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同
碳
源
对
欧
亚
旋
覆
花
愈
伤
组
织
诱
导
的
影
响
摘要： 本试验以采自张家口的欧亚旋覆花种
子为材料， 研究了不同种类的碳源对叶片、 根愈
伤组织诱导的影响， 结果显示： 在蔗糖、 麦芽
糖、 葡萄糖这三种碳源中， 比较适合欧亚旋覆花
愈伤组织诱导的是蔗糖。
关键词： 碳源； 欧亚旋覆花； 愈伤组织诱导
欧亚旋覆花是菊科多年生草本植物，为一种
中草药，含多种生物活性成分，据报道：其活性
成分在原植物中的含量极低且不稳定，产自山西
的欧亚旋覆花中乙酰大花旋覆花内酯的含量为
0.58%，而产于河北的则为 0.34%[1]。单纯依靠野
生采集进行分离提取的方法，难以满足进一步的
科研及临床需要。采用植物组织培养的方法使得
该类活性成分的获取在人为可控及可持续生产的
条件下进行，具有广阔的应用前景。
植物组织培养中被培养的外植体，光合作用
的能力较低，需要在培养基中添加一些碳水化合
物作为生长发育的能源，除此之外，碳源还具有
维持一定渗透压的作用。碳源的种类不仅对愈伤
组织的生长状况有极其重要的作用，而且对次生
代谢物的积累也有很大的影响[2 ~ 3]。本实验研究
了不同碳源对愈伤组织诱导的影响，为欧亚旋覆
花愈伤组织的培养，提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 植物材料。产自野生欧亚旋覆花药材干燥
花序。
1.2 试验方法
1.2.1 欧亚旋覆花无菌组培苗的获取。取野生采
集的旋覆花种子(产自张家口)，自来水泡种 18 ~
24 h后，用流水反复冲洗干净，50℃ ~ 60℃的
温水浸泡 20 ~ 30 min 后，在超净工作台上用
75%(V/V)酒精浸泡 1 ~ 2 min，无菌水充分漂洗，
然后用 0.1%(W/V)升汞溶液浸泡 4 ~ 5 min，无菌
水充分漂洗 5次，接种于灭菌后含有脱脂棉的三角瓶中。种
子萌发后选取无污染的幼苗，接种于MS培养基上，生长数
天后，继代于加有活性炭的MS培养基上。
1.2.2 愈伤组织的诱导。切取上述条件下培养的欧亚旋覆花
无菌苗的根和叶为外植体，接种于含不同碳源的培养基上
(MS + 1.0 mg/L NAA + 1.0 mg/L 6 - BA)。每个处理接种 35
个外植体，每个处理重复 3次。诱导温度为 23±1℃，黑
暗培养，40d后统计愈伤组织诱导率和观察愈伤组织生长状况。
2 试验结果
本试验在添加不同种类的碳源(蔗糖，葡萄糖，麦芽糖)
30 g/L的MS培养基(附加 NAA 1 mg/L，6 - BA 3 mg/L)上进
行无菌苗的根、叶片和黄化苗叶片愈伤组织的诱导，研究结
果显示(见图 1)：以麦芽糖作碳源的培养基中，三种外植体
的愈伤组织诱导率均低于蔗糖和葡萄糖，且愈伤组织生长状
况差，易褐化。以葡萄糖作碳源和以蔗糖作碳源的培养基
中，从出愈率来看，叶片和根部的愈伤组织诱导率没有明显
的差异，黄化苗叶片的愈伤组织诱导率以葡萄糖作碳源明显
低于以蔗糖作碳源。从愈伤组织诱导出后的生长状况来看，
以葡萄糖作碳源，愈伤组织生长较蔗糖作碳源弱，且愈伤组
织结构质密，易褐化。
图 1 不同的碳源对欧亚旋覆花愈伤组织诱导率的影响
3 分析与讨论
通常情况下，在组织培养的培养基中要加糖类物质，糖
作为碳源，为细胞呼吸及代谢提供底物和能源，糖类还用以
维持一定的渗透势。迄今为止，已用于植物组织培养的糖类
有 50多种。烟草原生质体培养中，葡萄糖、果糖和甘露糖
与蔗糖具有相似的效果，而核糖则表现明显的促进作用，半
乳糖显著抑制细胞生长和分化。Hunter等(1988)用麦芽糖作
为碳源，显著提高了大麦花药培养的诱导频率，高书国等[4]
在研究不同碳源及培养方式对小麦花培愈伤组织诱导的影响
时，表明用麦芽糖取代培养基中常用的蔗糖，可有效提高愈
伤组织的诱导率。
本试验结果表明：在蔗糖、麦芽糖、葡萄糖这三种碳源
中，比较适合欧亚旋覆花愈伤组织诱导的是蔗糖。以麦芽糖
作碳源的培养基中愈伤组织诱导率低于蔗糖和葡萄糖，且愈
伤组织生长状况差，易褐化。以葡萄糖作碳源，愈伤组织生
长较蔗糖作碳源弱，结构紧密，易褐化。
参考文献
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053000 河北省衡水学院 周红菊
试 验 研 究
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