全 文 :4种香茶菜属植物微性状特征研究
马德强1,杨 俊2,王文昊2,镇兰萍2
(1.太和县中医院,安徽 太和 236604;2.安徽中医药大学药学院
安徽省高校现代中药重点实验室,安徽 合肥 230012)
[摘要]目的 研究香茶菜及同属植物微性状鉴别特征。方法 采用500万像素电子摄像目镜,应用景深合
成技术合成微性状鉴别图片,观察4种香茶菜属植物的新鲜及干燥叶片的微性状特征。结果 在叶尖突起
程度、毛茸的长短与分布方面,4种香茶菜属植物叶片的微性状有明显不同:岐伞香茶菜和显脉香茶菜密被
较长毛茸,叶尖极度突起或明显突起;香茶菜和大萼香茶菜稀被较短毛茸,毛茸多分布在叶脉、叶缘,叶尖微
凹或突起。结论 微性状鉴别方法简便,可以区别香茶菜属不同植物。
[关键词]香茶菜;歧伞香茶菜;大萼香茶菜;显脉香茶菜;微性状特征
[中图分类号]R282.7 [DOI]10.3969/j.issn.2095-7246.2015.03.027
中药香茶菜来源于唇形科香茶菜属植物香茶菜
Rabdosia amethystoides(Benth.)Hara的全草。具
有清热利湿、活血、解毒等功效。主治湿热黄疸、淋
证、水肿、咽喉肿痛、关节痹痛、闭经、乳痈、痔疮、发
背、跌打损伤、毒蛇咬伤[1]。安徽香茶菜同属植物有
8种,在分布区也有药用习惯[2-3]。笔者采集了常见
的同属4种植物进行研究。前期文献[4-6]报道了香
茶菜属多种植物叶片扫描电镜观察特征及茎叶的形
态组织学特征,但对本研究的4种植物微性状鉴定
特征未见系统报道。微性状鉴定法是借助光学显微
镜直接观察药材表面性状特征的方法,是一种用显
微观察方法来观察药材表面性状特征的新技术[7-9]。
近年来有报道利用这种方法对灰毡毛忍冬与细毡毛
忍冬、孜然、车前子、菟丝子、白芥子、丹参、豨莶草等
中药材与其混伪品进行了微性状鉴别研究[10-11]。笔
者通过对4种香茶菜属植物叶表面微性状特征的观
察,找出香茶菜及同属植物叶表面微性状鉴别的特
征,为香茶菜属植物的分类及药材的鉴别提供依据,
同时对微性状鉴别方法的适用性进行探索。
1 材料
1.1 香茶菜 香茶菜 Rabdosia amethystoides
(Benth.)Hara、歧伞香茶菜Rabdosia macrophylla
(Migo)C.Y.Wu et H.W.Li、大萼香茶菜Rab-
dosia macrocalyx (Dunn)Hara、显脉香茶菜Rab-
dosia serra(Maxim.)Kudo,以上材料均采自安徽中
医药大学药用植物苗圃,材料均经作者进行鉴定。
基金项目:安徽省高校省级自然科学研究项目(Kj2012Z226);
安徽中医药大学自然科学研究项目(2012zr019)
作者简介:马德强(1974-),男,执业中药师
通信作者:杨俊,1094704506@qq.com
1.2 仪器与软件 显微镜:Motic BA310,500万
像素电子摄像目镜;拍摄软件:Motic Images Ad-
vanced 3.2,麦克奥迪公司生产。
2 方法
用500万像素电子摄像目镜连接显微镜与电
脑,将实验材料置于视野中,拍摄不同景深下的图
片,使用景深合成技术[12]合成微性状鉴别图片。
3 结果
3.1 香茶菜 叶尖突起明显;稀被茸毛,毛茸长短
不一,常呈倒钩状;毛茸在叶面上分布少,在叶脉、叶
缘上分布多,叶脉上的毛茸同向排列。见图1。
3.2 歧伞香茶菜 叶尖极度突起;多被茸毛,毛茸
较长,毛茸分布均匀,排列方向杂乱。见图1。
3.3 大萼香茶菜 叶尖微凹或突起不明显;稀被茸
毛,毛茸较短,常呈倒钩状;毛茸叶面上分布很少,在
叶脉、叶缘上分布稍多,在叶缘上排列均匀。见图1。
3.4 显脉香茶菜 叶尖突起明显;多被茸毛,毛茸
较长;毛茸在叶面上分布少,在叶脉、叶缘上分布多,
叶脉、叶缘上的毛茸同向排列。见图1。
4 讨论
4种香茶菜属植物在安徽均有分布,在每个产
地均有被作药用者。由于农民在采收时并不严格区
分,而药材在干燥后又很容易破碎,故香茶菜的外观
鉴别较为困难。叶微性状鉴定结果(见表1)显示4
种香茶菜叶片上毛茸的分布、长短、密度等存在差
异,可以作为鉴别4种药材的依据。
中药微性状鉴定法是传统性状鉴定在微观领域
的延伸[10],适用于细微的药材表面特征的观察。近
年来,先后有学者[10-11]对花、果实、种子的表面以及根
类药材断面的特征进行微性状观察研究,取得一定成
果。微性状鉴定具有方法简单、迅速、直观的特点,
48
Website http://xuebao.ahtcm.edu.cn E-mail ahxbbjb@163.com
安徽中医药大学学报 第34卷 第3期 2015年6月 J ANHUI UNIV CHINESE MED Vol.34 No.3Jun.2015
表1 4种香茶菜属植物叶微性状特征分类检索表
1.密被毛茸,毛茸较长;叶尖极度突起或突起明显
2.毛茸在叶表面分布均匀,排列方向杂乱;叶尖极度突起 岐伞香茶菜…………………………………………………………
2.毛茸多分布于叶脉、叶缘,多同向排列;叶尖突起明显 显脉香茶菜……………………………………………………………
1.稀被毛茸,较短或长短不一,多分布在叶脉、叶缘。叶尖微凹或突起
3.毛茸长短不一;叶尖突起明显 香茶菜……………………………………………………………………………………………
3.毛茸均较短,叶缘上均匀排列;叶尖微凹或突起不明显 大萼香茶菜…………………………………………………………
图1 4种香茶菜属植物叶表面微性状特征
(图中标尺均示200μm)
适宜于观察毛茸的长短以及在叶缘、叶脉的分布特
点等性状观察难以实现的特征,针对叶类、全草类药
材干燥后容易破碎而制作用于显微观察的表面制
片又较困难的问题,微性状鉴别不失为一种快速、准
确的方法,值得系统研究,也可以作为植物形态分类
的补充与参考。
(在实验过程中得到安徽中医药大学药学院周
建理教授、杨青山老师的指导和帮助,谨致谢意!)
参考文献:
[1]中药大辞典编委会.中药大辞典:下册[M].2版.上海:
上海科学技术出版社,2010:2353-2354.
[2]安徽中药志编委会.安徽中药志:第二卷[M].合肥:安
徽科学技术出版社,1997:613-616.
[3]钱啸虎.安徽植物志:第四卷[M].合肥:安徽科学技术
出版社,1991:310-317.
[4]冯毓秀,宋万志,陈红,等.12种香茶菜叶的扫描电镜观
察与鉴别[J].中国药学杂志,1991,26(3):147-151.
[5]邵邻相,杨菊林,郭水良,等.3种香茶菜茎叶表面的扫
描电镜观察[J].中草药,2003,34(10):947-950.
[6]严铸云,贾敏如.九种香茶菜属药用植物的形态组织学
研究[J].中药与临床,2010,1(1):13-19.
[7]黄璐琦.中药鉴定新技术新方法及其应用[M].北京:人
民卫生出版社,2009:32-35.
[8]周建理,杨青山.中药微性状鉴定法[J].安徽中医学院
学报,2011,30(1):66-68.
[9]陈士林,郭宝林,张贵君,等.中药鉴定学新技术新方法
研究进展[J].中国中药杂志,2012,37(8):1043-1055.
[10]高飞燕,周建理.中药豨签草的微性状鉴别[J].中国中
药杂志,2013,38(3):331-333.
[11]马逾英,卢晓琳,翟萌,等.几种中药材及其混伪品的微
性状对比鉴别[J].中国中药杂志,2012,37(8):1161-
1164.
[12]周建理,杨青山,曹海燕,等.景深合成技术在植物光学
微形态研究上的应用[J].生物学通报,2011,46(9):57.
(收稿日期:2015-01-16;编辑:姚实林)
A Study of Microscopic Characteristics of Four Species of Rabdosia Plants
MA De-qiang1,YANG Jun2,WANG Wen-hao2,ZHEN Lan-ping2
(1.Taihe Hospital of Traditional Chinese Medicine,Anhui Taihe 236604,China;2.Anhui Key Labo-
ratory of Modernized Chinese Materia Medica & School of Pharmacy,Anhui University of Chinese
Medicine,Anhui Hefei 230012,China)
[Abstract]Objective To study the microscopic characteristics of Rabdosiaplants.Methods Using a dig-
ital camera and eyepiece with a resolution of 5Megapixels,the images for identification of microscopic
characteristics were synthesized by depth-of-field synthesis technology.The microscopic characteristics of
58
Website http://xuebao.ahtcm.edu.cn E-mail ahxbbjb@163.com
安徽中医药大学学报 第34卷 第3期 2015年6月 J ANHUI UNIV CHINESE MED Vol.34 No.3Jun.2015
高效液相色谱法-蒸发光散射检测器同时测定
肝乐颗粒中黄芪甲苷和芍药苷的含量
姜 辉1,王 斌2,高家荣1
(1.安徽中医药大学第一附属医院,安徽 合肥 230031;2.安徽中医药大学科研实验中心,安徽 合肥 230038)
[摘要]目的 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(high performance liquid chromatography-evaporative
light scattering detector,HPLC-ELSD)建立肝乐颗粒中黄芪甲苷和芍药苷的含量测定方法。方法 以水
和甲醇分别为流动相A和流动相B,在Hypersil ODS XB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm)上进行梯度洗脱。
洗脱程序:0~5min,A 60%;6~10min,A 25%,11~18min,A 10%;流速:1.2mL/min;柱温:30℃。
ELSD参数优化:增益值分别设为1、2、3;漂移管温度分别设为50、70、90、110℃;载气流量分别为1.2、1.6、
2.0、2.4L/min。结果 通过优化参数,在增益值为2,漂移管温度为90℃和载气流量为2.0L/min时,对
芍药苷和黄芪甲苷的含量检测结果最佳。芍药苷和黄芪甲苷的平均加样回收率分别为99.58%、100.37%,
RSD分别为2.32%、1.21%。结论 该方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,所优化的ELSD参数及建立的
HPLC-ELSD法适合肝乐颗粒中芍药苷和黄芪甲苷含量的同时测定。
[关键词]高效液相色谱法;蒸发光散射检测器;肝乐颗粒;黄芪甲苷;芍药苷;含量测定
[中图分类号]R284 [文献标志码]A [DOI]10.3969/j.issn.2095-7246.2015.03.028
肝乐颗粒(又名疏肝健脾方)为安徽中医药大学
第一附属医院特色院内制剂,主治急性肝炎、慢性肝
炎、肝纤维化、肝硬化活动期,疗效确切[1-2]。方中黄
芪味甘微温,入脾、肺经,健脾益气;柴胡味苦辛微
寒,入肝胆二经,疏肝解郁,两药合用则疏肝健脾并
举,共为君药;白芍养血柔肝,茵陈、白术、茯苓、薏苡
仁、猪苓健脾和胃渗湿为臣药;佐以泽兰活血化瘀,
板蓝根清热解毒,以使毒消而正气自复。本实验在
前期研究[3-5]基础上,采用高效液相色谱-蒸发光散
射检测器(high performance liquid chromatogra-
phy-evaporative light scattering detector,HPLC-
ELSD)同时测定肝乐颗粒中君药黄芪活性成分黄
基金项目:国家自然科学基金项目(81102874)
作者简介:姜辉(1980-),男,硕士,主管药师
芪甲苷和臣药白芍活性成分芍药苷的含量,以期建
立该制剂的质量控制方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent1260型高效液相色谱仪(包括
在线脱气机、二元泵、柱温箱、380-LC型ELSD):美
国安捷伦公司;HS10260D型超声清洗器:天津奥特
赛恩斯仪器有限公司;BP211D型十万分之一电子
天平:德国赛多利斯公司。
1.2 材料 黄芪甲苷(批号110781-200512)和芍
药苷(批号110736-200934)对照品由中国药品生物
制品 检 定 所 提 供。肝 乐 颗 粒 (批 号 分 别 为
20121204、20131020、20130622)由安徽中医药大学
第一附属医院制剂中心提供;药材黄芪、柴胡、白芍、
茵陈、板蓝根、薏苡仁、枳壳、白术、猪苓、茯苓和泽兰
均购于合肥乐家老铺中药饮片有限公司,并经安徽
the fresh and dry leaves of four species of Rabdosiaplants were observed.Results There were substantial
differences in microscopic characteristics including the degree of leaf tip protrusion and the length and dis-
tribution of leaf trichomes between the leaves from four species of Rabdosiaplants.Rabdosia macrophylla
and Rabdosia nervosa were densely covered with long trichomes and had extreme or substantial protrusion
at leaf tips,while Rabdosia amethystoides and Rabdosia macrocalyx were loosely covered with short tri-
chomes mostly along the leaf vein and margin and had slight depression or protrusion at leaf tips.
Conclusion The identification of microscopic characteristics is a simple method to distinguish between dif-
ferent Rabdosiaplants.
[Key words]Rabdosia amethystoides(Benth.)Hara;Rabdosia macrophylla(Migo)C.Y.Wu et H.W.
Li;Rabdosia macrocalyx(Dunn)Hara;Rabdosia nervosa(Hemsl.)C.Y.Wu et H.W.Li;microscopic
characteristics
68
Website http://xuebao.ahtcm.edu.cn E-mail ahxbbjb@163.com
安徽中医药大学学报 第34卷 第3期 2015年6月 J ANHUI UNIV CHINESE MED Vol.34 No.3Jun.2015