全 文 ：第 1 5卷第 4第
1 9 9 3年 1 2月
延 边 农 学 院 学 报
Ju o r na l o fY a n bi a nA g ri e u l t u a rl C ol l e ge
V ol
D e e
1 5 取 4
1 9 9 3
栗 属 嫁 接 亲 和 力 与 过 氧 化
物 酶 同功 酶 谱 的 探 讨
沈允权 李永勋 金东浩
(延边农学院 )
曹后男 朴永虎
(浑春林业果树场 )
摘要 为了 扩大板栗 的 栽培 区 , 改造 东北 栋属 次生 林 , 通 过万 年的 时 间 , 对 栋
属上 嫁接 栗 属 、 砧穗 和 嫁 接 树叶片 过 氧化物酶 同功 酶 的分 析 , 结果 表明 : 栋属 和 栗
之 间 , 虽然过 氧化 物酶 同功酶 谱谱 差 很大 , 但 也有 共 同 的 酶 谱带 , 说 明 它们有 亲 缘
关 系 。 本试 验 还证 明酶 谱带数 与嫁 接 亲和力无 关 , 而不 均 酶糟 迁 移率 坦小 , 其像 接
亲和 力越强 ; 过 氧化物酶 同功 酶的活 性差 异越 大 . 其嫁接 亲和 力 性差 。
关够词 袱 肆 履 尾 过 氧化物 酶 同功酶 酶谱 户接 亲和 力
嫁接中亲和力是嫁接成功与否的关键 。
很多园艺学家对嫁接的生理性研究做了很大
的努力 , 解决了许多不容易解释的难题 , 但
至今我们还不能说已经真正地了解了亲和力
的实质 , 特另lJ是测定嫁接亲和力的强弱以及
后期不亲和等现象 。 嫁接亲和力田间试验及
测定需要时间很长 , 如果能在实验室进行测
定就方便多了。 1 9 8 9年李文斌等 〔 2 研 究 柑
桔矮化砧时 , 以平均酶谱距离来解释砧穗间
的亲和性 。 指出柑桔砧穗 间过氧化物酶平均
酶距离与嫁接成活率呈负相关 , 栗属植物同
功酶研究尚很少 , 过氧化物酶与栗属砧木亲
和性的关系目前尚无报道 。 如能在栗类及砧
木材料中找出过氧化物酶同功酶及活性与嫁
接亲和力的关系 , 无疑揭示了嫁 接 亲 和 机
制 , 对栗属砷木的预选具有重要 意 义 。 为
此 , 作者于 1 9 9 2 ] 9 9 3年对板栗 、 日本栗 、
蒙古栋 、 柞栋的实生树叶片和嫁接树叶片的
氧化物酶同功酶进 行了研究 。
1
. 试验材料 与方法
收稿 ; 1 9 子J心二Q
了. ] 材料
试验材料取自我院板 栗选种圃及浑春林
业果场 , 供试的种类有山 毛禅科 ( F a g ac e a -
e )栋属 ( Q u e r e u s ) 中的蒙克栋 ( m o n g o -
l i e a F i s e b ) 柞栋 ( d e n t a t a T h u n b ) _ 与
栗属 ( e a s t a n e a ) 板栗 ( C a s t a n e a m o l -
l i s s i m a )
、 日木栗 ( C · e r e n a t a s i e b
e t z 。 。 ) 及嫁接树的叶片 、 叶柄 、 萌动芽等 。
采样分三次 : 第一期为 5 月 2 日 ,采集蒙古栋
及柞栋萌动芽 , 5 月 2 4 日采集萌动的板栗及
日本栗 ; 第二期和第三期均集成熟的叶片及
叶柄 , 时期为 7 月20 日、 8 月 2 4 日。 样品采
集后冰藏条件下带回 , 每期重复三次 。
1
.
2 样品制备
送回的样品用蒸馏水洗净 , 用定性滤纸
吸干 , 称取萌动芽 、 叶片 、 叶柄各 1 克 , 加
蒸馏水 2 m l , 置于预 冻的研钵 中 , 研 磨 成
桨 , 在 4 0 0 0千转 / 分条件下离心 10 分钟 , 取
上清液为酸液 , 在 4 ℃条件下保存备用 。
1
.
3 电泳及染色
采用聚丙稀酸胺盘状凝脐 , 用 D r r 一 l
电泳仪电泳 , 取直径 o . c7 m 、 长 l c m 的 指
DOI : 10. 13478 /j . cnki . jasyu. 1993. 04. 004
二2 2 廷 边 农 学 院 学 报
管 , 注入浓度 10 % 、 P H S . 9的分离胶 , 长为
g c m
, 隔层胶浓度为 J % , P工钮6 . 8 , 长cI m 。
电极缓冲液为 T r 15 一 甘氨酸电泳 缓冲液 , 其
P H S
.
3
。 每管上样量为 50 m l , 初始 犷 作 电
压为 50 V , 0] 分钟后电压提高到 1 0 V , 电泳时
间为 8 ~ 1 0小时 。
染色采用抗坏血酸 一 联本胺法染色 , 在
3 %醋酸液中保存。
2 试验结果
2
.
1 栋属和栗属的酶谱
第 1 5卷
一」
试验结果表明 , 栋属的二个砧木种蒙古
栋和柞栋的酶谱类同 , 都有 3 条酶带 , 但酶
带相对迁移率和活性不同 , 即蒙古栋的酶带
迁移率慢于柞栋 , 平均酶带迁率蒙古栋 也比
柞栋小 , 而活性强于柞栋 。 栗属的接穗种
板 栗和 日本栗酶带数有差异 , 板 栗有 4 条酶
带 , 而 日本栗多 2 个 P 、 和 P 7酶带 , 板栗 P l
酶带弱于 日本栗 P : 酶带 , 酶谱迁移率 日本栗
较快 , 平均迁移率也比板 栗大 (详见图 1 ) 。
栋属与栗属之间酶谱差异显著 , 栋属有 3 条
酶带 , 而栗属是 4 一 6 条 酶 带 , 其中 P , 酶
带是栗属独有的 , 栋 属 没有 。 栗属 P 。酶带
弱 , 栋万写P 。酶带较强 。 但也有相似之处 , 即
P
: 、
P 3
、
P
。是栋属和栗属共有的酶带 。
根据 1 9 9 1 、 , 1 9 9 3年嫁接实践表明 , 板栗
嫁接在蒙古 栋 , 成活率较高 , 嫁接在柞栋的
表 1 栋属嫁接栗属成活调查表
1 9 9 3 年 7 月
接穗不中}砧木种…调查株数一成活数 百分率(% )
架蒙古 栋
栗伯 栋
日木栗 {蒙古栋…
日本栗一柞 栋 {
5 2 9
3 2 7
7 7 6
3 0 7
吐5 0
1 7 5
2 7 0
4 7
8 5
。
5 3
。
3 J
。
1 5
。
板
成活率较低 , 见表 l 。
对比 砧穗的酶谱平均迁移率 , 蒙古 栋和
板栗平均酶谱 荃异较少 , 而柞栗与板栗酶谱
差异较大 (见表 2 ) 。
表 2 过氧化物酶同工酶的相对迁 移率 ( R f)
一种 一 }二几二_ ’ _ 一卫 _谙二牡妈_ ; _爪二二盯_礁 一韶
一 快 区 ’ 慢
类 一丁 一} 一氏 } 一 P 一 P 、 一 P乒 } 一 P 。 }郭州 .(0 20 4 卜 25 5 … 二 .04 司叮 竺… 、 0 .2 08 …。 .2 60 … { …。 .4 4 8 {枚 _ 呆 } 0 · 1 5 6 0 · 2 0 8 、 O · 2 5 5 . 0 · 理2 6 }
日本栗 一 。· ` 6 0 。 · ` 9` · “ · “ 6 0 。· “ 9 8 。· ` 3 6 一
性一严 卫
P
7
。
2 8 9
P
。
i王移率
。
2 9 5
。
2 6 8
。
3 1 4
嫁接树 来 , 。 . 2 5 6 0 . 2 0 3 0 . 3 2 9 一 0 . 3 6 2 0 . 4 0 8 0 . 5 3 2 2 8 7
关 嫁 接 树为 蒙古 探砧 木接 板栗 树板栗 和嫁 接 树 是 同 一 母树
第 4期
沈允 权等 : 栗属嫁接亲 和力与 过 氧化
物酶 同功 酶谱 的 探 讨 2 2 3
试 验结果表明砧穗间 酶 谱 平 均迁移率
小 , 嫁接亲和力好 , 平均酶谱迁移率大 , 嫁接
亲和力弱 , 和李文斌等人的研究结果一致 ,
2
.
2 不占穗过氧化物酶活性的测定 」 〕
砧穗过氧 化忧酶同功酶活性测定结果见
表 3 。
表 3 同功酶活性表 9 3 . 9
吮一 二 一。 , L、 } 差 异树 : l卜 , ;: 』险 一杨对值犷
0
。
2 5 3 { 0
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2 8 3 } o
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.
0
.
2 7 0
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.
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0
。
3 ] 1 ’ 0
。
0 2 8
实验结果表明 : 板 栗 的 活 性 最 高 为
。 . 2 8 3 o D / 毫克查白 / 分钟 , 蒙古栋次之为
0
.
2 5 3 O D / 毫克蛋白 / 分钟 , 柞栋 最 低 为
0
.
0 1 3 0 D / 毫克蛋白 / 分钟 ; 说 明砧穗 同功
酶活性差异小 , 嫁接亲和力好 。 同时发现 ,
不同属间嫁接树叶片过氧化物酸同功酶活性
提高 。 嫁接树活性为 o . 3 1 1 0 D / 毫克蛋白 /
分钟 , 是母树板栗的 1 . 1倍 。
2
.
3 砧木对接穗过氧化物酶同功 酶 谱
的影响
蒙古 栋 、 柞栋 砧木不影 响板栗 、 日本栗
叶片过氧化物酶同功酶的相对达移草 , 但过
氧化物酶同功酶酶谱带数有变化 。 母株板栗
只有 4 条酶带 , 而嫁接在蒙古栋的嫁接树酶
带数为 6 条 , 即慢区增加一条 P 4谱 带 和 快
区增加一条 P S 谱带 (见图 2 ) 。
据 P 4 、 P 。谱带相对迁 移 率 来推测 , 砧
木不可能上来 , 可能是受砧木的影响 , 新陈
参 考
〔 1 〕张字和编著 1 9 6 3 果树砧木的研
究 上海科技出版社出版
代谢有所改变 , 增加了某种激素 , 而厂生新酶
谱 。 嫁接树表现显著增加耐寒性 , 绝对低温
一 4 o Cc 条件下安全越冬两年 , 另外嫁接当年
开花率达 15 % , 这种现象有待进一步研究 。
3 讨论
栋属中蒙古 栋和柞栋为砧木 , 嫁接板 栗
和 日本栗 , 试验结果表明蒙古 栋和板栗亲和
力较好 , 成活率达 8 5% ; 板呆和柞栋次之 ,
成活率 5 3 . 5% ; 蒙古 栋和 日本栗再次 , 成活
率 34 . 8% ; 柞栋和 日木栗亲和力最次 , 成活
率只有 1 5 . 3% 。
3
.
1 本试验结果表明 , 栋属与栗 属 间
叶片过氧化物酶同功酶平均酶谱距 离可以做
为鉴定砧穗亲和力的生化指标 , 而且过氧化
物 酶同功酶的活性可应用 少解释 砧穗为录和
少J 。
3
.
2 涛验结果表明 , 嫁接树增 加 过氧
化物酶同功酶谱带数 。 作者 一认为这不可能是
遗传基因的改变 , 而是新陈代谢受影 响 , 产
生或增加某种激素 ( 如乙稀等 ) 了}jt’ 产生新的
谱带 , 这种现象影响提早开花结果 , 最后产
生后期不亲和现象 。
文 献
〔 2 二李文斌等 1 9 8 9 柑桔矮化狱及半
矮化砧过氧化物酶及活性的比较 园艺学报
2 2 4 延 边 农 学 院 学 报 第巧卷
16〔 4〕
〔 3〕王秀珍等 1 98 1苹果矮 化砧与乔
化砧过氧化物酶同功酶的比较研究 植物学
报 2 3〔 l 〕
〔 4〕赤珍华等 18 9 5金坪胃垂栗过氧
化物酶同功酶研究初报 ’ 中国果树 2期
〔 5〕李文斌等 8 1 9 3叶片过氧化物酶
活性作为柑桔抗寒性指标的探讨 。
ST D U Y ON I S O EN Z Y MZ E Y MR O G A M OF P R E OX ID A S E八 N D
GR AF T工N F F N G A I IT YF OH C ET SN UT
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e u l t u r i n g C h i n e s e e h e s t n u t a n d r e f o r ln n o r t h e a s t O a k s e e o n d a r y f o r e s t
.
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z y m o g r a m t y p e o o f p e r o x i d a , e a r e v e r y d i f f e r e n t b e t w e e n O a k a n d C h e s t n u t
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