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特约栏目 博士达药业
女贞属三种植物成熟果实中有效成分含量的比较
★ 李俊1 徐凌川1* 李凤华2 (1． 山东中医药大学 药学院 济南 250355;2．山东省疾病预防控制中心
济南 250014)
摘要:测定中药女贞子、辽东水蜡、小蜡成熟果实中 3 种有效成分的含量，并进行比较。方法:采用高效液相色谱法测定以上 3
种植物成熟果实中的特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸。特女贞苷色谱条件为:色谱柱 Kromasil C18(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流
动相为乙腈 －水(20:80) ，流速 1． 0 Ml /分，检测波长为 224 nm，柱温 25 ℃;齐墩果酸与熊果酸色谱条件为:色谱柱 Merck Hi-
bar lichrospher sorbent lot(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流动相为甲醇 －水 －三乙胺 －冰醋酸(89:11:0． 02:0． 03) ，流速 1． 0 mL /
分，检测波长为 215 nm，柱温:30 ℃。结果:3 种有效成分线性关系均良好，特女贞苷的线性范围为 0． 330 ～ 1． 650 μg;齐墩果
酸的线性范围为 0． 235 ～ 1． 175 μg;熊果酸的线性范围为 0． 217 ～ 1． 085 μg。特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸的平均回收率分别为
100． 0%，RSD 0． 6%(n = 5) ;99． 7%，RSD 0． 4%(n = 5) ;99． 4%，RSD 0． 5%(n = 5)。女贞果实中特女贞苷、齐墩果酸和熊
果酸的平均含量分别为:1． 75%、0． 80%、0． 21%;辽东水蜡果实分别为 2． 00%、0． 15%、0． 32%;小蜡果实分别为 3． 13%、1．
07%、0． 19%。结论:建立了以特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸为综合指标的女贞子类药材质量分析方法，可用于女贞属药材的质
量控制。研究发现小蜡果实中特女贞苷和齐墩果酸含量较高，值得进一步开发利用。
关键词:女贞子;辽东水蜡;小蜡;有效成分
中图分类号:R 284． 1 文献标识码:A
女贞子是木犀科女贞属植物女贞 Ligustrum lu-
cidum Ait．的成熟果实［1］。主要分布于分布于陕西、
甘肃、浙江、江苏、云南、贵州、广东等地。呈卵形、椭
圆形或肾形。表面黑紫色或灰黑色，皱缩不平，基部
有果梗痕或具宿萼及短梗。在我国药材资源丰富，
始载于《神农本草经》，被列为上品。味甘苦，性凉，
归肝肾经。具有滋补肝肾、强腰膝、明耳目等功能。
辽东水蜡［2 － 3］Ligustrum obtusifolium subsp． suave 为
木犀科女贞属植物，落叶灌木，主要分布于辽宁、山
东、江西、安徽、江苏、湖南、陕西等地。其枝叶大多
具有清热解毒、消肿止痛的功效，用于治疗火眼、口
疮、牙痛、咽喉痛、烫伤、乳痈、肿毒等疾病。小蜡 Li-
gustrum sinense Lour．为木犀科女贞属植物，半常绿
灌木，主要分布于华北各地，其叶具清热解毒，抑菌
杀菌，消肿止痛，祛腐生肌的功效。可用于急性黄疸
型传染性肝炎，痢疾，肺热咳嗽，疮疡肿毒等外科感
染性疾病的治疗。长期以来，一直认为中药女贞子
的主要有效成分是以齐墩果酸为代表的五环三萜类
化合物，并对其进行了较为深入的研究［4 － 7］。但 20
世纪 90 年代后的国内外研究表明，女贞子中除低极
性的齐墩果酸外，还含有较高含量的环烯醚萜苷
类［8 － 9］等多种水溶性成分。环烯醚萜苷具有保肝利
胆，抗肝纤维化，抗菌消炎，抗肿瘤，降血脂，降血糖，
降低血液粘度，增强机体免疫调节等多种药理活性，
已日益引起广泛重视。特女贞苷属于裂环环烯醚萜
苷类化合物，为女贞子专属性成分［1］。本实验建立
了以高效液相色谱法对 3 种女贞属植物(女贞子、
辽东水蜡、小蜡)成熟果实中特女贞苷、齐墩果酸、
熊果酸进行了定量测定，为进一步研究女贞属植物
建立了可靠、准确的方法。
1 仪器与材料
Waters2695 Separations Module 高效液相色谱
仪，2998 光电二极管阵列检测器，KQ － 500E 型超声
液清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ，SHB －Ⅲ循
环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司) ，
FA1004 上皿电子天平(上海精科天平厂) ，德国 Sar-
torius CP225D型 1 /10 万电子分析天平。
特女贞苷对照品(上海源叶生物科技有限公
司，批号 YY20110404，供含量测定用，纯度 ≥
98%) ;齐墩果酸对照品(上海源叶生物科技有限公
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司，批号 YY20101020，供含量测定用，纯度 ≥
98%) ;熊果酸对照品(上海源叶生物科技有限公
司，批号 YY20100425，供含量测定用，纯度 ≥
98%) ;甲醇(分析纯，色谱纯，国药集团化学试剂有
限公司) ;乙腈(色谱纯，国药集团化学试剂有限公
司) ;水(娃哈哈牌纯净水)。
女贞子、辽东水蜡、小蜡均采自济南市植物园，
由山东中医药大学徐凌川教授分别鉴定为木犀科女
贞属植物女贞子 Ligustrum lucidum Ait．，木犀科女贞
属植 物 辽 东 水 蜡 Ligustrum obtusifolium subsp．
Suave，木犀科女贞属植物小蜡 Ligustrum sinense
Lour。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 特女贞苷色谱条件［10］:色谱柱
Kromasil C18 色谱柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流
动相为乙腈 －水(20∶ 80) ;流速 1． 0 mL /分;检测波
长为 224 nm;柱温 25 ℃;进样量 10 μL。齐墩果酸
与熊果酸色谱条件:色谱柱 Merck Hibar lichrospher
sorbent lot(4． 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流动相为甲
醇 －水 －三乙胺 －冰醋酸(89 ∶ 11 ∶ 0． 02 ∶ 0． 03) ;流
速 1． 0 mL /分;检测波长为 215 nm;柱温 30 ℃;进
样量 10 μL。对照品和样品的 HPLC图分别见图 1，
2，3，4。
2． 2 对照品溶液的制备 精密称取特女贞苷对照
品 8． 25 mg，置于 25 mL 容量瓶，加甲醇定容，得
0. 330 mg /mL的特女贞苷对照品溶液，超声混匀，即
得特女贞苷对照品贮备液，备用;精密称取齐墩果酸
对照品与熊果酸对照品 5． 87 mg，5． 42 mg，置于 25
mL容量瓶，加甲醇定容，得 1 mL 分别含 0． 235 mg
齐墩果酸和 0． 217 mg 熊果酸的混合溶液。超声混
匀，即得齐墩果酸和熊果酸的混合对照品贮备液，备
用。
2． 3 供试品溶液的制备 精密称取女贞子，辽东水
蜡，小蜡成熟果实的干燥粉末(过 40 目筛)各 1． 000
0 g，置于锥形瓶中，加甲醇 20 mL，保鲜膜封口，超声
(50W，40kHz)30 分钟，抽滤，滤渣加甲醇 10 mL，保
鲜膜封口，超声 15 分钟，合并两次滤液，置于 50 mL
容量瓶，加甲醇定容，超声混匀，经 0． 45 μm 微孔滤
膜过滤，即得供试品溶液。
2． 4 线性关系考察 精密吸取 2． 2 项下对照品贮
备液 1，2，3，4，5 mL分别置于 10 mL容量瓶，甲醇定
容，超声混匀，得 5 个不同浓度的对照品溶液，按上
述色谱条件进样 10μL 测定，记录峰面积。以浓度
X(μg /mL)为横坐标，峰面积 Y 为纵坐标绘制标准
曲线并计算回归方程。特女贞苷 Y = 14 880X +
36 452，r = 0． 999 4，特女贞苷在 0． 330 ～ 1． 650 μg
线性关系良好;齐墩果酸 Y = 3 264． 2X + 1
838. 3，r = 0． 999 4，齐墩果酸在 0． 235 ～ 1． 175 μg
线性关系良好;熊果酸 Y = 3 075． 4X + 1 741． 7，r
= 0. 999 8，熊果酸在 0． 217 ～ 1． 085 μg 线性关系良
好。
2． 5 精密度试验 精密吸取上述对照品 10 μL，按
照上述色谱条件，重复进样 6 次，测得特女贞苷，齐
墩果酸，熊果酸峰面积的 RSD分别为 1． 3%，0． 9%，
1． 1%。
2． 6 稳定性试验 取同一批供试品，按供试品溶液
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江西中医药 2012 年 1 月第 1 期总 43 卷第 349 期
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的制备方法操作，分别于 0、1、2、4、8 小时精密吸取
10 μL进样，测得特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸峰面
积的 RSD分别为 0． 9%、1． 1%、0． 4%。结果表明，
供试品溶液在 8 小时内稳定。
2． 7 重复性试验 精密称取同一样品(女贞子)5
份，按供试品溶液制备方法分别制备 5 份供试品溶
液。进样测定，测得特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸含
量的 RSD分别为 2． 3%，2． 8 %，1． 9%。结果表明
重复性良好。
2． 8 加样回收率试验 取已知含量的供试品(女
贞子 0． 1 g)5 份，分别精密加入一定量的特女贞苷、
齐墩果酸、熊果酸对照品，按照供试品溶液的制备方
法 2． 3 进行处理，制成供试品溶液，进样 10 μL，计
算加样回收率，特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸的平均
回收率分别为 100． 0%、99． 7%、99． 4%;RSD 分别
为 0． 6%、0． 4%、0． 5%。见表 1。
表 1 加样回收率试验结果(n = 5)
成分 样品中含量/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1． 753 1． 650 3． 379 99． 3
1． 689 1． 650 3． 358 100． 5
特女贞苷 1． 692 1． 650 3． 362 100． 6 100． 0 0． 6
1． 763 1． 650 3． 402 99． 7
1． 728 1． 650 3． 375 99． 9
0． 795 0． 705 1． 501 100． 1
0． 787 0． 705 1． 485 99． 5
齐墩果酸 0． 801 0． 705 1． 491 99． 0 99． 7 0． 4
0． 779 0． 705 1． 484 100． 0
0． 781 0． 705 1． 481 99． 7
0． 209 0． 217 0． 427 100． 2
0． 211 0． 217 0． 423 98． 8
熊果酸 0． 216 0． 217 0． 429 99． 1 99． 4 0． 5
0． 219 0． 217 0． 433 99． 3
0． 210 0． 217 0． 425 99． 5
2． 9 样品含量测定 取女贞子、辽东水蜡、小蜡成
熟果实的干燥粉末 1． 000 0 g，按照 2． 3 项下方法制
成供试品溶液，在上述色谱条件下，每个样品重复测
定 5 次，采用外标法以峰面积计算样品中特女贞苷、
齐墩果酸、熊果酸的含量。结果见表 2。
表 2 女贞属三种植物成熟果实中有效成分的含量(n = 5) %
样品 特女贞苷 珔X RSD 齐墩果酸 珔X RSD 熊果酸 珔X RSD
1． 761 0． 803 0． 213
1． 719 0． 791 0． 214
女贞子 1． 728 1． 75 1． 26 0． 811 0． 80 1． 53 0． 210 0． 21 0． 71
1． 752 0． 779 0． 212
1． 771 0． 799 0． 213
2． 037 0． 147 0． 327
2． 011 0． 148 0． 319
辽东水蜡 1． 964 2． 00 1． 82 0． 149 0． 15 1． 61 0． 329 0． 32 1． 22
1． 973 0． 153 0． 324
2． 045 0． 151 0． 322
3． 171 1． 085 0． 191
3． 085 1． 065 0． 195
小蜡 3． 119 3． 13 1． 08 1． 079 1． 07 1． 52 0． 193 0． 19 1． 15
3． 157 1． 043 0． 197
3． 124 1． 066 0． 194
注:药材采集时间为 2010 年 12 月。
3 结论与讨论
本文以特女贞苷、齐墩果酸、熊果酸为指标，建
立药材的定性定量控制方法。实验结果表明辽东水
蜡和小蜡的成熟果实中均含有中药女贞子的有效成
分，见图 5。据精密度试验和加样回收试验表明，本
方法准确，可用于女贞子，辽东水蜡，小蜡及其产品
的质量及其生产工艺控制，为进一步开发和利用女
贞属植物奠定基础。
图 5 女贞属三种植物果实中有效成分的含量示意图
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(收稿日期:2011-12-20 责任编辑:曾文雪)
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