全 文 ：第 21卷　第 3期
2000年 9月
内 蒙 古 农 业 大 学 学 报
Journal o f Inner Mongo lia Ag ricultural Univ er sity
Vo l. 21　 No. 3
Sep. 2000
文章编号: 1009- 3575( 2000) 03- 0112- 03
岩黄芪属五种植物种子的凝胶电泳鉴别
杨九艳 1 ,　王俊杰 2 ,　青梅 1 ,　王亚辉 3 ,　张春花 3
( 1.　内蒙古医学院药学系 ,呼和浩特　 010059; 2.　内蒙古农业大学生态与环境科学院 ;
3.　内蒙古赤峰丹龙药业中药制药有限责任公司 )
摘要:　对蒙古岩黄芪、山竹岩黄芪、塔落岩黄芪、短翼岩黄芪及山岩黄芪进行了蛋白电泳分析 ,结果表明 5种植
物的电泳谱带有明显差异 ,用该法能够进行鉴别 ,且方法简便、结果可靠。
关键词: 　岩黄芪属 ;　凝胶电泳 ;　药用植物
中图分类号: 　 S821. 2　　文献标识码:　 A
IDENTIFICATION OF FIVE SPECIES OF
HEDYSARUM BY GEL ELECTROPHORESIS
YONG Jiu- yan
1 ,　 WANG Jun- jie2 ,　 QINGMei1 ,　WANG Ya- hui, 3　 ZHANG Chun- hua3
( 1　 Dept. o f pha rmacy , Inner mongo lia medica l Colleg e, Hohh ot 010059; 2　 Inner Mongo lia Ag ricultur al Univ er sity )
Abstract: 　 The elect rophoreto grams of Hed ysarum mongolicum H. f ruticosum , H. lave, H .brachpterum
and H. alpinum were analyzed. The resul ts show ed tha t the pro tein elect ropho reto g rams of the fiv e
species w ere qui te dif ferent. Each o f them has i ts ow n characteristic band. This provides a method fo r the
identi fica tion. The method is simple and convenient. The result is reliable and good.
Key words:　 Hedysarum ; gel elect ropho resis; medicinal herbs
凝胶电泳技术在中药材鉴别中已得到了较广泛的应用 ,但在植物分类学方面的研究报道甚少。传统的植
物分类是以植物的外部形态特征为主要鉴别依据的 ,它受生长环境、产地、人为因素影响较大 ,蛋白质是生命
活动的体现者 ,是基因控制的生物大分子 ,它在植物种属间就不会是同质的 ,蛋白质序列是种的特征 ,因此利
用蛋白质种类的不同来鉴别那些亲缘关系相近、形态相似的植物种是有理论依据的 ,在实验方法上也是有效
可行的 [1 ] ,本文对岩黄芪属 5种植物的种子进行了蛋白电泳研究 ,试图为植物分类提供生化指标和新的分析
手段。岩黄芪属的许多种类是优良的饲用植物。如:山竹岩黄芪、塔落岩黄芪、山岩黄芪等 [2 ]。但由于它们的
种子与同属其它植物种子形态相似 ,在栽培利用中易混淆 ,给生产带来损失。 本文采用凝胶电泳技术将它们
进行鉴别 ,为生产利用提供 1个方法简便、结果可靠的检测手段。
1　材料与方法
1. 1　材料
收稿日期: 　2000- 06- 14作者简介: 　杨九艳 ( 1964— ) ,女 ,硕士 ,副教授 ,从事药用植的研究 .
( 1)蒙古岩黄芪　 Hedysarum mongol icum Turcz。
( 2)山竹岩黄芪　 H. f ruticosum Pa ll
( 3)塔落岩黄芪　 H. Laeve Maxim
( 4)短翼岩黄芪　 H.brach ypterum Bunge
( 5)山岩黄芪　 H. alpinum L
以上植物种子由内蒙古牧草种子检验站提供 ,均经鉴定。
1. 2　方法
1. 2. 1　实验试剂及凝胶的制备参照文献 [3, 4]方法进行。
1. 2. 2　样品制备　分别称取实验材料 0. 5g ,去皮 ,分别加入稀释 4倍的浓缩胶缓冲液 4m l,在研钵中研磨匀
浆 ,转移到离心管中 , 3500r /min离心 15min,取上清液置冰箱中备用。
1. 2. 3　电泳　取样品上清液 ,用微量进样器点样 20μl,在上槽的电极缓冲液中加入 2滴溴酚蓝指示剂示踪。
电泳开始时电流控制在 10m A,待样品进入分离胶后电流加大到 20mA,整个电泳过程维持电流强度不变 ,
待示踪指示剂距前沿约 1cm时停止电泳 ,取出胶板 ,用 0. 1%的考马斯亮蓝 R250染色 ,在 37℃染色 1h,再用
含 20%甲醇和 7%醋酸的脱色液脱色 ,反复更换脱色液 ,直至背景清晰为止。
2　结果与分析
根据胶板的前沿位置及各级谱带的位置 ,计算各谱带的电流迁移率 ( Rf ) ,并由此绘制电泳图谱。按电迁
率 ( Rf ) 0. 33、 0. 67、 1把图谱分为 A、 B、 C3个区 ,电泳谱带根据染色深浅可分为 3级:染色深而明显的为 1级
带 ,染色较深的为 2级带 ,染色浅但可以分辨的为 3级带 [4 ]。
113第 3期　　　　　　　　　　　　　杨九艳等: 　岩黄芪属五种植物种子的凝胶电泳鉴别
附表　岩黄芪属 5种植物种子电泳分析
植物名称 电泳谱带数目、分布 　各级谱带数量　 一二级谱带泳动率总数 A区 B区 C区 一级 二级 三级 Rf值
蒙古岩黄芪 3 2 0 1 3 0 0 0. 05 0. 15 0. 79
山竹岩黄芪 4 2 0 2 3 0 1 0. 05 0. 13 0. 77
塔落岩黄芪 9 4 2 3 3 2 4 0. 04 0. 11 0. 69 0. 75
短翼岩黄芪 9 4 2 3 3 2 4 0. 06 0. 13 0. 20 0. 70
山岩黄芪　 8 3 3 2 2 2 4 0. 06 0. 21 0. 26 0. 76
由图可知 ,蒙古岩黄芪有 3条一级带 ;山竹黄芪有 3条一级带 , 1条三级带 ;塔落岩黄芪有 3条一级带 , 1
条二级带 ;短翼岩黄芪有 3条一级带 , 2条二级带 , 4条三级带 ;山岩黄芪有 2条一级带 , 2条二级带 , 4条 3级
带。从表中可以看出这 5种植物的谱带条数、级别分布及 Rf均有明显差异 ,可以作为它们的鉴别依据 ,以上
实验重复多次 ,重现性好 ,结果可靠。
参　考　文　献:
[ 1]　周荣汉 .药用植物化学分类学〔M〕.上海:上海科学技术出版社 , 1985, 178- 182.
[ 2]　马毓泉 .内蒙古植物志卷三〔M〕.呼和浩特:内蒙古人民出版社 , 1989, 331- 346.
[ 3]　袁晓华 .植物生理生化实验〔M〕.北京:高等教育出版社 , 1983, 223- 243.
[ 4]　石俊英 .山东鬼针草属种子的电泳分析〔 J〕.中国中药杂志 , 1992, 17( 12): 717- 719.
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