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女贞子和水蜡树果实中多糖与总黄酮含量比较



全 文 :女贞子和水蜡树果实中多糖与总黄酮含量比较
张欣 ,杨欣鹏 (吉林农业科技学院生物工程学院 ,吉林吉林 132101)
摘要 以乙醇为溶剂 ,采用索氏提取法提取女贞子和水蜡树果实中的总黄酮 ,用蒸馏水提取其中的多糖。采用紫外—可见光谱法对总
黄酮和多糖含量进行测定。结果表明 ,水蜡树果和女贞子中总黄酮与多糖含量分别为 1.788%、2.036%和 8.789%、9.476%。
关键词 水蜡树果;女贞子;总黄酮;多糖
中图分类号 S567.23+9  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2010)33-18990-02
ContentComparisononPolysaccharidesandTotalFlavonoidsinLigustrumlucidumAit.andLigustrumobtusifoliumSieb.etZuccFruit
ZHANGXinetal (SchoolofBioengineering, JilinAgriculturalScienceandTechnologyColege, Jilin, Jilin132101)
Abstract Withethanolassolvent, thetotalflavonoidswasextractedfromLigustrumlucidumAit.andLigustrumobtusifoliumsieb.EtZucc
fruitbyusingSoxhletextractionandtheirpolysaccharideswasextractedwithdistiledwater.Thecontentsoftotalflavonoidsandpolysaccha-
ridesweredeterminedbyusingUV-visiblespectrometry.TheresultsshowedthatthecontentsoftotalflavonoidsandpolysaccharidesinL.ob-
tusifoliumfruitandL.lucidumwere1.788%, 2.036%and8.789%, 9.476%resp.
Keywords LigustrumobtusifoliumSieb.etZuccFruit;LigustrumlucidumAit.;Totalflavonoids;Polysaccharides
作者简介 张欣(1981-),男 ,吉林松原人 ,助教 ,从事生物工程和天然
产物方面的教学与科研工作。
收稿日期 2010-08-27
  水蜡树(LigustrumobtusifoliumSieb.etZucc)为木犀科女
贞属植物 ,其资源丰富 ,主要用作城市绿化树种 [ 1] 。水蜡树
与女贞子(LigustrumlucidumAit.)为同属植物 ,据报道 ,女贞
子主要含有帖类 、黄酮 、多糖等化合物 [ 2] ,具有养阴气 、平肝
火 、滋补肝肾等功效。现代医学研究表明 ,黄酮具有降低心
肌耗氧量 ,增加冠脉 、脑血管流量 ,抗心律失常 ,软化血管 ,降
血糖 ,降血脂 ,抗氧化 ,消除机体内自由基 ,抗衰老 ,增强机体
免疫力等功能 [ 3] 。现代药理研究表明 ,女贞子多糖具有抗氧
化 、抗衰老 、增强免疫等功效 [ 4] 。笔者比较了水蜡树果和女
贞子中黄酮与多糖含量的差异 ,以期为水蜡树果药用成分的
开发提供理论依据 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 原料与试剂。女贞子购于吉林市吉林大药房;水蜡
树果采自吉林农业科技学院校园 ,经阴干 、低温烘干后粉碎
备用。
芦丁标准品(中国药品生物制品检定所),葡萄糖(购于
天津化学试剂有限公司),分析纯(沈阳市新化试剂厂),乙醚
(天津市福晨化学试剂厂),石油醚(天津市福晨化学试剂
厂),无水乙醇(沈阳市新化试剂厂),正丁醇(沈阳市新化试
剂厂),氯仿(沈阳市新化试剂厂),浓硫酸(沈阳市新化试剂
厂),苯酚(沈阳市新化试剂厂),蒸馏水。
1.1.2 仪器。 UV-1600型紫外 -可见分光光度计(北京瑞
利);ESJ205-4型电子天平(沈阳龙腾电子有限公司);HH-S
型恒温水浴锅(江苏省金坛市正基仪器有限公司);101-3型
电热鼓风箱(中国上海第二五金厂);AnkeTGI-16B离心机;索
氏提取器(上海洪纪仪器设备有限公司);RE-52AA型旋转蒸
发仪(上海亚荣);SHB-IIA循环水真空泵(郑州长城科工贸有
限公司);XA-1型固体样品粉碎机(金坛市恒丰仪器厂)。
1.2 方法
1.2.1 溶液的配制。
1.2.1.1 芦丁标准溶液的配制。准确称取芦丁标准品
10.00mg,置于 25 ml容量瓶中 ,加无水乙醇溶解并稀释至刻
度 ,摇匀 ,即得浓度为 0.4 mg/ml的芦丁标准溶液。
1.2.1.2 葡萄糖标准溶液的配制。准确称取于 105 ℃条件
下干燥至恒重的葡萄糖标准品 25.00 mg,置于 250ml容量瓶
中 ,加蒸馏水溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得浓度为 0.10 mg/ml
的葡萄糖标准溶液。
1.2.1.3 苯酚溶液的配制。取苯酚 80 g,加铝片 0.1 g和
NaHCO30.05 g,蒸馏 ,收集 182℃馏分。称取 6 g,加水溶解 ,
定容于 100 ml棕色容量瓶中(现用现配)。
1.2.2 黄酮与多糖的提取。
1.2.2.1 黄酮的提取 。准确称取女贞子和水蜡树果各
20.000 g,用滤纸包好 ,置于索氏提取器中 ,加无水乙醇 80
ml,在水浴锅上加热回流 4 h,回流液过滤 ,并定容于 100 ml
容量瓶中 ,得待测液 ,放于冰箱中备用 。
1.2.2.2 多糖的提取与纯化。准确称取 “1.2.2.1”的残渣
各 15.000g,分别置于 500ml烧杯中 ,再各加蒸馏水 300 ml,
在水浴锅上加热浸提 3 h,间歇搅拌 ,滤过 ,减压浓缩至 100
ml, Sevage法除蛋白 ,滤过 ,调滤液 pH值为 8.0,然后滴加
H2 O2脱色 ,脱色后用流动水透析 48 h,透析液加无水乙醇使
含醇 80%,于冰箱中静止过夜醇沉 ,再离心分离 ,沉淀依次用
无水乙醇 、丙酮 、乙醚各洗 2次 ,真空干燥至恒重 ,即得精致
女贞子多糖和水蜡树果多糖。
1.2.3 标准曲线的绘制。
1.2.3.1 芦丁标准曲线的绘制 。取 “1.2.1.1”芦丁标准溶
液 10 ml,置于 25 ml容量瓶中 ,用无水乙醇定容至刻度 ,摇
匀 。得 0.16 mg/ml芦丁标准溶液 ,准确吸取此标准溶液 0,
1.00, 1.50, 2.50, 3.00, 3.50 ml置于 25 ml容量瓶中 ,用无水
乙醇定容至刻度 ,摇匀 ,在 360 nm波长处测吸光度。绘制标
准曲线 ,得回归方程:A=0.032C+0.0048, R=0.999(n=5)。
1.2.3.2 葡萄糖标准曲线的绘制。取 “1.2.1.2”的葡萄糖
标准溶液 0.20, 0.40, 0.60, 0.80, 1.00, 1.20, 1.40 ml依次加
水 ,使最终体积均为 2ml。另取蒸馏水 2 ml做空白试验 ,每
支试管加质量分数为 6%的苯酚溶液 1 ml,摇匀。用移液管
向每支试管中缓慢加入浓 H2 SO4 5 ml,摇匀 ,放置 15 min后
置 40 ℃水浴中加热 10 min,取出置于冷水中冷却 。在 490
责任编辑 常俊香 责任校对 况玲玲安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(33):18990-18991, 19015
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.33.110
nm处测定吸光度 ,绘制标准曲线 ,得回归方程:A=12.643C
-0.031。R=0.999(n=5)。
1.2.4 样品总黄酮和多糖含量测定 。
1.2.4.1 总黄酮的测定。按 “1.2.3.1”方法分别测定
“1.2.2.1”中女贞子和水蜡树果提取液的吸光度 ,根据回归
方程求出总黄酮的含量。
1.2.4.2 多糖的测定。 ①换算因子的测定。准确称取
“1.2.2.2”纯化的女贞子多糖和水蜡树果多糖各 5.00 mg,加
水定容于 25 ml容量瓶中。按 “1.2.3.2”方法处理后测定吸
光度 ,按下式计算换算因子:f=CS/C(CS为多糖浓度 , C为多
糖液中葡萄糖的浓度)。计算得女贞子和水蜡树果的换算因
子分别为 4.28和 4.69。②样品溶液的制备。准确称取
“1.2.2.1”的残渣各 0.500 0 g,分别置于 200 ml烧杯中 ,再各
加蒸馏水 50 ml,在水浴锅上加热浸提 3 h,间歇搅拌 ,滤过 ,
分别定容于 250ml容量瓶中 ,各取 2 ml,按 “1.2.3.2”方法处
理后测定吸光度 ,根据回归方程分别求女贞子和水蜡树果的
葡萄糖含量 ,再根据换算因子求得多糖的含量。
2 结果与分析
2.1 样品总黄酮和多糖含量测定结果 试验测得样品总黄
酮和多糖的含量见表 1。
2.2 测定波长的选择 用紫外 -可见分光光度计分别扫描
芦丁标准溶液和按 “1.2.3.2”处理的葡萄糖标准溶液得吸收
光谱图 ,根据芦丁的吸收光谱图可知 ,其在 200 ~ 400 nm内
有 2个最大吸收峰 ,考虑到短波区干扰因素较多 ,特选择长
波区的最大吸收波长 360 nm作为黄酮的检测波长;根据葡
萄糖的吸收光谱可知其最大吸收波长为 490 nm。
表 1 总黄酮和多糖含量测定结果
Table1 Themeasuredresultsofthecontentofgeneralflavoneand
polysaccharide %
样品
Sample
总黄酮
Generalflavone
多糖
Polysaccharide
女贞子 Fructusligustrilucidi 2.036 9.476
水蜡树果 Thefruitofborderprivet 1.788 8.789
2.3 稳定性试验 取 “1.2.2.1”女贞子和水蜡树果的提取
液每间隔一定时间 ,即 0、15、30、60、90、 120、180 min按
“1.2.3.1”测定吸光度值 ,结果 RSD=1.98%,说明黄酮在 3 h
内较稳定。取样品溶液 、纯化多糖溶液 、葡萄糖标准溶液各 2
ml,按 “1.2.3.2”方法每隔一定时间 ,即 0、5、25、40、50、80min测
定吸光度值 ,结果 RSD=2.18%,说明多糖在 80 min内稳定。
2.4 重现性试验  分别取女贞子和水蜡树果各 6份 ,
“1.2.2.2”和 “1.2.4.2”方法制备待测液 ,按 “1.2.3”方法测
定吸光度 ,得女贞子和水蜡树果黄酮的 RSD分别为 0.83%
和 0.23%,两者多糖的 RSD分别为 0.36%和 0.76%,说明该
方法具有较好的重现性 。
2.5 回收率试验 分别取女贞子和水蜡树果各 5份 ,每份
0.500 0g,分别精密加芦丁 5.00mg和纯化多糖 10.00mg,按
各项操作 ,测定吸光度。黄酮回收率结果见表 2,多糖回收率
结果见表 3。
表 2 黄酮回收率试验结果(n=5)
Table2 Theexperimentalresultsofflavonerecovery(n=5)
女贞子 Fructusligustrilucidi 水蜡树果Thefruitofborderprivet
取样量∥gSamplevolume
加入量∥mgAdditionamount
测得量∥mgMeasuredamount
回收率%Recovery
平均回收率∥%Averagerecovery
RSD%
取样量∥gSamplevolume
加入量∥mgAdditionamount
测得量∥mgMeasuredamount
回收率%Recovery
平均回收率∥%Averagerecovery
RSD%
0.500 5.00 15.23 100.33     0.500 5.00 13.87 99.50    
0.500 5.00 14.92 98.29 0.500 5.00 14.02 100.57
0.500 5.00 15.14 99.74 98.98 1.00 0.500 5.00 13.67 98.06 99.01 1.30
0.500 5.00 14.88 98.02 0.500 5.00 13.57 97.35
0.500 5.00 14.97 98.61 0.500 5.00 13.88 99.57
表 3 多糖回收率试验结果(n=5)
Table3 Theexperimentalresultsofpolysacchariderecovery(n=5)
女贞子 Fructusligustrilucidi 水蜡树果Thefruitofborderprivet
取样量∥gSamplevolume
加入量∥mgAdditionamount
测得量∥mgMeasuredamount
回收率%Recovery
平均回收率∥%Averagerecovery
RSD%
取样量∥gSamplevolume
加入量∥mgAdditionamount
测得量∥mgMeasuredamount
回收率%Recovery
平均回收率∥%Averagerecovery
RSD%
0.500 10.00 56.17 97.89     0.500 10.00 52.08 96.54    
0.500 10.00 56.57 98.59 0.500 10.00 53.81 99.74
0.500 10.00 57.42 100.07 98.78 0.87 0.500 10.00 53.15 98.53 98.87 1.89
0.500 10.00 56.89 99.15 0.500 10.00 54.76 101.51
0.500 10.00 56.35 98.20 0.500 10.00 52.89 98.04
  由表 2、3可知 ,黄酮的平均回收率分别为 98.98%和
99.01%, RSD分别为 1.00%和 1.30%;多糖的平均回收率分
别为 98.78%和 98.87%, RSD分别为 0.87%和 1.89%。该
结果精确可靠。
3 结论 
该试验结果表明 ,女贞子中总黄酮和多糖含量分别为
2.036%和 9.476%,水蜡树果中总黄酮和多糖含量分别为
1.788%和 8.789%。由此可见 ,女贞子和水蜡树果中总黄酮
和多糖含量相近 ,从而可推测水蜡树果也具有很高的药用
价值。
该试验方法操作简单 ,所用仪器价格低廉 ,是一种可行
性高 、检测数据可靠的方法 ,可用于测定女贞子和水蜡树果
中总黄酮和多糖含量。
(下转第 19015页)
1899138卷 33期                张 欣等 女贞子和水蜡树果实中多糖与总黄酮含量比较
  怡丰 ·新都汇居住区中心游园景观中 ,现代简约风格的
立体框景墙 ,将交替的元素设计成形式和材质强烈对比的效
果 ,看似意在框出随性浪漫的立体画卷 ,实则将框做成景观 ,
丰富园林空间 ,成就异步有景的效果(图 9)。
图 9 怡丰·新都汇居住区中心游园框景
Fig.9 ThegardenenframedsceneryofYeeFungMetropolis
ResidentialCentre
图 10是武汉街头绿地一景 ,用大红钢架结构 ,框出街头
园林气氛 。景观中 ,欣欣向荣的绿色和冰冷压抑的灰色并
存 ,置于钢筋水泥中醒目的红色交叉钢构如同一个大大的
惊叹号 ,在整幅作品中起到景观提示性作用 ,构成视觉焦
点。该设计成功地运用现代元素 ,借助框景的组景手法完
成了时代的命题:矛盾与和谐 ,意在说明保护生态环境的
内涵 。
  厦门园博大道 4号桥———皓洁桥尽头主景 “月光环 ”(图
11),以月亮 、船为设计主题元素 ,似弦月低挂 ,又如船儿轻轻
荡漾。月光皎洁的夜晚 ,重叠错落的线型框出水中倒影 ,涟
漪轻漾 ,优美惬意。低头赏框内虚景 ,回神看月环之框 ,烘托
出 “和谐统一 ”的主题 [ 4-5] 。
5 结论 
随着现代园林的不断发展 ,框景形式也层出不穷 。笔者
认为无论是古代的框出完整画面 ,深化园林意境 ,还是现代
直接用框景造景的组景手法 ,只要能以此为载体 ,结合园林
图 10 武汉街头绿地景观
Fig.10 ThestreetgreenlandscapeinWuhan
图 11 皓洁桥主景“月光环”
Fig.11 ThemainsightofHaojieBridge——— “MoonHalo”
要素 ,表达出设计思想 ,丰富园林空间 ,都不失为一种成功的
造景技法。
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(上接第 18991页)
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1901538卷 33期                韩雪等 框景于现代园林之新用