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薄层荧光扫描法测定中药
白芷中欧芹属素乙的含量
董 林 邓丽平 杨模坤
(四川省药品检验所 成都 )
提要本文报道了用薄层荧光扫描法测定白芷中欧芹属素 乙的含量 。 当欧芹属素 乙在 。 . 2一儿 。 协g时 ,
其含量与所致的面积积分值成 良好的线性关系 。 精密度测定 , 同板杯 = 3 . 1% , 异板乏无几二 3 . 3 %加样回
收率 1 0 2 . 9% 。 该法简便 、 迅速 、 结果可靠 。
关翅词 白芷 欧芹属素 乙 薄层荧光扫描法
白 芷 为 伞 形 科 植 物 白 芷 A n g e l沁 a
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. 或 杭 白芷 A . d a h u r i e a ( F i s e h .
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)
s h a 。 。 t y u a 。 的干燥
根 , 具散风除湿 , 通窍止痛 , 消肿排脓的功能 ,
为一常用中药 , 全国各地均有栽培 。 白芷 中含
有多种吠喃香豆素 〔`一 2〕 , 其中欧 芹 属 素乙具
有抗菌 、 抗炎 、 解痉 、 平喘等作用 〔幻 , 近年来又
证明其为治疗银屑病 的有效成分之一 〔 4〕。 为了
评价和控制白芷的内在质量 , 保证临床用药安
全 、 有效 , 并为制订药品标准提供依据 , 本文
研究了用薄层荧光扫描法测定白芷中欧芹属素
乙的含量 。
元素分析值与计算值误差在 。 . 3%内 , 经 U v 、
IR
、
M S等鉴定均与欧芹属素乙一致卿 。 薄层
多种溶剂系统展开均显一个黄绿色荧光斑点 ,
经薄层色谱全程扫描只呈一个峰 。 见图 1 。
图 1 .欧芹属素 乙标准品的薄层色谱全程扫描图
F i g 1
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S t a n d a r d
实 验 部 分
一 、 仪器 、 样品及试剂
1
. 仪器 日本岛津 C S一 93 0薄层扫描 仪 美
国 D r a m m o n d S e i e n t i f i e C o . 定量毛细管 ;
P B QI 型薄层 自动铺板器 ; 双槽式层析缸 。
2
. 供试品 川白芷药材由南川药物种植研
究所 、 四川省中药学校 、 遂宁市药品检验所提
供 ; 川白芷饮片由成都市中药材公司提供 , 杭
白芷由浙江省药品检验所及成都市中药材公司
提供 。
3
. 欧芹属素 乙标准品 m p 10 1~ 1 0 2℃ ,
4
. 试剂 乙醚 、 乙酸乙酚 , 石油醚 (6 O~
90
“
) 均为分析纯 ; 硅胶 G 为薄层 色谱用 , 10
一 40 “ , 青岛海洋化工厂出品 。
二 、 操作条件的选择
1
. 白芷中欧芹属素乙的薄层分离 ( 1 )
薄层板制备 取硅胶G s g加 0 . 5% C M C一N a 溶
液 15 m l混匀 , 铺制成 20 x 2 c0 m 层析板 , 室温
晾干 , n o℃活化 30 分钟 , 备 用 ; ( 2 ) 取白
芷 乙醚提取液 , 挥干 , 残渣用乙酸 乙醋溶解 ,
供点样用 , 取 白芷 乙酸 乙醋液及欧芹属素 乙标
准品乙酸 乙醋液适量点于同一薄层板上 , 分别
以苯一石油醚一乙酸艺醋 ( 6 : 3 : 1 ) , 苯-
乙酸 乙酷一醋酸 ( 9 : 0 . 5 : 1 ) 、 石油醚一乙
DOI : 10. 13375 /j . cnki . wcjps . 1990. 01. 010
1期 2 5
醚 ( l : l ) 等溶剂系统 , 室温上行展开后 , 以
紫外线检测器观察荧光 , 并用薄层扫描仪进行
荧光扫描 。 结果表明 , 以 石 油醚一乙醚 l( :
1 ) 上行展开的分离效果最佳 。 见图 2 及图 o3
呀属耗
图 2 . 白芷的薄层色谱扫描图
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en ce cS a n 加 9 of A n脚纽 D ha u r ic a
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方式为荧光法 , 激发 波 长 : 入E x 二 3 1 3n m , 发
射滤光片 3 # ; 纵座标 : x 4 , 灵敏度 : 中 。 定
量测定 : 外标法程序 自动计算 。
三 、 欧芹属素乙在菊层板上的稳定性试软
1
. 避光条件下的稳定性测定 吸取欧芹属
素 乙标准品溶液 (0 . 2 09 协g /川 ) 2川 , 点于薄
层板上 , 以石油醚一 乙醚 ( 1 : 1) 避光展开 ,
暗处放置 , 于不同时间内测定其面积积分值 , 结
果表明 , 斑点的荧光强度在 2 小时内基本稳定 。
2
. 自然光条件下的稳定性测定 若将展开
后的薄层板暴露于自然光下 , 于不同时间内进
行测定 , 结果表明 , 斑点的荧光强度在 15 分钟
内即有较大程度的减弱
四 、 线性范围的确定
精密称取欧芹属素乙干燥品 2 . o g m g 于 10
m l容量瓶中 , 加乙酸乙酷溶解并稀释至刻度 ,
即得 0 . 20 9卜g /川的标准品溶液 。 用定量毛细管
取上液 1 一 6 川 , 分别点于同一薄层板上 , 按
前法避光展开 、 荧光扫描测定 , 以欧芹属素 乙
的含量为横座标 、 峰面积积分值为纵座标 , 绘
制含量一积分值曲线 , 求 得 其 回 归 方 程为 :
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曰
OQ
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C呵
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一
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图 3 . 白芷的 T L C图谱
1
. 欧芹属素 乙标准品 2 , 3 . 杭白芷 4 . 遂宁
白芷 5 . J I!白芷 (饮片 ) 6 , 7 . Jl l白芷
F i g 3
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2
. 白芷中欧芹属素 乙的提取试验 取白芷
粉末 (过 20 目筛 ) 约 g2 , 精密称定 。 置索氏提
取器中 , 用 乙醚适量 回流提取 1一 8 小时 , 蒸
去溶剂后 , 精密加入 5 m l乙酸 乙醋 , 待残留物
溶解后 , 取上清液点样 , 同时用标准品对照 ,
展开后扫描测定 , 结果表明 , 提取时间为 6 小
时即可将白芷中欧芹属素 乙提尽 。 本实验曾用
乙酸乙酷为溶剂回流提取 , 但提取液澄清度不
够好 , 且层析展开后的斑点较多 , 不利于欧芹
属素 乙的定量测定 , 故仍选用 乙醚作提取溶剂。
3
. 欧芹属素乙的薄层荧光扫描参数 测定
y 二 叉1 4 1 . 15 + 9 3 1 . 1 7 x
r 二 0。 98 15
ǎ,。15斌众葵环阿世
。 1 2 3 4 5 6 7 点湘加一)
图 4 . 欧芹属素乙的标准曲线
F i g 4
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y = 1 1 4 1
.
1 5 + 9 3 1
.
1 7 x , 相关系数 r 二 0 . 9 8 1 5。
见图 4 。
五 、 精密度浏定
分别在 5 块不同板及同一板上点同数量点
标准品溶液 , 避光展开后测定斑点 面 积 积 分
华 西 药 学 杂 志 5卷
值 , 计算丙 % , 同抓 v = 3 . 1% ,异板石 = 3 . 3%。
六 、 供试品测定
精密称取白芷粉末 (过 20 目筛 ) 约 2 9 , 置
索氏提取器中 ,用 乙醚适量回流提取 6小时 , 回
收 乙醚 , 残渣加乙酸 乙醋溶解并定 容至 5 m l ,
供点样用 。
用定量毛细管分别吸取样品溶液 1川 及标
准品溶液 2川 , 间隔点于同一块薄层板 上 , 以
石油醚一 乙醚 ( 1 : 1 ) 避光展开 , 荧光法扫
描测定 , 并计算含量 , 结果见表 1 。
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讨 论
七 、 加样回收试验
刁“ 同一薄层板上分别点上样品溶液 , 欧芹
属素 乙标准品液及样品液加标准品液 , 按 “ 样
品测定法 ” 展开测定 , 计算其平均加样回收率
为 1 0 2 . 9% ,见表 2 。
1
. 为避免边缘效应影响测定结果准确性 ,
层析展开前薄层板应预饱和 10 分钟 。
2
. 欧芹属素 乙为光敏物质 , 故整个操作应
尽可能避光 。
3
. 不同来源的白芷在薄层板上的色谱斑点
略有差异 , 但均以欧芹属素乙的斑点最大 , 荧
光最强 。
4
. 中医用药的传统观 念 认 为 白芷以条粗
壮 、 体重 、 粉性足 、 香气浓郁者为佳 。 但在实
验中我们发现久负盛名的遂宁白芷其薄层色谱
图上各荧光斑点均很弱 , 表明其香豆素含量较
低 , 测定结果也证实了这一点 。 究竟应以什么
指标来评价白芷的质量 , 还有待于进一步商榷 。
参 考 文 献
1
. 秦清之 , 他 。 药学杂志 (日 ) 19 63 , 55 : 6 0 6 0
2
.斋木保久 。 药学杂志 ( 日 ) 1 9 7 1 ; 9 1 : 13 1 3。
3
. 国家医药局中草药倩报站编 。 植物药有 效 成分 手册 。
北京 : 人民卫生 出版社 19 86 , 6 03 。
4
.周继铭 , 等 。 中成药研究 1 98 0 , ( 4 ) , 3 3 。
5
.周继铭 , 等 。 中草药 19 8 7 , 18 ( 6 ) : 2。
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轰噜梦烧 `” ” 。 , 5 ` , ’ ` 2卜 2。
抗孕酮新药R U 4 86 合成研究
亚 3 , 3一乙撑二氧 一 11日一 〔4 、 ( N , N 一二甲胺基 )
一苯基〕一△ ” “ 0) 一雌烯一 s a 一轻基 一 17 一酮的制备
曾庆葫 王宇辉
(四川省计划生育科学研究所 成都 )
提要 环氧化合物 〔亚〕 在氯化亚铜存在下的无水四氢映喃溶液中 , 用对一二甲胺基澳化苯基镁处
理得到化合物 〔皿〕 。 它是合成 R U 4 86 〔 I 〕 的重要中间体 。 1 日一芳胺基的引入 , 是导致 R U 4 86 分子
和黄体酮受体之间产生相对亲和力的主要基 团之一 。 因此 , 它具有 良好的抗孕酮的作用。 化合物 〔皿〕
的结构经红外光谱 、 核磁共振光谱和 比旋度得到确定 。
美越词 R U 48 6 相对亲和力 对一二 甲胺基澳化苯基镁 环氧化合物
我们 已经报道了 R U 4 86 的合成 〔 1 〕 。 它是
一种新型的 、 具有 良好的抗早孕作用的街体激
素 。 分子结构中引入 1 1日一芳胺基是导致该化取
物产生这种生物活性的主要因素之一 。 在立体
化学上 , n 日一芳胺基与 C , 3 一甲基之间产 生 1 ,
3 一二竖键效应 , 使分子 〔工〕 核弯 曲 , 导致
与生物体内的黄体酮受体更好地结合 , 从而增
强了它的生物活性〔 2 〕。
1 9一降街体化合物的 1 1日一取代基的引入 , 除
了使用 C o r e y 改 良的 W i t t i g 反应 和 p e t e r s -
。 n 烯化反应得相应的 C : : 一次甲基化合物 , 再
经 A da m s 催化剂选择性氢化得相应的 1 1日一甲
基化合物的经典方法外 , 近年来主要 采 用 a5 ,
10 a 一环氧一△ 9 ( ` ’ )一街体 〔五〕 与有机铜 锉试
剂或卤化亚铜催化的格氏试剂反应制得 。
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[ 1 ] R U
一`日` 之 = 给剐 X ,丫 盆 议 :
竣X 二 跳 从 . 丫 二好 戏
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T e ut s h 等人成功地合成了各类 1 1日不
同取代基的留体激素 。 经筛选 , 化合物 〔 I 〕
具有强效的抗早孕活性〔 . 3 〕。沁 ` 、 -
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