免费文献传递   相关文献

高效液相色谱法测定红金耳环中马兜铃酸A的含量



全 文 :现代医药卫生 2009 年第 25卷第 15期
30.4±1.2
31.2±1.5
>0.05
表2 两组患者DBIL、ALB、TBA治疗前后比较(x±s)
组 别
治疗组
对照组
P值
例数
33
43
DBIL(μmol/L)
治疗前 治疗后
342.7±102.5
322.7±114.6
>0.05
176.3±96.2
302.8±122.4
<0.01
ALB(g/L)
治疗前 治疗后
32.4±2.3
31.1±1.6
<0.01
TBA(μmol/L)
治疗前 治疗后
347.2±203.7
357.3±210.6
>0.05
183.4±80.2
292.3±187.9
<0.01
表3 两组患者PT、PTA比较(x±s)
组 别
治疗组
对照组
P值
例数
33
43
PT(s)
治疗前 治疗后
23.7±7.8
23.1±6.5
>0.05
18.3±10.2
20.7±7.3
<0.01
PTA(%)
治疗前 治疗后
20.8±10.3
21.4±10.9
>0.05
36.8±8.4
22.6±9.3
<0.01
表1 两 组 患 者 肝 功 能 指 标 比 较 (x±s)
组 别
治疗组
对照组
P值
例数
33
43
ALT(U/L)
治疗前 治疗后
113.8±65.8
125.6±60.1
>0.05
60.3±26.7
116.2±63.4
<0.01
AST(U/L)
治疗前 治疗后
67.3±54.6
135.3±86.7
<0.01
TBIL(μmol/L)
治疗前 治疗后
476.3±157.2
462.9±170.5
>0.05
241.2±76.6
364.6±147.2
<0.01
148.7±120.3
151.3±124.7
>0.05
红金耳环Asarum petelotii O.C. Schmidt为马兜铃科细辛属
植物,常作地方习用药广东山慈菇使用,以全草入药,具有袪风
散湿、活络止痛、散寒止咳之功效,临床上用于治疗风寒感冒、
风湿关节疼痛、咳喘、跌打损伤等 [1]。马兜铃科药材中所含的马
兜铃酸成分因其具有肾毒性而引起医药工作者的高度关注。本
实验利用高效液相色谱法(HPLC)对红金耳环中马兜铃酸A的
含量进行测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器:Waters 515型高效液相色谱仪,Waters 2487型紫外
检测器,N 3000色谱工作站,UP WATER P633型超纯化水机,
XS 125A型电子天平,SG 8200HE型超声波清洗仪。
1.2 试药: 马兜铃酸A (广东省药品检验所, 批号:110746-
高效液相色谱法测定红金耳环中马兜铃酸A的含量
钟燕珠1,柴婷婷2,李知源2,邓超明2
(1.广东省中医院药学部,广东 广州 510120;2.广州中医药大学中药学院,广东 广州 510405)
【摘要】目的:对红金耳环中马兜铃酸A进行定量分析。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定马兜铃酸A的含量,色谱柱:Kro-
masi C18(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(65∶34∶1),流速1.0 ml·min-1,检测波长310 nm,柱温25 ℃。结果:马兜铃
酸A在0.16~0.80 μg范围内呈良好的线性关系,r为0.9995,平均加样回收率为98.97%,RSD为2.10%。红金耳环中马兜铃酸A的含量为
0.0012%。结论:该方法简便,重现性好,可用于测定红金耳环中马兜铃酸A的含量。
【关键词】红金耳环;马兜铃酸A;高效液相色谱法
文章编号:1009-5519(2009)15-2245-02 中图分类号:R28 文献标识码:A
Content determination of aristolochic acid A in Asarum petelotii O.C. Schmidt by HPLC
ZHONG Yan-zhu1,CAI Ting-ting2,LI Zhi-yuan2,et al.
(1.Department of Pharmacy,Guangdong Provincial Hospital of Chinese Medicine,Guangzhou 510120,China;2.School of Chinese Herbal
Medicine,Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405,China)
【Abstract】Objective:To analyse aristolochic acid A in Asarum petelotii O.C. Schmidt in order to guide use in clinic. Methods:The
content of aristolochinc acid A in Asarum petelotii O.C. Schmidt was determined by HPLC on Kromasi C18(250 mm×4.6 mm,5 μm) with
the mobile phase consisted of methanol-water-glacial acetic acid (65∶34∶1). The flow rate was 1.0 ml·min-1.The detection wavelength was
310 nm. Column temperature was set at 25 ℃.Results:The method of HPLC had a good linearity relationship in the range of 0.16~0.80
μg (r=0.999 5).The average recovery was 98.97%(RSD=2.10%). Conclusion:HPLC used in content determination of aristolochinc acid
A is precise and reproducible,which can be used for precisely analysing the quantity of aristolochic acid A in Asarum petelotii O.C.
Schmidt.
【Key words】Asarum petelotii O.C. Schmidt;Aristolochic acid A;HPLC
3 讨论
我院开展的人工肝支持系统治疗乙型重型肝炎均顺利完
成,取得了较好的疗效,治疗组患者通过血浆置换有效地改善
了乙型重肝患者的症状,93.9%的患者治疗后腹胀减轻,食欲明
显增加 ,乏力改善 ,与文献报道一致 [1]。从肝功能比较 ,血清
ALT、AST、TBIL、DBIL、ALB、TBA等指标较对照组指标差异有
显著性,P均<0.01[2],黄疸也明显下降。血清凝血酶原时间明显
缩短(P<0.01),凝血酶原活动度明显上升(P<0.01),同时治疗组
的存活率同对照组相比较差异有显著性,可以提高乙型重型肝
炎患者的存活率。
由于乙型重型肝炎患者病情危重,发展快,并发症多,对患
者生命构成极大威胁,而人工肝就是通过选用不同的耗材可以
特异性与非特异性地清除体内各种毒素,有效地解除肝细胞坏
死,肝功能衰竭所致的高胆红素血症、内毒素血症、有毒物质的
积蓄、氨基酸代谢障碍、白蛋白和凝血因子减少,病毒血症等,
从而大大降低了病死率。
参考文献:
[1] 江元森,陈幼明,姚集鲁,等.人工肝支持系统治疗重型肝炎疗效评
价[J].中华内科杂志,2000,39(1):111.
[2] 龚钰清,任泽久,陈 悦,等.人工肝支持系统治疗慢性乙型重型肝
炎的疗效观察[J].实用医学杂志,2005,21(4):383.
收稿日期:2009-04-10
作者简介:钟燕珠(1976-),女,广东从化人,硕士,主管中药师。主
要从事中药调配工作及中药材真伪鉴别研究。
2245
现代医药卫生 2009 年第 25卷第 15期
利胆片中药材的鉴别及大黄的含量测定
余晓琴1,王 颖1,张丽平2,董 林1
(1.四川省食品药品检验所,四川 成都 610036;2.成都纺织高等专科学校,四川 成都 611731)
【摘要】目的:提高利胆片的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法鉴别金银花、黄芩、知母及白芍,用高效液相色谱(HPLC)法
测定方中大黄的含量。结果:TLC鉴别斑点明显。含量测定大黄素0.01064~0.3192 μg、大黄酚0.02586~0.7758 μg,进样量与峰面积线
性关系良好。平均加样回收率大黄素为99.80%,RSD=0.78%(n=6);大黄酚为99.72%,RSD=1.18%(n=6)。结论:建立的TLC鉴别和
HPLC 含量测定方法专属性强、重复性好,可用于利胆片的质量控制。
【关键词】利胆片;薄层色谱法;高效液相色谱法;含量测定
文章编号:1009-5519(2009)15-2246-03 中图分类号:R28 文献标识码:A
Identifications of Lidan Tablets and determination of Rheum officinale Baill
YU Xiao-qin1,WANG Ying1,ZHANG Li-ping2,et al.
(1.Sichuan Provincial Institute for Food and Drug,Chengdu,Sichuan 610036,China;2.Chengdu Textile College,Chengdu,Sichuan
611731,China)
【Abstract】Objective:To improve the quality standard of Lidan Tablets. Methods:TLC and HPLC were used.Results:The TLC
method could indentify Flos Lonicerae,Scutellaria,Timosaponin and Paeony.The HPLC method could quantitatively determine the total
content of emodin and chrysaphanol in Lidan Tablets.The linear range of emodin was 0.01064~0.3192 μg (r=0.9999) and the average re-
200406), 红金耳环经鉴定为Asarum petelotii O.C. Schmidt的干
燥全草,甲醇,色谱醇,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱:Kromasi C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),
甲醇-水-冰醋酸(65∶34∶1),流速1.0 ml·min-1,检测波长310 nm,
柱温25 ℃。色谱见图1。
A 对照品 B 供试品
图1 高效液相色谱图
2.2 对照品溶液的制备:精密称取马兜铃酸A对照品2.0 mg,置
于25 ml容量瓶中,用甲醇定容至刻度,浸泡15 min,超声处理20
min,以0.45 μm微孔滤膜滤过,即得浓度为0.080 mg·ml-1的对照
品溶液。
2.3 供试品溶液的制备:精密称取在五氧化二磷减压干燥12 h
至恒重的样品粉末(60目)5 g,加甲醇溶液50 ml,浸泡15 min,
超声处理20 min,滤过,滤液回收至干,用0.5%氢氧化钠溶液使
其完全溶解并转移至分液漏斗中,用乙醚萃取两次,每次l5 ml。
萃取后的碱液用3.5%盐酸溶液调至pH 2左右,用乙醚萃取4次,
每次15 ml,合并萃取液,水浴蒸干,用甲醇溶解并转移至5 ml容
量瓶中,加甲醇至刻度,再以0.45 μm微孔滤膜滤过,即得供试
品溶液。
2.4 线性关系的考察:精密吸取2,4,6,8,10 μl对照品溶液,进
样,按“2.1”色谱条件测定,记录峰面积。以峰面积积分值(Y)为
纵坐标,进样量(X)为横坐标,绘制标准曲线。回归方程为:Y=
2.0×106X+5207.9 (r=0.999 5)。 结果表明马兜铃酸A进样量在
0.16~0.80 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验:精密吸取对照品溶液10 μl,按“2.1”色谱条
件重复进样6次,测定峰面积,RSD为1.62%(n=6)。结果表明仪
器精密度良好。
2.6 稳定性试验: 取同一供试品溶液, 室温下静置, 分别于
0,2,4,6,8,16 h精密吸取10 μl,按“2.1”色谱条件测定,RSD为
1.51%。结果表明样品溶液在16 h内稳定性良好。
2.7 重现性试验:分别精密称取样品5份,按“2.3”项下方法平
行操作制备供试液 ,按 “2.1”色谱条件测定 ,RSD为1.01%(n=
5)。结果表明该方法重现性良好。
2.8 加样回收率试验: 取已知含量马兜铃酸A的药材样品5 g
共6份,精密称定,分别精密加入一定量的马兜铃酸A对照品,按
“2.3”项下方法平行操作制备,按“2.1”色谱条件测定,平均回收
率为98.97%,RSD为2.10%。
2.9 样品含量测定:精密称取药材样品5 g,按“2.3”项下方法
平行操作制备5份供试液。按“2.1”色谱条件测定,结果见表1。
3 讨论
实验建立的测定红金耳环中马兜铃酸A含量的方法简便,
稳定可靠,可用于其含量测定。
马兜铃酸A在红金耳环中含量为0.0012%, 是关木通中马
兜铃酸A含量的1/330~1/15[2],含量较低。
参考文献:
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(3)[M].上海:上海
科学技术出版社,1999.506.
[2] 由丽双,王智民,姜 旭,等.反相HPLC法测定不同产地关木通中
马兜铃酸A的含量[J].中国中药杂志,2003,28(5):465.
收稿日期:2009-04-08
表1 红金耳环中马兜铃酸A含量测定结果
1
2
3
4
5
实验
次数
5.0005
5.0023
5.0018
5.0015
5.0011
样品重
(g)
10
进样量
(μl)
0.0012
0.0013
0.0012
0.0012
0.0013
马兜铃酸A
含量(%)
0.0012
平均含
量(%) RSD(%)
4.4
2246