全 文 ：2011年 第 47卷 第 9期 Animal Health·动物保健
——————————————
收稿日期：2010- 01- 25；修回日期：2010- 07- 19
资助项目：浙江省科技计划重点科研项目(2006C22052)
作者简介：喻洋(1987- )，女，江西南昌，硕士
* 通讯作者
摘 要：试验主要研究樟科提取物（CE）、腐植酸（HA）及其复合添加对仔猪粪尿中氨排放的影响及其作用机理。将35
日龄体重相近的仔猪256头随机分为基础日粮组，基础日粮+CE（0.35 g/ kg）组，基础日粮+ HA（0. 5 g/ kg）组，基础日粮+
CE(0.35 g/ kg）+HA(0.5 g/ kg）4个组，每个组设4个重复。结果表明：饲喂CE、HA及CE+HA使仔猪饲料增重比分别下降
了6.03％（P<0.05）、4.52％（P<0.05）以及7.54％（P<0.01），脲酶活性显著下降（P<0.05），粪样pH值下降，从6h开始各个时间
点的尿素氮浓度均显著高于对照组 (P<0.05），同时氨态氮浓度达到最高点的时间比对照组要分别晚24、24h和48h。试验表
明，CE、HA及CE+HA均能降低尿素分解速率，减少氨气的挥发，并显著提高仔猪的生产性能，CE+HA组效果最佳。
关键词：樟科提取物；腐植酸；脲酶；尿素氮；氨态氮；仔猪
中图分类号：S828.5 文献标识码：B 文章编号：0258- 7033（2011）09- 0061- 03
樟科提取物、腐植酸及其复合添加对仔猪
粪尿中氨排放的影响
喻 洋，李晓燕，王旭平，潘 倩，赵 燕，陈安国*，洪奇华，杨彩梅
（浙江大学动物科学学院，畜禽养殖与环境工程研究所，浙江杭州 310029）
随着畜牧业的迅猛发展，规模化养殖作为一种
更加经济有效的方式开始蓬勃兴起，规模化养殖场
所产生的大量粪便污染也日益严重。Pain[1]指出，最
主要的3个问题是氨的挥发、恶臭的释放以及粪便贮
存期产生的漂浮物及沉淀所带来的问题。其中，氨
气的挥发是最大的问题影响动物的健康、生产性
能、福利以及人的健康。空气中含有37.5 mg/m3的
氨，能使猪的增重滞缓；75～150 mg/m3时可引起猪
Effects of Bacillus Subtilis on Growth Performance, Antioxidant Capacity and
Immunity of Intestinal Mucosa in Broilers
LI Wei-fen, WEN Jing, WU Hong-zhao, ZHAi Ling, YU Dong-you*
(Key Laboratory for Animal Nutrition and Feed Science of Ministry of Agriculture, Institute of Feed Science,
Zhejiang University, Zhejiang Hangzhou 310029, China)
Abstract : This experiment was conducted to study the effect of Bacillus subtilis on growth performance, antioxidant
capacity and immunity of intestinal mucosa in broilers. Six hundred one-day cocks were randomly assigned to four
treatments with three replicates and fifty cocks with each pen. The groups received the same basal diet
supplemented with 0, 0.25, 0.50, 0.75 g/kg praeparatum of Bacillus subtilis, respectively. The feeding trial lasted
11 weeks. The results showed that compared to the control, the average daily gain in 0.75 g/kg group increased
significantly by 6.86% (P<0.05); The contents of T-AOC, GSH-Px, VC and XOD in jejunal mucosa of test group
were significantly higher (P<0.05) than that of control group, while the content of MDA was significantly decreased
(P<0.05). The contents of IL-2, IL-4, IL-10 and TNF-α in appendix mucosa and ileal mucosa of test group were
significantly increased (P <0.01). These results indicated that adding Bacillus subtilis in diet could improve
antioxidant capacity and immunity of intestinal mucosa, which could improve broilers’growth performance.
Key words: Bacillus subtilis; growth performance; antioxidant; cytoimmunity; broilers
vehicles[J]. Infect Immun, 2003, 71: 2810-2818.
[13] Duc L H, Hong H A, Barbosa T M. Characterization of Bacillus
probiotics available for human use[J]. Appl Environ Microb, 2004,
70: 2161-2171.
[14] Per Brandtzaeg. Current Understanding of Gastrointestinal
Immunoregulation and Its Relation to Food Allergy [J]. Annals
New York Academy Sciences, 2002, 964: 13-45.
[15] 童晓莉，周勤飞，王永才． 动物肠道免疫研究进展[J]． 现代畜
牧兽医，2005，(9)：48-50．
．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
61
2011年 第 47卷 第 9期动物保健·Animal Health
摇头、流涎、喷涕、丧失食欲[2]。目前，对畜禽粪便的
处理已经有许多被证实有效的方式，如生产甲烷、厌
氧或者需氧净化、固液分离等，但是由于需要很高的
成本与专业的技术，这些方法的推广使用受到限制。
近年来，更多的研究开始着重于寻找更加经济有效
的解决方法，开发和使用除臭型添加剂已成为研究
的热点，特别是经济有效、无污染的除臭剂添加。本
研究将樟科植物提取物和腐植酸单独或者混合，通
过体外添加到排泄物中来比较其作用效果，通过饲
养试验比较CE、HA以及混合添加对生长猪生长性
能及氮代谢的影响。
1 材料与方法
1.1 试验动物及日粮 256头35日龄体重为7 kg左
右、健康状况良好的杜长大仔猪，公、母各半，试验
基础日粮参照美国NRC（1994）猪营养需要，配合而
成的粉料，配方及营养成分见表1。
表1 基础日粮组成及营养成分
玉米 60.5 65.5
豆粕 21.5 21.5
豆油 2.25 1.25
鱼油 1.25 2.25
活性酵母 1.5 2.5
乳清粉 5 0
4%预混料 4 4
鱼粉 4 3
合计 100 100
营养成分
消化能/（MJ·kg-1） 13.36 13.31
粗蛋白/% 19 18
钙/% 0.7 0.75
有效磷/% 0.54 0.52
总磷/% 0.75 0.75
赖氨酸/% 1.3 1.25
蛋氨酸/% 0.75 0.73
蛋氨酸+胱氨酸/% 0.95 0.93
色氨酸/% 0.29 0.26
苏氨酸/% 0.79 0.82
粗灰分/% 6.02 5.8
项目
原料组成/ %
35～54 日龄 55～66 日龄
1.2 试验设计 试验分为4个处理组，每个处理组4
个重复，每个重复16头猪。试验分组如下，处理1为
基础日粮，处理2为基础日粮+ CE0.35 g/kg，处理3为
基础日粮+HA0.5 g/kg，处理4为基础日粮+ CE0.35 g/kg
+ HA0.5 g/kg。
1.3 饲养管理 每个重复16头猪为一栏，自由饮
水，自由采食，并进行常规免疫。
1.4 测定指标与方法
1.4.1 生产性能 测定体重，统计喂料量，计算日
采食量、平均日增重和饲料增重比。
1.4.2 脲酶活性测定 采用靛蓝比色法测定脲酶
活性。
1.4.3 粪样pH值测定 鲜粪2 g, 加入50 mL蒸馏过
的去离子水，充分搅拌后在10℃下用雷磁E- 201- C
pH计测定。
1.4.4 尿素氮含量测定 从浙江大学试验牧场随
机采集仔猪粪样，称取样品10 g左右装入100 mL不
同组分的抑制剂，同时以95%的乙醇10 mL作为对照。
于0、6、12、24、48 h充分搅拌后去上清液1 mL上清液
于5 mL离心管中，加水2 mL,3 000 r/min离心5 min。
去上清液50 μL，采用南京建成尿素氮测定试剂盒进
行测定。
1.4.5 氨态氮含量测定 取离心后的上清液1 mL
于50 mL容量瓶中，加20 mL蒸馏水，加4 mL苯酚钠
溶液和3 mL次氯酸钠容易，随加随摇匀。20 min后显
色，定容。1 h内在721型分光光度计上于波长578 nm
出比色。以空白管挑零，读取吸光度。
2 结果与分析
2.1 对仔猪生产性能的影响
表 2 CE、HA、CE＋HA 对仔猪生长性能的影响
项目 对照 CE HA
平均始重/kg 12.35 12.45 12.15
末重/kg 28.9 30.28 30.08
日增重/g 533.87a 575.00a 602.42b
日采食量/g 1061.92 1070.06 1145.67
饲料增重比 1.99Aa 1.87b 1.90b
CE＋HA SEM P
12.68 0.70 0.96
31.68 0.99 0.32
612.91b 22.07 0.10
1123.06 49.18 0.58
1.84B 0.03 0.02
注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著 (P<0.05)，肩标不同大
写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同
由表2可见，各组的平均始重以及日采食量差异
不显著（P＞0.05），CE、HA以及CE+HA添加组的平均
末重要高于对照组，但差异也未达到显著（P＞0.05）。
CE、HA以及CE+HA添加组的平均日增重与对照组
相比分别提高了7.70%（P＝0.212）、12.84％（P<0.05）
以及14.81％（P<0.05）；饲料增重比较对照组相比分
别下降了6.03％（P<0.05）、4.52％（P<0.05）以及7.54％
62
2011年 第 47卷 第 9期 Animal Health·动物保健
（P<0.01）。
2.2 对粪样pH值及粪尿混合物中脲活性的影响
由表3可知，与对照组相比，试验组能够降低粪样pH
值，CE组、HA组和CE+HA组分别降低了0.24%（P=
0.09）、0.3%（P<0.05）和0.37%（P<0.05）。试验组粪尿
混合物中相对脲酶活性均显著低于对照组（P<0.05）。
表3 CE、HA、CE+HA对粪样pH值和脲酶活性的影响
项目 对照 CE HA
粪样 pH 7.22a 6.98 6.92b
相对尿酶活性 100a 82.68b 79.78b
CE+HA
6.85b
76.98b
SEM P
0.09 0.06
1.13 0.04
2.3 对粪尿混合物中尿素氮浓度的影响 由表4可
知，在0 h时间点，CE、HA以及CE+HA添加组的粪尿
混合物中尿素的含量与对照组非常接近，在86～88mmol/L
之间，在不同时间点，试验组下降均比对照组缓慢。
在 6 h时间点，CE+HA组与对照组差异达到显著
（P<0.05）；在12 h时间点，CE组和CE+HA组与对照组
差异极显著（P<0.01）；在24 h时间点，CE组和HA组
与对照组尿素浓度差异显著（P<0.05），CE+HA组与
其他组的差异均极显著（P<0.01）；在48 h时间点，CE
组、HA组以及CE+HA组的尿素氮浓度分别是对照组
的1.28、1.44以及2.01倍，并在72 h时间点扩大到
2.08、1.53倍和3.35倍；到96 h点的时候，CE组（P<0.05）
和HA组（P<0.01）与对照组差异达到显著，CE+HA组
与其他组的差异均达到极显著（P<0.01）。
表4 CE、HA、CE+HA对尿素浓度的影响
时间/h 对照 CE HA CE+HA
0 86.63 86.43 87.12 87.12
6 73.48a 78.49 77.28 81.39b
12 62.67A 70.39Ba 65.58b 71.19Ba
24 43.29Aa 48.963Ab 50.16b 62.66B
48 27.71Aa 35.57ABb 40.04B 55.65C
72 13.01Aa 27.06Ba 19.91ABb 43.52C
96 9.23Aa 17.24B 15.65ABb 32.41C
SEM P
1.39 0.91
1.77 0.07
1.42 0.01
1.65 0.00
1.82 0.00
1.84 0.00
1.56 0.00
2.4 对粪尿混合物中氨态氮浓度的影响 由表5可
知，在0 h时间点，CE、HA以及CE+HA添加组的粪尿
混合物中氨态氮的含量与对照组非常接近，在4～5mg/mL
之间，随着时间的增加，氨态氮的浓度先增加，到达
最高点后再不断下降。对照组的氨态氮浓度在6、12 h
时间点要高于各试验组，并在 48 h达到最高值
21.02 mg/mL后，开始下降；CE组和HA组都从24 h时
间点开始，氨态氮浓度高于对照组，并在72 h分别达
到最高值26.45 mg/mL和27.43 mg/mL后，开始下降；
CE+HA组从48 h时间点开始，氨态氮浓度高于对照
组，并在96 h达到最高值27.74 mg/mL。在48 h时间点
以后，试验组粪尿混合物中氨态氮的浓度均显著高
于对照组（P<0.01）。
表5 CE、HA、CE+HA对氨态氮浓度的影响
时间/h 对照 CE HA CE+HA
0 4.7 4.9 4.37 4.46
6 8.83Aa 7.77 6.89B 7.22b
12 12.94A 12.11ABa 11.11Bb 10.22C
24 17.59 17.64 18.23 17.51
48 21.02A 24.55B 25.91B 25.51B
72 20.32A 26.45B 27.43B 26.73B
96 20.23A 26.44B 27.29B 27.74B
SEM P
0.13 0.53
0.24 0.02
1.32 0.00
2.13 0.62
1.96 0.00
1.86 0.00
2.31 0.00
3 讨 论
3.1 对仔猪生产性能的影响 猪消化道中存在多
种产脲酶菌，脲酶作用产生的氨气可导致消化道pH
的上升，引起动物胃肠道的感染 [4]。Mina等 [5]研究发
现，樟科植物（C. cassia）的提取液对于从人体胃上
皮组织分离的螺杆菌属菌种（H. pylori）的生长及其
所产的脲酶均具有抑制作用，并且认为樟科植物提
取液中的CA是发挥抑菌作用的主要物质，由于醛类
具有良好耐酸性，所以能够通过人体胃部的强酸性
环境到达肠道，而在其中发挥抑制脲酶活性作用。同
时CE中含有极强抑菌作用成分，对大肠杆菌、铜绿
假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌等多种细菌的生长均
具有很强的抑制效果 [6]。通过影响消化道微生物区
系，减少畜舍环境中氨气等有害物质浓度的途径，能
够提高动物的生产性能[7]。
在保育舍仔猪、生长猪日粮中添加适量的CE能
够提高猪的生长性能，提高日增重，降低饲料增重比[8- 9]。
本试验结果也表明，在仔猪饲料中添加适宜量的
CE，具有促生长，提高饲料利用率的作用，可能是通
过抑制消化道微生物脲酶活性、抑制有害微生物生
长繁殖、改善畜舍环境等方面来实现的。但CE组的
采食量与对照组十分接近，说明CE无促进食欲的效
果。
HA作为饲料添加剂广泛的用于动物生产中，其
改善动物生产性能的作用已被许多研究所证实，HA
可刺激胃壁黏膜，增加胃液分泌，从而增加食欲；能
使副交感神经兴奋，促进肠管蠕动，增加腺体分泌，
促进消化吸收，增加有机物积累；激活己糖激酶 ,促
63
2011年 第 47卷 第 9期动物保健·Animal Health
进葡萄糖的吸收利用；促进消化酶的活力，有效地分
解营养物质，游离出芳香烃从而提高饲料的适口性[10]。
本试验也表明，HA具有促生长，提高饲料利用率的
作用，同时增加了采食量，但与对照组相比差异未达
到显著。CE+HA混合添加改善猪生产性能的作用最
好，日增重与对照组差异达到显著，饲料增重比达到
极显著。
3.2 对仔猪粪尿混合物中氨的影响 石军等 [8]研究
表明，CE能显著抑制脲酶活性，高树清等 [11]研究表
明，HA能显著降低土壤中脲酶活性。本试验表明，
CE、HA以及CE+HA添加在仔猪日粮中，对所取粪样
中的脲酶活性均具有显著的抑制效果，具体的抑制
机理还有待于进一步研究；CE及CE+HA对大肠杆
菌、普通变形杆菌均有较强的抑制作用。因此，CE及
CE+HA可能是通过同时抑制脲酶产生菌和脲酶活性
而减少氨态氮的产生。CE、HA以及CE+HA添加在仔
猪日粮中，对粪尿混合物中各个时间点尿素浓度的
分解均具有显著的抑制作用。这一结果与上述粪中
脲酶活性的结果相一致，粪中脲酶活性的降低使其
对粪尿混合物中尿素的分解作用大大降低。
CE、HA及CE+HA对粪尿混合物中各个时间点氨
态氮保存均具有显著促进作用，在12 h内，对照组氨
氮浓度均高于试验组，高浓度的氨态氮使得对照组
在12 h内氨的挥发较快，且对照组粪尿混合物中氨
态氮达到最高值的时间最短为48 h，而其他各组在
72 h（CE+HA在96 h）才达到最高，说明对照组中，尿
素分解很快，氨气很快挥发到空气当中，而试验组尿
素分解缓慢，长时间后，仍有尿素不断分解产生氨，
从而使得溶液中氨态氮的含量较高，而挥发出去的
氨较少。试验组pH值的降低也进一步增加了粪尿混
合物中铵态氮的保留，Canh等 [11]也报道，粪便中pH
值轻微的改变，就能对氨的挥发产生很大影响，而通
过降低pH值来控制氨和铵之间的平衡是减少氨挥
发的有效方法。康萍等 [12]指出HA可调节动物体的电
解质、酸碱平衡，对某些细菌的生长有抑制作用等，
从而可能改变肠道中的营养物质分解的最终产物，改
变粪样的pH值。CE虽然不是酸类物质，但是其对有些
致病微生物以及产脲酶菌的作用，能够改变肠道和粪
便中的微生物菌群组成，从而可能改变微生物活动以
及营养物质的代谢方式，改变粪样的pH值。
参考文献：
[1] Pain B F, Thompson P B, De La Cremer L C N, et al. The use of
additives in livestock slurries to improve their flow properties,
conserve nitrogen and reduce odours [A]. In Van Der Meer et al.
Development in plant soil sciences. Animal manure on grassland
and fodder crops [C]. Fertiliser or waste Martius Nijhoff Publ，
Dordrecht, the Netherlands, 1987: 229-246
[2] 赵辉玲，吴东，程广龙. 畜牧业生产中的恶臭及除臭技术的
应用[J]. 饲料研究, 2004，(1): 33-36.
[3] Robinson I M, Allison Milton J. Characterization of the fecal
bacterial of normal pigs [J]. Appl Environ Microbiol, 1981, 41:
950- 955.
[4] Stefano C, Stefano B, Rypniewski W R, et al. Structural
properties of the nickel ions in urease: novel insights into the
catalytic and inhibition mechanisms [J]. Coordin Chem Rev, 1999,
113:190-192.
[5] Mina T, Robert A, Ishak N. Cinnamon extracts ′ inhibitory effect
on Helicobacter pylori[J]. Ethnopharmacol, 1999, 67: 269-277.
[6] 黄晓晖 , 陈思东 , 谭剑斌 . 中药桂枝提取物杀灭微生物效果
研究[J]. 广东药学院学报, 2001, 17(4): 300- 301.
[7] 廖新悌 . 生态系统原理对解决动物废弃物污染问题的启发
[J]. 家畜生态学报, 1999, 20 (4): 10-14.
[8] 石军，陈安国. 樟科提取物对保育期仔猪粪尿氮排放的影响
及其机理探讨[D]. 杭州浙江大学，2003.
[9] 汪善锋，陈安国. 樟属皮提取物对生长猪粪尿中氨挥发的影
响及其机理研究[D]. 杭州浙江大学，2004.
[10] 姜剑平，孙明强，严玉娟，等. 腐植酸系列专用的开发与利用
[J]. 磷肥与氮肥，2001，16（2）：70-71.
[11] 高树清，王宝申，韩英群 . 腐植酸及不同原料对土壤脲酶活
性及氮素的影响研究[J]. 腐植酸，2004，(6)：32-36.
[12] Canh T T, Aarnink A J A, Verstegen M W A, et al. Influence of
dietary factors on the pH and ammonia emission of slurry from
growing-finishing pigs[J]. J Anim Sci, 1998, 76 : 1123-1130.
[13] 康萍，刘福柱，刘敏. 腐植酸在动物生产中的应用 [J]. 中国饲
料，2003，(24) : 17-18.
欢迎订阅《中国畜牧杂志》
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!
!
!
!
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!
!
!
!

64