全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2010 年
收稿日期：2009－08－07
作者简介：周红菊（1981－），女，河北衡水人，助教，硕士，从事药用植物的组织培养研究，（电话）15130822569（电子信箱）zhouhongjv＠126．com。
第 49 卷第 4 期
2010 年 4 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 49 No.4
Apr．，2010
欧亚旋覆花 （Inula britannica L．） 为菊科
（Compositae）旋覆花属（Inula Linn．）多年生草本或
亚灌木植物，分布于欧洲、非洲和亚洲，主产地为地
中海沿岸。 旋覆花味苦、辛、咸、微温，入肺、肝、肾
经，传统主治风寒咳嗽、痰饮硬结、胸膈痞满、呕吐
噫气等［1］。 现代药理学研究表明，其还具有抗菌 ［2］、
抗氧化［3］及护肝［4］等功效。 《中国药典》规定的旋覆
花干品为采自日本旋覆花和欧亚旋覆花的干燥头
状花序。 最新的药理学研究表明，欧亚旋覆花中含
有的乙酰大花旋覆花内酯具有对外周和中枢神经
的镇痛作用。 国外有专利报道，乙酰大花旋覆花内
酯具有和紫杉醇相似或更强的抗癌活性，可作为一
种有效的天然化学防癌剂和治疗药物。 持续地从野
生欧亚旋覆花中提取有效活性成分，势必会破坏生
物多样性和生态系统的平衡。 而人工种植存在品质
退化、农药污染、占用大量耕地等问题。 目前对旋覆
花开展的研究主要集中在其活性成分的药理作用、
提取和结构鉴定等方面，关于其植物组织培养方面
的研究报道较少。 噻重氮苯基脲（Thidiazuron，TDZ）
是人工合成的苯基脲衍生物之一， 化学名为 N－苯
基－N’－1，2，3－噻二唑，是一种新型的植物生长调节
剂，具有强烈的细胞活性，其活性超过玉米素和 6－
BA 几十倍至几百倍，TDZ 可诱导离体培养材料的
多种途径形态发生，具有细胞分裂素的作用，其在
低浓度下即可表现出较强的促进细胞增殖作用 ［5］。
它能诱导外植体从愈伤组织形成到体细胞胚胎发
生的一系列过程，具有生长素和细胞分裂素双重作
用的特殊功能［6］。 试验研究了不同浓度的 TDZ对欧
亚旋覆花叶片、根愈伤组织诱导的影响，以期为欧
亚旋覆花通过组织培养途径规模生产提供技术可能。
1 材料与方法
1．1 材料
欧亚旋覆花来源于衡水学院生命科学系培养
于加有活性碳的 MS 培养基上的无菌苗 ；6－BA、
TDZ、NAA 等植物激素以及蔗糖、 琼脂等均为生命
TDZ对欧亚旋覆花愈伤组织诱导的影响研究
周红菊
（衡水学院生命科学系，河北 衡水 053000）
摘要：以欧亚旋覆花（Inula britannica L．）无菌苗为材料，研究了不同浓度的噻重氮苯基脲（Thidiazuron，
TDZ）对叶片、根愈伤组织诱导的影响。 结果显示，在不添加 TDZ 时，叶片的愈伤组织诱导率为 82．9％，且
诱导出的愈伤组织生长情况较好。 当 TDZ 的浓度为 0．05 mg ／ L 时， 欧亚旋覆花根的出愈率最高，达
100％，且愈伤组织生长佳、有光泽。
关键词：欧亚旋覆花；噻重氮苯基脲；愈伤组织诱导
中图分类号：Q949．763．5；S567．23＋9；Q943．1 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2010）04－0798-02
Influence of Different Concentrations of TDZ on Callus Induction of Inula britannica
ZHOU Hong－jü
（Department of Life Science， Hengshui University， Hengshui 053000， Hebei， China）
Abstract： The effect of different concentrations of Thidiazuron （TDZ） on callus induction of the leaves and roots of Inula
britannica was studied using sterile seedling as explants． The results showed that the leaves on MS without TDZ had a high-
er induction rate， and the calli grew better． The medium containing TDZ 0．05 mg ／ L was proved to be the most effective for
root inducing callus and the induction rate was 100％， the callis grew better and had glossy．
Key words： Inula britannica L．； Thidiazuron； callus induction
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2010.04.030
第 4 期
科学系实验室储备的常用品，活性炭为市售。
1．2 方法
切取欧亚旋覆花无菌苗的根和叶为外植体，接
种到附加不同浓度的 TDZ（0、0．05、0．10、0．50、1．00
mg ／ L）＋6－BA 0．50 mg ／ L＋NAA 1．00 mg ／ L＋MS 培养
基上，每个处理接种 35 个外植体，黑暗培养，诱导
温度为 23℃±1℃，40 d 后统计愈伤组织诱导率，观
察愈伤组织生长状况，研究不同浓度的 TDZ 对欧亚
旋覆花无菌苗愈伤组织的诱导情况。
2 结果与分析
2．1 TDZ对叶片愈伤组织诱导的影响
不同浓度的 TDZ 对欧亚旋覆花无菌苗叶片愈
伤组织诱导的影响结果见表 1，从表 1 中发现，在所
选用的几种浓度中，愈伤组织诱导率及愈伤组织的
生长情况均随着 TDZ 浓度的增加而呈下降的趋势。
在不添加 TDZ 时 ， 叶片的愈伤组织诱导率为
82．9％，且诱导出的愈伤组织生长好，黄绿色，有光
泽。 TDZ 浓度在 1．00 mg ／ L 时，出愈率仅为 17．1％，
愈伤组织生长状况最差，仅有极少量的愈伤组织颗
粒形成。 TDZ 浓度在 0．05 mg ／ L 时，出芽个数最多。
从愈伤组织诱导后的生长情况来看，TDZ 在 0～1．00
mg ／ L 浓度范围内，浓度越高，愈伤组织的生长情况
越差，即欧亚旋覆花无菌苗叶片愈伤组织的诱导和
生长状况随 TDZ浓度的增加呈下降的趋势。
2．2 TDZ对根愈伤组织诱导的影响
不同浓度的 TDZ 对欧亚旋覆花无菌苗根愈伤
组织诱导的影响结果见表 2，从表 2 可见，TDZ 浓度
为 0．05 mg ／ L 时， 欧亚旋覆花根的出愈率最高，为
100％， 其他浓度的 TDZ 均导致愈伤组织诱导率降
低。 从愈伤组织生长情况来看，TDZ 浓度为 0．05
mg ／ L 时，愈伤组织具有很好的光泽，且生长状况最
好；浓度为 0．10 mg ／ L 时，生成愈伤组织的量较少，
且无光泽。 TDZ浓度达 1．00 mg/L时，愈伤组织的颜
色呈浅褐色，质地紧实，且有芽原基形成。 结合出愈
率及愈伤组织生长情况来看，TDZ 各浓度对欧亚旋
覆花无菌苗根诱导愈伤组织情况的综合排名为
0．05 mg ／ L＞0．10 mg ／ L＞0．50 mg ／ L＞1．00 mg ／ L。
3 讨论
在大多数的植物组织培养研究中， 通常使用
2，4－D诱导愈伤组织的产生， 使用浓度为 10－7～10－5
mol ／ L［7］。 但是 2，4－D 属中等毒性的植物生长调节
剂，有一定的致癌作用及残留效应，大鼠急性口服
的 LD50为 375 mg ／ kg，因此，在药用植物的组织培养
过程中应慎重使用。 相比之下，TDZ 使用浓度通常
为 10－9～10－5mol ／ L， 大鼠急性口服的 LD50 为4 000
mg ／ kg且无致畸、致癌、致突变作用［8］，安全性较高。
从欧亚旋覆花叶片的愈伤组织诱导来看，愈伤
组织诱导率及愈伤组织诱导出后的生长情况，均随
着 TDZ浓度的增加而呈下降的趋势；从根的愈伤组
织诱导来看，TDZ 浓度为 0．05 mg ／ L 时，外植体全部
出愈，且愈伤组织诱导出后的生长情况最好，愈伤
组织的颜色呈浅黄绿色，带有紫红色斑点，具有很
好的光泽，质地疏松。 其原因可能是在欧亚旋覆花
无菌苗叶片愈伤组织的诱导过程中，低浓度的 TDZ
有利于愈伤组织的诱导，高浓度的 TDZ 会抑制愈伤
组织的生成。 根和叶片相比，无菌苗的根更易于诱
导愈伤组织。
参考文献：
［1］ 中国医学科学院药物研究所．中药志［M］． 北京： 人民卫生出版
社，1994．
［2］ BENSKY D，GAMBLE A．Chinese herbal medicine： Materia me-
dia ［M］．Revised Edition Eastland Press，Seattle，1993．193－194．
［3］ PARK E J，KIM Y，KIM J． Acylated flavonol glycolsides from
the flower of Inula britannica［J］． J Nat Prod，2000，63：34－36．
［4］ SONG Q H， KOBAYASHI T， IIJIMA K， et al． Hepatoprotec-
tive effects of Inula britannica ［J］． Phytochem Res，2000，14：
180－186．
［5］ 王关林，方宏筠，那 杰．高活性细胞激动素 TDZ 在植物组织培
养中的应用［J］．植物学通报，1997，14（3）：47－53．
［6］ 徐晓峰，黄学林．TDZ：一种有效的植物生长调节剂［J］． 植物学
通报，2003（2）：227－237．
［7］ 贺 红，潘瑞炽，何亚文，等 ． Factors affecting organogenesis of
Citrus microcarpa Bunge ［J］． 热带亚热带植物学报 ，1997，5
（3）：53－56．
［8］ 朱惠香，张宗俭，陈虎保．常用植物生长调节剂应用指南［M］． 北
京：化学工业出版社， 2002．
表 1 TDZ 对欧亚旋覆花叶片愈伤组织诱导的影响
TDZ
mg/L
0
0.05
0.10
0.50
1.00
接种外植体
块
35
35
35
35
35
愈伤组织
块
29
18
15
13
6
出愈率
%
82.9
51.4
42.9
37.1
17.1
愈伤组织
颜色
黄绿色
黄绿色
黄绿色
黄绿色
黄绿色
生长
状况
++++
++++
++++
++
+
注：+表示生长差；++表示生长一般；+++表示生长较好；++++表
示生长好，下同。
表 2 TDZ 对欧亚旋覆花根愈伤组织诱导的影响
TDZ
mg/L
0
0.05
0.10
0.50
1.00
接种外植体
块
35
35
35
35
35
愈伤组织
块
28
35
30
20
22
出愈率
%
80.0
100
85.7
57.1
62.9
愈伤组织
颜色
浅黄绿色
浅黄绿色，带有紫红色斑点
浅黄绿色
浅黄绿色
浅褐色
生长
状况
+++++
+++++
++
++++
++
注：+++++表示生长最好。
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