全 文 ：收稿日期:2008-01-08;　修订日期:2008-06-10
基金项目:云南省教育厅科研基金资助项目(No.5Y0386C)
作者简介:夏从龙(1974-),男(汉族),云南华坪人 ,现任大理学院药学院
副教授 ,硕士学位 ,主要从事天然药物研究工作.
民族药岩陀药材中岩白菜素的高效液相色谱定量分析
夏从龙 ,段新瑜 ,何华斌 ,杨　兰 ,李枉桉 ,杨雪莲
(大理学院·药学院 ,云南 大理　671000)
摘要:目的 用高效液相色谱法测不同来源的民族药岩陀药材中岩白菜素的含量 , 为资源利用提供依据。方法 Zorbax
SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm), 流动相:甲醇 -水(含 0.1%磷酸)17∶83, 流速:0.80 ml/min, 检测波长:
275nm, 柱温 30℃。结果 岩白菜素线性范围为 3.05 ～ 10.98 μg, 相关系数 r= 0.999 9, 其平均回收率为 101.17%(n=
5), RSD为 1.56 %。结论 在民间作为岩陀使用的植物根茎中都含有岩白菜素 ,但种间差异较大 , 且与产地和采收期有
一定的关系。
关键词:岩陀;　民族药;　岩白菜素;　高效液相色谱法
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0289-01
QuantitativeAnalysisofBergenininEthnodrugRodgersiabyHPLC
XIACong-long, DUANXin-yu, HEHua-bin,YANGLan, LIWang-an,YANGXue-lian
(DepartmentofPharmacology, DaliUniversity, Dali671000, China)
Abstract:ObjectiveToanalyzeandcomparethecontentofbergeninin3speciesofRodgersiaandtosupplyabasisforthere-
sourcesexploitation.MethodsThechromatographicassayofbergeninwasperformedonZorbaxSB-C18column(4.6 mm×150mm, 5 μm)withaflowrateof0.80 ml/min.ThemobilephaseconsistedofCH3OH-0.1%H3PO4(17∶83).Thedetectionwavelengthwasat275nm, andthecolumntempraturewasmaitainedat30℃ .ResultsTheresultindicatedgoodlinearityover
therangeof3.05～ 10.98 μgwithcoeficients(r)of0.999 9 .ConclusionThisexperimenalresultsshowthatthoseplantsused
forYuantuoinfolkmedicinecontainbergenin, butthedifferenceisnotable.
Keywords:YanTuo;　Ethnodrug;　Bergenin;　HPLC
　　岩陀为白族 、傈族民间习用的民族药 , 药材的傈僳文名为埃
陀 , 白族则习称散药 , 为虎耳草科植物羽叶鬼灯檠 Rodgersiapin-
nataFranch.,西南鬼灯檠 RodgersiasambucifoliaHemsl.或七叶鬼
灯檠 RodgersiaaesculifoliaBatal.的干燥根茎。其根茎具有收敛 、
消炎 、祛风除湿的功效 , 对菌痢 、肠炎 、感冒头痛 、外伤出血 、风湿
骨痛 、老年性支气管炎等常见疾病有较好的疗效 [ 1] 。岩陀根茎
中主要含有糖类 、鞣质 、岩白菜素 、槲皮素及山萘酚等黄酮类成
分 [ 2] 。其止咳的主要成分为岩白菜素(bergenin), 因岩白菜的资
源减少 , 现主要从岩白菜属中岩白菜 BergeniapurpurascensHook.
f.etThoms.鬼灯檠属中西南鬼灯檠 RodgersiasambucifoliaHemsl.
的根茎中提取岩白菜素 ,经多年的开发利用 , 上述两种植物面临
资源短缺。本实验对 3种鬼灯檠植物根茎中岩白菜素的含量进
行了含量测定 , 为扩大药源和合理开发利用资源提供有用的
数据。
1　仪器与材料
1100 LC高效液相色谱仪(美国 Agilent公司);UV1100紫外
可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司);SK5200H超声
波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);梅特勒 -托利多电子
天平(梅特勒 -托利多仪器 -上海有限公司)。 甲醇(美国天地
公司)为色谱纯 ,水为重蒸水。其余试剂为分析纯。
岩白菜素对照品购自中国药品生物制品检定所 , 批号为
1532-200202。
实验材料(产地见含量测定项)由作者本人鉴定为虎耳草科
植物羽叶岩陀 RodgersiapinnataFranch., 西南鬼灯檠 Rodgersia
sambucifoliaHemsl.和七叶鬼灯檠 RodgersiaaesculifoliaBatal.的干
燥根茎。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 ZORBAXSB-C
18
色谱柱(4.6 mm×150 mm,
5 μm);流动相为甲醇 -水(含 0.1%磷酸)17∶83;检测波长:
275 nm;流速:0.80 ml/min;柱温:30℃。在该色谱条件下 , 岩白
菜素被洗脱且达到基线分离 , 保留时间为 11.33 min。按岩白菜
素峰计算 ,理论塔板数应不低于 5 000。
2.2 　对照品及供试品溶液的制备
2.2.1　对照品储备液 精密称取对照品岩白菜素 6.10 mg置 10
ml容量瓶中 ,以甲醇溶解并定容 , 配制成对照品储备液 , 浓度为
0.61 mg/ml。
2.2.2　样品溶液 精密称取粉碎过 60目筛的样品各 1 g, 置于
锥形瓶中 ,加入 20 ml甲醇 , 浸泡 5 h, 超声提取 45 min, 滤过 , 以
甲醇洗涤锥形瓶及滤渣 3次 , 每次 1 ml, 定容置 25 ml容量瓶
中 [ 3] , 作为储备液使用。
2.3 　方法学考察
2.3.1　线性关系考察 精密量取对照品储备液(0.61 mg/ml)5,
8, 12, 15, 18μl注入高效液相色谱仪中 , 按选定的色谱条件进行
测定 , 记录色谱图及峰面积。以峰面积的积分值定量 , 以进样量
(μg)为横坐标 , 峰面积(A)为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 并进行回归
分析 , 岩白菜素的回归方程为:
A=1 829.569 2C+67.575 6　　r=0.999 9
线性范围为:3.05 ～ 10.98 μg。
2.3.2　精密度实验 取岩白菜素对照品(0.61 mg/ml)溶液 , 连
续进样 5次 , 每次进样 5 μl。 分别测定峰面积 , 计算 RSD为
0.17%(n=5)。表明进样精密度良好。
2.3.3　重复性实验 精密称取同一批七叶鬼灯檠粉末 5份 ,每份
1 g,分别按样品溶液的处理方法制备样品液 , 进样 5 μl, 在给定
的色谱条件下测定岩白菜素的峰面积 ,计算 RSD为 1.71%。
2.3.4　稳定性实验 将同一样品溶液隔 0, 1, 2, 4, 6, 12 h进样
5μl, 在选定的色谱条件下测定岩白菜素的峰面积 , 计算 RSD为
1.16%。表明样品溶液在 12 h内稳定。
2.3.5　加样回收实验 取已知含量的同一供试品溶液 5份 , 分
别添加对照品适量(岩白菜素:0.42 mg/ml溶液 0.5 ml),按样品
溶液处理方法操作 , 测得岩白菜素的平均回收率为 101.17%;
RSD为 1.56%。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2 时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期
2.4　样品含量测定 分别取供试品溶液 ,进样 5μl,在给定的色
谱条件下 , 测定岩白菜素的峰面积 , 采用对照品对照法计算其含
量 , 结果见表 1 ～ 2(不同采收期的羽叶鬼灯檠 、七叶鬼灯檠采自
剑川县)。岩白菜素对照品及样品图谱见图 1。
表 1　3种岩陀药材及岩白菜根茎中岩白菜素的含量 %
样品 产地 岩白菜素的含量
羽叶鬼灯檠 大理三阳峰 4.06
剑川 4.14
云龙 2.97
西南鬼灯檠 宁蒗 4.30
七叶鬼灯檠 大理三阳峰 2.72
岩白菜 大理三阳峰 4.87
　　n=3
表 2　不同采收期两种岩陀药材中岩白菜素的含量 %
样品 5月 6月 7月 8月 9月 10月
羽叶鬼灯檠 4.62 4.42 4.23 4.14 4.28 4.58
七叶鬼灯檠 3.22 3.17 3.15 3.11 3.20 3.32
　　n=3
a-对照品岩白菜素;b-羽叶鬼灯檠　1.岩白菜素
图 1　HPLC图
3　讨论
3.1　检测波长的选择 应用紫外可见分光光度计 UV1100 在
190 ～ 400 nm范围内对岩白菜素进行紫外扫描 , 并结合三维图 ,
发现该化合物有两个吸收峰 ,分别位于 220nm和 275nm, 考虑流
动相中甲醇在 220 nm波长处对基线有影响 , 故实验中检测波长
选为 275 nm。
3.2　流动相与色谱柱的选择 本实验曾比较过文献报道过的多
种流动相:甲醇 -水(25∶ 75), 甲醇 -水(45∶55), 甲醇 -醋酸
-水(12∶0.5∶88)等系统 [ 3 ～ 5] , 经过反复多次实验 , 选择本文
“ 2.1”项色谱条件;加 0.1%磷酸可抑制拖尾。我们还对 3种色
谱柱 [ ZORBAXSB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm), ZOR-BAXDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm), ZORBAXXDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5μm)]进行比较 , 在该色谱条
件下 ,以 ZORBAXSB-C18色谱柱(4.6mm×150mm, 5μm)分离
度较好 ,柱效高。
通过测定发现 , 3种岩陀药材中以西南鬼灯檠 Rodgersiasam-
bucifoliaHemsl.根茎中岩白菜素的含量最高 , 以七叶鬼灯檠
RodgersiaaesculifoliaBatal.根茎中岩白菜素的含量最低。同种岩
陀药材在不同产地(采自同一月份)岩白菜素的含量也有差异。
采于同一产地不同采收期的岩陀药材中岩白菜素的含量有明显
的差异 ,以 8月份含量最低 ,故作者认为最佳采收期为 5月份前 、
10月份后。
参考文献:
[ 1 ] 　云南省卫生厅.云南省药品标准 [ M] .昆明:云南大学出版社 ,
1996:72.
[ 2 ] 　江苏新医学院.中药大辞典 [ M].上海:上海人民出版社 ,
1999:2359.
[ 3 ] 　孙诗清 ,李多伟 ,郭培莹 ,等.RP-HPLC测定不同产地鬼灯檠中岩
白菜素的含量 [ J] .中成药 , 2003, 25(12):979.
[ 4 ] 　张文珠 ,师彦平 ,刘　霞 ,等.中药岩白菜的反相高效液相色谱分析
[ J] .分析科学学报 , 2003, 19(6):525.
[ 5 ] 　丁家欣 ,张秋海 ,张　玲 ,等.RP-HPLC测定不同产地与采收期虎
耳草中岩白菜素的含量 [ J].中国中药杂志 , 2002, 27(10):792.
收稿日期:2008-02-29;　修订日期:2008-05-27
基金项目:广东省科技厅课题(No:2004B30101002);广东中医药局课题(No:1040083)
作者简介:王榕乐(1982-),男(汉族),福建福州人 ,现任中山大学中山医学院神经生物学中心行政秘书 ,硕士学位 ,主要从事新药筛选研究工作.
＊通讯作者简介:谭毓治(1956-),男(汉族),江西九江人,现任广东药学院药理学教授,硕士生导师,学士学位,主要从事药物筛选与新药研究工作.
毛茛总苷抗炎镇痛作用研究
王榕乐 , 谭毓治＊ , 罗绍宝
(广东药学院 ,广东 广州　510006)
摘要:目的 观察毛茛总苷抗炎 、镇痛作用。方法 采用小鼠热板法和扭体法实验观察镇痛作用;用二甲苯诱导小鼠耳廓
肿胀和角叉菜胶诱导大鼠足肿胀实验模型观察抗炎作用。结果 200, 400, 800 mg· kg-1毛茛总苷能显著减小二甲苯诱导
的小鼠耳廓肿胀程度 , 抑制由 55℃热板刺激诱导的小鼠疼痛反应和醋酸刺激引起小鼠腹腔疼痛反应 ,效应具有浓度依赖
性;200, 400mg· kg-1毛茛总苷明显抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀。结论 毛茛总苷具有显著的抗炎 、镇痛作用。
关键词:毛茛总苷;　抗炎;　镇痛
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0290-02
Anti-inflammatoryandAnalgesicEffectofTotalGlycosidesofRanunculusjaponicus
WANGRong-le, TANYu-zhi＊ ,LUOShao-bao
(Dept.ofPharmacology, GuangdongPharmacologicalUniversity, Guangzhou510006 China)
Abstract:ObjectiveTostudytheanti-inflammatoryandanalgesiceffectsoftotalglycosidesofRanunculusjaponicus.Meth-
odsHot-plateandbody-contortionmethodswereusedtoobservetheanalgesicefects.Dimethylbenzene-inducedauris
swelingmodelinmiceandcarrageen-inducedfeetswellingmodelinratswereestablishedtoobservetheanti-inflammatory
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2