全 文 ：收稿日期:2011-12-17
基金项目:广东省自然科学基金团队项目(8351063201000003)
作者简介:吴春(1985-) ，女，博士研究生，研究方向:生物医药工程;E-mail:ksdchun416@ 126. com。
* 通讯作者:李药兰，Tel:020-85221728，E-mail:tliyl@ jnu. edu. cn。
鸭脚木指纹图谱研究及 3 种三萜皂苷类
化合物的含量测定
吴 春，王国才，段营辉，吴 霞，周光雄，叶文才，李药兰*
(暨南大学中药及天然药物研究所 /中药药效物质基础及创新药物研究广东省重点实验室，广东 广州
510632)
摘要 目的:建立鸭脚木药材 HPLC指纹图谱，并同时测定鹅掌柴熊果酸皂苷 F、鹅掌柴熊果酸皂苷 D和鹅掌
柴齐墩果酸皂苷 D 3 种主要成分的含量，为鸭脚木药材的质量控制提供有效的方法。方法:采用 Agilent Zorbax SB-
C18(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)色谱柱，甲醇-0. 1%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱，流速 1 mL /min，以蒸发光散射
检测器(ELSD)检测，记录 10 批不同来源鸭脚木药材样品的色谱图，并同时测定 3 种主要成分的含量。结果:建立
了 10 批鸭脚木药材的 HPLC-ELSD指纹图谱，3 种三萜皂苷分离度较好。结论:此方法简便、可靠，指纹图谱结合含
量测定可以更好的控制鸭脚木药材的内在质量。
关键词 鸭脚木;HPLC-ELSD;指纹图谱;三萜皂苷
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)07-1062-04
Study on the HPLC Fingerprint and Simultaneous Determination of Three
Triterpene Glycosides in Schefflera heptaphylla
WU Chun，WANG Guo-cai，DUAN Ying-hui，WU Xia，ZHOU Guang-xiong，YE Wen-cai，LI Yao-lan
(Institute of Traditional Chinese Medicine ＆ Natural Products /Guangdong Province Key Laboratory of Pharmacodynamic Constituents of
TCM and New Drugs Research，Jinan University，Guangzhou 510632，China)
Abstract Objective:To establish the HPLC fingerprint and simultaneously determination three triterpene glycosides in Schefflera
heptaphylla. Methods:The separation was carried out on an Agilent Zorbax SB-C18(4. 6 mm × 250 mm，5μm)column eluted with meth-
anol-0. 1% glacial acetic acid as the mobile phase，and samples were detected by an evaporative light scattering detector (ELSD). The
similarity evaluation system for chromatographic fingerprint of traditional Chinese medicine (Version 2004 A)was used in data analysis.
Results:Schefflera heptaphylla from different regions were similar and the separation of three triterpene glycosides was good. Conclu-
sion:This method is simple and reliable. The HPLC fingerprint and contents of three kinds of triterpene glycosides of Schefflera hep-
taphylla can be used for their quality control.
Key words Schefflera heptaphylla (L.)Frodin;HPLC-ELSD;Fingerprint;Triterpene glycosides
鸭脚木 Schefflera heptaphylla (L. )Frodin 又名
手树、鹅掌柴，为五加科鹅掌柴属植物。该种在我国
主要分布于广东、广西、云南、江西等地〔1〕。以根皮
及树皮入药，味苦涩。民间常作为祛风镇痛药，有镇
静、镇痛和催眠作用，临床上常用于治疗坐骨神经
痛、三叉神经痛、神经性头痛、风湿性关节痛等〔2〕。
鸭脚木中主要有效成分为三萜及其皂苷类化合
物〔3-6〕，其中主要成分为鹅掌柴熊果酸皂苷 F、鹅掌
柴熊果酸皂苷 D和鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D。
目前，对于鸭脚木质量控制的研究还只停留在
形态鉴别和简单的经验鉴定上。为了准确评价鸭脚
木药材的质量，在对其化学成分分离鉴定的基础上，
本实验应用 HPLC法，系统地对 10 批不同来源的鸭
脚木药材的指纹图谱进行了研究，首次建立了鸭脚
木药材的特征指纹图谱，并对鹅掌柴熊果酸皂苷 F、
鹅掌柴熊果酸皂苷 D 和鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D 3
种主要成分的含量进行比较研究。指纹图谱结合含
量测定可以更好的鉴定鸭脚木药材的真伪优劣，为
鸭脚木的质量评价提供科学依据。
1 仪器、样品和试药
美国 Agilent 1200 型高效液相色谱仪;法国 All-
tech ELSD 2000 型蒸发光检测器;KQ-250DE超声波
清洗仪(昆山市超声仪器有限公司) ;德国赛多利斯
BS 224S型天平。
共收集 10 批不同来源鸭脚木药材，经暨南大学
周光雄教授鉴定均为五加科植物鸭脚木Schefflera
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heptaphylla (L. )Frodin的干燥树皮(表 1)。对照品
鹅掌柴熊果酸皂苷 F、鹅掌柴熊果酸皂苷 D 和鹅掌
柴齐墩果酸皂苷 D 均由鸭脚木中分离得到，经质
谱、1H-NMR、13C-NMR等方法鉴定其结构〔7〕。经
HPLC 分析，以峰面积归一法计算，纯度均大于
98. 0%。甲醇为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为
分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Agilent Zorbax SB-C18(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm)色谱柱;流动相 A 相为甲醇，B 相为
0. 1%的乙酸水溶液;梯度洗脱 0 ～ 5 min，12% A;5
～ 10 min，12% ～ 60% A;10 ～ 40 min，60% ～ 70%
A;40 ～ 45 min，70% ～ 90% A;45 ～ 55 min，90% ～
100% A;55 ～ 60 min 100% A。流速为 1. 0 mL /min，
进样量 20 μL，柱温35 ℃;ELSD检测器检测漂移管温
度110 ℃，氮气流速 3. 0 L /min，以鹅掌柴熊果酸皂苷
D的色谱峰(S峰)计算理论塔板数不低于 3 000。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取鹅掌柴熊果酸
皂苷 F 12. 90 mg、鹅掌柴熊果酸皂苷 D 13. 10 mg和
鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D 13. 51 mg 分别置于 10 mL
容量瓶中，加甲醇溶解，定容;精密吸取鹅掌柴熊果
酸皂苷 F溶液 1. 0 mL、鹅掌柴熊果酸皂苷 D 溶液
1. 5 mL和鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D溶液 1. 5 mL置于
5 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀制成每 1 mL含鹅
掌柴熊果酸皂苷 F 0. 258 mg、鹅掌柴熊果酸皂苷 D
0. 393 mg和鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D 0. 405 mg 的混
合对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取鸭脚木药材粉碎，过
60 目筛，混合均匀后，精密称定约 1. 5 g，置于 50 mL
锥形瓶中，精密加甲醇 15 mL，称重，浸润 1 h，超声
处理 45 min，取出，放冷，再称定质量，用甲醇补足减
失的质量，摇匀，滤过，滤液再用 0. 45 μm 微孔滤膜
滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 精密度试验:精密吸取 S4 供试品溶液 20
μL，连续进样 5 次，考察色谱峰保留时间和峰面积
的一致性，结果表明各主要色谱峰的相对保留时间
的 RSD小于 0. 1%，相对峰面积的 RSD小于 2. 8%，
表明仪器精密度良好。
2. 4. 2 重复性试验:取 S4 供试品 5 份，按“2. 3”项
下方法制备供试品溶液，分别精密吸取 20 μL进样，
考察色谱峰保留时间和峰面积的一致性，结果表明
各共有色谱峰的相对保留时间的 RSD 小于 0. 1%，
相对峰面积的 RSD 小于 2. 9%，表明该方法重复性
良好。
2. 4. 3 稳定性试验:精密吸取 S4 供试品溶液 20
μL，分别在 0、2、4、8、12、24 h进样，考察色谱峰保留
时间和峰面积的一致性，结果表明各共有色谱峰相
对保留时间的 RSD 小于 0. 1%，相对峰面积的 RSD
小于 3. 0%，表明供试品溶液在 24 h内稳定。
3 鸭脚木药材指纹图谱的建立
取 10 批鸭脚木药材按“2. 3”项下方法制备供
试品溶液，精密吸取 20 μL，按“2. 1”项下色谱条件
分析得到鸭脚木药材的指纹图谱见图 1。
图 1 10 批鸭脚木药材 HPLC指纹图谱
采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似
度评价系统 2004 A版”软件生成鸭脚木药材共有模
式的对照指纹图谱，得到 9 个共有峰，见图 2。通过
与对照品图谱对照，指认其中的 4 号峰为鹅掌柴熊
果酸皂苷 F，5 号峰为鹅掌柴熊果酸皂苷 D，6 号峰
为鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D。
采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似
度评价系统 2004 A 版”软件对上述 10 批药材的指
纹图谱进行相似度分析，得 10 批药材的相似度分别
为 0. 909，0. 625，0. 893，0. 875，0. 883，0. 910，0. 900，
·3601·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 7 期 2012 年 7 月
0. 912，0. 688，0. 877。10 批药材中除 S2 和 S9 外，其
余的相似度均大于 0. 80。结果显示各批次鸭脚木
药材整体具有一定的相似性，但部分色谱峰所代表
的化学成分含量存在差异。
4 鸭脚木中三萜皂苷的含量测定
4. 1 系统适用性实验 按“2. 1”项下色谱条件进
行检测，以鹅掌柴熊果酸皂苷 D 色谱峰计算理论塔
板数大于 3 000，分离度大于 1. 5。对照品溶液及供
试品溶液的色谱图如图 3。 图 2 10 批鸭脚木药材的对照指纹图谱
图 3 对照品溶液及供试品溶液 HPLC图
A. 对照品 B. 鸭脚木样品 1. 鹅掌柴熊果酸皂苷 F 2. 鹅掌柴熊果酸皂苷 D 3. 鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D
4. 2 线性关系考察 分别精密吸取上述混合对照
品溶液 2、4、8、12、18、20 μL 注入液相色谱仪，用上
述色谱条件测定。以峰面积为纵坐标，进样量为横
坐标进行线性回归，得鹅掌柴熊果酸皂苷 F 回归方
程 Y =1 591. 5X －1 362. 5，r =0. 999 6;鹅掌柴熊果酸
皂苷 D回归方程 Y = 3 085. 5X － 2727. 7，r = 0. 9995;
鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D 回归方程 Y = 1 501X －
965. 57，r = 0. 999 8。鹅掌柴熊果酸皂苷 F、鹅掌柴
熊果酸皂苷 D和鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D 进样量分
别在 0. 516 ～ 5. 160、0. 786 ～ 7. 860、0. 810 ～ 8. 100
μg，线性关系良好。
4. 3 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液 20
μL，重复进样 6 次，记录峰面积值，结果鹅掌柴熊果
酸皂苷 F、鹅掌柴熊果酸皂苷 D 和鹅掌柴齐墩果酸
皂苷 D峰面积 RSD 分别为 2. 2%、1. 0%和 1. 2%，
表明仪器精密度良好。
4. 4 重复性试验 取 S4 供试品药材 6 份，按
“2. 3”项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取 20
μL进样，结果鹅掌柴熊果酸皂苷 F、鹅掌柴熊果酸
皂苷 D和鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D 含量的 RSD 分别
为 2. 4%、1. 8%和 2. 0%，有较好的重复性。
4. 5 稳定性试验 取 S4 供试品溶液于制备后 0、
1、2、4、12、24 h 进样，鹅掌柴熊果酸皂苷 F、鹅掌柴
熊果酸皂苷 D 和鹅掌柴齐墩果酸皂苷 D 峰面积
RSD分别为 2. 1%、1. 6%和 2. 0%，表明供试品溶液
在 24 h内测定稳定。
4. 6 加样回收率试验 精密称取已知含量的鸭脚
木样品(S4)6 份，分别精密加入一定量的鹅掌柴熊
果酸皂苷 F、鹅掌柴熊果酸皂苷 D 和鹅掌柴齐墩果
酸皂苷 D对照品溶液，按“2. 2”项下制备对照品溶
液，依法测定，结果三个对照品的平均回收率分别为
95. 3%、97. 6%和 96. 1%，RSD分别为 2. 1%、1. 5%
和 1. 9%。
4. 7 含量测定 分别精密吸取各批药材供试品溶
液 20 μL，按“2. 1”项下色谱条件进行测定，计算鹅
掌柴熊果酸皂苷 F、鹅掌柴熊果酸皂苷 D 和鹅掌柴
齐墩果酸皂苷 D的含量，结果见表 1。
表 1 鸭脚木样品信息及 3 种三萜皂苷类
化合物的质量分数(mg/g)
产地 鹅掌柴熊果酸皂苷 F
鹅掌柴熊
果酸皂苷 D
鹅掌柴齐墩
果酸皂苷 D
广东从化(S1) 1. 28 3. 94 1. 34
香港(S2) 0. 63 2. 02 0. 64
广东广州(S3) 1. 23 4. 87 1. 48
广西玉林(S4) 0. 87 2. 69 0. 98
广东茂名(S5) 1. 13 3. 85 1. 24
福建福州(S6) 1. 40 4. 91 1. 37
湖南长沙(S7) 0. 93 2. 71 1. 01
广东湛江(S8) 1. 38 4. 92 1. 53
广东深圳(S9) 0. 67 2. 13 0. 51
江西南昌(S10) 0. 83 2. 49 0. 97
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5 讨论
5. 1 检测器的选择 研究表明三萜皂苷类成分为
鸭脚木的主要化学成分，且该类成分在紫外区只有
弱的末端吸收，若采用 HPLC-UV 测定效果不太理
想，故在本实验中采用 HPLC-ELSD对鸭脚木药材中
的主要化学成分三萜皂苷类化合物进行含量测定，
研究结果表明该方法分离效果好，重复性好，回收率
高，是一种简便、快速、准确的 HPLC 测定鸭脚木皂
苷类成分的含量测定方法，可用于鸭脚木药材的质
量控制。
5. 2 样品提取条件的选择 考虑不同提取溶媒
(甲醇、95%乙醇、无水乙醇)、不同提取时间(30、
45、60 min)对提取效率的影响，结果表明用甲醇溶
液，超声处理 45 min，即能提取完全，且含量稳定。
本研究采用 HPLC-ELSD 法对不同来源鸭脚木
药材指纹图谱进行了研究并且对该药材中 3 种主要
成分的含量进行了测定，结果显示各批次鸭脚木药
材整体上具有一定的相似性，3 种化学成分在各批
次中的含量存在差异，初步推测可能与药材不同生
长年限、不同采收期有关，这些因素所引起的含量变
化有待进一步研究。
参 考 文 献
［1］中国科学院中国植物志编辑委员会 . 中国植物志［M］.
第 54 卷 . 北京:科学技术出版社，1978:26.
［2］南京药学院《中草药学》编写组 . 中草药学［M］.中册 .
南京:江苏人民出版社，1976:742.
［3］ Kitajima J，Tanaka Y. Two new triterpenoid glycosides from
the leaves of Schefflera octophylla［J］. Chem Pharm Bull，
1989，37(10) :2727-2730.
［4］ Maeda C，Ohtani K，Kasai R，et al. Oleanane and ursane
glycosides from Schefflera octophylla［J］. Phytochemistry，
1994，37(4) :1131-1137.
［5］ Sung T V，Adam G. A sulfated triterpenoid saponin from
Schefflera octophylla ［J］. Phytochemistry，1991，30(8) :
2717-2720.
［6］ Sung T V，Steglich W，Adam G. Triterpene glycosides from
Schefflera octophylla ［J］. Phytochemistry，1991，30(7) :
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［7］ Wu C，Wang L，Yang X X，et al. A new ursane-type triter-
penoid from Schefflera heptaphylla (L. )Frodin［J］. J Asi-
an Nat Prod Res，2011，13(5) :434-439.
收稿日期:2011-12-19
基金项目:重庆市高校创新团队建设计划项目(201040)
作者简介:周浓(1978-) ，男，副教授，主要从事药用植物栽培与质量控制;Tel:13398726162，E-mail:erhaizn@ 126. com。
* 通讯作者:白志川，Tel:13983634203，E-mail:baizhichuan@ yahoo. com. cn。
商品川楝子的品质评价
周 浓1，2，杨 敏2，王 胤2，白志川3* ，柴 艳2
(1. 重庆三峡学院生命科学与工程学院，重庆 404000;2. 大理学院药学院，云南 大理 671000;3. 西南大学
园艺园林学院，重庆 400716)
摘要 目的:分析评价商品川楝子的品质。方法:采用 HPLC法分析不同来源川楝子中芦丁、异槲皮苷和槲皮
素的含量，并建立其指纹图谱。结果:不同来源川楝子中芦丁、异槲皮苷和槲皮素的含量及其 HPLC 指纹图谱均具
有一定差异。结论:以有效成分定量分析结合指纹图谱整体分析的模式评价商品川楝子的品质，对控制药材质量、
确保临床疗效具有实用价值。
关键词 川楝子;芦丁;异槲皮苷;槲皮素;指纹图谱;高效液相色谱法
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)07-1065-06
Quality Evaluation of Fructus Toosendan
ZHOU Nong1，2，YANG Min2，WANG Yin2，BAI Zhi-chuan3，CHAI Yan2
(1. College of Life Science and Engineering，Chongqing Three Gorges University，Chongqing 404000，China;2. College of Pharmacy，
Dali University，Dali 671000，China;3. College of Horticulture and Landscape Architecture，Southwest University，Chongqing 400716，
China)
Abstract Objective:To evaluate the quality of Fructus Toosendan. Methods:HPLC method was used to determine the content of
rutin，isoquercitrin and quercetin in Fructus Toosendan from different origins，and the HPLC fingerprints were established corresponding-
ly. Results:There were significant differences among the HPLC fingerprints，and the contents of rutin，isoquercitrin and quercetin were
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