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第 1 4卷 第 8 期
2012 年 8 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 14 No. 8
Aug .，2012
半边旗Pteris semipinnta L.为凤尾蕨属植物[1]，
其醇提物及从中分离到的二萜类化合物具有较强的
体内外抗肿瘤作用[2-5]。根据药用植物亲缘学的原
理[6]，亲缘关系相近的植物其所含化学成分相似，而
化学结构相似的化合物其生理活性多相似，因此，我
们在研究半边旗抗肿瘤作用的基础上，对与半边旗
为同属植物且资源丰富的剑叶凤尾蕨P. ensiformis
Burm.的抗肿瘤活性进行了初步研究，为发现新的
抗肿瘤化合物打下基础。
1 仪器与材料
1.1 仪器
索 氏 提 取 仪，旋 转 蒸 发 仪，AE-240天 平 ；
凤尾蕨属草药剑叶凤尾蕨的抗肿瘤活性初步研究
蔡宏亚，苟占平
（广东医学院，广东 东莞 523808）
摘 要：目的：对广东产凤尾蕨属草药剑叶凤尾蕨提取物进行抗肿瘤活性初步研究。方法：采用MTT法检测
剑叶凤尾蕨乙醇提取物的体外抗肿瘤活性。结果：剑叶凤尾蕨提取物对人肺癌细胞H23、肝癌细胞hepG2、结肠癌
细胞SW579增殖均有明显抑制作用。结论：广东产凤尾蕨属草药剑叶凤尾蕨有较好的抗肿瘤研发前景。
关键词：剑叶凤尾蕨；抗肿瘤作用；MTT法
中图分类号：R979.1 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2012) 08- 0080- 02
收稿日期：2012-02-10
基金项目：广东省自然科学基金项目（8152402301000019）；广东省科技计划项目（20O9B03O8O1336）
作者简介：蔡宏亚（1972-），女，甘肃天水人，实验师，学士，研究方向 ：实验教学和实验室的管理工作。
Preliminary Study on Antitumor Effect of Herba Pteridis Ensiformidis from Genus Pteris
CAI Hong-ya, GOU Zhan-ping
（Guangdong Medical College, Dongguan 523808, Guangdong, China）
Abstract：Objective: To study the antitumor effect of Guangdong native herb Jian-Ye Feng-Wei-
Jue(Herba Pteridis Ensiformidis). Methods: Antitumor effect of ethanol extract was screened by tetrazolium
salt (MTT) assay. Results: Ethanol extract of Pteris ensiformis Burm. was showed to have significant
inhibitory effect against cancer cell lines (H23, HepG2，SW579). Conclusion: The herb of Jian-Ye Feng-
Wei-Jue(Herba Pteridis Ensiformidis) produced in Guangdong has a good development and utilization
prospect on antitumor.
Key words：Pteris ensiformis; antitumor effect; MTT assay
能，使骨磨片上的骨吸收陷窝数量明显减少[8]。由
于这些实验采用离体单细胞培养进行研究，难以反
映机体状态下的骨形成和骨吸收的全貌。故本实
验选用共育培养的OB和OC为研究对象进行实验
观察，结果显示，给予骨康含药血清和空白血清后，
自第3天起骨康组OPG含量明显高于同时期空白组
（P<0.01），而空白组整个培养过程中无明显变化，说
明骨康血清能作用于OB，使其分泌OPG增加。骨
康组RANKL含量第7天明显下降（P<0.05），而空白
组无明显变化（P>0.05）。自第3天起骨康组OPG/
RANKL比值显著高于空白组（P<0.05、P<0.01）。在
培养第5、7天骨康组OPG/RANKL比值较初始比值
明显增大（P<0.05），而空白组在培养过程中无明显
变化。由此可以认为骨康含药血清对OB和OC均有
影响，可改变细胞生存环境中OPG/RANKL的比例，
间接影响OC的功能活性。在OB存在的情况下，这
种间接的调控机制可能发挥更大的作用，这更符合
机体内的生理环境，而非主要因为含药血清直接抑
制了OC的功能。◆
参考文献
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[ 6 ] 魏合伟，李钊，张志海，等.骨康含药血清对新生大鼠成骨细
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DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2012.08.82.caihy.091
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1 4 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
NAPCO series 5400 CO2培养箱，Elx 酶标仪（Bio-
TEK- INSTUMENTS INC产品）；96孔培养板(美国
Costar)。
1.2 材料
乙醇、乙酸乙酯、正丁醇（分析纯）；小牛血清(杭
州四季青生物材料有限公司) ；RPMI 1640培养基
(GIBCO) ；二甲基亚砜(DMSO)、胰蛋白酶、甲基噻唑
蓝（MTT）(美国Sigma公司)。
剑叶凤尾蕨P. ensiformis Burm.采于广东湛江，
由广东医学院苟占平博士鉴定。
细 胞 株 ：人 肺 癌H23、肝 癌HepG2、结 肠 癌
SW579细胞株，由本实验室传代培养。
2 方 法
2.1 实验药品的制备
将剑叶凤尾蕨放于阴凉处晾干，粉碎，取样品
10g，加乙醇100mL索氏抽提器连续回流提取8h，
所得提取液稀释至含醇量30%后，按提取液 ：石油
醚II（2 ：1）比例萃取2次。弃石油醚层，合并萃取
液，蒸干，用适量DMSO 溶解，并以PBS定容，得含生
药1g·mL-1供试液（DMSO的体积分数= 5% )，灭菌
后，置4℃冰箱备用。
2.2 细胞培养
人肺癌H23、肝癌细胞HepG2、结肠癌细胞
SW879细胞培养于含10%小牛血清、100kU·L-1青
霉素、100mg·L-1链霉素的RPM I- 1640培养液中，
在37℃、5% CO2培养箱中培养，取对数生长期的细
胞进行实验。
2.3 细胞增殖抑制试验（MTT法）
取对数生长期的人肺癌细胞H23、肝癌细胞
HepG2、结肠癌细胞SW879 分别用0.25%的胰蛋白
酶消化，10%新生小牛血清的RPMI-1640培养液
调制成4×104个·mL-1的细胞悬液，接种于96 孔
板中，每孔接种100μL。在37℃、5%CO2条件下
培养过夜后，吸出培养液，加入新培养液90μL及
药液10μL。待测样品中DMSO终体积分数不超
过0.5%，样品的终浓度分别为含生药31.25、62.5、
125mg·mL-1，每个浓度平行6孔 ；分别培养24、
48、72h后，每 孔 加 入5mg·mL-1的MTT 20μL，
37℃、5%CO2条件下温育4h，弃去上清液，每孔加入
150μL DMSO，在微型振荡器上摇匀5min，结晶溶解
后，在酶标仪主波长为570nm，参比波长为630nm处
测其OD 值，比色以无细胞孔作空白调零。抑制率 =
（1-实验组6孔OD值平均值/对照组6孔OD值平均
值）×100%。
2.4 统计分析
实验数据以（x—±s）表示，采用SPSS 13.0统计软
件包One Way Anova 进行统计学处理。P<0.05 表示
差异有统计学意义。
3 结 果
3.1 提取物对体外培养的H23肿瘤细胞生长增殖的
影响
剑叶凤尾蕨提取物对肺癌H23体外抗肿瘤活性
见表1。
3.2 提取物对体外培养的HepG2肿瘤细胞生长增殖
的影响
剑叶凤尾蕨对肝癌HepG2体外抗肿瘤活性见
表2。
表1 对肺癌细胞H23生长增殖的影响（n=6）
组别 抑制率（%） 24h 48h 72h
空白对照（1%DMSO） - - -
剑叶凤尾蕨(mg·mL-1)
3.125 14.58 30.14 46.18
6.25 52.49 77.24 82.53
12.5 68.64 85.82 90.17
表2 4种凤尾蕨属植物对肝癌细胞
HepG2生长增殖的影响（n=6）
组别 抑制率（%） 24h 48h 72h
空白对照（1%DMSO） - - -
剑叶凤尾蕨(mg·mL-1)
3.125 26.52 45.06 56.13
6.25 44.36 58.76 68.46
12.5 60.29 72.66 81.87
3.3 提取物对体外培养的SW579肿瘤细胞生长增殖
的影响
剑叶凤尾蕨提取物对结肠癌SW579体外抗肿
瘤活性见表3。
表3 对结肠癌细胞SW579生长增殖的影响（n=6）
组别 抑制率（%） 24h 48h 72h
空白对照（1%DMSO） - - -
剑叶凤尾蕨(mg·mL-1)
3.125 9.86 26.86 41.13
6.25 37.97 61.87 77.89
12.5 59.62 74.62 83.26
4 讨 论
半边旗具有较强的抗肿瘤作用，本研究在研究
半边旗抗肿瘤作用的基础上，以人肺癌H23、肝癌
HepG2、结肠癌SW579细胞株为模型，以抗肿瘤活性
为指标，对与半边旗为同属植物的剑叶凤尾蕨的抗
肿瘤活性进行了初步研究，为发现新的抗肿瘤化合
物打下基础。
剑叶凤尾蕨在岭南地区也做民间草药使用，资
源丰富，草医常认为和半边旗功效雷同。本研究发
现其提取物在各个质量浓度范围对肿瘤细胞均有
抑制作用，且呈一定的时间-剂量依赖性。其提取
物对肺癌H23在48h，12.5mg·mL-1组的抑制率超
过了85%，在72h，6.25、12.5mg·mL-1时的抑制率
分别约为83%和90% ；其提取物对肝癌HepG2在
48h，12.5mg·mL-1组的抑制率超过了70%，在72h,
12.5mg·mL-1时的抑制率分别约为82% ；其提取物
对结肠癌SW579细胞株在48h，12.5mg·mL-1组的
抑制率接近了75%，在72h，6.25、12.5mg·mL-1时的
抑制率分别约为78%和83%。提示剑叶凤尾蕨有较
好的抗肿瘤研究前景。◆
参考文献
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