全 文 ：新疆农业科学 2013，50( 9) : 1642 － 1650
Xinjiang Agricultural Sciences
doi:10． 6048 / j． issn． 1001 － 4330． 2013． 09. 011
新疆紫草不同材料染色体制片技术研究
潘颀，王芳，郝爱花，张佩玲
( 新疆农业大学农学院，乌鲁木齐 830052)
摘 要:【目的】研究新疆紫草不同材料的染色体制片方法，为今后倍性鉴定奠定技术基础。【方法】以新疆紫
草根尖及毛状根根尖为试验材料，采用常规制片法，分别考察培养方式及培养时间、取材时间、预处理方法、酸
解方法、酸解时间、染色时间对染色体制片效果的影响。【结果】B5 固体培养基培养 4 d的毛状根中期分裂相
指数较大，且染色体清晰，制片效果较好;早上 08:00 取材的毛状根根尖的中期分裂相指数(124． 2‰)最高，
原植物根尖(115． 4‰)在早上 10:00 取材较为适宜;毛状根根尖采用 0． 1%秋水仙素、温度 15℃、预处理时间
4 h时的中期分裂指数为 97． 6‰ ～124． 2‰，室温酸解法、10%盐酸、酸解时间为 12 min、染色时间为 20 min有
利于毛状根根尖的制片。原植物根尖采用 0． 1% ～ 0． 2%秋水仙素、温度 4 ～ 15℃、预处理时间 3 h、室温酸解
法、10%盐酸、酸解时间为 15 min时的中期分裂指数为 128． 6‰ ～128． 9‰。【结论】材料不同则取材时间及秋
水仙素预处理时间就有所不同。秋水仙素预处理时间、温度及酸解时间是影响新疆紫草染色体制片效果的关
键因素。
关键词:新疆紫草;染色体制片;中期分裂指数;毛状根根尖
中图分类号:S562 文献标识码:A 文章编号:1001 － 4330(2013)09 － 1642 － 09
收稿日期:2013 － 04 － 11
基金项目:国家自然科学基金项目(31060205)
作者简介:潘颀(1989 －) ，女，新疆阿克苏人，硕士研究生，研究方向为植物细胞工程，(E － mail)1601263797@ qq． com
通讯作者:王芳(1962 －) ，女，教授，硕士生导师，研究方向为植物细胞工程，(E － mail)wangfang1hao@ 126． com
Research into Chromosome Squash Technique of Different Materials
in Arnebia Euchroma (Royle)Johnst
PAN Qi，WANG Fang，HAO Ai － hua，ZHANG Pei － ling
(College of Agronomy，Xinjiang Agricultural University，Urumqi 830052，China)
Abstract:【Objective】This study aims to explore the chromosome squashing method of different materials
of Arnebia Euchroma (Royle)Johnst，and provide reference for the polyploid identification．【Method】The
roots and hairy roots of Arnebia Euchroma (Royle)Johnst＇s were used as experiment materials and conventional
tablet method was used to investigate the influence of chromosomes squashing effects of cultivation mode，culti-
vation time，sampling time，pretreatment method，acid solution method，acid solution time and dyeing time．
【Result】4d medium － term phase splitting index of B5 solid medium culture hairy roots was larger，the chro-
mosomes were clear and squashing effect was good;Sampled at 8:00 A． M． medium － term phase splitting in-
dex of hairy roots apices was the highest (124． 2‰) ，the roots (115． 4‰)of original plant sampled at 10:00
A． M． were relatively appropriate;The medium － term phase splitting index of hairy roots apices of was
97. 6‰ to 124． 2‰ when 0． 1% colchicine solution was pretreated at 15℃ for 4h;Acid solution at room tem-
perature，hydrolysed with 10% HCL for 12 mins and dyed 20 mins was advantageous to the squashing of hairy
roots． Medium － term phase splitting index of original plant roots apices of was 128． 6‰ to 128． 9‰ when
0. 1% to 0． 2% colchicine solution was pretreated at 4℃ to 15℃ for 3h and acid solution at room temperature
9 期 潘颀等: 新疆紫草不同材料染色体制片技术研究
with 10% HCL for 15 mins．【Conclusion】When the material was different，the sampling time and colchicine
solution time were different，too． Colchicines pretreatment time，temperature and acid solution time were the
key factors that would influence the effect of squashing．
Key words:Arnebia Euchroma (Royle) ;chromosome squashing
0 引 言
【研究意义】新疆紫草(Arnebia eeuchroma (Royle．)Johnst)习称软紫草，为紫草科多年生草本植物，
是我国传统药用紫草类植物中临床药效最好的一种，其主要成分为紫草素，具有杀菌、护肝、抗肿瘤、抗
生育等药理作用［1］。在临床上主要用于治疗肝炎、静脉炎、血管性紫癜、银屑病、烧伤等多种疾病，同时
还是世界上常用的天然植物红色素中性能最好的一种，已被联合国食品添加剂法典委员会列入食品、化
妆品、药品添加剂范围［2］。随着需求量的大幅提高，近年来对新疆紫草的无序采挖，生态环境遭受严重
破坏。因此保护新疆紫草种质资源、提供稳定、可持续利用的药材资源刻不容缓。多倍体诱变育种及体
细胞杂交是创造新材料、新种质、新品种的重要育种手段，是解决资源缺乏的重要途径，而染色体制片是
进行种质资源评价、染色体变异、杂种分析等细胞学、遗传学研究的基础和关键环节，染色体计数也是倍
性鉴定最直接、最可靠的方法，不仅技术准确，而且不需要昂贵的仪器设备。【前人研究进展】许多学者
在各种植物的制片技术研究中，常常采用常规压片法和去壁低渗法，并分别对植物材料的种类、取材时
间、预处理方法、预处理药剂种类及药剂的浓度、处理时间、固定液的种类、酸解方法、酸解浓度、酸解时
间、染色液种类及染色时间等影响制片效果的因素进行了大量研究［3 ～ 7］，认为不同物种、同一物种不同
品种的染色体制片技术是有差异的［8 ～ 11］，而且预处理及解离是影响制片效果的重要环节［12］。【本研究
切入点】新疆紫草染色体制片技术的相关研究报道较少［13 ～ 14］，且未详细对制片技术进行研究。研究以
新疆紫草的毛状根根尖、原植物根尖为材料，着重探讨预处理方法、秋水仙素浓度及处理时间、解离时间
对制片效果的影响。【拟解决的关键问题】研究以新疆紫草根尖及毛状根根尖为试验材料，采用常规制
片法，分别考察培养方式及培养时间、取材时间、预处理方法、酸解方法、酸解时间、染色时间对染色体制
片效果的影响，旨在筛选出一套适于新疆紫草不同材料的染色体制片方法，为新疆紫草倍性鉴定奠定技
术基础。
1 材料与方法
1． 1 材 料
新疆紫草种子、毛状根［15］由本课题组提供。
主要药品为 95%乙醇，秋水仙素，二甲基亚砜，培养基为 SH、B5 培养基
［16］。
主要设备为高压灭菌锅 (上海博迅实业有限公司) ，超净工作台 (苏州净化) ，温控气浴摇床 (金坛
市精达仪器制造有限公司) ，数码显微镜(DigilabII － C)及相应软件(Motic Digilabll)。
1． 2 方 法
1． 2． 1 药品配制
卡宝品红溶液的配制参照许艳萍等［17］的方法。
秋水仙素母液配制:称取 1 g秋水仙素，用经高压灭菌的 2%二甲基亚砜溶液溶解，定容至 10 mL，
即配成 100 mg /mL母液，过滤除菌(滤膜孔径 0． 22 μm)后待用。
1． 2． 2 材料培养
(1)毛状根培养
将 2 ～ 4 cm的毛状根分别接种于装有 B5 固体培养基、SH 液体培养基中，培养基均附加蔗糖 30 g /
L、肌醇 1 g /L、酸水解酪蛋白 0． 5 g /L。培养液灭菌前调 pH 5． 8，在温度(23 ± 1)℃条件下暗培养，培养
一定时间待用。液体培养的转速为 90 ～ 100 r /min。
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新疆农业科学 50 卷
(2)种子萌发
基质的比例按珍珠岩∶蛭石∶土 = 1∶ 1∶ 1 的比例混合并高温灭菌，种子播种于装有基质的花盆中，覆
土约 1 ～ 1． 5 cm后洒水，盆土含水量 80%左右，花盆置于(25 ± 1)℃条件下光照培养，待根长至 2 cm左
右时取根尖制片。
1． 2． 3 染色体制片
采用常规制片法进行染色体制片，即取材、清洗、预处理、固定及保存、酸解、染色、压片、镜检。具体
方法是取生长旺盛的根尖，洗掉根尖上的泥土和其他物质，剪短至 2 cm，置于秋水仙素溶液中预处理一
定时间，然后淹没于卡诺固定液(无水乙醇∶ 冰乙酸 = 3∶ 1)中、4℃下固定 24 h，并于 4℃条件下保存备
用。固定后的材料经蒸馏水冲洗 5 ～ 6 遍，置于 HCl中、一定温度下处理一定时间进行酸解，将材料用蒸
馏水冲洗 7 ～ 8 遍，置于载玻片上，卡宝品红染色，用尖头镊子将材料夹碎，盖上盖玻片，用吸水纸将盖玻
片及载玻片包在一起，用拇指以适当的力度按压，然后用铅笔橡皮头一端轻盖玻片，使细胞均匀分散。
选择有代表性的制片，每张制片随机选取 30 个视野，数码显微镜 100 倍下拍照，分别统计视野中的细胞
总数和具中期分裂相的细胞数，计算平均中期分裂相指数。
中期分裂相指数(千分数)=分裂中期细胞数 /视野细胞总数。
(1)培养方式及培养时间
设置 SH液体及 B5 固体两种培养基;培养时间梯度为 4、7、15 d。
(2)取材时间试验
在一天的 08:00 ～ 20:00 时间范围内每隔 1 h取材一次。
(3)预处理方法
设置三种预处理方法即 0． 2%的秋水仙素、0． 002 mol /L的 8 －羟基喹啉、冰水混合物(4℃、24 h) ;
设置秋水仙素预处理浓度 0． 1%、0． 2%、预处理时间 3、4 h、预处理温度 4、15、25℃。所有预处理均在黑
暗中进行。
(4)酸解方法及酸解时间
采用室温酸解法和 60℃恒温水浴法两种方法进行酸解;酸解浓度分别为 8． 5% HCl、10% HCl;设置
酸解时间梯度为 8、12、15、18、20 min。
(5)染色时间
设置染色时间梯度为 15、20、25、30、35 min。
2 结果与分析
2． 1 培养方式及培养时间对毛状根根尖中期分裂相的影响
研究表明，两种培养基的毛状根根尖的中期分裂相指数均随培养时间延长而下降，培养 4 d 时的中
期分裂相指数最大。B5 固体培养基培养的毛状根的中期分裂相指数较 SH培养基的大，且染色体清晰，
制片效果较好。培养时间过长，根尖颜色变深、老化，制片后处于分裂期的细胞极少，难以看清染色体。
表 1
张羽等［12］研究认为，在预处理前对材料进行蒸馏水活化有助于提高试验效果，目的是造成细胞内
外压力差，增加细胞吸收药液的能力。研究中，在 SH 培养基中的毛状根的中期分裂相较少，推测可能
是由于在液体培养基中毛状根细胞内的水分过多，对药液的吸收能力降低的缘故。因此，当采用液体培
养的毛状根根尖进行制片时，宜选择露出液体表面的根尖。
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9 期 潘颀等: 新疆紫草不同材料染色体制片技术研究
表 1 培养方式及培养时间对毛状根根尖的中期分裂相的影响(100 ×)
Table 1 Effect of hairy roots medium － term phase division on cultivation mode and time (100 ×)
培养方式
Cultivation mode
培养时间(d)
Cultivation time
中期分裂相指数(‰)
Medium － term phase division index
SH液体培养
SH Liquid culture
4 95． 24
7 40． 64
15 0
B5 固体培养
B5 Solid culture
4 120． 42
7 46． 25
15 0
2． 2 取材时间对获得不同材料中期分裂相的影响
在早晨 08:00 ～ 20:00 范围内每隔 1 h 取材，制片后镜检观察，比较不同采集时间的中期分裂相指
数。毛状根根尖、原植物根尖均在上午取材有利于获得较多的中期分裂相，毛状根根尖的中期分裂相指
数在早上 08:00 点为最高，其次为原植物根尖为早上 10:00，表明中期分裂相指数达峰值的时间因材料
不同而异。两种材料的中期分裂相指数在达峰值后均随取材时间的延后而降低，表明这两种材料在早
晨 08:00、10:00 是生长较旺盛的时期，是适宜的取材时间。表 2
表 2 取材时间与新疆紫草不同材料的中期分裂相指数的关系(100 ×)
Table 2 The relationship of medium － term phase division index on sampling time with
Arnebia euchroma (Royle)Johnst different materials (100 ×)
材料 Material
取材时间 Sampling time
08:00 09:00 10:00 11:00 12:00 13:00 14:00 15:00 16:00 17:00 18:00 19:00 20:00
毛状根根尖 (‰)
Hairy roots 124． 2 110． 8 68． 2 36． 7 32． 7 31． 2 21． 7 24． 7 22． 2 22． 2 18． 4 10． 5 8． 3
原植物根尖 (‰)
Original plant roots 47． 3 33． 3 115． 4 64． 3 40． 2 36． 3 34． 3 25． 7 22． 2 16． 5 18． 4 13． 5 6． 7
2． 3 不同预处理方法对获得毛状根根尖中期分裂相的影响
对 3 种不同预处理方法进行了研究，结果显示，采用秋水仙素预处理获得的中期分裂相指数最高，
且染色体形态好、缢痕清晰、能够独立分开(图 1a) ，制片成功率最高;采用 8 －羟基喹啉效果次之，染色
体聚缩效果较差，部分染色体缠绕在一起(图 1b) ，不利于染色体数目统计和核型分析;冰水混合物处理
后，虽易使染色体集中在赤道板上，但染色体聚缩效果欠佳，且形态弯曲，粘连现象较严重，背景较模糊，
染色体形态不清晰(图 1c) ，制片成功率最低。表 3，图 1
表 3 不同预处理方法对毛状根根尖制片效果的影响
Table 3 Effect of hairy roots squashing effects in different pretreatment methods
预处理方法
Pretreatment method
中期分裂相指数(‰)
Medium － term phase division index
分散效果
Dispersion effect
分辨程度
Degree of resolution
秋水仙素
Colchicine 125． 0 较好 易观察，染色体短、清晰
8 －羟基喹啉
8 － Hydroxyquinoline 84． 3 好 染色体清晰
冰水混合物
Mixture of ice and water 45． 7 较差 染色体有缠绕，染色体不清晰
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图 1 不同预处理方法的毛状根根尖中期分裂相(100 ×)
Fig. 1 Hairy roots medium － term phase division in different pretreatment method (100 ×)
2． 4 秋水仙素预处理对获得毛状根根尖及原植物根尖中期分裂相的影响
对毛状根根尖及原植物根尖进行两种浓度、两个温度、两个预处理时间制片效果比较，结果显示，对
于毛状根根尖而言，秋水仙素浓度无论在 0． 1%还是在 0． 2%时，均表现预处理温度在 15℃时的中期分
裂相指数较高。当秋水仙素为 0． 1%、预处理时间为 4 h时的中期分裂指数最高为 97． 6‰，表明温度和
处理时间是影响毛状根根尖制片的重要因素。对于原植物根尖而言也表现出预处理温度在 15℃时的
中期分裂相指数较高，当秋水仙素为 0． 1%、温度为 15℃、预处理时间为 3 h 时的中期分裂相指数最高
为 128． 9‰，但染色体多聚集在一起，分散度较差，而当秋水仙素预处理浓度为 0． 2%、温度为 25℃、预
处理时间为 3 h时，虽然中期分裂相指数较低，但染色体聚缩适中、分散度好、清晰可数。毛状根根尖与
原植物根尖表现出的这种差异可能与根尖的结构、软硬程度及粗细有关，有待今后进一步研究。表 4
表 4 秋水仙素预处理对新疆紫草不同材料中期分裂相指数的影响(100 ×)
Table 4 Effect of medium － term phase division index on Arnebia euchroma (Royle)Johnst
different materials with colchicine pretreatment (100 ×)
秋水仙素浓度(%)
Concentration of colchicine
预处理温度(℃)
Pretreatment temperature
预处理时间(h)
Pretreatment time
毛状根根尖 (‰)
Hairy roots
原植物根尖 (‰)
Original plant roots
0． 10
15
25
3 74 82． 5
4 97． 6 86． 7
3 64． 5 35． 4
4 72． 4 28． 5
0． 20
15
25
3 79． 2 66． 2
4 86． 6 68． 3
3 62． 2 64． 1
4 69． 4 53． 2
2． 5 酸解方法及酸解时间对毛状根根尖染色体制片的影响
材料经固定后需进行酸解，使细胞分离，软化细胞壁和降解部分细胞质，便于染色体分散和展平，而
盐酸解离是较为普遍的一种解离方式。研究对酸解温度研究发现，室温酸解法(图 2a)较 60℃恒温水
浴法(图 2b)的中期分裂相多，染色体分散、较清晰。在此基础上对盐酸浓度进行研究，结果表明 10%
盐酸较 8． 5%盐酸能使染色体更加分散，表明在常温酸解条件下，适当增加盐酸浓度有利于制片效果的
提高。进一步对解离时间进行研究，发现酸解时间过短(8 min) ，细胞壁未破裂，染色体难以分散开，且
呈弯曲状(图 2c) ;酸解时间过长(≥15 min) ，导致整个细胞完全破碎，染色体分散度太大，或出现染色
体也被解离的现象(图 2d) ，从而无法统计染色体总数。毛状根根尖的适宜酸解时间为 12 min。图 2
当秋水仙素浓度为 0． 2%、预处理时间为 4 h时，预处理温度及酸解时间对新疆紫草原植物根尖中
期分裂相指数的影响结果显示，随着预处理温度的升高，原植物根尖中期分裂相指数呈下降趋势。当温
度一定时，酸解时间均呈先升高后降低趋势，在 4℃预处理条件下，酸解时间为 15 min 中期分裂相指数
达最高(128． 6‰)。表 5
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9 期 潘颀等: 新疆紫草不同材料染色体制片技术研究
图 2 酸解方法与毛状根根尖染色体制片效果(100 ×)
Fig. 2 Acid solution method with hairy root tips chromosomes squashing effects (100 ×)
表 5 预处理温度及酸解时间对新疆紫草原植物根尖中期分裂相指数的影响(100 ×)
Table 5 Effect of medium － term phase division index on Arnebia euchroma (Royle)
Johnst original plant roots with pretreatment temperature and acid solution time(100 ×)
预处理温度(℃)
Pretreatment temperature
酸解时间(min)
Acid solution time
原植物根尖(‰)
Original plant roots
4
12 104． 3
15 128． 6
18 92． 5
15
12 80． 6
15 90． 3
18 64． 8
25
12 73． 6
15 76． 4
18 57． 8
2． 6 染色时间对毛状根根尖制片效果的影响
不同染色时间试验结果显示，染色时间较短(15 min)时则染色背景颜色太浅，很难观察到细胞，其
中的染色体难以看清，若染色时间太长(≥30 min)则细胞都被染成紫红色，背景颜色深且成团，很难观
察。研究发现毛状根根尖染色体制片的最佳染色时间为 20 min。
3 讨 论
大量研究表明，植物细胞染色体制片检测染色体数目可以采用多种材料，如根尖、茎尖、种子、芽、幼
叶、花粉母细胞及愈伤组织［18 ～ 24］等，但采用根尖和茎尖最为常见。试验分别采用新疆紫草的根尖、毛状
根根尖作为试验材料，发现毛状根根尖中期分裂相较多，染色体粗、短，细胞及染色体均较分散，较清晰、
易观察。其主要原因可能与毛状根尖结构、软硬程度及粗细有关，有待今后进一步研究。
任何时间取样压片都可以从正常的分生组织材料中获得中期分裂相［25］，只是分裂相所占的比例及
分散细胞的数量差异较大。杨宁等［6］研究认为 08:40 ～ 09:15 是观察百里香染色体数目比较好的时期，
其中期细胞的百分比最高可达 40%;韩毅科等［5］以黄瓜卷须为材料，发现取材时间在 08:40 ～ 09:10，出
现的中期分裂相次数最多，制片成功率高;汪洋等［26］以中华蚊母根尖为材料，发现取材时间为 09:00 ～
11:00 或 13:00 ～ 15:00 可获得最佳得制片效果。试验通过反复摸索发现，毛状根根尖、原植物根尖分
别在 08:00 ～ 09:00、10:00 时取材有利于获得较多的中期分裂相，此结果与张羽等［12］的结果一致。
目前在细胞学研究中，人们常使用的预处理液主要是秋水仙素、对二氯苯、8 －羟基喹啉和冰水混合
物等。洪培培等［4］以一串红萌发种子的根尖为试验材料，用 8 －羟基喹啉预处理 3 ～ 4 h，压片所得染色
体效果最好。杨宁等［6］采用 0． 04%秋水仙素和 0． 002 mol /L 8 －羟基喹啉溶液等体积混合液处理百里
香芽尖 2 ～ 3 h，获得较好的染色体制片效果。劳世辉等［27］以 0． 002 mol /L 8 －羟基喹啉与 0． 2%秋水仙
素(1∶ 1)混合液作为预处理剂预处理 3 h，进行菠萝蜜的染色体制片效果较好。刘敏等［28］采用 0． 002
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mol /L 8 －羟基喹啉预处理预处理 4 h，进行树上干杏染色体制片获得较好效果。研究采用三种不同的
预处理方法，结果表明 0． 2%秋水仙素溶液处理新疆紫草毛状根根尖，获得了缢痕清晰，分散良好的中
期分裂相。这与劳世辉等［27］的研究结果基本一致。可见预处理药剂的种类是获得较多中期分裂相的
影响因素之一。
酸解的主要目的是软化植物细胞壁，使细胞容易分散，利于染色和观察，因此酸解的浓度、时间及方
法成为制片技术的主要考察因子。汪洋等［26］认为中华蚊母树根尖采用 1 mol /L盐酸 60℃下解离 8 min
的制片效果较好。姚睿等［29］对春石斛组培苗根尖采用 1 mol /L 的 HCl、在 25℃下解离 18 min 时，染色
体形态清楚，易于观察。林秀琴等［30］对甘蔗根尖采用 1 mol /L HCl与 45%乙酸等体积混合液于 60℃水
浴锅解离 8 min的染色体制片效果最好。研究采用 10%HCl、25℃酸解 12 min时，所得制片的染色体中
期分裂相数目较多，且染色体较短，清晰，易于观察。这与前人的研究结果一致，只是由于植物材料不
同，酸解浓度有所不同。此外，经反复多次制片发现，中期分裂相指数不够稳定，这可能与毛状根分支
多、根尖生长不整齐、不一致，以及种子苗发芽整齐度差、根尖生长不整齐、不一致有关，有待进一步研
究。
4 结 论
通过对新疆紫草不同材料染色体制片技术方法的比较分析和探索，制片材料不同，取材时间、秋水
仙素浓度、温度、预处理时间及酸解时间有所不同。秋水仙素预处理时间、温度及酸解时间是影响制片
效果的关键因素。研究为今后新疆紫草的倍性鉴定奠定了技术基础。
参考文献(Reference)
［1］葛锋，王晓东，王玉春．药用紫草的研究进展［J］．中草药，2003，34(9) :6 － 10．
GE Feng，WANG Xiao － dong，WANG Yu － chun． (2003)． Advances in studies on medicinal Radix Arnebiae Seu Lithospermi［J］． Chinese
Traditional and Herbal Drugs，34(9) :pp． 6 － 10．(in Chinese)
［2］高菊红．紫草的资源、化学、药理和临床研究情况［J］．中草药，1986，17(6) :28 － 31．
GAO Ju － hong． (1986)． Resources，chemical，pharmacological and clinical research of Lithospermum erythrorhizon Sieb． et Zucc［J］． Chi-
nese Traditional and Herbal Drugs，17(6) :pp． 28 － 31． (in Chinese)
［3］胡凤荣，王斐，鲍仁蕾，等．风信子根尖预处理及核型分析［J］．西北植物学报，2012，32(10) :2 030 － 2 034．
HU Fengrong，WANG Fei，BAO Ren － lei．(2012)． Pretreatment Reagents for Hyacinthus Root Tip and Karyotype Analysis［J］． Acta Bot． Bo-
real． － Occident． Sin．，32(10) :pp． 2，030 － 2，034．(in Chinese)
［4］洪培培，杨建玉，陈洪伟，等．一串红染色体制片技术优化与计数［J］．西北植物学报，2011，31(10) :2 124 － 2 128．
HONG Pei － pei，YANG Jian － yu，CHEN Hong － wei．(2011)． Optimization of Chromosome Sectioning and Chromosome Counting of Salvias-
plendns［J］． Acta Bot． Boreal． － Occident． Sin．，31(10) :pp． 2，124 － 2，128．(in Chinese)
［5］韩毅科，杜胜利，王鸣．黄瓜染色体制片及倍性研究［J］．华北农学报，2003，18(1) :72 － 74．
HAN Yi － ke，DU Sheng － li，WANG Ming． (2003)． Study on Chromosome Preparing and Ploidy in Cucumber［J］． Acta Agriculturae Bireali
－ sinica，18(1) :pp． 72 － 74．(in Chinese)
［6］杨宁，谈永霞，李巧峡，等．百里香染色体制片优化及核型分析［J］．草业学报，2012，21(1) :184 － 189．
YANG Ning，TAN Yong － xia，LI Qiao － xia． (2012)． Optimization of a chromosome mounting technique and karyotype analysis of Thymus
mongolicus［J］． Acta Prataculturae Sinica，21(1) :pp． 184 － 189． (in Chinese)
［7］杨晓伶，程舟．柑橘类植物染色体制片新技术［J］．同济大学学报(自然科学版)2005，28(2) :242 － 244．
YANG Xiao － ling，CHENG Zhou． (2005)． New Method of Chromosome Flaking for Citrus Plant［J］． Journal of Tongji University (Natural
Science) ，28(2) :pp． 242 － 244． (in Chinese)
［8］杜幸，陈敏燕，刘鹏，等．两个荞麦品种的核型分析［J］．亚热带植物科学，2005，34(2) :36 － 38．
DU Xing，LIU Min － yan，LIU Peng． (2005)． Karyotype Analysis of Two Buckwheat Variety Chromosomes［J］． Subtropical Plant Science，34
(2) :pp． 36 － 38． (in Chinese)
［9］何子灿，李勇，闫斌，等．五种紫萁属植物的核型分析［J］．植物分类学报，2006，44(6) :617 － 626．
HE Zi － can，LI Yong，YAN Bin． (2006)． Karyotype analysis of five species in Osmunda (Osmundaceae) ［J］． Acta Phytotaxonomica，44
(6) :pp． 617 － 626．
8461
9 期 潘颀等: 新疆紫草不同材料染色体制片技术研究
［10］郄丽娟，申书兴，轩淑欣，等．大白菜和结球甘蓝基因组原位杂交及核型分析［J］．园艺学报，2007，34(6) :1 459 － 1 464．
QIE Li － juan，SHEN Shu － xing，XUAN Shu － xin． (2007)． Karyotype Analysis of Chinese Cabbage and Cabbage by Genome in Situ Hy-
bridization［J］． Acta Horticulturae Sinica，34(6) :pp． 1，459 － 1，464． (in Chinese)
［11］张旭，吴卫，郑有良，等．紫苏属植物染色体数目和核型分析［J］．西北植物学报，2008，28(10) :1 972 － 1 977．
ZHANG Xu，WU Wei，ZHENG You － liang． (2008)． Chromosome Numbers and Karotypes Analysis of Genus Perilla L．［J］． Acta Bot． Bo-
real． － Occident． Sin．，28(10) :pp． 1，972 － 1，977． (in Chinese)
［12］张羽，王勇，陈雪燕．植物染色体制片中疑难问题的解析［J］．安徽农业科学，2010，38(35) :19 901 － 19 903．
ZHANG Yu，WANG Yong，CHEN Xue － yan． (2010)． Analysis of Problems in Chromcsomal Observation of Plant［J］． Journal of Anhui
Agricultural Sciences，38(35) :pp． 19，901 － 19，903． (in Chinese)
［13］计巧灵，王卫国．新疆紫草的无性繁殖及其再生植株的遗传稳定性初探［J］．植物生理学报，2001，37(6) :499 － 502．
JI Qiao － ling，WANG Wei － guo． (2001)． Asexual reproduction and regeneration plant genetic stability of Arnebia euchroma(Royle)Johnst
［J］． Plant Physioligy Communications，37(6) :pp． 499 － 502． (in Chinese)
［14］李国珍，秦明波，康宁玲，等．新疆紫草的组织培养及其染色体分析［J］．植物学通报，1992，9(1) :37 － 41．
LI Guo － zhen，QIN Ming － bo，KANG Ning － ling． (1992)． Tissue culture and chromosome analysis of Arnebia euchroma［J］． Chinese Bul-
letin of Botany，9(1) :pp． 37 － 41．
［15］陈永芳，芦韦华，王芳，等．新疆紫草毛状根的诱导及培养［J］．西北植物学报，2008，28(12) :2 423 － 2 428．
CHEN Yong － fang，LU Wei － hua，WANG Fang． (2008)． Induction and culture of hairy roots from Arnebia euchroma (Royle)Johnst［J］．
Acta Bot． Boreal． － Occident． Sin．，28(12) :pp． 2 423 － 2 428． (in Chinese)
［16］芦韦华，陈永芳，王芳，等．理化条件对新疆紫草毛状根培养及紫草素含量的影响［J］．华中农业大学学报，2012，31(1) :50 － 54．
LU Wei － hua，CHEN Yong － fang，WANG Fang． (2012)． Effects of physical and chemical conditions on culture of Arnebia euchroma
(Royle)Johnst hairy roots and content of shikonin and derivatives［J］． Journal of Huazhong Agricultural University，31(1) :pp． 50 － 54． (in
Chinese)
［17］许艳萍，杨明，郭孟壁，等．大麻染色体制片技术的比较研究［J］．西南农业学报，2012，25(5) :1 865 － 1 869．
XU Yan － ping，YANG Ming，GUO Meng － bi． (2012)． Comparison of Techniques of Chromosome Preparation in Cannabis sativa L［J］．
Southwest China Journal of Agricultural Sciences，25(5) :pp． 1，865 － 1，869．
［18］张挺，顾志建．百合科扭柄花属一个新的染色体基数［J］．植物分类学报，2005，43(6) :533 － 538．
ZHANG Ting，GU Zhijian． (2005)． A new basic chromosome number of x = 7 for the genus Streptopus (Liliaceae) ［J］． Acta Phytotaxonomi-
ca Sinica，43(6) :pp． 533 － 538． (in Chinese)
［19］王俊丽，林鉴钊，李素丽，等．甘蔗茎尖初生增粗分生组织与顶端分生组织细胞分裂研究［J］．广西农业生物科学，2004，23(1) :11 －
14．
WANG Jun － li，LIN Jian － zhao，LI Suli． (2004)． Studies on the cell division of primary thickening meristem and apical meristem of the
shoot apex in sugarcane［J］． Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science，23(1) :pp． 11 － 14．
［20］陈迪新，宣章燕．去壁低渗法在黄瓜染色体核型分析中的应用［J］．生物学通报，2008，43(4) :52 － 53．
CHEN Di － xin，XUAN Zhang － yan． (2008)． Application of Low permeability to wall method on cucumber karyotype analysis［J］． Bulletin
of Biology，43(4) :pp． 52 － 53． (in Chinese)
［21］王水琦，王子琳，郭陈福，等．福建割手密的染色体研究［J］．甘蔗糖业，1996，(5) :9 － 13．
WANG Shui － qi，WANG Zi － lin，GUO Chen － fu． (1996)． Studies on the Chromosome of Saccharum spontaneum from Fujian［J］． Sugar-
cane and Canesugar，(5) :pp． 9 － 13．
［22］高和琼，王英，金鸽，等．橡胶树叶片染色体制片方法的优化［J］．热带作物学报，2009，30(5) :565 － 569．
GAO He － qiong，WANG Ying，JIN Ge． (2009)． Optimization of Chromosome Preparations of Hevea Leaves［J］． Chinese Journal of Tropi-
cal Crops，30(5) :pp． 565 － 569． (in Chinese)
［23］刘传虎，张秋平，姚家玲，等．龙须草核型分析和花粉母细胞减数分裂的细胞学研究［J］．中国农业科学，2007，40(1) :27 － 33．
LIU Chuan － hu，ZHANG Qiu － ping，YAO Jialing． (2007)． Karyotype Analysis and Pollen Mother Cells Meiosis Observation in Eulaliopsis
binata［J］． Scientia Agricutura Sinica，40(1) :pp． 27 － 33． (in Chinese)
［24］王海燕．速生杨愈伤组织染色体制片技术［J］．安徽农业科学，2008，36(25) :10 895 － 10 896，10 897．
WANG Hai － yan． (2008)． Chromosome Preparation Technique of Calls of Fast － growing Poplar［J］． Journal of Anhui Agricultural Sciences，
36(25) :pp． 10，895 － 10，896，10，897．(in Chinese)
9461
新疆农业科学 50 卷
［25］李懋学，张赞平．作物染色体及其研究技术［M］．北京:中国农业出版社，1996．
LI Mao － xue，ZHANG Zan － ping． (1996)． Plant Chromosome and Its Research Technique［M］． Beijing:China Agriculture Press．(in Chi-
nese)
［26］汪洋，李晓玲，杨进，等．中华蚊母树染色体制片及核型分析［J］．西北植物学报，2011，31(9) :1 742 － 1 748．
WANG Yang，LI Xiao － ling，YANG Jin．(2011)． Chromosome Preparation and Karyotype Analysis of Distylium chinense (Fr．)Diels［J］．
Acta Bot． Boreal． － Occident． Sin．，31(9) :pp． 1，742 － 1，748． (in Chinese)
［27］劳世辉，魏岳荣，盛鸥，等．菠萝蜜的染色体制片优化及核型分析［J］．中国农学通报，2011，27(16) :215 － 219．
LAO Shi － hui，WEI Yue － rong，SHENG Ou． (2011)． Optimization of Chromosome Mounting Technique and Karyotype Analysis of Jack-
fruit (Artocarpus heterophyllus Lam．) ［J］． Chinese Agricultural Science Bulletin，27(16) :pp． 215 － 219． (in Chinese)
［28］刘敏，王卉，宁慧霞，等．树上干杏染色体制片优化及核型分析［J］．西北农业学报，2012，21(10) :79 － 83．
LIU Min，WANG Hui，NING Hui － xia． (2012)． Optimization of Chromosome Sectioning and Karyotype Analysis of Apricot Cultivar“Shus-
hanggan”［J］． Acta Agriculturae Boreali － occidentalis Sinica，21(10) :pp． 79 － 83． (in Chinese)
［29］姚睿，廉美兰，于晓坤，等．春石斛根端染色体制片技术的优化［J］．延边大学农学学报，2012，34(2) :99 － 102．
YAO Rui，LIAN Mei － lan，YU Xiao － kun． (2012)． Optimization of chromosome sectioning technology of root tip in nobile － type Den-
drobium［J］． Journal of Agricultural Science Yanbian University，34(2) :pp． 99 － 102． (in Chinese)
［30］林秀琴，蔡青，陆鑫，等．甘蔗根尖染色体制片技术研究［J］．中国农学通报，2011，27(27) :104 － 108．
LIN Xiu － qin，CAI Qing，LU Xin． (2011)． Studies on Technique of Chromosome Squashing of Root － tip in Sugarcane［J］． Chinese Agri-
cultural Science Bulletin，27(27) :pp． 104 － 108． (in Chinese
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