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超高效液相色谱法同时测定柑橘属类药材中4种黄酮类成分



全 文 :神、睡眠可,饮食一般。大便如上述,小便正常,体质量无明
显增减。
5.2 临床用药分析 患者10年来一直服用番泻叶,番泻叶
中所含的番泻苷能抑制大肠对水分的吸收,使肠内容物急剧
增加,同时还能增加大肠的张力,引起腹痛、恶心、呕吐等,严
重者可诱发上消化道出血,表现为上腹疼痛、呕吐咖啡样液
体或出现柏油样便;对于长期服用的患者,因为过量所导致
的不良反应更严重。番泻叶中含有蒽醌类物质,这种物质对
肠道黏膜有刺激作用,时间长了会造成肠道黏膜病理性改
变,临床上称为结肠黑病变。结肠黑病变目前被认为是一种
癌前病变,可引起结肠癌。
5.3 临床药师建议 临床药师建议患者出院后,从饮食上
调整,吃麻油、多吃蔬菜、水果,早晚喝蜂蜜水,多运动,增加
肠蠕动,解决排便困难,不再服用番泻叶。
5.4 结果 患者听取了临床药师建议,不再服用番泻叶。
从饮食上调整便秘。一段时间后,经过回访患者,便秘情况
有所好转。
6 讨论
临床药师深入临床参与临床治疗、提供药学服务,要做
好临床医师的助手,要与患者或家属多沟通、交流,全方位了
解患者的情况,为临床医师诊断、抢救患者提供依据;临床药
师同时要提高自身的素质和专业技术水平,熟悉临床疾病的
药物治疗,按照卫生部抗菌药物临床指导原则,指导外科手
术正确预防性使用抗菌药物;临床药师应关注临床治疗药物
之间的相互作用,提醒临床医师避免药物拮抗作用,降低药
物不良反应,提高疗效。临床药师要及时对患者及家属进行
用药教育,提高患者用药的依从性,提高临床治愈率。
临床药师直接面向患者提供全程化药学技术服务是时
代的呼唤、患者的需要和社会发展的必然趋势,临床药师要
做到深入临床,必须要有过硬的本领和良好的执业道德,要
有处理好各种影响因素、建立彼此的信赖和协作关系的能
力,从而达到药师与医生、护士的密切合作,药师和患者的相
互信任[3]。
参考文献:
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[收稿日期]2012-03-20
[作者简介]李志辉,男,副主任药师,研究方向:医院药学,电话:13545177855,E-mail:lili820902@sina.com
超高效液相色谱法同时测定柑橘属类
药材中4种黄酮类成分
李志辉,肖晖,孟军华,陈永刚 (武汉市第三医院药学
部,湖北 武汉430060)
[摘要] 目的:建立柑橘属药材陈皮、广陈皮、青皮中橙皮
苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮、橘红素的 UP-
LC同时测定方法,为相关药材质量控制提供参考。方法:运
用UPLC法,甲醇-0.1%乙酸水为流动相,梯度洗脱,检测波
长330 nm,流速0.3 mL·min-1,柱温35℃的色谱条件进行测
定。结果:柑橘属药材中4个指标成分橙皮苷、川陈皮素、3,
5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮、橘红素在进样量19.22~
961.00,5.05~252.50,1.82~91.00,5.43~271.50 ng范围
内与峰面积线性关系良好(R2=0.999 7、R2=0.999 9、R2=
0.999 8、R2=0.999 8),平均加样回收率(n=9)分别为
97.69%、97.73%、97.72%、97.67%,RSD值均小于1.00%;
结论:该方法快速简便、准确可靠、灵敏度高、重复性好,可为
柑橘属药材的质量控制提供快速准确的检测方法。
[关键词] 陈皮;广陈皮;青皮;超高效液相色谱;含量测定;
质量分析
[中图分类号]R927.2  [文献标识码]A  [文章编号]1001-
5213(2012)20-1683-03
  陈皮Citri Reticulatae Pericarpium 为芸香科植物橘及
其栽培变种的干燥成熟果皮,陈皮药材分为“广陈皮”、“陈
皮”[1]。陈皮原植物主要为福橘、大红袍和温洲密柑,主产于
福建、四川、浙江等;广陈皮原植物为茶枝柑和行柑,产于广
东新会、四会[2]。青皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥
幼果或未成熟果实的果皮,自落的幼果,习称“个青皮”,未成
熟的果实纵剖成四瓣至基部,除尽瓤瓣,习称“四花青皮”[1]。
陈皮和广陈皮主要的有效成分有挥发油和黄酮、香豆
素、萜类等化合物[3-5](其中以橙皮苷为主),一般通过测定橙
皮苷的含量作为评价陈皮的质量指标[6]。但只通过测定橙
皮苷无法鉴别出陈皮和广陈皮。相关研究表明橙皮苷、川陈
皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素等黄酮类在这
几种药材中含量较高,是其主要活性成分[7-8]。2010年版中
国药典一部陈皮和青皮药材的质量标准收载了以橙皮苷为
指标成分的含量测定[1],分析时间长,且不能充分反映药材
内在质量的优劣。本文以橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',
4'-七甲氧基黄酮和橘红素为指标成分,建立陈皮、广陈皮和
青皮药材UPLC测定法,为陈皮、广陈皮和青皮的质量检测
提供快速简便地方法。
1 仪器与试剂
ACQUITY UPLC(美国 Waters公司,包括四元高压梯
度泵、真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、
Empower2色谱工作站),ACQUITY UPLC BEH C18色谱
柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)。
橙皮苷(批号 WKQ-111027,纯度≥98.5%)、川陈皮素
(批号 WKQ-100513,纯度≥98.5%)、3,5,6,7,8,3',4'-七甲
氧基黄酮(批号 WKQ-100726,纯度≥98.5%)和橘红素(批
号 WKQ-110902,纯度≥98.5%)对照品购自四川省维克奇
生物科技有限公司;甲醇为色谱纯,水为注射用水,其余试剂
为分析纯。陈皮、广陈皮、青皮药材分别购于四川、湖南、江
西、浙江、福建、广东、广西等省药材批发市场或大型连锁药
店,经武汉市第三医院吴金虎主任药师鉴定为相关正品,凭
证标本存于武汉市第三医院药学部。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 精密称取橙皮苷、川陈皮素、3,5,
·3861·中国医院药学杂志2012年第32卷第20期Chin Hosp Pharm J,2012Oct,Vol 32,No.20
6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素对照品24.02、6.31、
2.27、6.79 mg,分别转移至5 mL量瓶中,用甲醇溶解并定
容,得各对照品母液;分别精密吸取上述对照品母液2 mL至
10 mL量瓶中,甲醇定容,摇匀,制成每1 mL各含0.960 8、
0.252 4、0.090 8、0.271 6 mg的混合对照品储备液。
2.2 供试品溶液的制备 取药材粉末0.5 g,精密称定,加
入50 mL具塞锥形瓶中,加甲醇50 mL,称定,浸润30 min,超
声提取60 min(功率250 W,频率40 kHz),放冷至室温,用甲
醇补足重量,摇匀,0.22μm微孔滤膜滤过,取续滤液即为供
试品溶液。
2.3 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅
胶为填充剂;以甲醇为A相,以0.1%乙酸水溶液为B相,梯
度洗脱0~10 min,A:30%~90%,流速0.3 mL·min-1。柱
温35℃;检测波长330 nm。理论塔板数按川陈皮素色谱峰
计算不低于10 000。
图1 对照品及陈皮、广陈皮、青皮样品UPLC色谱图
1-橙皮苷;2-川陈皮素;3-3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮4橘红素
Fig 1 UPLC chromatograms of standard and samples
1-hesperidin;2-nobiletin;3-seven methoxy flavanone;4-tangeratin
2.4 标准曲线的制备 分别精密吸取混合对照品储备液
1 mL至2,5,10,25,50 mL量瓶中并用甲醇定容,得到一系列
浓度的混合对照品溶液,0.22μm微孔滤膜过滤后,依前述色
谱条件,进样1.0μL,以各对照品的进样量(ng)为横坐标,峰
面积为纵坐标,绘制标准曲线,得到4个成分的线性回归方
程及线性范围(见表1)。
表1 4种成分的线性回归方程及线性范围
Tab 1 The linear regression equation and linear range of 4
components
成分 线性回归方程 线性范围/ng  R2
橙皮苷 Y=1 428.78 X-18 529.29  19.22~961.00 0.999 7
川陈皮素 Y=11 865.01 X-7 546.74  5.05~252.50  0.999 9
3,5,6,7,8,3',4'-七
甲氧基黄酮
Y=11 959.74X-208.85  1.82~91.00 0.999 8
橘红素 Y=13 896.60 X-9 156.33  5.43~271.50  0.999 8
2.5 精密度试验 准确吸取同一供试品溶液,连续等体积
进样 6 次,连 续 分 析3 d;求 得 橙 皮 苷、川 陈 皮 素、
3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素峰面积的日内 RSD
分别为0.62%,0.87%,0.95%,0.39%,日间 RSD 分别为
0.65%,0.68%,0.97%,0.73%。
2.6 重复性试验 取同一样品(广州致信陈皮)6份,精密称
定,按“2.2”项下操作,在上述色谱条件下进行进样测定,橙
皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素含
量的RSD分别为0.73%,0.54%,0.87%,0.83%,表明试验
重复性良好。
2.7 稳定性试验 准确吸取同一供试品溶液,分别在制备
后0,2,4,8,12,24,36,48 h进样1.0μL分析,橙皮苷、川陈皮
素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素峰面积的 RSD
分别为0.94%,0.77%,0.81%,0.93%。结果表明样品在制
备后48 h内稳定。
2.8 加样回收率试验 取已知橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,
8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素含量的广州致信陈皮药材粉
末0.25 g,精密称定9份,分别加入高、中、低3个浓度(分别
为已知含量的80%,100%,120% )的橙皮苷、川陈皮素、
3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素的对照品母液,按供
试品溶液制备项下方法操作,进样测定,结果橙皮苷、川陈皮
素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮、橘红素的平均回收率为/
97.69%,97.73%,97.72%,97.67%,RSD 分别为0.57%,
1.00%,1.00%,0.18%。
2.9 样品含量测定 按照本方法的测定条件,分别测定市
售各品种各批次药材样品,每个批次平行3份,每份样品平
行测定2次,以外标法计算样品中橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,
7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素的含量,结果见表2、表3、
表4。
表2 10批次陈皮中4种指标成分质量分数(mg·g-1)
Tab 2  Results of determination of Citrus Reticulatae
Pericar-pium(mg·g-1)
样品来源 橙皮苷 川陈皮素
3,5,6,7,8,3',
4'-七甲氧基黄酮
橘红素
广东致信 47.974 8  9.231 4  1.156 4  5.362 5
广州清平 42.546 1  8.154 7  1.014 2  4.962 5
广西南宁 38.524 3  6.549 2  0.841 2  4.412 3
广西玉林 36.214 8  6.487 1  0.774 9  3.331 6
四川成都 56.415 6  11.614 7  0.997 6  6.371 6
湖南高桥 35.624 5  6.532 1  0.796 1  2.895 5
河北安国 40.561 3  7.849 2  0.826 3  3.748 8
江西樟树 49.752 3  10.865 2  0.914 3  6.604 2
浙江金华 53.214 5  12.841 3  1.268 5  7.714 6
福建福州 52.237 9  12.613 4  1.043 9  5.814 7
表3 10批次广陈皮中4种指标成分质量分数(mg·g-1)
Tab 3  Results of determination of Citrus Reticulate
Chachiensis(mg·g-1)
样品来源 橙皮苷 川陈皮素
3,5,6,7,8,3',
4'-七甲氧基黄酮
橘红素
广东致信 53.741 5  10.321 5  1.017 6  6.374 7
广州清平 59.471 6  10.841 6  0.972 6  7.846 1
广西南宁 42.754 6  7.771 5  0.716 6  7.614 3
广西玉林 43.614 5  12.116 2  1.130 2  9.488 6
四川成都 50.991 4  8.144 3  0.813 2  7.622 6
湖南高桥 46.169 2  7.454 6  0.714 3  8.612 0
河北安国 45.136 9  7.589 7  0.746 7  7.894 4
江西樟树 40.354 5  6.882 2  0.611 3  6.743 3
浙江金华 39.214 3  9.333 1  0.674 7  8.554 1
福建福州 50.662 9  11.512 0  1.314 2  10.477 5
3 讨论
本试验建立了UPLC法测定柑橘属药材陈皮、广陈皮、
青皮中橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮和
橘红素等4种黄酮类成分的含量方法,10 min内即可完成测
·4861· 中国医院药学杂志2012年第32卷第20期Chin Hosp Pharm J,2012Oct,Vol 32,No.20
表4 10批次青皮中4种指标成分质量分数(mg·g-1)
Tab 4 Results of determination of Pericarpium Citri Reti-
vulatae Viride(mg·g-1)
样品来源 橙皮苷 川陈皮素
3,5,6,7,8,3',
4'-七甲氧基黄酮
橘红素
广东致信 43.196 4  3.330 4  0.372 3  2.540 6
广州清平 39.054 6  4.154 7  0.314 2  1.962 5
广西南宁 45.624 3  2.549 2  0.241 2  2.412 3
广西玉林 47.214 8  2.487 1  0.404 9  2.331 6
四川成都 56.415 6  4.614 7  0.537 6  3.371 6
湖南高桥 35.624 5  2.532 1  0.216 1  2.495 5
河北安国 37.021 5  3.077 6  0.257 3  2.220 9
江西樟树 44.752 3  3.865 2  0.244 3  2.604 2
浙江金华 46.214 5  3.441 3  0.668 5  2.714 6
福建福州 35.237 9  2.613 4  0.343 9  2.114 7
试,与 HPLC法比较,分离效果和效率大幅度提高,可准确测
定柑橘属药材中4种成分含量。本试验方法快速简便,为大
批量药材检测工作带来极大的方便。
2010年版中国药典仅采用橙皮苷含量为指标控制柑橘
属药材质量,无特征性,信息不够全面,不能充分反映柑橘属
药材内在质量的好坏。本试验从现有柑橘属药材药理成分
研究基础出发,以其功效性成分橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,
8,3',4'-七甲氧基黄酮和橘红素的总含量为考察指标,完善柑
橘属药材内在质量控制方法。
从试验结果来看,柑橘属中4个指标性成分的总和以广
陈皮最大,陈皮次之,青皮最小,广陈皮中橙皮苷与其余3种
多甲氧基黄酮均大于陈皮与青皮,进一步验证了广陈皮的道
地性。
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[收稿日期]2012-04-22
[作者简介]姜永生,男,博士,主治医师,研究方向:恶性肿瘤的综合治疗,电话:15327434928 [通讯作者]王芙蓉,女,博士,副教授,电话:
18627126298,E-mail:1109872228@qq.com
452例恶性肿瘤患者贫血状况及影响
因素分析
姜永生1,王芙蓉2 (华中科技大学同济医学院附属同济
医院,1.肿瘤中心,2.神经科,湖北 武汉430030)
[摘要] 目的:了解并分析恶性肿瘤患者贫血状况及影响因
素。方法:对收集到的452例恶性肿瘤患者的贫血状况进行
统计分析。结果:452例恶性肿瘤患者的贫血发生率为
71.25%,中重度贫血中中老年患者占77.12%,不同肿瘤的
贫血发生率亦有差异,贫血患者中,接受手术治疗的占
61.36%,接受化疗的占89.66%,接受放疗的占43.49%。结
论:恶性肿瘤患者贫血发生率高,妇科肿瘤、肺癌、淋巴瘤、肾
癌、消化道肿瘤和乳腺癌尤为明显;中老年患者更易发生贫
血;在恶性肿瘤常见3种治疗手段中,化疗药物对贫血的影
响最为显著,多种治疗手段相加增加了贫血的发生率及其严
重程度。
[关键词] 恶性肿瘤;贫血;化疗
[中图分类号]R730.5  [文献标识码]A  [文章编号]1001-
5213(2012)20-1685-03
  贫血是恶性肿瘤患者的常见合并症,据文献报道,大约
50%的恶性肿瘤患者发生贫血,而在接受手术、放疗或化疗
的患者中,这一比例还要提高[1]。为更好了解恶性肿瘤患者
的贫血发生率、贫血与各种肿瘤疾病的关系、各种治疗手段
对贫血发生的影响、贫血对肿瘤患者生活质量的影响等,特
对我中心452例恶性肿瘤患者的贫血状况进行分析。
1 资料与方法
1.1 资料来源 收集并分析我院肿瘤中心自2011年10月
-2012年4月共452例恶性肿瘤患者的贫血状况,所有患者
均有组织病理学诊断。其中,男206例,女246例。年龄6
~79岁,中位年龄54.5岁。肺癌123例,淋巴瘤53例,妇科
肿瘤49例,乳腺癌44例,消化道肿瘤43例,原发灶不明转
移性肿瘤28例,纵膈肿瘤25例,肾癌17例,神经系统肿瘤
17例,肉瘤16例,其他肿瘤37例。
1.2 方法 通过回顾性的调查统计方法,采用统一调查表
填写:(1)一般情况:性别、年龄、诊断等;(2)贫血情况:贫血
程度、症状及持续时间等;(3)治疗情况:手术、放疗、化疗药
物等。分析性别、年龄、肿瘤发生部位、治疗方法对肿瘤贫血
的影响。所有数据分析均采用SPSS16.0统计软件包进行处
理。推断两个或多个总体率或构成比之间有无差异采用χ

检验。
2 结果
2.1 贫血程度及发生率 贫血诊断标准:根据陆再英等主
编的《内科学》[2]第7版,成年男性 Hb<120 g·L-1,成年女
性 Hb<110 g·L-1。贫血程度划分标准:轻度贫血 Hb>90
g·L-1,中度贫血 Hb 60~90 g·L-1,重度贫血 Hb≤60 g·
L-1。452例恶性肿瘤患者的贫血发生率为71.25%,其中轻
度贫血61.32%,中度贫血36.02%,重度贫血2.66%。从性
别分布来看,女性占54.36%,男性占45.64%。从年龄分布
来看,10岁以下患者占1.87%,10~20岁占5.60%,20~30
岁占3.87%,30~40岁占7.91%,40~50岁占37.84%,50
~60岁占16.92%,60岁以上占25.99%,各年龄段间差异显
著(P<0.05)。40岁以上的中老年患者更容易发生贫血,占
所有恶性肿瘤患者的80.75%,并且贫血的严重程度更高,占
中重度贫血的77.12%。结果见表1。
·5861·中国医院药学杂志2012年第32卷第20期Chin Hosp Pharm J,2012Oct,Vol 32,No.20