全 文 ：广东药学院学报
, ,
茶枝柑皮提取物中黄酮类成分的含量测定
甘伟发 ,黄庆华 ,吉国辉
广东药学院 药科学院 ,广东
定力
广州
摘要 目的 建立茶枝柑皮提取物中黄酮类成分的高效液相色谱含量测定方法 。方法 采用
, , 林 色谱柱 ,检测波长为 和 ,以乙睛一 体积分数 乙
酸水溶液为流动相梯度洗脱 ,柱温为 ℃。结果 橙皮昔 、川陈皮素和橘皮素分别在 一 协岁
、 、 · 一 · 林梦 和 一 林 范围内呈良
好线性关系 。回收率分别为 、 和 , 分别为 、 和 。结论 本方法
简便快捷 、重复性好 、准确度高 ,为茶枝柑皮提取物质量标准的建立提供了有力依据 。
关键词 茶枝柑皮提取物 橙皮普 陈皮素 橘皮素 含量测定
中图分类号 文献标志码 一
文章编号 一 一 一
“ `
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伴, 二。 , , 、 人 ,
, `
,
, 林
℃
一 林岁 二 , , 巧
一 林扩 , 叮 ·
一 林留 二 , 、, 卿
, 哪
`
哪 ` 〕 一
茶枝柑皮是茶枝柑 ` 分 ,多甲氧基黄酮具有抗癌等作用 一 有文献报道
的干燥成熟果皮 ,是广东道地药材 “广陈皮 ”的来源 , 茶枝柑皮提取物对 一半乳糖致 小鼠衰老模型
也是国家卫生部公布的药食两用品种之一 经多抗 有明显抗氧化作用 ,能使血 、肝和脑的 含量明
氧化指标响应面法优化提取工艺所得的茶枝柑皮提 显降低及 活力提高 ,使血液中的 一 活力
取物 ,含有黄酮类成分和果胶多糖 ` 研究表明二氢 明显提高 李烧玲 “,等人通过血清药物化学研究 ,发
黄酮类如橙皮昔具有抗氧化 、抗病毒和抑菌抗炎作 现多甲氧基黄酮川陈皮素和橘皮素均为原型人血成
用 一 川陈皮素 、橘皮素同属于多甲氧基黄酮类成 分 本文通过同时测定茶枝柑皮提取物中橙皮昔 、川
`广东药学院 级药学本科生
收稿日期 一 一
基金项目 珠海市科技工贸和信息化局企业技术创新项目 珠经贸字 号
作者简介 甘伟发 一 ,男 ,硕士生 , 从事保健食品开发与研究 , 鱿 通信作者 黄庆华 一 , 教
授 ,从事中药保健食品开发与质量控制 , ·
网络出版时间 一 一 网络出版地址 “
274 广东药学院学报 第 卷
陈皮素和橘皮素的含量 ,为茶枝柑皮提取物质量控
制及开发利用提供重要依据
仪器与试药
仪 器
高效液相色谱仪 ,包括 一 双泵 、
型二极管阵列检测器 一 、
控制器 、 色谱工作站 、六通定量
阀 、手动进样器 型十万分之一天平 日
本岛津公司 、 型万分之一电子天平 日本岛
津公司 、 一 超纯水纯化系统 密理博公司
试药
批茶枝柑皮分别于 年 月 、 年
月采自广东翁源坝仔镇溪水村 ,批号分别为 一 、
一 ,均由广州中医药大学中药鉴定教研室张丹
雁教授鉴定为茶枝柑 `
参照文献 方法 ,分别 自制成茶枝柑皮提取物样品
、样品 橙皮昔对照品 批号 一 ,中国
药品生物制品检定所 川陈皮素 、橘皮素对照品 批
号分别为 和 ,上海华壹生物科技
有限公司 ,质量分数大于 乙睛为色谱纯 水
为超纯水 ,其余试剂均为分析纯
分别精密称取橙皮昔 、川陈皮素和橘皮素对照
品适量 ,分别置于 量瓶中 ,加甲醇溶解并定容
至刻度 ,摇匀 ,分别配制成橙皮昔 、川陈皮素和橘皮
素质量浓度分别为 、 、 酬 的
对照品储备液 分别精密吸取各对照品储备液
,置于 量瓶中 ,加甲醇稀释定容 ,摇匀制成
橙皮昔 、川陈皮素和橘皮素质量浓度分别为 、
、 林岁 的混合对照品溶液
供试品溶液的制备
精密称取茶枝柑皮提取物约 ,精密称定 ,
置 量瓶中 ,加人甲醇溶解定容 摇匀 ,静置 ,用
协 微孔滤膜过滤 ,取续滤液 ,即得
系统适应性试验
分别精密吸取 , ”项下混合对照品溶液 、供
试品溶液 批号 一 按 “ ”项下色谱条件进
样分析 结果供试品溶液中橙皮什 、川陈皮素和橘皮
素均得到较好分离 ,被测组分与相邻组分分离度均
大于 理论塔板数分别按橙皮昔 、川陈皮素和橘
皮素计均不低于 见图
︸︶亡, 」一︸门气
卜乙三
方法与结果 七
色谱条件
色谱柱 柱
, 协。 流动相 为乙睛 , 为 乙酸溶液 ,
梯度洗脱条件 一 , 一
, 弓 一 ,
一 , 卜 一 , 、
一 , 一 ,
流速 紫外检测波长 一 ,
一 , 一 , 柱
温 ℃ 进样量 林
溶液的制备
对照品溶液的制备
才
橙皮普 川陈皮素 橘皮素 〕
图 对照品 、供试品 溶液的 色谱图
,` , ,
标准曲线的绘制
分别精密吸取混合对照品溶液 、 、 、
、 、 、 ,置于 量瓶中 ,加甲醇
稀释定容 ,摇匀 。按 “ ”项下色谱条件测定 ,以各
成分质量浓度 为横坐标 ,色谱峰面积 为纵坐
标作图 ,进行线性回归 。 种待测成分的回归方程 、
线性范围和相关系数见表 。
表 橙皮背 、川陈皮素和橘皮素的标准曲线数据表
, 〕 一
成分 问归方程 线性范围 卜 · 一`
橙皮昔
陈皮素
橘皮素
几 户 火
户
一
一
一
第 期 甘伟发 ,等 茶枝柑皮提取物中黄酮类成分的含量测定
精密度试验 制备供试品溶液 ,共 份 ,按 “ ”项下色谱条件分
精密吸取混合对照品溶液 ,按 “ ”项下色谱 析测定 ,分别记录橙皮昔 、川陈皮素和橘皮素的色谱
条件连续进样 次 ,结果橙皮昔 、川陈皮素及橘皮素 峰面积 ,计算其质量分数 。结果橙皮昔 、川陈皮素 、
峰面积的 值分别为 、 和 橘皮素的平均质量分数分别为 、 、
,表明仪器的精密度良好 。 扩 , 值分别为 、 、 。结果表
稳定性试验 明该方法重复性良好 。
取茶枝柑皮提取物样品 适量 ,精密称定 。按 加样回收率试验
“ ”项下方法制备供试品溶液 ,按 “ ”项下色 精密称取 份已知质量分数的茶枝柑皮提取物
谱条件 ,分别在 、 、 、 、 、 、 进样分析 ,分别 样品 ,每份约 ,精密称定 。分别精密加入质
记录橙皮昔 、川陈皮素和橘皮素峰面积并计算其 量浓度为 岁 的橙皮昔 、 梦
值 。结果 种成分峰面积 值分别为 、 的川陈皮素和 岁 的橘皮素 ,按
和 ,表明供试品溶液在 内稳定 。 “ ”项下方法制备供试品溶液 ,按 “ ”项下色
重复性试验 谱条件进样分析 ,记录色谱图并计算加样回收率 。
取茶枝柑皮提取物样品 ,按 “ ”项下方法
表 橙皮营、川陈皮素和橘皮素的加样回收率试验结果
卿 ` ,
成分 序号 样品中的量 加人量 测得量 回收率 平均回收率
内`、勺二勺乙,、…勺一,︸乙
橙皮背
样品量
︺八
陈皮素
橘皮素
闷
样品测定
分别取茶枝柑皮提取物样品 和 各 份 ,精
密称定 ,按 “ ”项下方法制备供试品溶液 ,按
“ ”项下色谱条件分析测定 ,分别记录橙皮昔 、川
陈皮素和橘皮素的色谱峰面积 ,计算其质量分数 。
结果样品 中橙皮昔 、川陈皮素和橘皮素的质量分
数分别为 、 、 扩 , 值分别为
、 、 ,样品 中橙皮昔 、川陈皮素和
橘皮素的质量分数分别为 、 、 岁
, 值分别为 、 、 。
讨论
黄酮类成分具有特定的紫外吸收峰 ,橙皮昔等
二氢黄酮类和川陈皮素 、橘皮素等多甲氧基黄酮类
成分的最大吸收波长分别在 和 附
近 〔 。因此本试验采用二极管阵列检测器 ,选择
2 7 6 广东药学院学报 第 卷
和 作为检测波长 ,提高方法灵敏度和准
确性 ,定量测定茶枝柑皮中橙皮昔 、川陈皮素和橘皮
素 种组分 。
试验 中考 察 了 甲醇一水 、乙睛一水困 和 乙睛
体积分数 乙酸等流动相体系对样品中各组
分分离的影响 。橙皮昔具有酚经基结构而呈弱酸
性 ,乙睛习 体积分数 乙酸能抑制其电离 ,改善
样品在甲醇一水和乙睛一水系统中出现的基线漂移 、
色谱峰拖尾和分离度低的状况 ,所得色谱峰峰形对
称 ,待测组分与相邻色谱峰具有良好的分离效果 ,可
达到定量测定的要求 。
橙皮昔 、川陈皮素 、橘皮素等黄酮类成分一般易
溶于甲醇等强极性溶剂 ,多糖类成分则难溶于醇 。
茶枝柑皮提取物供试品以甲醇作为提取溶剂 ,待测
组分提取效率高 ,还可除去多糖等难溶杂质 ,操作快
捷简便 、重复性好 。
文献报道橙皮普在体内水解成昔元后与葡萄糖
醛酸结合进人血浆 〔 ,作为原型入血成分的川陈皮
素和橘皮素具有抑制移植瘤生长 、与化疗药物的协
同及抗肿瘤转移活性 “一”〕。因此本试验对茶枝柑
皮提取物中橙皮昔 、川陈皮素和橘皮素多指标开展
测定 ,更能准确反映茶枝柑皮提取物的质量 。该方
法供试品溶液制备简便 ,重复性 、精密度 、准确度高 ,
为茶枝柑皮提取物质量标准的建立提供有力依据 。
参考文献
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作用研究 〔 」中草药 , , 叫 一
川 于宏伟 ,韩卫荣 ,周二鹏 ,等 橘皮素的提取及应用研究
进展 〕 江苏农业科学 , , 一
责任编辑 刘晓涵
维生素 缺乏可致学龄儿童胃肠道感染及耳感染
维生素 缺乏 在全世界儿童中普遍存在 ,甚至在之前认为很少发生这种情况的热带地区也是如此 。
比如在拉美国家中 ,哥斯达黎加儿童和青少年中维生素 缺乏的发生率是 ,在哥伦比亚的波哥大 ,这一数字
是 ,而在巴西的圣保罗则高达 。之前业界公认维生素 缺乏会影响骨的代谢和体内钙的平衡 ,现在人
们发现维生素 缺乏还会影响机体的免疫反应 ,增加发生感染的风险 。
研究人员对哥伦比亚波哥大地区随机选取的平均年龄 土 岁的 名学龄儿童进行研究 ,对血清
轻基维生素 浓度进行检测 ,为期 个学年 。结果发现 , 的研究对象存在维生素 缺乏 ,另有 存在维生
素 不足 。维生素 缺乏可导致腹泻 伴有呕吐 、耳朵疼痛 耳分泌物增加 伴有发热 发病率上升 。这一结果
显示 ,维生素 缺乏与学龄儿童胃肠道感染及耳部感染的发病率增加有关 。但纠正维生素 缺乏是否能降低这
类感染的发病率仍有待进一步研究 。
仁来源 , , 一 , 一 一 夏勺明编译 」