全 文 ：陈宏伟，万里红，杨进军，等． 盐肤木叶片总 RNA提取方法的比较研究［J］． 江苏农业科学，2012，40(5) :27 － 30．
盐肤木叶片总 RNA提取方法的比较研究
陈宏伟1，2，3，5，万里红1，杨进军4，饶力群3，邱业先1，2，3，5
(1．苏州科技学院化学与生物工程学院，江苏苏州 215009;2．江西农业大学理学院，江西南昌 330045;
3．湖南农业大学生物科学技术学院，湖南长沙 410128;4．天津理工大学环境科学与安全工程学院，天津 300191;
5．江苏省环境功能材料重点实验室，江苏苏州 215009)
摘要:比较了 Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB法、SDS法以及改良 CTAB法和改良 SDS法等方法提取盐肤木叶片
总 RNA，琼脂糖电泳和紫外检测结果表明:改良 SDS 法提取的盐肤木总 RNA 没有降解，28S 和 18S rRNA 条带清晰，
D260nm /D280nm和 D260nm /D230nm分别为 2． 05 和 2． 12，虽然其产量只有 59． 87 μg /g，但是综合判断改良 SDS 法是适宜盐肤
木总 RNA提取的一种有效方法。
关键词:盐肤木;叶片;总 RNA;提取方法
中图分类号:Q789 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)05 － 0027 － 03
收稿日期:2011 － 09 － 09
基金项目:江西省跨世纪学术与技术带头人项目(编号:200193) ;江
苏高校优势学科建设工程资助项目;苏州科技学院基金。
作者简介:陈宏伟(1978 －) ，男，湖南茶陵人，博士研究生，讲师，研究
方向为生物化学与分子生物学。Tel．: (0512)68056493;E － mail:
hwchen2000@ 163． com。
通信作者:邱业先，博士生导师，教授，研究方向为生物化学与分子生
物学。Tel．:(0512)68418431;E － mail:qyx542@ mail． usts． edu． cn。
盐肤木(Rhus chinensis Mill．) ，是漆树科(Anacardiaceae)
盐肤木属(Rhus)植物，是我国主要经济树种之一，具药用和
经济价值，不仅本身药用功效很多，而且叶上形成的虫瘿———
五倍子，也是医药、冶金、石油、鞣革、食品、染料等工业的重要
原料。过去对盐肤木的研究较少，主要研究盐肤木中部分化
学成分及其药理作用和生物活性［1］。而随着现代分子生物
学技术的发展，运用分子生物学对盐肤木进行基因克隆及功
能研究、cDNA 文库构建等分子方面的研究，已成为盐肤木当
前研究的迫切需要。本研究小组前期研究表明盐肤木种子中
含有一些营养性贮藏蛋白，因此分离这些贮藏蛋白、建立 cD-
NA文库用于基因克隆和作物遗传改良，将为作物种质基因
工程奠定良好的基础。
现代分子生物学试验操作的一个重要基础就是核酸的提
取，特别是 RNA的提取，其提取质量将直接影响到后续试验
的成败。不同植物、同一植物不同组织的 RNA提取方法也不
尽相同。植物类特别是木本植物与其他生物(动物、微生物)
在生物结构和化学组成方面有很大的不同，树木、叶片含有大
量的次生代谢物，如油脂、单宁、萜烯、色素、酚、醌等以及蛋白
质和多糖等有机大分子，这些生物分子极大地影响 RNA提取
的产量和质量，对于 RNA的 RT － PCR，体外酶切等后续的分
子生物学操作也有很大的影响。盐肤木叶片含有丰富的次生
代谢物质，尤其是油脂含量高，这给提取高质量的 RNA 增加
了难度。目前植物 RNA 提取的常用方法主要有商业试剂盒
如 Trizol法等，但是商业试剂盒也存在成本高和各试剂盒针
对的植物类型不一而难以选择等缺点，因此仍有不少实验室
利用异硫氰酸胍变性的异硫氰酸胍法，阳离子去污剂 CTAB
法，阴离子去污剂 SDS 法等自行摸索特定植物 RNA 的提取
方法。本研究针对盐肤木油脂和酚类物质含量高的特点，采
用了 Trizol 法、异硫氰酸胍法、CTAB 法、SDS 法以及改良
CTAB法和改良 SDS法等方法提取 RNA，在提取 RNA的过程
中，也作了适当的改进，如加入聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)降
低酚类物质的干扰等。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
盐肤木新鲜幼嫩叶片采自苏州上方山国家森林公园。研
磨前洗净晾干。
1． 2 仪器和药品规格
Bio － rad 电泳仪(美国 Bio － rad 公司) ;UV2450 紫外分
光光度计(日本岛津公司) ;凝胶成像系统。
1． 3 RNA提取试剂及操作
Trizol购于 Invitrogen 公司，SDS(十二烷基硫酸钠)、
CTAB、异硫氰酸胍、DEPC 购自上海生工生物工程技术服务
有限公司，其余试剂均为国产分析纯。试验中使用的各种器
皿和耗材如研钵、枪头、离心管等均用 0． 1% DEPC 溶液浸泡
12 h 以上，121 ℃灭菌 40 min 并烘干。所用溶液均用灭菌的
0． 1% DEPC 水配制并湿热灭菌 40 min。电泳槽及所用梳子
和挡板用 0． 1% DEPC 水处理 12 h 以上，并用保鲜膜封好。
各种 RNA 操作参照《分子克隆实验指南》［2］进行。
1． 4 盐肤木叶片总 RNA的提取方法
1． 4． 1 SDS法 所用方法参考 Zhou等的方法［3］，略作改动。
称取 1． 0 g 新鲜或 － 70 ℃保存的盐肤木叶片置于预冷的研钵
中，加入少量 PVPP，加入液氮充分研磨成粉末状，转移至
1． 5 mL离心管中，加入 600 μL提取液［0． 1 mol /L Tris － HCl
(pH值 9. 0) ，含 15 μL β － 巯基乙醇］旋涡混匀，室温静置
15 min;加入 250 μL 20% SDS 裂解液，轻轻混匀，室温静置
5 min，12 000 r /min 离心 10 min;取上清，加入 1 /3 体积的
8 mol /L LiCl，上下颠倒混匀后，于 4 ℃冰浴 2 ～ 3 h;4 ℃，
15 000 r /min离心 20 min，取上清;用 500 μL SSTE 溶解沉淀，
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DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.05.131
再加入等体积的酚 －氯仿(1 ∶ 1)涡旋混匀，12 000 r /min 离
心 10 min;上清转移至新的 1． 5 mL 离心管中，加入等体积的
氯仿旋涡混匀，12 000 r /min离心 10 min;取上清，加入等体积
异丙醇，－ 20 ℃放置 2 h;4 ℃，12 000 r /min 离心 20 min，得
沉淀，用体积分数为 75%乙醇洗涤，将沉淀在超净工作台无
RNase环境中干燥;加入 50 μL DEPC水，充分溶解沉淀。
1． 4． 2 改良 SDS 法 按杨卫东等人［4］方法，适当改动。称
取 1． 0 g 新鲜或 － 70 ℃保存的盐肤木叶片置于预冷的研钵
中，加入少量 PVPP，加入液氮充分研磨成粉末状，移入
1． 5 mL离心管中，加入 1 mL 提取缓冲液［0． 1 mol /L Tris －
HCl (pH值 7． 4) ，0． 5 mol /L NaCl，25 mmol /L EDTA(pH 值
8． 0) ，20 g /L SDS;20 g /L PVPP 和 20 g /L β －巯基乙醇使用
前加入］，室温下摇动 10 min;加入 1 /3 体积 5 mol /L 醋酸钾
(pH值 6． 0) ，冰上沉淀 30 min，4 ℃，12 000 r /min 离心
15 min，上清液移到新离心管中，等体积酚 /氯仿抽提，4 ℃，
12 000 r /min离心 15min，重复此步骤;再用等体积氯仿抽取
水相移到新离心管中，加入等体积异丙醇，－ 20 ℃沉淀 2 h;
4 ℃，12 000 r /min离心 20 min，DEPC 水重悬;等体积酚 －氯
仿、氯仿抽取，用等体积异丙醇和 1 /30 体积 3 mol /L 醋酸钠
(pH值 5． 2)于 － 20 ℃沉淀 2 h;4 ℃，12 000 r /min 离心
20 min;收集沉淀，用 75%乙醇洗涤沉淀 2 次，将沉淀在超净
工作台无 RNase环境中干燥;沉淀溶解于 50 μL DEPC水。
1． 4． 3 CTAB法 根据 Kiefer 等人［5］方法，适当改动。称取
1． 0 g 新鲜或 － 70 ℃保存的盐肤木叶片置于预冷的研钵中，
加入少量 PVPP，加入液氮充分研磨成粉末状，加入至已 65 ℃
预热的 CTAB 提取缓冲液中(每 1 mL 中加入 20 μL 巯基乙
醇) ，涡旋振荡 30 ～ 60 s 后，于 65 ℃ 水浴中继续振荡约
15 min;取上清于新的离心管中，加入等体积的氯仿:异戊醇
(24 ∶ 1)提取 2 次，旋涡混匀，18 ℃或室温，12 000 r /min离心
10 min;取上清，加 1 /4 体积的 8 mol /L LiCl 上下颠倒混匀，
4 ℃沉淀过夜;4 ℃，12 000 r /min 离心 20 min，收集沉淀，用
500 μL SSTE溶解沉淀，洗去 DNA 及其他杂质;加入等体积
的氯仿 ∶ 异戊醇(24 ∶ 1)抽提;取上清，加入 2 倍体积无水乙
醇，－ 20 ℃放置 2 h或 － 70 ℃放置 30 min;4 ℃，12 000 r /min
离心 20 min，得沉淀用体积分数为 75%乙醇洗涤，将沉淀在
超净工作台无 RNase环境中干燥;加入 50 μL DEPC 水，充分
溶解沉淀。
1． 4． 4 改良 CTAB法 依据吴功庆等的方法［6］，适当改动。
称取 1． 0 g 新鲜或 － 70 ℃保存的盐肤木叶片置于预冷的研钵
中，加入少量 PVPP，加入液氮充分研磨成粉末状，然后转入 2
支 1． 5 mL EP管中;加入 4 mL RNA 提取液(预先在 60 ℃水
浴中保温 1 h)和 80 μL β －巯基乙醇并混匀;加入等体积的氯
仿 ∶ 异戊醇(24 ∶ 1)混匀后 4 ℃，12 000 r /min 离心 10 min，
将上清液转移到另一离心管中，重复抽提 1 次;取上清液于另
一支 1． 5 mL离心管中，加入 1 /4 体积的 10 mol /L LiCl 混匀，
4 ℃沉淀过夜或 － 20 ℃沉淀 1 h;4 ℃ 12 000 r /min 离心
20 min，弃上清液，将沉淀溶于60 ℃预热的 500 μL 纯化缓冲
液中，60 ℃温浴 5 min，加入等体积氯仿 －异戊醇(24 ∶ 1) ，混
匀;4 ℃ 1 200 r /min 离心 10 min，将上清液转移至 1． 5 mL的
EP管中，向上清液中加入等体积无水乙醇，－ 20 ℃沉淀 1 h;
4 ℃ 12 000 r /min离心 10 min，弃上清液，用 75%乙醇洗涤沉
淀，将沉淀在超净工作台无 RNase 环境中干燥;加入 50 μL
DEPC水，充分溶解沉淀。
1． 4． 5 Trizol 法 根据徐进等人方法［7］，适当改动。称取
1. 0g 新鲜或 － 70 ℃保存的盐肤木叶片置于预冷的研钵中，加
入少量 PVPP，加入液氮充分研磨成粉末状，转入盛有 1 mL
Trizol的 1． 5 mL 离心管中(分两管) ，振荡混匀，室温放置
5 min左右，4 ℃，12 000 r /min离心 10 min;取上清，用(原 Tr-
izol试剂 1 /5)酸性酚和氯仿的等体积混合物抽提，混匀后，
4 ℃，12 000 r /min 离心 10 min，重复 1 遍，再用氯仿抽提 1
遍;将上清液转入新的 1． 5 mL离心管中，加入异丙醇(原 Tr-
izol试剂 1 /2) ，混匀，室温放置 15 ～ 30 min，4 ℃，12 000 r /min
离心 20 min，得白色沉淀;加入体积分数为 75%的乙醇漂洗，
将沉淀在超净工作台无 RNase环境中干燥;加入 50 μL DEPC
水，充分溶解沉淀。
1． 4． 6 异硫氰酸胍法 按 Chomczynskip 等人方法［8］，适当
改动。称取 1． 0 g 新鲜或 － 70 ℃保存的盐肤木叶片置于预冷
的研钵中，加入少量 PVPP，加入液氮充分研磨成粉末状，加
入至装有 RNA提取液(4 mL的 4 mol /L异硫氰酸胍和150 μL
β －巯基乙醇)中旋涡混匀，室温静置 10 min;用等体积的
酚 ∶ 氯仿(1 ∶ 1)抽提 2 次，每次于 4 ℃，12 000 r /min 离心
10 min;用等体积氯仿抽提 1 次，4 ℃，12 000 r /min 离心
10 min，取上清;加入 2 倍体积无水乙醇;－ 20 ℃放置 60 min，
沉淀 RNA;4 ℃，12 000 r /min 离心 10 min，收集沉淀并用
75%乙醇洗涤;用 500 μL 无 RNase 水溶解沉淀，加入等体积
的氯仿旋涡混匀，12 000 r /min 离心 20 min;取上清，加入
1 /10 体积的 4 mol /L LiCl和 2 倍体积的无水乙醇，－ 20 ℃放
置60 min;4 ℃，12 000 r /min 离心 20min，得沉淀用体积分数
为 75%乙醇洗涤，将沉淀在超净工作台无 RNase 环境中干
燥;加入 50 μL DEPC水，充分溶解沉淀。
1． 5 盐肤木叶片总 RNA纯度及质量检测
取提取液 5 μL，上样缓冲液 1 μL。电泳电压 120 V，时间
40 min。电泳结束，用溴化乙锭染色 15 ～ 20 min后，置于凝胶
成像系统观测并拍照。
用紫外分光光度计测量 RNA 样品的 D230 nm、D260 nm、
D280 nm，并计算 D260 nm /D230 nm，D260 nm /D280 nm，确定 RNA纯度，再
计算得率:RNA得率(μg /g)=(D260 nm × 40 μg /L ×稀释倍数
×原液体积)/样品质量。
2 结果与分析
2． 1 不同提取方法对总 RNA提取质量的电泳分析
从图 1 中可以看出，6 种方法提取的总 RNA 中 28S 和
18S RNA均清晰可见，1、2、6 泳道的 28S的亮度约为 18S的 2
倍，其他泳道由于降解的原因导致呈现 28S 和 18S RNA 的亮
度接近。Trizol法和异硫氰酸胍法提取的总 RNA 亮度很高，
但存在一定拖尾，说明仍存在大片段的基因组 DNA;CTAB 法
提取的总 RNA有部分片段断裂，并呈现一定程度的弥散，但
基因组 DNA 杂质却不明显;经过改良的 CTAB 法提取的总
RNA条带清晰，降解不明显，只是由于产量不高，可能导致
28S和 18S RNA 的亮度接近;SDS 法和改良 SDS 法提取的总
RNA条带都较为清晰，尤其是改良 SDS 法提取的总 RNA 中
条带更为清晰，但28S和18SRNA亮度相当，前端异常亮的
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区域表明有小 RNA。
2． 2 不同提取方法对总 RNA纯度的影响
对不同的方法提取盐肤木叶片的总 RNA，用紫外分光光
度计测量 RNA样品，结果见表 1。
从表 1 可以看出，6 种方法所提取的盐肤木叶片总 RNA
的 D260 nm /D280 nm中，CTAB法、SDS 法和改良 SDS 法均在 2 左
右，达到理论纯度，表明 CTAB 法、SDS 法和改良 SDS 法提取
的总 RNA 基本无蛋白质杂质污染;Trizol 法和改良 CTAB 法
在 1． 7 ～ 1． 8 之间，说明 Trizol 法和改良 CTAB 法没能很好去
除蛋白质杂质;而异硫氰酸胍法低于 1． 7，异硫氰酸胍法提取
的总 RNA则纯度较差，这也与电泳结果相符。
表 1 中，6 种方法中所提取的盐肤木叶片总 RNA 的
D260 nm /D230 nm在 1． 74 ～ 2． 47，其中有 5 种方法提取的总 RNA
的 D260 nm /D230 nm接近 2． 0 或在 2． 0 以上，说明这 5 种方法对于
去除多糖和酚类杂质都很理想，其中以改良 CTAB 法最好;异
硫氰酸胍法的D260 nm /D230 nm最低，仅为1 ． 74，表明异硫氰酸
表 1 不同方法提取盐肤木叶片总 RNA的结果比较
方法 D230 nm D260 nm D280 nm D260 nm /D230 nm D260 nm /D280 nm RNA得率(μg /g)
Trizol法 0． 421 0． 939 0． 540 2． 23 1． 71 62． 60
CTAB法 0． 647 1． 403 0． 721 2． 17 1． 95 93． 53
改良 CTAB法 0． 417 1． 031 0． 579 2． 47 1． 78 68． 73
SDS法 0． 483 0． 939 0． 444 1． 94 2． 11 62． 60
改良 SDS法 0． 423 0． 898 0． 437 2． 12 2． 05 59． 87
异硫氰酸胍法 0． 573 0． 996 0． 603 1． 74 1． 65 66． 40
胍法不能有效去除盐肤木叶片中的多糖类杂质。
从图 1 和表 1 的数据综合来看，SDS 法和改良 SDS 法提
取的总 RNA，电泳条带清晰，杂质较少，尤其是改良 SDS法提
取的 RNA，不仅 28S和 18S RNA条带清晰，且前端的小 RNA
也很清晰，其缺点是得率较低，因此在不考虑得率的情况下，
是一种可取的方法;CTAB 法提取的总 RNA 纯度高，产量也
高，对蛋白质和多糖类杂质的去除都比较彻底，尽管有一定降
解，但通过更为谨慎的操作也不失为木本植物总 RNA提取优
选方法;经过改良的 CTAB 法提取的总 RNA 虽然产量减少
了，但是蛋白质杂质有所增加;Trizol 法与改良 CTAB 法提取
的总 RNA纯度和产量较为接近，但蛋白质杂质去除同样不彻
底，需要反复抽提以彻底去除杂蛋白;异硫氰酸胍法也没能很
好的去除蛋白质杂质，对多糖和多酚类物质去除也不理想，提
取总 RNA的纯度最低，产量也较低，电泳条带虽然较亮，但可
能是由于蛋白质的干扰造成，这与异硫氰酸胍法不适于多糖
类物质较高的植物 RNA提取相符。
2． 3 不同提取方法对总 RNA得率的影响
由表 1 可以看出，用 CTAB 法提取盐肤木叶片的总 RNA
的得率为 6 种方法中最高，达到 93． 53 μg /g;其次是改良
CTAB法，为 68． 73 μg /g;而 Trizol 法、异硫氰酸胍法、SDS 法
和改良 SDS法的得率都较低，在 59． 87 ～ 66． 40 μg /g，尤其是
SDS法和改良 SDS 法提取的 RNA 最低，这与 SDS 法提取的
总 RNA产量较低相符［9］，可能是因为 SDS 和异硫氰酸胍能
引起蛋白质变性，从而导致部分与蛋白质结合的 RNA也一并
去除。CTAB法提取的 RNA 最高，这可能与 CTAB 主要是去
除多糖类和酚类杂质［10］。
3 结论与分析
由于植物组织尤其是木本植物含有较多的糖类、多酚、油
脂等次生代谢产物，这些都将严重影响 RNA的提取。植物总
RNA的提取方法很多，目前建立的常用方法有 Trizol 法、
CTAB、SDS和异硫氰酸胍法等。异硫氰酸胍一步法用于葡萄
等植物 RNA提取并取得了不错的效果，Trizol 法是近年来兴
起的一种试剂盒提取法，其主要成分为异硫氰酸胍和酚等
组成的单相溶液，其操作较为简便，但价格较高，应用在盐
肤木总 RNA提取时，尚需增加蛋白质抽提等步骤以提高蛋
白质等杂质的去除率。CTAB去除多糖的能力较强，常用木
本植物组织 RNA的提取。SDS作为一种高效去污剂和变性
剂，去除油脂和蛋白质能力很强，也是植物组织核酸提取的
常用方法。
本研究比较了 Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB 法、SDS 法
以及改良 CTAB 法和改良 SDS 法等方法提取盐肤木叶片总
RNA，结果表明改良 SDS法提取的盐肤木总 RNA 质量好，纯
度高，所用试剂也都是常用试剂，价格不高，方法简单，便于操
作，是适宜盐肤木总 RNA 提取的一种快速、简单、高效的方
法。通过提高操作质量和调整蛋白质抽提的次数等，Trizol 法
和 CTAB法等也可以作为可选择的方法。考虑到盐肤木中酚
类物质和油脂含量较高，极易氧化成褐色物质，并与核酸不可
逆的结合，影响 RNA的提取，本研究采用液氮快速研磨，减少
酚类的氧化，同时加入 PVPP帮助去除酚类物质，取得不错的
效果。
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—92—陈宏伟等:盐肤木叶片总 RNA提取方法的比较研究
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尹明华，周 璐． KT对黄独带芽茎段生长发育和离体保存的影响［J］． 江苏农业科学，2012，40(5) :30 － 31．
KT对黄独带芽茎段生长发育和离体保存的影响
尹明华，周 璐
(上饶师范学院生命科学学院，江西上饶 334001)
摘要:以黄独试管苗为材料，采用植物组织培养和单因子试验的方法，对黄独带芽茎段生长发育和离体保存的影
响因子(KT)进行了分析。结果表明:1 ～ 2 mg /L 的 KT可以促进黄独带芽茎段的生长发育，而 4mg /L的 KT可以提高
黄独带芽茎段离体保存后的成活率。
关键词:黄独;带芽茎段;KT;生长发育;离体保存
中图分类号:S567． 904． 3 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)05 － 0030 － 02
收稿日期:2011 － 09 － 23
基金项目:江西省教育厅 2011 年度一般科技项目(编号:GJJ11610) ;
上饶师范学院植物学创新团队 2011 年校设招标课题(编号:
Z201101) ;上饶师范学院科研基金(编号:SR1013)。
作者简介:尹明华(1973—) ，女，江西永新人，硕士，讲师，主要从事生
物技术方面的研究。E － mail:yinminghua04@ 163． com。
黄独(Dioscorea bulbifera L．)隶属于薯蓣科薯蓣属基生翅
组，广布于东南亚、大洋洲、非洲和美洲［1］，在中国主要分布
于浙江、江西等地［2］。其肉质块茎可入药，性味苦、平，具有
清热解毒、凉血降火的功效［3］，临床上常用于治疗肿瘤和炎
症等［4］。关于黄独组织培养，国内尚无研究。近年来，本实
验室通过茎段培养建立了黄独的无菌培养体系，获得了黄独
的无菌苗，并对黄独试管苗的快繁及其生长发育进行了初步
研究［5］。离体保存具有占用空间少、易于交流、不受自然灾
害和病虫害侵袭等优点［6］，伴随离体保存种质资源策略的提
出，植物种质资源离体保存技术已经在许多植物材料上得到
成功应用。本研究将对影响黄独带芽茎段离体生长发育和离
体保存的影响因子(KT)进行重点分析，以期为黄独试管苗的
产业化生产和优质种苗离体保存库的建立提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 供试材料
黄独无菌试管苗由上饶师范学院生命科学学院植物组织
培养室提供。
1． 2 方法
将黄独带芽茎段(0． 5 ～ 1． 5 cm)接种至培养基上，进行
各项单因子试验。培养基分别设计为:(1)MS + KT 0 mg /L;
(2)MS + KT 1mg /L; (3)MS + KT 2 mg /L; (4)MS + KT
4 mg /L;(5)MS + KT 8 mg /L。以上培养基 pH 值均调为 5． 8
～ 6． 0，配制后的培养基均在高压灭菌锅中于 121 ℃、0． 1 MPa
灭菌 20 min。在超净工作台上接种。培养条件为:光照时间
14 h /d，光照强度 1 000 ～ 1 400 lx，温度(25 ± 1)℃，湿度
70% ～80%。在 1 ～ 60 d内每隔 1 个星期进行一次观察并记
录试管苗的新生芽数、株高、根数和根长等形态指标，并在 30
～ 180 d内每隔 30 d统计一次各处理组试管苗的成活率。成
活率 =(成活的带芽茎段数 /接种的总带芽茎段数)× 100%。
以上实验均重复 3 次，数据取平均值。
2 结果与分析
2． 1 KT对黄独试管苗生长发育的影响
从表 1 和图 1 可知，添加不同浓度的 KT 对黄独试管苗
的生长发育会产生显著的影响。不添加 KT，黄独试管苗的新
生芽少，植株矮，无根产生。而添加了 1 ～ 2 mg /L KT后，黄独
试管苗的新生芽显著增多，株高明显增加，根也增多增长。但
是 KT浓度超过 2 mg /L 时，则抑制黄独的生长发育。因此，
黄独试管苗生长发育最佳的培养基是 MS + KT 1 ～ 2 mg /L。
—03— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 5 期