全 文 ：紫珠属药用植物体外抗氧化作用
浙江医科大学药学院 (3 10 3) 1蒋惠娣 季燕萍 张水利
摘要 本实验测定了紫珠属药用植物批把叶紫珠 、 紫珠及其果实 、 日本紫珠 、 大叶紫珠 、 华紫
珠 、 老鸦糊抑制大鼠脏器体外孵育时 自动发生脂质过氧化 (I刃 0)5 0 %的药物浓度 (I嘶 ) ,发现除老鸦糊
无抑制作用外 , 其余药物 I与差别较大 , 以紫珠果实 CI , 为最小 , 且 I嘶与黄酮含量并不完全一致 ,
进一步测定了批把叶紫珠 、 紫珠果实 、 紫珠对 · OH 引发的红细胞 IJ O 及溶血抑制的 I嘶 、 · O H 引发的脑
匀浆 I尸0 抑制的 I与 、 氏 q 与 eF OS 4 体系生成 · O H 的清除 (或抑制 )的 I断 、 发现 I嘶大小顺序均为紫珠
果实 > 紫珠 > 批把叶紫珠 。 结果表明 , 紫珠果实对体外 自动发生 1 . 0 反应抑制最强 , 批把叶紫珠则
对 · O H 引发的 L尸0 反应抑制最强 。
关键词 紫珠 脂质过氧化 经自由基
马鞭草科紫珠属植物传统用于治疗 出血 、
痈疖 , 近年有文献报道该属植物中的华紫珠有
很好的护肝作用〔`〕。 根据自由基医学理论 , 肝
脏的发病机理与 自 由基 引发 的脂质过 氧 化
( u x 〕)密切相关 , 我们 的研究表明 , 华紫珠确
实有很强的抗氧化作用图 。 为了寻求同属植物
中是否有更强的抗氧化剂 , 本文测定了该属植
物中的批把叶紫珠 ( ca l ic a耳心 从兀人记an ) 、 紫珠
( c
.
bod in ic ir )及果实
、 日本紫珠 ( C . ajP ~ a)
、
大 叶 紫 珠 ( C . ~ 哪入lart ) 、 华 紫 珠 ( C
.
ca
-
tha r o an )
、 老鸦糊 ( C . 梦ar 诚 i) 抑制 大 鼠离体组
织体外孵育时 LP 0 50 % 的浓 度 ( cI , ) 、 抑制 ·
O H引 发 的红 细胞 ( BR C ) 膜 LPO 及溶血的
orCI
、 抑制 · O H引发的小鼠脑组织体外 Lp o 的
CI , 及对 由玩 0 2与 FeS 氏 系统产生 · O H的清除
或抑制的 I与 。
材料
实验动物 sD 雄性 大 鼠 ( 2加 一 25 0 9 ) ,
NIH 雄性小 鼠 ( 2 一 25 9 ) 由本校实验动物中心
提供。
1
.
2 主要药品及试剂 紫珠属植物采用地上
部分或果实 , 大叶紫珠采 自浙江温州 , 其余均
采自浙江天 目山 , 由本校生药教研室薛祥骥老
师鉴定 , 四乙氧基丙烷为 is gma 产品
, 其余试
剂均为国产分析纯或生化试剂 。
2 方法
2
.
1 药物提取 称药物粉末 10 9 加 60 % 乙醇
中药材第 2 卷第 3 期 19 9 年 3 月
10 耐 , 回流两 次 , 每次 1 . 5 h , 合并两次滤
液 , 减压浓缩 至 0 . 5 酬血 , 以 IA C b 比色法测
定浓缩液中黄酮含量 , 冷藏备用 。
2
.
2 药物对 大鼠 离体组织 l f o 抑制的 I场测
定 参考文献方法图 , 测出药物在不同浓度时
对大鼠肝 、 心 、 肾 、脑组织 37 土 0 . 5℃孵育时 1刃0
反应产物丙二醛 ( M DA )生成的抑制率 , 求抑制
率对浓度的回归直线 ,再求抑制率为 50 % 时的
药物浓度 , 即 Ie 、 。
2
.
3 药物抑制 · O H 引发的 R B C 膜 1卫0 与溶血
的 I与 取小 鼠静脉血 , 肝素抗凝 , 以氰化高
铁血红蛋 白法测 定血红 蛋 白含 量 , 抗凝血 以
BP S ( p H 7
.
4 10 mln
0 F L 生理盐水磷酸盐缓冲
液 )制成含血红蛋 白 5 % 的 RB C 悬液 。 将体积
1
.
5 以 , 内含 BR C 悬液 0
.
1耐 , 姚仇 0 . 1 mo F L
及不 同浓度药物 (空 白对照管 以 P BS 代替药
物 )的体系 ,于 37 士 0 . 5℃振荡孵育 Z h , 以硫代
巴比妥酸 ( TB A )法测定 MDA 含量 , 以文献法 〔’ 〕
测定溶血度 , 按前法计算 I与 。
2
.
4 药物 抑制 · O H 诱导的 小 鼠 脑 1刃0 的
soIC
〔4〕 将反应总体积 2 时 , 内含 5% 小鼠脑匀
浆 1 耐 ,不 同浓度药物 , 硫酸亚铁钱及 姚仇 均
0
.
16
~
F L 的体系于 37 士 0 . 5℃振荡孵育 or
而 n , 以 TB A 法测定 MDA 含量 ,计算 IC , 。
2
、
5 药物 清除或抑制 · oH 生成 的 IC印〔4〕
线仇在 ezF 十 存在 下可 通过 eF n ot n 反应生成 ·
O H
, 可 使 邻二 氮 菲 ezF + 氧 化为 邻 二 氮 菲
1 39
.
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1999. 03. 017
e F s
+, 使其在 536 mn 处的吸收峰消失 , 因此
A S肠的变化可反映 · O H 的生成量 。 测定时 , 将
总体积 4 d , 内含邻二氮菲及 f ,e s q 各 0 . 75
~
F L
,
p H 7
.
4 p Bs 150 ~
U L
、 不同浓度药
物 、 玩仇 0 . 8 n o F L 的体系 , 于 37 士 0
.
5℃振
荡反应 l h , 测 凡 36 , 未损伤管不加 氏 q , 以
△ A 536 二 凡36( 未损 ) 一 凡36( 侧 表示 · OH 生成 的多
少 ,表观 · O H 清除率 (或生成抑制率 ) 二 ( 1 -
会会鸳) · lo % , 计算 ’s0C 。
3 结果
3
.
1 药物 对 大 鼠离体组 织 孵育时 自动发生
U 气) 的影响 从表 1结果可知 , 受试药物除老
鸦糊在测定 浓度范围内对肝脏 IJ 0 无抑制作
用而测不 出 I嘶外 , 其余药物均有抑制作用 ,
但其 I场差别较大 , 即抑制能力差别较大 、 以
紫珠果实 I与为 最小 。 紫珠 果实 、 批把叶 紫
珠 、 紫珠及老鸦糊对肝 IJ X ) 的抑制作用与 黄
酮含量多少 一致 , 但从观察的所有药物对 肝
I尹( ) 的作用看 , 抑制作用大小与黄酮含量并不
完全一致 。 从表 1 及表 2 可看出 , 批把叶紫
珠 、 紫珠及紫珠果实在不同组织中 IC , 大小顺
序一致 , 同一药物对不同组织 IJ x ) 抑制的 I与
不同 , 上述三种药物在脑组织 中的 I与均小于
其它组织 。 同一植物紫珠 , 其地上部分与果实
相 比 , 黄酮含量与抗氧化能力差别均较大 。
3
.
2 药物对 · OH 引发的 BR C 损伤的影响 表
3结果表 明 , 批把叶紫珠 、 紫珠及果实对 · O H
诱发的 R B C膜 IJ O 及溶血均有抑制作用 , I与
为紫珠果实 > 紫珠 > 批把叶紫珠 。
3
.
3 药物对心 H 引发的脑 1于0 及 凡 n ot n 反应
生成 · O H 的影响 由表 4 知 , 批把 叶紫珠 、 紫
珠 、 紫珠果实对两个过程均有抑制 , 批把叶紫
珠 I与最小 , 紫珠果实 I场为最大 。
4 讨论
4
.
1 植物中的黄酮被认为是抗氧化的主要成
分之一 , 从本实验结果看 , 所观察的紫珠属植
物中 , 紫珠果实 , 批把叶紫珠 、 紫珠及老鸦糊
抑制大 鼠肝组 织体外孵育时 自动发生 IJ飞) 反
应的能力与提取液中黄酮含量大小顺序一致 ,
14 0
.
但从所观察的所有药物看 , 其抑制能力大小与
黄酮含量不完全一致 , 推测该属植物 中发挥抗
氧化作用的除黄酮外还可能有其它成分 。 在所
观察的紫珠属植物 中 , 除老鸦糊外 , 其余药物
体外抑制脂质过氧化能力均 比具有较好护肝作
用的华紫珠强 。 因此 , 我们将进一步观察它们
的护肝作用 。
4
.
2 氏仇 在金属离子催化下可通过 eF in on 反
应 生成活性很强 的 · OH , RB C膜含有大量 的不
表 1 药物提取液黄酮含 , 、 药物对肝组织体
外孵育时 L P O抑制的 IC渤 (岁 L )
药物 黄酮含量 (岁 )L I喘 (岁 )L
紫珠果实 16 9 .0 以 6
批把叶紫珠 5 . 0 0 . 1价
日本紫珠 7 . 8 0 . 1醉
紫珠 2 . 1 0 . 198
大叶紫珠 N l, 0 . 205
华紫珠 .4 0 .0 23 9
老鸦糊 ND ND
,
8 只大鼠测定值的平均值 ; N’r : n ot tes t记 , N D : ont de -
teC
,润卜le
表 2 药物对脑 、 心 、 肾组织体外
孵育时 L P O 抑制的 I C助
药物 不同组织
I喘 (岁 )L
脑 心 肾
紫珠果实 .0 仍 6 0 . 1 5 .0 04 9
批把叶紫珠 .0 伪3 0 . 149 0 . 170
紫珠 0 . 126 0 . 2料 .0 2印
铃
8 只大 鼠组织测定值的平均值
表 3 药物抑制 . O H 引发的 R B C
l刃O 及溶血的 IC助
药物 抑制 1刃0 1与 (岁L ) 抑制溶血 I与 (岁)L
紫珠果实 .0 7 35 .3 21
批把叶紫珠 .0 08 8 .0 23
紫珠 0 . 159 .0 29
表 4 药物抑制 . O H 引发的脑 L p O及清除 (或
抑制 及毗 e n 反应生成 . O H 的 IC , (岁 L )
药物 抑制脑 I刃。 I与 清除 · oH I与
紫珠果实 21 . 9 13 . 8
批把叶紫珠 8 . 1 .4 4
紫珠 10 . 4 6 . 8
中药材第 2 卷第 3期 l q ) 9年 3月
饱和脂肪酸 , 因此 , 玩仇 可引发 R B C 膜发生
I PO 而使 BR C 溶血 , 实验结果表 明 , 批把 叶
紫珠 、 紫珠 、 紫珠果实对此过程均有抑制 , 但
抑制能力差异较大 , 体外 抑制 1于0 能力最强
的紫珠果实对此过程的抑制能力最弱 , 而批把
叶紫珠对此过程的抑制能力却最强 , 在抑制由
·
OH 引发 的体外脑组织 L PO 实验中也见到同
样结果 , 这 可能与其对 · O H 生成的抑制或清
除能力有关 , 这一推测被它们对 姚仇 与 eF OS 4
系统 · O H 的清除 (或生成的抑 制 )作 用大小所
证实 。 紫珠果实对 大 鼠组织体外 1于0 抑制较
强可能是由于其对该过程中其它自由基的生成
抑制或清除作用较强 。 上述结果提示 , 考察药
物体外抗氧化作用应从多方面着手 , 不仅应考
察它对 自动发生 1正D 反应 的抑制 , 还 应考察
它对 自由基清除或生成的抑制作用 。
参 考 文 献
王立明 , 等 . 10 种中药材对四抓化碳或半乳糖胺
损伤的原代培养大 鼠肝细胞的作用 . 浙江医科大
学学报 , 199 4 , 23 ( 3) : 1伪
蒋惠娣 , 等 . 九种护肝中药抗脂质过氧化作用的
研究 . 中药材 , 19 7 , 20 ( 1 2 ) : 62 4
冯立明 , 等 . 青心酮的抗氧化作用 . 药学学报 ,
19 87
,
2 ( 4 )
:
34 1
陈小夏 , 等 . 茶多酚清除氧自由基与抗脂质过氧
化作用 . 中药材 , l卯 8 , 2 1 ( 3 ) : 24 2
( 19 9 8
一
09
一 1 1 收稿
1 99 9 一 0 1 一 0 8 修回 )
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. 仆叹 er s t山 s s uge s t司 ht at het I n OS t s t or n g i咖ih otr ot a t l t o n l a t i c L PO卜
刚 on aws Cbf , bu t ot l f 0 e a l翻记 娜 · O H ~ C .k
K即 w or ds 倒 l ic啊aP h e r比 ; U idn ep ID ix d iat o n ; H y dor x y l触 e r a id c al
仑句e 冠妞眨芡酥以仑司e 范双宅 e 范窿绝准眨冷坟炎断灭峨汉多以多酬乡砂仑砂3 甸公忿e 佗 e 范双范您绝粗眨友洲
《中药材》 特约征稿启事
药用植物栽培 包括野生药材变家种 , 引进药材和异地药材的引种驯化 , 培育优 一良品种 , 防
治病虫害 , 改革耕作制度 、 提高产量 、 质量 , 组织培养 , 药用真菌的栽培等 。 药用动物研究 包
括饲养和管理 , 资源 、 生态 、 习性调查与观察 ; 野生变家养与引进的驯化 ; 新技术 、 新方法提高
动物的产量与质量 , 动物药的药理 、 药化与临床实验等 。 中药材加工炮制与商品养护 包括 中药
炮制工艺 、 原理 、 方法等研究及具有指导性 、 实用性的经验总结 ; 中药商品养护新技术研究及应
用等。 资源 中药资源调查 、 合理开发和应用等 。
致作者 本刊药理栏目主要刊登地道药材的 比较药理 ; 新药
材 、 新资源及药材有效成分的药理 ; 药材加工处理后药理变化等内
容 。
中药材第 2 卷第 3 期 19卯年 3 月