全 文 ：基金项目：国家自然科学基金（８１０６０３５６）
作者简介：买尔旦·马合木提（１９６０－），男（维吾尔族），教授，硕士生导师，研究方向：中药民族药，Ｅ－ｍａｉｌ：ｍａｉｅｒｄａｎ６０＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ。
新疆紫草脂质体凝胶剂对放射性皮肤损伤的作用
买尔旦·马合木提１，２，古丽仙·胡加１，李 娜２，李国英２
（新疆医科大学１附属肿瘤医院，２药学院，乌鲁木齐 ８３００１１）
摘要：目的 考察新疆紫草脂质体凝胶剂对放射性皮肤损伤创面及愈合相关因素的影响。方法 用不同
体积的脂质加入到适量的凝胶基质中制备脂质体凝胶剂，考察其体外释药特性；以直线加速器β射线照射 Ｗｉｓｔａｒ
大鼠后臀部，建立皮肤放射性损伤模型，观察模型用药后的愈合时间、创面组织病理改变、皮肤羟脯氨酸（ｈｙｐ）含
量、血清 ＭＤＡ、ＳＯＤ、ＩＬ－６、ＴＧＦ－β变化情况。结果 脂质体凝胶剂组（ＡＥＬＧ）体外释药曲线符合 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程，
透皮速率比普通凝胶低。４０Ｇｙ剂量单次照射后２０ｄ左右出现脱毛、溃烂现象。经照射后皮肤组织中羟脯氨酸含
量，血清中 ＭＤＡ、ＩＬ－６、ＴＧＦ－β水平明显下降，ＳＯＤ含量显著升高 （Ｐ＜０．０５）。创面用药后，各给药组溃疡４～５ｗ
基本愈合，愈合时间较阴性组明显缩短 （Ｐ＜０．０５）。皮肤组织中羟脯氨酸含量所升高，血清中 ＭＤＡ、ＩＬ－６、ＴＧＦ－β
含量升高，ＳＯＤ含量下降，脂质体凝胶剂效果优于普通凝胶剂。结论 新疆紫草脂质体凝胶剂对放射性皮肤损伤
的愈合有一定的促进作用，其机理可能与促进胶原蛋白合成有关。
关键词：新疆紫草；脂质体凝胶剂；放射性皮肤损伤
中图分类号：Ｒ９８６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９－５５５１（２０１３）１１－１６１１－０７
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｒｎｅｂｉａ ｅｕｃｈｒｏｍａ（Ｒｏｙｌｅ）ｊｏｈｎｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ
ｇｅｌ ｏｎ ｒａｄｉａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｋｉｎ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｒａｔｓ
Ｍａｉｅｒｄａｎ Ｍａｈｅｍｕｔｉ １，２，ＧｕＩｉｘｉａｎ Ｈｕｊｉａ１，ＬＩ Ｎａ２，ＬＩ Ｇｕｏｙｉｎｇ２
（１ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｔｕｍｏｒ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ ８３００１１，Ｃｈｉｎａ；
２Ｉｎｉｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ ８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｉｓ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ａｒｎｅｂｉａ ｅｕｃｈｒｏｍａ（Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ．ｅｘｔｒａｃｔｓ ｌｉ－
ｐｏｓｏｍｅｓ ｇｅｌ（ＡＥＬＧ）ｏｎ ｒａｄｉａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｋｉｎ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ＡＥＬＧ
ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｍｉｘｉｎｇ ｔｈｅ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍＡｒｎｅｂｉａ ｅｕｃｈｒｏｍａ（Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ．ｗｉｔｈ ｇｅｌ ｂａｓｅ ｉｎ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｖｏｌｕｍｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ ｐｒｏｆｉｌｅ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ；ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｒａｄｉａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｋｉｎ ｉｎｊｕｒｙ ｗｅｒｅ
ｍａｄｅ ｏｎ ｔｈｅ ｈｉｐ ｏｆ ｒａｔｓ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅβ－ｒａｙ ｆｒｏｍ ｌｉｎｅａｒ ａｃｃｅｌｅｒａｔｏｒ．Ｔｈｅ ｈｅａｌｉｎｇ ｔｉｍｅ ｏｆ ｕｌｃｅｒ，ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ
ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ，ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ（ｈｙｐ）ｉｎ ｓｋｉｎ ｔｉｓｓｕｅ，ｓｅｒｉｕｍ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＭＤＡ，ＳＯＤ，ＩＬ－６ａｎｄ
ＴＧＦ－βｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｐｒｏｆｉｌｅ ｉｎ ｖｉｒｏ．ｏｆ ｇｅｌ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｄ ｔｏ ｔｈｅ Ｈｉｇｕｃｈｉ
ｅｑｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｒａｔｅ ｗｅｒｅ ｌｏｗｅｒｉｎｇ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ａｍｏｕｎｔｓ．Ｔｈｅ ｕｌｃｅｒ ｏｆ ｓｋｉｎ
ａｐｐｅａｒｅｄ ａｆｔｅｒ ２０ｄａｙｓ′ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｕｎｄｅｒ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｆ ４０ｇｒｙ ｏｎｃｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｈｙｐ，ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌ ｏｆ
ＭＤＡ，ＩＬ－６ａｎｄ ＴＧＦ－βｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｂｕｔ ＳＯＤ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ｂｅｉｎｇ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａ－
ｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｌ ａｎｄ ＡＥＬＧ ｏｎ ｔｈｅ ｕｌｃｅｒ ｏｆ ｓｋｉｎ，ｔｈｅ ｕｌｃｅｒ ｈｅａｌｅｄ ｗｉｔｈｉｎ ４－５ｗｅｅｋｓ，ｔｈｅ ｈｅａｌｉｎｇ ｔｉｍｅ ｏｆ ｂｏｔｈ
ｇｒｏｕｐｓ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｇｅｌ ｗｅｒｅ ｓｈｏｒｔｅｒ ｔｈａｎ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｈｙｐ，ｌｅｖｅｌ ｏｆ
ＭＤＡ，ＩＬ－６ａｎｄ ＴＧＦ－βｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ＳＯＤ ｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅ ＡＥＬＧ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｇｅｌ
ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ ｔｅｒｍｓ ｏｆ ｅｘｔｅｎｔｓ ｏｆ ｉｎｄｅｘｅｓ ａｂｏｖｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＡＥＬＧ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｈｅａｌｉｎｇ ｏｆ ｒａｄｉａｔｉｏｎ－ｉｎ－
第３６卷 第１１期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．１１
２０１３年１１月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｎｏｖ．２０１３
ｄｕｃｅｄ ｓｋｉｎ ｕｌｃｅｒ．Ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｃｏｌａｇｅｎ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｙｎｔｈｅｔｉｚａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｒｎｅｂｉａ ｅｕｃｈｒｏｍａ（Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ．；ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｇｅｌ；ｒａｄｉａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｋｉｎ ｉｎｊｕｒｙ
放射性皮肤损伤是由于各种电离辐射（如α、β、
γ和Ｘ线，以及电子、质子等）照射而引起皮肤、黏膜
及附属器官的损伤，是肿瘤放射治疗中常见的并发
症。射线直接作用于皮肤及其深部组织细胞，发生
渐进性退变和坏死，一旦溃疡形成很难再有健康肉
芽组织形成和血管网新生，从而自愈的可能性很
小［１］。其作用机理为电离辐射产生的大量自由基，
直接攻击细胞核内的ＤＮＡ及细胞膜，造成ＤＮＡ单
链和双链断裂等损伤，引发不饱和脂肪酸脂质过氧
化而使细胞膜损伤、各种亚细胞结构破坏、酶活性降
低和消失［２］。射线也可引起皮肤组织中胶原蛋白的
损伤，影响胶原的代谢，阻碍组织的修复［３］。新疆紫
草 （Ａｒｎｅｂｉａ ｅｕｃｈｒｏｍａ（Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ）具有清热凉
血、活血解毒、透疹消斑之功效，其中萘醌类成分具
有很强的抗氧化、促进血液循环等作用，对急性炎症
渗出和慢性炎症增生均有较强的抑制作用［４－５］。鉴
于临床上使用的紫草传统制剂选择性低，稳定性差，
本研究以新疆紫草萘醌类为基础，制备脂质体凝胶
剂，在直线加速器β射线照射下建立大鼠放射性皮
肤损伤模型，对比观察脂质体凝胶剂对皮肤放射性
损伤创面愈合的影响，并通过光镜观察创面病理变
化及细胞超微结构，检测受照射皮肤组织中羟脯氨
酸及血清中的 ＭＤＡ、ＳＯＤ、ＩＬ－６、ＴＧＦ－β的含量，初
步探讨皮肤放射性损伤创面愈合中自由基与胶原代
谢的关系，以期为皮肤放射性损伤的治疗提供新的
途径。
１ 材料和方法
１．１ 仪器与试药
１．１．１ 仪器 ＵＶ－２５５０型紫外可见分光光度仪
（日本岛津），美国瓦里安６００Ｃ／Ｄ直线加速器，ＰＳ－
１０００型ＥＹＥＬＡ磁力搅拌恒温水浴锅（日本东京理
化器械株式会所），ＬＧ１０－２．４Ａ高速离心机（北京医
用离心机厂），ＫＱ－４００ＤＢ型数控超声波清洗器（昆
山市超声仪器有限公司），改良的Ｆｒａｎｚ扩散池（江
苏海门三和中华玻璃仪器厂），８５－１磁力搅拌器（江
苏金坛医疗仪器厂）。
１．１．２ 试药 左旋紫草素对照品（中国药品生物制
品检定所，批号：０７６９－９９０３），新疆紫草提取物（新疆
医科大学药学院药剂教研室制备，含左旋紫草素
０．９９８％），卡波姆－９４０（北京国人逸康科技有限公
司，批号：２０１００２２３），羟脯氨酸测试盒（南京建成生
物工程研究所），ＳＯＤ测试盒（南京建成生物工程研
究所，批号：Ａ００１），ＭＤＡ测定试剂盒（南京建成生
物工 程 研 究 所），大 鼠 ＩＬ－６ 定 量 检 测 试 剂 盒
（ＥＬＩＳＡ）（上海继锦化学科技有限公司），大鼠
ＴＧＦ－β定量检测试剂盒（上海继锦化学科技有限公
司），水合氯醛（上海山浦化工有限公司），美宝湿润
烧伤膏（汕头市美宝制药有限公司，批号：１００６０５），
新疆紫草提取物凝胶剂（每克凝胶中平均含左旋紫
草素０．６０ｍｇ）和新疆紫草提取物脂质体（含左旋紫
草素的平均含量为０．０８４±０．００３ｇ／ｇ，包封率的平
均值为８０．６９％），三乙醇胺（天津市化学试剂三厂，
分析纯，２００８０４０８），尼泊金乙酯（上海市山浦化工有
限公司，分析纯，２００６１０２０），醋酸纤维素膜薄（人工
膜，浙江台州市路桥四甲生化塑料厂，２００４０５１５）。
１．２ 实验动物 ３月龄 Ｗｉｓｔａｒ清洁级雌性大鼠，
体质量１８０～２２０ｇ，由新疆医科大学医学动物实验
中心提供［实验动物使用许可合格证号：ＳＹＸＫ（新）
２００３－０００１］。
１．３ 实验方法
１．３．１ 脂质体凝胶剂的制备［６－７］ 取处方量的卡
波姆－９４０均匀撒于适量蒸馏水中，放置过夜使其充
分溶胀。另取适量乙醇将冰片、尼泊金乙酯溶解后，
加入处方量的丙二醇、吐温－８０，混合均匀。在搅拌
下分别加入载药脂质体２０、４０和６０ｍＬ，再加适量
的紫草提取物粉末，使总含药量为每１００ｇ含ＡＥＥ
０．１１６４ｇ，混匀，最后加入到适量的凝胶基质中，用
适量三乙醇胺调节ｐＨ 值至５．８，加水至１００ｇ即
得。脂质体凝胶剂中载药脂质体所含药量占总药量
的５％、１０％、１５％。
１．３．２ 体外释药特性 采用改良的Ｆｒａｎｚ扩散池，
装置透皮面积为４．５１ｃｍ２，接受池容积约为１３ｍＬ。
取醋酸纤维素膜（人工膜）覆盖在扩散池上，将样品
２ｇ均匀涂在膜上并固定在扩散池的样品室；在扩
散池的接受池中加满预热至３７℃的生理盐水作为
接受液，内置１粒磁力转子。将样品室与接受池紧
密固定，排除气泡，开启循环，保持水浴（３７±１）℃恒
温，磁力搅拌１００ｒ／ｍｉｎ。于加样后ｌ、２、４、６、８、１０、
１２、２４ｈ分别从接受池中吸取４ｍＬ接受液置具塞
试管中，同时向扩散池内补充３７℃的接受液４ｍＬ。
２１６１ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３６卷
于５２０ｎｍ处测定吸光度，代入回归方程计算浓度，
并求累积释放量与渗透速率常数。
根据公式Ｑ＝（ＣｎＶｎ＋∑ＣｉＶｉ）／Ｓ计算单位面
积药物累积渗透量（其中Ｑ为累积释放量，Ｃｎ为该
次取样测定浓度，Ｖｎ为第ｎ次取样的体积，Ｃｉ为第
ｉ次至上次取样时释放介质中药物浓度，Ｖｉ为每次
取样体积，Ｓ为药物与人工膜接触面积）。绘制累积
释药量随时间的变化曲线，并将各时间点的释放数
据分别用零级、一级和 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程与时间进行拟
合，用相关系数（ｒ）判断其拟合程度。
１．３．３ 动物模型的建立
１．３．３．１ 动物分组 于安静、室温、光线柔和的环
境中饲养４８ｈ，随机分为７组：每组１０只，分别为空
白对照组（正常饲养）、阴性对照组（照射后给予生理
盐水）、阳性对照组（照射后外用美宝湿润烧伤膏）及
５％、１０％、１５％脂质体凝胶剂组（ＡＥＬＧ）和普通凝
胶剂组（ＡＪＥＧ）（照射后给药）。
１．３．３．２ 照射剂量的确定 另取大鼠２５只，随机
分为５组，每组５只。用１０％水合氯醛每１００ｇ ＢＷ
腹腔注射０．４ｍＬ进行麻醉，分别以２、６、１２、４０、
５０Ｇｙβ射线分别单次照射后臀部，照射面积２ｃｍ
×２ｃｍ，以不死亡且出现溃疡面为指标确定照射剂
量。照射后各组正常饲养，共观察３０ｄ。最后用确
定的剂量单次照射，建立模型。
１．３．３．３ 动物整体情况观察 照射后各组动物常
规分组饲养，观察并记录大鼠的全身状态与创面色
泽、渗出、愈合等情况。待各组大鼠出现溃疡创面
后，用药组创面按照分组情况分别给予５％、１０％、
１５％脂质体凝胶剂１ｇ及普通凝胶剂１ｇ，１次／ｄ，连
续９ｗ；阴性对照组创面给予０．９％生理盐水１ｍＬ，
１次／ｄ；阳性对照组创面给予美宝湿润烧伤膏１ｇ，１
次／ｄ。记录各个体创面愈合情况及愈合时间。
１．３．３．４ 组织切取 ９ｗ后给药终止，各组动物以
１０％水合氯醛腹腔注射麻醉后，取照射部位皮肤组
织及血液。组织块分为两部分：一部分皮肤组织用
１０％福尔马林浸泡保存，石蜡包埋，５μｍ 切片，行
ＨＥ染色，光镜观察；另一部分置－７０℃低温冰箱冷
冻保存，以作创面组织胶原总量的检测。血液置
４℃冰箱，放置１ｈ后冷冻离心，３ ０００ｒ／ｍｉｎ离心
２０ｍｉｎ，分离血清，置－２０℃冰箱，进行 ＭＤＡ（丙二
醛）、ＳＯＤ（超氧化物歧化酶）、ＩＬ－６及 ＴＧＦ－β指标
测定。
１．３．４ 各项指标测定
１．３．４．１ 皮肤组织中羟脯氨酸含量的测定 按试
剂盒说明书测定皮肤组织中羟脯氨酸的含量。根据
羟脯氨酸在氧化剂的作用下所产生的氧化产物和二
甲氨基苯甲醛作用呈现紫红色的原理，根据其呈色
的深浅即可推算出样本中羟脯氨酸的含量，按公式
求出被测样品的羟脯氨酸含量，单位为μｇ／ｍｇ。计
算公式：
羟脯氨酸含量（μｇ／ｍｇ湿重）＝
测定管吸光度－空白管吸光度
标准管吸光度－空白管吸光度×
标准管含量（５μｇ／ｍＬ）×
水解液总解液总１０ｍＬ
组织湿重（ｍｇ）
１．３．４．２ ＭＤＡ的测定 取各组动物血清，按照试
剂盒说明分别加入各试剂后，用旋涡混匀器混匀，试
管口用保鲜膜扎紧，用针头刺一小孔，９５℃水浴
４０ｍｉｎ，取出后流水冷却，然后３ ５００～４ ０００ｒ／ｍｉｎ离
心１５ｍｉｎ。待沉淀完全后取上清，５３２ｎｍ处，１ｃｍ光
径，用蒸馏水调零，测定各管吸光度值。计算公式：
１．３．４．３ 总ＳＯＤ的测定 取各组动物血清，按照
测定试剂盒说明分别加入各试剂后，旋涡混匀器混
匀，室温放置１０ｍｉｎ，于波长５５０ｎｍ处，１ｃｍ光径，
蒸馏水调零，比色测定各管吸光度值。计算公式：
血清［浆清 ＭＤＡ含量（ｎｍｏｌ／ｍＬ）］＝
测定管吸光度－空白管吸光度
标准管吸光度－标准空白管吸光度×
标准品浓度（１０ｎｍｏｌ／ｍＬ）×样本测试前稀释倍数
血清中总清中总ＳＯＤＵ／ｍＬ＝
对照管吸光度－测定管吸光度
对照管吸光度 ÷５０％×反应体系稀释倍数×样本测试前稀释倍数
１．３．４．４ ＩＬ－６的测定 取各组动物血清，采用双
抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），按照试剂
盒说明书操作，在４５０ｎｍ波长下测定ＯＤ值，根据
标准品和样品的ＯＤ值计算样本中ＩＬ－６的含量。
１．３．４．５ ＴＧＦ－β的测定 取各组动物血清，采用
双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），按照试
剂盒说明书操作，根据最终颜色的深浅与样品中大
鼠转化生长因子β（ＴＧＦ－β）浓度呈正相关的原理，
在４５０ｎｍ波长下测定ＯＤ值，根据标准品和样品的
ＯＤ值计算样本中ＴＧＦ－β的含量。
１．４ 统计学处理 采用ＳＰＳＳ１３．０统计学软件对
数据进行统计学分析，组间分析采用因素方差分析，
结果以均数±标准差 （珚ｘ±ｓ）表示，检验水准α＝
０．０５。
３１６１ 第１１期 买尔旦·马合木提，等：新疆紫草脂质体凝胶剂对放射性皮肤损伤的作用
２ 结果
２．１ 体外释药特性 用 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程拟合时ｒ值
最大，即Ｑ＝１．５８４２ｔ１／２－０．３２５ ９（ｒ＝０．９８８ ２），
由此可知，累积渗透量Ｑ与ｔ１／２有较好的相关性，符
合 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程，不同曲线的相关参数见表１。
表１ 普通凝胶剂体外释放模型拟合结果
曲线 渗透速率常数 截距 相关系数
零级释药 Ｑ＝ｋｔ＋ｃ ０．２５０ ６ １．７７６ ８ ０．９３０ ３
一级释药Ｉｎ（１－Ｑ）＝ｋｔ＋ｃ － － －
Ｈｉｇｕｃｈｉ Ｑ＝ｋｔ１／２＋ｃ １．５８４ ２ －０．３２５ ９ ０．９８８ ２
将各制剂体外释药量用 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程拟合，计
算渗透速率常数Ｋ及２４ｈ平均累积渗透量Ｑ２４，结
果显示渗透速率常数及２４ｈ平均累积渗透量大小
顺序为普通凝胶＞５％脂质体凝胶＞１０％脂质体凝
胶＞１０％脂质体凝胶＞１５％脂质体凝胶。即脂质体
凝胶剂释药速率比普通凝胶剂慢，累积渗透量少，且
脂质体含量越高，渗透速率越慢，紫草脂质体凝胶剂
具有缓释作用。释药数据及曲线见表２和图１。
表２ 紫草凝胶剂与脂质体凝胶剂的体外释药参数
（珔ｘ±ｓ，μｇ／ｃｍ２）
时间／ｈ
不同时间释药量Ｑ
ＡＪＥＧ组 ５％ ＡＥＬＧ １０％ＡＥＬＧ １５％ ＡＥＬＧ
１ １．９３±０．４５ １．１４±０．１９ １．５９±０．１１ ０．８７±０．０９
２ ４．１３±０．９８ ２．３５±０．３７ ２．７２±０．１５ １．５５±０．１１
４ ６．４５±０．８９ ３．４５±０．２３ ３．７６±０．３２ １．９６±０．１３
６ ８．１５±１．１６ ４．４８±０．３０ ４．８２±０．２１ ２．５２±０．３１
８ ９．７１±１．４９ ５．３２±０．２１ ５．６２±０．１５ ３．３９±０．２８
１０ １１．０４±１．６９ ６．１５±０．２６ ６．６１±０．２２ ４．３１±０．２２
１２ １２．２９±１．８６ ７．３３±０．１８ ７．５０±０．３３ ５．８９±０．３３
２４ １５．７６±１．８８ ９．３５±０．２６ ９．１０±０．０９ ７．９２±０．１９
Ｋ ３．６０±０．３９ ２．１５±０．１８ ２．００±０．０３ １．８８±０．０８
Ｑ２４ １５．７６±１．８７ ９．３５±０．９３ ９．１０±０．１３ ７．９２±０．３１
图１ 不同含量脂质体凝胶的释药曲线
２．２ 照射剂量的确定 β－射线照射后各组正常饲
养。２、６、１２Ｇｙ组全程无脱毛现象，精神状态良好，
如同正常大鼠。４０、５０Ｇｙ组大鼠于照射后２０ｄ左
右出现脱毛现象，继而出现溃烂、脓肿，５０Ｇｙ组大
鼠相继出现腹泻及尿失禁，体质量明显下降，精神萎
靡不振，死亡情况较严重。４０Ｇｙ组大鼠体质量也
有下降，精神状况优于５０Ｇｙ组，且无死亡情况，故
最终照射剂量确定为４０Ｇｙ。
２．３ 动物整体情况 β－照射后１～１９ｄ，各组动物
均伴有明显的精神萎靡，饮食量和活动减少，但受照
皮肤及下肢无明显变化；照射后１８～２０ｄ，部分动物
受照皮肤开始出现脱毛；至２３ｄ，所有动物均出现皮
肤反应：脱毛，局部有浓肿，出现不同程度的溃疡，部
分动物出现跛行、有脓性分泌物。
阴性组动物于２３ｄ全部脱毛完全，每天给予生
理盐水，溃疡面逐渐扩大，颜色加深，炎性渗出液增
多，至给药结束仍有３只未完全愈合，创面边缘苍
白，恢复缓慢。
给药１ｗ后，各给药组动物创面开始逐渐收缩，
渗出减少，颜色脱变淡，２ｗ后，开始硬化，渗出停
止，２～３ｗ创面结痂，４～５ｗ基本愈合，但脱毛持
续至完全脱光。与阴性组相比，各给药组溃疡愈合
时间缩短，除５％ ＡＥＬＧ组外，各组溃疡愈合时间
的差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０５），愈合动物数多于
阴性组。结果见表３及图２～７。
表３ 各组动物创面愈合情况
组别 动物数／只 治愈数／只 治愈时间／ｄ
空白组 ６ － －
阴性组 ８ ５ ４８．５±２．１２
阳性组 ８ ８ ４３．３±３．３９
１５％ ＡＥＬＧ １０ １０ ４１．３±２．４２＊
１０％ＡＥＬＧ组 ９ ８ ４１．３±２．６６＊
５％ ＡＥＬＧ组 １０ ８ ４４．３±２．９４
ＡＪＥＧ组 １０ １０ ４１．８±１．７２＊
注：与阴性组比较，＊Ｐ＜０．０５。
２．４ ＨＥ染色及光镜观察结果 与空白组比较（图
８），阴性组（图９）表皮剥脱，细胞各层结构均消失，
血管扩张，白细胞附壁，棘层、基底层均可见炎性浸
润，血管外有白细胞游走趋势，损伤区边缘表皮增
生。阳性对照组（图１０）表皮明显增厚，空泡样变性
较明显，乳头层炎性浸润，基底细胞增生，细胞体积
较大，由矮柱状、立方状变为长柱状，且层数增多，排
列紊乱。给药组（图１１～１２）与阴性组相比，各层细
４１６１ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３６卷
胞结构修复较完整，表皮明显增厚，基底细胞部分由
１层变为２～３层且紊乱不齐，细胞变性，毛细血管
数量明显增多。提示，４０Ｇｙ剂量一次照射能产生
放射性损伤创面，用药组在照射后９ｗ创面生长情
况优于阴性对照组，但各给药组间组织结构的变化
无明显差异。
图２ ４０Ｇｙ射线照射２０ｄ时的创面 图３ 给予１５％ ＡＥＬＧ １ｗ后的创面 图４ 给予１５％ ＡＥＬＧ ２ｗ后的创面
图５ 给予１５％ ＡＥＬＧ ３ｗ后的创面 图６ 给予１５％ ＡＥＬＧ ４ｗ后的创面 图７ 给予１５％ ＡＥＬＧ ５ｗ后的创面
图８ 正常组皮肤组织（×４００） 图９ 阴性组皮肤组织（×４００） 图１０ 阳性组皮肤组织（×４００）
图１１ １５％ＡＥＬＧ组皮肤组织（×４００）
２．５ 各组动物受照射后皮肤中羟脯氨酸含量比较
与空白组比较，各组动物皮肤受到射线照射后，羟
脯氨酸含量急剧下降 （Ｐ ＜０．０５）。与阴性对照组
相比，各给药组、阳性对照组皮肤中羟脯氨酸的含量
均有不同程度的升高，其差异有统计学意义 （Ｐ ＜
０．０５）。各给药组中，１０％ ＡＥＬＧ组的作用最明显，
与阳性对照组相比，各给药组羟脯氨酸含量差异均
无明显差异 （Ｐ＞０．０５），见表４。
图１２ ＡＪＥＧ组组皮肤组织（×４００）
２．６ 各组动物受照射后 ＭＤＡ含量比较 与空白
组比较，经过射线照射后阴性对照组的血清 ＭＤＡ
５１６１ 第１１期 买尔旦·马合木提，等：新疆紫草脂质体凝胶剂对放射性皮肤损伤的作用
含量升高 （Ｐ ＜０．０５），与阴性组比较，各给药组
ＭＤＡ含量均有所下降。各给药组之间比较，１５％
ＡＥＬＧ组下降明显 （Ｐ＜０．０５）。与阳性组比较，各
给药组与其差异均无明显差异，见表４。
２．７ 各组动物受照射后总ＳＯＤ活力比较 与空白
组相比，经射线照射各组的血清ＳＯＤ值均降低 （Ｐ＜
０．０５）。与阴性组比较，各给药组ＳＯＤ值均有一定程
度的提高，其中１５％ ＡＥＬＧ、５％ ＡＥＬＧ组ＳＯＤ值的
升高的差异有显著性 （Ｐ＜０．０５），且１５％ ＡＥＬＧ组
的ＳＯＤ值基本达到阴性组水平，见表４。
表４ 各组动物受照射后皮肤中羟脯氨酸、血清 ＭＤＡ含量及ＳＯＤ活力的比较（珔ｘ±ｓ）
组别 动物数／只 羟脯氨酸／（μｇ／ｍｇ） ＭＤＡ／（ｎｍｏｌ／ｍＬ） ＳＯＤ活力／（Ｕ／ｍＬ）
空白组 ６ １８５．４８±２２．１４＊ ６．２１±０．７４＊ ３１１．６５±３０．８８＊
阴性组 ８ ９７．８５±９．７８ ７．６５±０．５２ ２５４．８４±３１．３７
阳性组 ８ １４７．０１±２４．６８＊ ５．８４±０．８６＊ ２７７．７５±３７．３９
１５％ ＡＥＬＧ组 １０ １３７．６９±１４．９３＊ ５．０９±０．７５＊ ３１２．３４±３４．６６＊
１０％ＡＥＬＧ组 １０ １６８．４２±１９．７５＊ ６．９４±１．３２ ２８７．７７±２６．４５
５％ ＡＥＬＧ组 １０ １３７．１９±３２．６２＊ ６．０５±０．８６＊ ２９４．６３±２２．３０＊
ＡＪＥＧ组 １０ １４０．０３±２８．３０＊ ６．８５±１．４３ ２８０．５０±１４．９７
注：与阴性组比较，＊Ｐ＜０．０５。
２．８ 各组动物受照射后ＩＬ－６含量比较 与空白组
相比，经射线照射各组的血清ＩＬ－６含量均升高 （Ｐ
＜０．０５），与阴性组相比，各给药组及阳性组的差异
无明显差异 （Ｐ＞０．０５），见表５。
２．９ 各组动物受照射后ＴＧＦ－β含量比较 与空白
组相比，经β射线照射的血清ＴＧＦ－β含量明显升高
（Ｐ＜０．０５），与阴性组相比，除 ＡＪＥＧ组外，各给药
组ＴＧＦ－β含量的差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０５），见
表５。
表５ 各组动物受照射后血清ＩＬ－６及ＴＧＦ－β含量比较
（ｎｇ／Ｌ，珔ｘ±ｓ）
组别 动物数／只 ＩＬ－６含量 ＴＧＦ－β含量
空白组 ６ １８３．４７±１６．１３＊ ５５０．４８±１１．１８＊
阴性组 ８ ２３３．６６±１４．７５ ６３４．０５±１３．４４
阳性组 ８ ２２２．９５±２７．５６ ６１５．７９±２３．７１＊
１５％ ＡＥＬＧ组 １０ ２１７．４７±３３．２７ ６０９．５８±８．５４＊
１０％ＡＥＬＧ组 １０ ２１０．５２±２３．７７ ６１６．０２±１９．７０＊
５％ ＡＥＬＧ组 １０ ２２８．４３±６．６２ ６０８．５２±７．７８＊
ＡＪＥＧ组 １０ ２２２．２４±１１．６１ ６１９．２７±８．２４
注：与阴性组比较，＊Ｐ＜０．０５。
３ 讨论
本研究涉及的脂质体为混悬液，对动物射线损
伤的皮肤进行涂抹过程有一定的困难，所以将脂质
体加入凝胶基质中制备成剂脂质体凝胶，方便了用
药，但凝胶剂处方中的水相体积限制，在制备脂质体
凝胶剂时脂质体的加入量就成为了关键问题。本实
验所设计的脂质体含药量按总药量的５％、１０％、
１５％计算，需加入脂质体的体积分别为２０、４０、
６０ｍＬ。若脂质体所占比例继续增大，则凝胶剂不
成型。为考察脂质体凝胶剂的释药情况，本研究进
行了体外释放实验，结果显示，在总药物含量相同的
情况下，脂质体凝胶比普通凝胶透皮速率低，脂质体
含量越高，透皮速率越慢。说明脂质体可延缓药物
从基质中的释放，而凝胶剂中的药物，又起到了速释
作用。
动物模型的建立是实验的关键问题之一，在建
模时比较了不同部位的照射效果，大鼠背部照射后，
经过１～７ｄ相继出现萎靡不振、食欲下降、腹泻、尿
失禁、体质量迅速下降继而死亡等情况。经解剖发
现，经辐射的动物胃黏膜严重受损、脱落，腹腔充血，
肝脏边缘肿大，肾上腺、淋巴结肿大，推测可能是射
线穿透动物身体造成脏器损伤而死亡。因此照射部
位改为后臀部，并且于照射前将１ｃｍ厚的湿毛巾盖
于照射部位，避免穿透。经过预试验发现，雄性鼠在
照射臀部后死亡数多于雌性鼠，原因可能是造成性
器官损伤，所以选择雌性大鼠作为实验动物。实验
设计的动物数除空白组外每组均为１２只，但在受照
射后的观察期内不断有死亡，致使各组动物数量不
同，而创面出现后情况趋于稳定。
目前国内外临床用于预防和治疗放射性皮肤损
伤的药物主要有重组牛碱性成纤维细胞生长因子外
用溶液（贝复济）［８］、维生素Ｂ１２硫酸庆大霉素喷雾剂
（贯新克）［９］、金因肽（重组人表皮生长因子）喷雾
剂［１０］、三乙醇胺乳膏（比亚芬）［１１］、湿润烧伤膏［１２］
（美宝，主要为成分有黄连、黄柏、黄芩、地龙及罂栗
壳等），本研究选择中药制剂湿润烧伤膏作为阳性对
照药物。
创面反复溃疡难以愈合的机制与胶原代谢、自
６１６１ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３６卷
由基的产生及数量变化、ＴＧＦ－β、ＩＬ－６等细胞因子有
关［１３］。肤羟脯氨酸是构成皮肤胶原蛋白的特有成
分之一，约占胶原组织氨基酸残基的１０％。因此，
羟脯氨酸的含量可作为衡量其胶原组织代谢的重要
指标，自由基与膜脂质作用使膜中磷脂的不饱和脂
肪酸过氧化，产生过氧自由基、脂质过氧化物等。
ＭＤＡ是脂质过氧化物的产物，可作为反映机体脂
质过氧化物水平的间接指标，其血清和组织水平可
以反映机体细胞和组织受自由基攻击的程度。ＳＯＤ
是氧自由基最有效的清除剂，其活力的高低间接反
映了机体清除自由基的能力。本实验结果显示，经
过β射线照射的大鼠皮肤羟脯氨酸含量、ＳＯＤ含量
下降，血清 ＭＤＡ、ＩＬ－６、ＴＧＦ－β含量升高。而经过
药物干预后，各给药组皮肤羟脯氨酸含量、ＳＯＤ含
量均上升，血清 ＭＤＡ、ＩＬ－６、ＴＧＦ－β含量均有所下
降，说明 ＡＥＬＧ既能有效提高自由基清除酶系活
性，也能部分清除射线照射后产生的自由基。脂质
体凝胶剂组效果优于普通凝胶剂组，原因可能是脂
质体发挥了其延缓药物释放，较长时间保持局部药
物浓度稳定的作用。从普通凝胶与脂质体凝胶的体
外透皮试验结果看出，脂质体凝胶组２４ｈ平均累积
渗透量明显低于普通凝胶组，皮肤中羟脯氨酸含量
测定结果也证明了这点。而各组血清中的 ＭＤＡ、
ＴＧＦ－β、ＩＬ－６含量、ＳＯＤ活力差异不明显，提示脂质
体中的药物，透过角质层后滞留于皮下，在局部发挥
了作用，从而影响了羟脯氨酸含量，凝胶剂中剩余药
量的一部分在局部发挥作用，另一部分则部分进入
体内，但进入体内的药量不足以引起血清中上述指
标的明显变化。
实验中所有动物都是在观察期结束后同时取
材，经过９ｗ时间很多动物的损伤皮肤有不同程度
的自愈，给病理判断和药物疗效带来一定困难。因
此，将来的研究应加大动物样本，采用分时段取样来
研究，从而更客观地评价新疆紫草对放射性皮肤损
伤的作用及效果。
参考文献：
［１］ 李晓梅，谢燕萍，谌永毅．放射性皮肤损伤的药物防护现状［Ｊ］．
肿瘤药学，２０１２，２（５）：３３２－３３４．
［２］ 仇灏，周迎会，徐岚，等．ＳＤ近交系大鼠经电子直线加速器照射
后局部与全身自由基的变化［Ｊ］．中国血液流变学杂志，２００１，
１１（２）：９７－９９．
［３］ 周迎会，吴士良，仇灏，等．电子射线照射大鼠胶原及自由基改
变的研究［Ｊ］．中华放射医学与防护杂志，２００４，２４（５）：
４０９－４１１．
［４］ 李国英，买尔旦·马合木提．紫草在新疆的分布及研究进展
［Ｊ］．新疆医科大学学报，２００９，３２（４）３８６－３８８．
［５］ 夏玲红，崔岚，王可耀．紫草素及其衍生物的药理作用研究进
展［Ｊ］．医药导报，２０１１，３０（３）：３３９－３４１．
［６］ 李娜，买尔旦·马合木提．新疆紫草提取物凝胶剂的制备及质
量考察［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１１，１７（１）：１４－１７．
［７］ 李国英，买尔旦·马合木提，古丽仙·胡加．新疆紫草提取物
脂质体制备工艺的初步筛选［Ｊ］．中国药房，２０１０，２１（１５）：
１３７６－１３７８．
［８］ 邵伟，毛伟珍．贝复济用于放射治疗后患者皮肤黏膜糜烂的疗
效观察［Ｊ］．上海护理，２００７，７（３）：４６－４７．
［９］ 刘小红．贯新克联合ＴＤＰ治疗仪在放射性皮肤损伤中的应用
［Ｊ］．中国医疗前沿，２０１１，６（１７）：８３－８４．
［１０］ 谷串联，姜如，白欣欣．金因肽防治鼻咽癌放射治疗致皮肤损
伤的疗效 观 察 ［Ｊ］．上 海 预 防 医 学 杂 志，２００９，２１（１２）：
５９１－５９３．
［１１］ 王立英，任瑞美，刘尚兰，等．三乙醇胺对乳腺癌保留乳房术
后同时推量照射皮肤保护作用的临床观察［Ｊ］．中华肿瘤防治
杂志，２０１０，１７（１９）：１５７９－１５８０．
［１２］ 杨玉兰，何小满，唐求．美宝烧伤膏治疗放射性皮肤损伤的临
床观察［Ｊ］．湖北中医杂志，２００９，３１（４）：３３－３５．
［１３］ 姜海燕，周迎会，仇濒，等．高能电子线皮肤辐射损伤大鼠自
由基的变化［Ｊ］．上海实验动物科学，２００４，２４（２）：１０１－１０３．
［收稿日期：２０１３－０５－０３］
（本文编辑 施洋）
７１６１ 第１１期 买尔旦·马合木提，等：新疆紫草脂质体凝胶剂对放射性皮肤损伤的作用