６６ ～ ０畅２９１ 之间 ，该群体的遗传距离为 ０畅２０８ 。 本研究结果揭示了目前海南养殖的泰国产东
风螺群体遗传多样性仍很丰富 ，可为泰国产方斑东风螺资源的进一步选种育种提供科学参考 。 但是 ，在东
风螺市场需求的利益驱动下 ，由于过度捕捞 、盲目引种 、养殖群体的逃逸 、繁殖群体过小 、环境恶化等原因 ，
东风螺种质资源面临日益衰退的趋势 。 为最大限度地保护与利用开发东风螺资源 ，应从现有种质资源提
纯 、复壮出发 ，在注意保护野生资源的前提条件下 ，尽可能保证人工育苗过程各环节的科学性和合理性 ，尽
快将分子遗传标记技术应用于东风螺苗种培育 ，建立标记辅助选育技术 ，极大程度地促进对东风螺人工养
殖业的发展 。
参 　 考 　 文 　 献
　 １ 　 蔡英亚 ，张 　 荣 ，魏若飞 ．贝类学概论 ．上海 ：上海科学技术出版社 ，１９９５ ．２３４ ～ ２４５
　 ２ 　 吴 　 善 ．方斑东风螺的产卵及幼贝培育 ．中国水产 ，２０００ （１） ：４０ ～ ４２
　 ３ 　 刘 　 永 ，梁飞龙 ，毛 　 勇 ，等 ．方斑东风螺的人工育苗高产技术 ．水产养殖 ，２００４ ，２５（２） ：２２ ～ ２５
　 ４ 　 柯才焕 ，李复雪 ．台湾东风螺繁殖行为研究 ．贝类学论文集（第四集） ．青岛 ：青岛海洋大学出版社 ，１９９４ ．１４１ ～ １４８
　 ５ 　 郑怀平 ，朱建新 ，柯才焕 ，等 ．温盐度对波部东风螺胚胎发育的影响 ．台湾海峡 ，２０００ ，１９（１） ：１ ～ ５
　 ６ 　 刘德经 ，肖思祺 ．台湾东风螺生态学的初步研究 ．中国水产科学 ，１９９８ ，５（１） ：９３ ～ ９６
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第 ６期 黄 　 海等 ：泰国产方斑东风螺养殖群体遗传多样性的 RAPD分析 １２９　
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１３０　 中 国 生 态 农 业 学 报 第 １５ 卷