全 文 ：选定相同的色谱条件下进行测定。结果表明 Venusil
MP-C18色谱柱在该色谱条件下分离效果最佳。
5. 5 本实验建立吴茱萸药材脂溶性成分的 HPLC
指纹图谱 采用聚类分析及主成分分析对图谱信息
进行识别，发现药典规定的 3 种吴茱萸虽同为药用，
但是品质存在一定的差异。主成分分析结果首次表
明，石虎与疏毛吴茱萸在脂溶性化学成分上相似度
较高，其品质主要受土壤、光照、温度、降水等气候、
环境因素影响较大，与品种没有明显的关系。但吴
茱萸药材的脂溶性化学成分与石虎及疏毛吴茱萸化
学成分具有较大的相对差异性。因此本研究结果既
为现版中国药典的规定吴茱萸药材为吴茱萸、石虎
或疏毛吴茱萸提供了理论与实验依据，同时吴茱萸
药材品质的差异性也为制定新的吴茱萸质量控制与
品质评价模式提供了参考依据。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:160.
［2］卢永飞，杨健，孙吉慧，等 . 不同产地吴茱萸有效成分指
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清风藤属药用植物叶表皮特征及其鉴定学意义
孙庆文，齐维娜，王 波
(贵阳中医学院药学院，贵州 贵阳 550002)
摘要 目的:通过观察统计清风藤属 9 种药用植物的叶表皮显微特征，考察该方法鉴别该属植物和药材的可
行性及其鉴定学意义。方法:应用光学显微镜和 SPSS 17. 0 软件对叶片表皮特征进行观察、测量和统计分析。结
果:所观察的 9 种植物叶表皮在毛被、细胞形态、细胞大小等显微特征上有一定差异，其中下表皮细胞的长和周长
差异显著。结论:显微观察与统计学方法结合可作为该属植物分类及其药材的鉴别依据。
关键词 清风藤属;叶表皮;显微特征
中图分类号:Ｒ282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)10-1594-05
Microstructure Characteristics and Identification Significance of Leaf Epidermis
of Medicinal Plants from Sabia Genus
SUN Qing-wen，QI Wei-na，WANG Bo
(Department of Pharmacy，Guiyang College of Traditional Chinese Medicine，Guiyang 550002，China)
Abstract Objective:To study the feasibility and significance of the method to identify medicinal plants through the observation
and statistics of 9 species of Sabia medical plants from Guizhou province. Methods:Leaf epidermis characteristics were observed，meas-
ured by optical microscope and analyzed by SPSS 17. 0 software. Ｒesults:All of these plants had some differences in indumentum，cell
morphology and size，and had significant difference in the length and circumference of lower epidermis cells. Conclusion:The method
combining microscopic observation with statistics can be used as the classification and identification basis of medicinal plants and mate-
rials of Sabia genus.
Key words Sabia genus;Leaf epidermis;Microstructure characteristics
收稿日期:2013-03-25
基金项目:贵州省科技厅联合基金项目(黔科合中药字【2010】LKZ7027 号);贵州省中药现代化项目(黔科合社字【2008】5004 号)
作者简介:孙庆文(1978-)，男，硕士，副教授，主要从事中药资源和鉴定的教学与科研;Tel:13765160105，E-mail:sqwen_2008@ 126. com。
·4951· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2013.10.018
清风藤科清风藤属植物约 30 种，分布于亚洲南
部及东南部，我国约有 17 种〔1〕。据调查，贵州省该
属植物约有 11 种，均为药用植物〔2，3〕，全株入药具
有祛风、清热、利湿、止痛等功效，常用于治疗肝炎、
风湿关节痛、跌打损伤疼痛等〔4〕。其中小花清风藤
Sabia parviflora Wall. ex Ｒoxb. 治疗病毒性肝炎的
效果显著〔5〕，是贵州西部民间治疗肝炎的常用药物
之一，现已开发成“龙华清肝冲剂”等多个制剂〔6〕。
清风藤属植物资源丰富，保肝、降酶、抗炎等功效显
著，因而具有广阔的开发利用前景。该属多种植物
的花期仅有幼叶，加上花期较短，花瓣易落，结果率
低等特点，使得该属植物和药材的分类鉴定比较困
难。通过文献查阅，笔者未见有关该属植物叶片表
皮特征的系统研究报道。因此，对黔产清风藤属 9
个种的叶片表皮进行显微观察、测量及统计分析，以
了解不同种类之间的叶片表皮特征，制定分种检索
表，为该属植物和药材的分类鉴定提供新的参考依
据。
1 材料和方法
1. 1 材料 所有实验材料均由笔者亲自到贵州省
野外采集，并鉴定，材料的代号、种名、产地、凭证标
本号等信息见表 1。凭证标本存放于贵阳中医学院
标本馆(HGCM)。仪器:OLYMPUS BX41 显微镜，
OLYMPUS DP72 显像系统(日本 Olympus公司)。
表 1 清风藤属 9 种药用植物的来源
代号 种名 产地 采集时间 采集人 标本号
种 1 凹萼清风藤 Sabia emarginata Lecomte 龙里县湾寨乡 2010. 07. 17 齐维娜 100717052
种 2 平伐清风藤 Sabia dielsii Levl. 龙里县湾寨乡 2010. 07. 21 齐维娜 100721045
种 3 小花清风藤 Sabia parviflora Wall. ex Ｒoxb. 修文县大石乡 2010. 10. 05 孙庆文 101005029
种 4 尖叶清风藤 Sabia swinhoei Hemsl. ex Forb. et Hemsl. 龙里县湾寨乡 2010. 07. 23 王波 100723011
种 5 灰背清风藤 Sabia discolor Dunn 贵定县云雾镇 2010. 09. 22 孙庆文 100922037
种 6 四川清风藤 Sabia schumanniana Diels 普安县盘水镇 2010. 08. 03 孙庆文 100803009
种 7 鄂西清风藤 Sabia campanulata Wall. ex Ｒoxb. subsp.ritchieae (Ｒehd. et Wils. )Y. F. Wu 贵阳市水田镇 2010. 09. 06 孙庆文 100906024
种 8
两色清风藤 Sabia schumanniana Diels subsp. pluriflora
(Ｒehd. et Wils.)Y. F. Wu var. bicolor (L. Chen)Y.
F. Wu
威宁县岔河乡 2010. 10. 25 孙庆文 101025078
种 9 多花清风藤 Sabia schumanniana Diels subsp. pluriflora(Ｒehd. et Wils. )Y. F. Wu 贵阳市下坝乡 2010. 06. 07 王波 100607003
1. 2 方法 从成熟叶片的中部撕取或刮取小块表
皮，置于 30%的次氯酸钠溶液中漂白 10 ～ 15 min，
清水漂洗后用稀甘油装片，中性树胶封片。将装片
置光学显微镜下进行观察、测量、拍照和描述。绘图
采用拍照，打印，硫酸纸拓印，扫描，制版的方法和步
骤;数值测量应用 DP2-BSW软件进行，测量 50 个近
邻表皮细胞的长、宽和周长数值(长为细胞的长轴
长度，宽为过长轴中心的垂直线长度，周长为绕细胞
壁一周的长度)，应用 SPSS 17. 0 软件进行统计分
析。形态描述的术语依据张丽娟等〔7〕。
2 结果
2. 1 表皮细胞特征描述 所观察的 9 种植物叶片
叶脉内均有大量棱角较钝的大型草酸钙簇晶。上表
皮未见气孔器，表皮细胞按垂周壁可分为 2 种类型，
一类是平直型，细胞呈不规则的多边形，如图 1 中的
1、3、4、6、7、8、9;另一类是弯曲型，垂周壁稍波状弯
曲，如图 1 中的 2 和 5。下表皮均有气孔器分布，细
胞也可分为 2 种类型，一类是深波型，细胞垂周壁深
波状弯曲，如图 1 中的 10、11、13、14;另一类是浅波
型，细胞垂周壁浅波状弯曲，或稍弯曲，如图 1 中的
12、15、16、17、18。多数种类均无毛被，但尖叶清风
藤的上、下表皮均有较多单细胞非腺毛，毛长 60(35
～ 95)μm，基部直径约 8 μm。四川清风藤上表皮
和多花清风藤下表皮有少量单细胞非腺毛，但毛
的胞腔大小差异较大。所有种类的气孔器均不是
均匀分布，均以不定式为主，掺杂少量不等式，大
小有一定差异。物种名称、表皮细胞和气孔器的
大小、细胞壁情况等见表 2。根据叶表皮上毛被的
有无，细胞的形态和大小等特征，制定的分类检索
表见表 3。
2. 2 表皮细胞数值统计分析 应用 SPSS 17. 0 软
件对细胞长、宽和周长的数值进行统计分析，结果显
示，大多数种类叶片表皮细胞的长和周长数值满足
正态性和方差齐性，平均数、中位数和众数都比较
接近，但周长差异显著。分析结果见表 2、表 4 和
图 2。
·5951·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月
图 1 清风藤属 9 种植物叶上、下表皮特征图(标尺 =50 μm)
1、10. 凹萼清风藤 2、11. 平伐清风藤 3、12. 小花清风藤 4、13. 尖叶清风藤 5、14. 灰背清风藤 6、15. 四川清风藤
7、16. 鄂西清风藤 8、17. 两色清风藤 9、18. 多花清风藤
注:1 ～ 9 为上表皮，10 ～ 18 为下表皮
·6951· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月
表 2 清风藤属 9 种植物叶表皮细胞情况
代号 种名
上表皮
细胞大小
(长 ×宽 ×周长)/μm 垂周壁
下表皮
细胞大小
(长 ×宽 ×周长)/μm 垂周壁
气孔大小
(长 ×宽 ×周长)
均值 /μm
图 1
种 1 凹萼清风藤
(37. 50 ～ 70. 00)49. 98 ×
(27. 50 ～ 50. 00)33. 30 ×
(107. 50 ～ 192. 50)143. 70
平直
(28. 75 ～ 75. 00)55. 00 ×
(10. 00 ～ 57. 50)26. 85 ×
(90. 00 ～ 275. 00)195. 23
深波状弯曲
34. 46 × 24. 46
× 91. 79 1、10
种 2 平伐清风藤
(38. 75 ～ 90. 00)56. 23 ×
(17. 50 ～ 33. 40)50. 00 ×
(125. 00 ～ 220. 00)156. 58
稍弯曲
(30. 00 ～ 80. 00)54. 18 ×
(12. 50 ～ 47. 50)26. 35 ×
(92. 50 ～ 280. 00)190. 43
深波状弯曲 28. 91 × 20. 78× 80. 63 2、11
种 3 小花清风藤
(22. 50 ～ 45. 00)32. 33 ×
(16. 25 ～ 32. 50)22. 63 ×
(75. 00 ～ 110. 00)92. 40
平直
(20. 00 ～ 52. 50)32. 13 ×
(7. 50 ～ 28. 75)16. 70 ×
(63. 75 ～ 132. 50)97. 43
浅波状弯曲 25. 67 × 22. 31× 80. 67 3、12
种 4 尖叶清风藤
(37. 50 ～ 70. 00)53. 50 ×
(22. 50 ～ 46. 25)34. 98 ×
(113. 75 ～ 185. 00)152. 83
平直
(22. 50 ～ 73. 75)43. 75 ×
(10. 00 ～ 43. 75)22. 33 ×
(82. 50 ～ 202. 50)151. 78
深波状弯曲 33. 19 × 23. 19× 90. 83 4、13
种 5 灰背清风藤
(33. 75 ～ 62. 50)48. 38 ×
(17. 50 ～ 41. 25)29. 70 ×
(107. 50 ～ 181. 25)144. 28
稍弯曲
(22. 50 ～ 72. 50)42. 60 ×
(12. 50 ～ 45. 00)25. 70 ×
(83. 75 ～ 222. 50)148. 20
深波状弯曲
24. 69 × 21. 09
× 74. 53 5、14
种 6 四川清风藤
(46. 25 ～ 107. 50)81. 03 ×
(35. 00 ～ 80. 00)55. 45 ×
(152. 50 ～ 300. 00)235. 78
平直
(16. 25 ～ 45. 00)31. 50 ×
(8. 75 ～ 27. 50)17. 80 ×
(52. 50 ～ 125. 00)93. 80
浅波状弯曲 25. 00 × 21. 25× 75. 31 6、15
种 7 鄂西清风藤
(26. 25 ～ 80. 00)54. 20 ×
(22. 50 ～ 48. 75)39. 58 ×
(97. 50 ～ 197. 50)155. 35
平直
(30. 00 ～ 82. 50)53. 10 ×
(12. 50 ～ 40. 00)26. 88 ×
(85. 00 ～ 221. 25)163. 35
浅波状弯曲 39. 46 × 29. 46× 112. 50 7、16
种 8 两色清风藤
(37. 50 ～ 57. 50)43. 45 ×
(22. 50 ～ 45. 00)33. 23 ×
(107. 50 ～ 157. 50)131. 53
平直
(20. 00 ～ 52. 50)37. 15 ×
(15. 00 ～ 37. 50)24. 00 ×
(72. 50 ～ 177. 50)109. 70
略弯曲或平直 32. 38 × 24. 38× 91. 25 8、17
种 9 多花清风藤
(15. 00 ～ 48. 75)35. 40 ×
(15. 00 ～ 35. 00)27. 63 ×
(60. 00 ～ 135. 00)109. 45
平直
(25. 00 ～ 60. 00)42. 90 ×
(10. 00 ～ 35. 00)20. 88 ×
(88. 75 ～ 182. 50)127. 48
浅波状弯曲
35. 63 × 29. 06
× 108. 44 9、18
表 3 清风藤属 9 种植物叶表皮特征分种检索表
1 叶表皮上有单细胞非腺毛
2 叶片仅上或下表皮有少量单细胞非腺毛
3 叶片仅上表皮具有单细胞非腺毛，上表皮细胞周
长 152 ～ 300 μm 四川清风藤……………………
3 叶片仅下表皮具有单细胞非腺毛，上表皮细胞周
长 60 ～ 135 μm 多花清风藤……………………
2 叶片上、下表皮都有较多单细胞非腺毛
尖叶清风藤…………………………………………
1 叶表皮上无单细胞非腺毛
4 上表皮细胞表面观呈不规则形，垂周壁弯曲
5 上表皮细胞的周长平均值约为 156 μm，下表皮细
胞的周长平均值约为 190 μm
平伐清风藤………………………………………
5 上表皮细胞的周长平均值约为 144 μm，下表皮细
胞的周长平均值约为 148 μm
灰背清风藤………………………………………
4 上表皮细胞表面观呈多角形，垂周壁平直
6 下表皮细胞呈极不规则形，垂周壁深波状弯曲，
周长均值约为 195 μm 凹萼清风藤……………
6 下表皮细胞略呈不规则形或多角形，垂周壁浅波
状弯曲或平直，下表皮细胞周长均值小于 175 μm
7 下表皮细胞的周长均值约为 163 μm
鄂西清风藤……………………………………
7 下表皮细胞的周长均值小于 150 μm
8 下表皮细胞的垂周壁稍弯曲，周长均值约
为 97 μm，气孔器周长均值约为 80 μm
小花清风藤………………………………
8 下表皮细胞的垂周壁多数平直，周长均值
约为 109 μm，气孔器周长均值约为 90 μm
两色清风藤…………………………
图 2 清风藤属 9 种植物叶表皮细胞周长均值柱形图
3 讨论
3. 1 考虑到一个植物种的单个样本所测得数据是
否有统计学意义的问题，笔者在确定实验方法后对
·7951·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月
表 4 清风藤属 9 种植物叶表皮细胞大小数值统计
代号
上表皮
周长 /μm
均值 最大值 最小值 中位数 众数
概率(正态性检验)
标准差 标准误 周长 长 宽
下表皮
周长 /μm
均值 最大值 最小值 中位数 众数
概率(正态性检验)
标准差 标准误 周长 长 宽
种 1 143. 70 192. 50 107. 50 142. 50 130. 00 18. 32 2. 59 0. 241* 0. 029 0. 000 195. 23 275. 00 90. 00 198. 75 220. 00 39. 69 5. 61 0. 238* 0. 653* 0. 056*
种 2 156. 58 220. 00 125. 00 155. 00 150. 00 19. 40 2. 74 0. 089* 0. 005 0. 088* 190. 40 280. 00 92. 50 191. 25 202. 50 43. 03 6. 09 0. 681* 0. 388* 0. 032
种 3 92. 40 110. 00 75. 00 93. 75 90. 00 8. 14 1. 15 0. 272* 0. 335* 0. 079* 97. 43 132. 50 63. 75 98. 75 75. 00 18. 16 2. 57 0. 097* 0. 53* 0. 412*
种 4 152. 83 185. 00 113. 75 153. 75 155. 00 14. 30 2. 02 0. 847* 0. 124* 0. 305* 151. 78 202. 50 82. 50 154. 38 162. 50 27. 77 3. 93 0. 652* 0. 490* 0. 017
种 5 144. 28 181. 25 107. 50 142. 50 140. 00 17. 74 2. 51 0. 597* 0. 497* 0. 003 148. 20 222. 50 83. 75 152. 5 157. 5 37. 64 5. 32 0. 203* 0. 567* 0. 478*
种 6 235. 78 300. 00 152. 50 235. 63 262. 50 34. 17 4. 83 0. 780* 0. 111* 0. 816* 93. 80 125. 00 52. 50 94. 38 97. 50 15. 56 2. 20 0. 894* 0. 681* 0. 466*
种 7 155. 35 197. 50 97. 50 160. 00 160. 00 18. 58 2. 63 0. 266* 0. 043 0. 019 163. 35 221. 25 85. 00 160. 00 187. 50 31. 21 4. 41 0. 547* 0. 535* 0. 573*
种 8 131. 53 157. 50 107. 50 127. 50 120. 00 14. 32 2. 02 0. 004 0. 010 0. 732* 109. 70 177. 50 72. 50 105. 63 102. 50 21. 06 2. 98 0. 104* 0. 376* 0. 199*
种 9 109. 45 135. 00 60. 00 111. 88 112. 50 13. 87 1. 96 0. 005 0. 213* 0. 010 127. 48 182. 50 88. 75 126. 88 130. 00 21. 79 3. 08 0. 096* 0. 896* 0. 164*
注:样本容量 n = 50，* P ＞ 0. 05 满足正态性
5 个小花清风藤 Sabia parviflora Wall. ex Ｒoxb. 植
株上成熟叶片的表皮特征进行了对比研究。所得数
据采用单因素方差分析，结果表明 5 个植株成熟叶
片表皮细胞的形态、细胞大小、细胞壁的周长和弯曲
情况均无显著性差异，说明同一种植物成熟叶片表
皮的显微特征是很稳定的，完全可作为种的鉴别特
征。
3. 2 细胞的长和宽虽然可以体现细胞的大小，但
由于下表皮细胞的垂周壁常强度波状弯曲，细胞形
态极不规则，因此其数值的测量会受一定程度的主
观影响，而周长的测量受人的主观影响较小，数值相
对比较客观。分析结果也表明，只有叶片的下表皮
细胞长和周长满足多重比较的条件，即随机数据满
足正态性和方差齐性。加上各个种类叶表皮细胞的
周长均值差异较大，因此，制定 9 种清风藤属植物叶
表皮特征分种检索表时，主要以毛被、垂周壁和下表
皮细胞的周长为主要指标。
3. 3 传统宏观的形态分类具有直观、快速的特点，
但对清风藤属的一些植物形态十分相似而又常常见
不到繁殖器官的种类就显得尤为困难。利用叶片表
皮上的附属物、细胞形态和气孔类型，加上应用数学
统计分析的方法，对相似的植物或药材进行分类鉴
定往往可以弥补传统分类的劣势。例如凹萼清风藤
与鄂西清风藤、小花清风藤与四川清风藤均是民间
常用的药材，它们的植物形态特征十分相似，在没有
繁殖器官时很难准确鉴定。统计分析结果表明，前
二者下表皮细胞周长平均值分别为 195. 23 μm 与
163. 35 μm，加上细胞垂周壁差异显著，容易区分。
后二者下表皮细胞周长平均值分别为 97. 43 μm 与
93. 80 μm，十分接近，但上表皮细胞周长平均值分
别为 92. 40 μm与 235. 78 μm，差异较大，易于鉴别。
因此，统计分析对植物的显微鉴别具有可行性和一
定的参考价值，是植物和药材分类鉴定的有益补充。
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2010.
《中药材》杂志在“中国知网”发行情况:2010 年期刊机构用户总计 3196 个，国际个
人读者分布在 20 个国家和地区。2011 年期刊机构用户总计 3232 个，国际个人读者分布
在 22 个国家和地区。
·8951· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月