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中国和苏丹产马兜铃属植物中马兜铃酸A含量比较



全 文 :中 国 药 科 大 学 学 报
Journal of China Pharmaceutical University 1999 ,30(4):288 ~ 290
中国和苏丹产马兜铃属植物中马兜铃酸A 含量比较
Omer A .Mohamed 王峥涛 余国奠 Hassan E.Khalid1  Bouran I.Abu-Elrish2
(中国药科大学生药学研究室 , 南京 210038;1Department of Phytochemistry and Taxonomy ,Medicinal and Aromatic Plants Rasearch
Institute , P.O.Box 2424 , Khartoum-Sudan;2Department of Botany , Faculty of Science , University of Khartoum , P.O.Box 321 , Khartoum-
Sudan)
摘 要 用HPLC分析技术 , 比较测定了苏丹和中国 Aristolochia 属共 5种植物中马兜铃酸 A 的含量。实验
结果表明苏丹的 Aristolochia bracteata Retz.根的含量略高于四种中国产 Aristolochia 属植物根和根茎中的含量。本
方法回收率和 RSD分别为 100.8%, 6.3579%。
关键词 马兜铃属;马兜铃酸 A;HPLC
  马兜铃属(Aristolochia)植物全世界约有 200
种 ,中国约有 40种[ 1] ,苏丹有 1种[ 2] 。本属植物在
国内外都广泛药用 ,在中国药用范围较广 ,马兜铃
(Aristolochia debilis)的根称青木香 ,茎叶称天仙藤 ,
果实称马兜铃 。青木香用于眩晕头痛 ,胸腹胀痛 ,
痈肿疔疮 ,蛇虫咬伤;天仙藤用于脘腹刺痛 ,关节痹
痛 ,妊娠水肿;马兜铃主要用于肺热喘咳 ,痰中带
血 , 肠 热痔 血 , 痔 疮 肿 痛[ 3] 。 在 苏丹 西 部 ,
Aristolochia bracteata Retz.根的水提物用于治疗胃
痛 ,蝎子蜇伤与毒蛇咬伤[ 2] ,而在苏丹中部 ,该植物
全株的提取液用于癌症的治疗[ 4] 。本属有 37种植
物进行过化学成分研究 ,得到并鉴定的有 140个化
合物 ,分别属于马兜铃酸类及其衍生物 、生物碱类 、
萜类及甾体化合物 、黄酮类 、苯丙素酚类和其它类
化合物[ 1] 。已知有 14种马兜铃酸类及其衍生物 ,
其中有两种以甲醚 、甲酯化衍生物的形式存在 。马
兜铃酸只存在于马兜铃属 ,此外还存在于那些依靠
这种植物的蝴蝶体内[ 5] 。马兜铃酸 A 具有抗癌 、
抗感染 、抗早孕及增强吞噬细胞的活性等方面的药
理作用 ,其对肝 、肾的毒性剂量为有效剂量的 1000
倍[ 1 ,6 , 7] 。张永萍等曾用反相 HPLC 法对青木香药
材进行了定性分析并测定了药材中马兜铃酸 A的
含量[ 8] 。经过查阅文献 ,有关于 A.bracteata 的根
中马兜铃酸A含量至今尚未报道 。
1 仪器和材料
Shimadzu LC-10AD液相色谱仪。Shimadzu SPD-
10A UV-VIS 检 测 器 。 层 析 柱:LichroCART★R
(250 mm×4 mm),流动相:甲醇-水-冰醋酸(72∶28∶
1);检测波长:310 nm ,AUFS:0.1 。
实验所用药材均经鉴定为下列植物的根或根
茎:Aristolochia bracteata Retz., 1997 年 9 月采集自
苏丹 ,马兜铃 Aristolochia debilis(产地:南京 ,1998年
11月 ,自采);北马兜铃 Aristolochia contorta(产地:
甘肃天水 , 1990 年 9 月 , 标本);异叶马兜铃
Aristolochia heterophylla (产地:陕西南郑 , 1990年 9
月 ,标本);绵毛马兜铃 Aristolochia mollissima(产地:
南京 ,1998年 11 月 ,自采),凭证标本保存在中国
药科大学标本馆。马兜铃酸 A对照品由中国药科
大学楼凤昌教授提供。
2 方法和结果
2.1 标准曲线的绘制
精密称取马兜铃酸A 标准品 ,加甲醇溶解 ,配
成 1 ~ 5号对照品溶液 ,它们的浓度分别为(μg μl),
0.0028 ,0.0772 , 0.1516 ,0.2260 , 0.3004。回归方程
为:A=122591×107C-9240.25 , r=0.9998。
2.2 精密度的测定
288
收稿日期 1998-04-27
  取同一浓度的标准品溶液 ,进样量相等 ,共进
12次样 , 对测得的面积数据进行处理 , RSD=
4.25%(n =12)。
2.3 样品的处理[ 8]
精密称取药材粉末适量 ,加 5%氨水 20 ml ,冷
浸过夜 ,取滤液 10 ml ,加 6 mol L 盐酸 2 ~ 3 ml ,至
不再产生沉淀 ,加乙醚萃取(10 ml×1 ,5 ml×3)4
次 ,合并醚层 ,用含有 6 mol L 0.1 ml盐酸的水溶液
25 ml洗至中性 ,过滤醚层 ,蒸干乙醚 ,残渣加甲醇
溶解并定溶至 5 ml ,用微孔滤膜抽滤后 ,供 HPLC
分析用。
2.4 回收率测定
精密称定苏丹产 Aristolochia bracteata 的根的
粉末适量 ,共 9份 ,在 1 ~ 5份中加入马兜铃酸 A
0.1554 mg 。9份样品的处理方法参见“样品的处
理”项下 ,结果平均回收率为 100.9%(n=5), RSD
=6.36%。
2.5 定性及定量分析
取不同产地 ,不同种的上述药材 ,经处理后(参
见药材处理项下),进行液相色谱分析 ,定性结果见
图1;定量结果见表 1。
Fig 1.Chromatograms of aristolochic acid A and extracts of plants
Aristolchia from Sudan and China
A-Standard;B-Aristolochia bracteata;C-A.contorta;D-A.mollissima;
E-A.debilis;F-A.heterophylla; S-aristolochic acid A
Tab 1.Contents of aristolochic acidA in Sudanese and Chinese Aristolochia
drugs
Species Habitat Contents(%) RSD(%)
A.bracteata Khartoum , Sudan 0.1727 4.8
A.contorta Tianshui ,Gansu 0.1708 0.67
A.debi lis Nanjing , Jiangsu 0.1386 4.5
A.heterophylla Nanzheng , Shanxi 0.1637 3.6
A.mollissima Nanjing , Jiangsu 0.0465 4.6
3 讨 论
常用的马兜铃酸A的含量分析方法有 TLC ,极
谱法 , HPLC 。本文用 HPLC 法测定了 Aristolochia
bracteata Retz.和 4种中国同属植物的马兜铃酸 A
的含量。回收率实验表明该实验样品处理方法可
行的 。
实验结果表明本方法是可用于马兜铃酸A 的
定性和定量分析 ,药材不同种间含量有所区别。其
中苏丹 Aristolochia bracteata Retz.的马兜铃酸 A 的
含量略高于其它中国的 4种植物。
参 考 文 献
1 丁林生 ,楼凤昌.马兜铃属(Aristolochia)植物的化学成分.中草
药 , 1983 ,14(9):40
2 Gamal EBE , Ekhlas AB , Ahmed KB , et al.Medicinal Plants of the
Sudan.Part 2 , Medicinal Plants of the Eastern Nuba Mountains.
Khartoum University Press , 1987.32
3 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典.一
部.广州:广东科技出版社 , 北京:化学工业出版社 , 1995.40 ,
42, 164
4 Gamal EBE , Eltohami MS , El-Egami AAB.Medicinal Plants of the
Sudan.Part 3, Medicinal Plants of the White Ni le Province.Khartoum
University Press , 1994.16
5 David BM , Helene Guinaudeau , Maurice Shamma.The Aristolochic
acids and aristolactams, Journal of Natural Product , 1982 , 45(6):657
6 朱大元 ,黄宝山 ,陈仲良.马兜铃属植物的化学 、药理和临床.国
外医学药学分册 , 1979,(2):83
7 王文华 ,郑锦海.中药寻骨风及其成分马兜铃酸 A 终止妊娠作
用和毒性的研究.药学学报 , 1984 , 19(6):405
8 张永萍 ,徐国钧 ,金蓉鸾 ,等.反相HPLC法测定青木香药材中马
兜铃酸 A的含量.中国药科大学学报 ,1993 , 23(1):56
2894 期 Omer A.Mohamed 等:中国和苏丹产马兜铃属植物中马兜铃酸A 含量比较  
Determination of Aristolochic Acid A in the Roots and
Rhizomes of Aristolochia from Sudan and China by HPLC
Omer A.Mohamed , Wang Zhengtao , Yu Guodian , Hassan E.Khalid1 ,
Bouran I.Abu-Elrish2
Department of Pharmacognosy , China Pharmaceutical University ;1Department of Phytochemistry and Taxonomy ,
Medicinal and Aromatic Plants Research Institute , P.O.Box 2424 , Khartoum-Sudan;2Department of Botany ,
Faculty of Science , University of Khartoum , P .O Box 321 , Khartoum-Sudan
Abstract Aristolochic acid was extracted from roots of Aristolochia bracteata Retz.collected from the Sudan and roots
and rhizomes of Aristolochia contorta , Aristolochia debilis , Aristolochia heterophylla and Aristolochia mollissima
collected from different places in China and was determined by HPLC on LichroCART
★R(250mm×4 mm)column with
methanol-acetic acid-water (72∶28∶1)as mobile phase (1 ml min), and with a measuring wave length of 310 nm.
The method was very useful for detection and determination of aristolochic acid A and the different species could be
distinguished from each other based on the typical peaks.The content of aristolochic acid in A.bracteata is slightly
higher.The average recovery of aristolochic acid A and variation coeffecient were 100.8%, and 6.35%respectively.
Key words Aristolochia ;Aristolochic acid A;HPLC
290     中 国 药 科 大 学 学 报     30卷