全 文 ：基金项目:国家科技支撑计划(编号:2007BAI38B05)
通讯作者:程东岩 Tel:(0431)86058657 E-mail:cdyan1225@ sohu． com
HPLC-ELSD法测定不同产地欧亚旋覆花中 1-O-乙酰旋覆花内
酯的含量
董政起1，2，3 陈昕3 高军2 程东岩2 (1．中国医学科学院药用植物研究所 北京 100193;2．吉林省中医药科学院;3．
长春中医药大学)
摘 要 目的:采用 HPLC-ELSD方法测定不同产地欧亚旋覆花中 1-O-乙酰旋覆花内酯的含量。方法:采用高效液相色谱
法，蒸发光散射检测器。色谱柱:Diamonsil ODS C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ;柱温:30℃;流动相:乙腈-水梯度洗脱，流速:0． 8
ml·min －1;ELSD 条件:漂移管温度:100℃，载气流速:2． 8 L·min －1。结果:1-O-乙酰旋覆花内酯线性范围为2． 72 ～
19． 00 μg，平均回收率98． 91% ，RSD = 2． 20%(n = 6)。结论:方法可靠，简单可行，为控制中药材欧亚旋覆花的质量提供了依
据。
关键词 欧亚旋覆花;1-O-乙酰旋覆花内酯;高效液相色谱法
中图分类号:R927． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2012)04-0443-03
Determination of 1-O-acetyl-britannilactone in the Inula Britannica Linn． from Different Habitats by
HPLC-ELSD
Dong Zhengqi1，2，Chen Xin3，Gao Jun2，Cheng Dongyan2(1． Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical
Sciences，Beijing 100193，China;2． Academy of Sciences of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica of Jilin Province;3．
Changchun University of Chinese Medicine)
ABSTRACT Objective:To determine the content of 1-O-acetyl-britannilactone in Inula britannica Linn． from different areas by
HPLC-ELSD．Method:An HPLC-ELSD method was established using the Diamonsil ODS C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)column，the
mobile phase was acetonitrile-water with gradient elution with a flow rate of 0． 8 ml·min －1 ． The temperature of drift tube heater was
100℃ and the gas flowed at the rate of 2． 8 L ·min －1 ． Result:The calibration curve was linear within the range of 2． 72 ～ 19． 00 μg，
and the average recovery was 98． 91% with RSD of 2． 20%(n = 6)． Conclusion:The method is reliable and simple，and it provides a
scientific basis for utilization of different parts of Inula britannica Linn．
KEY WORDS HPLC-ELSD;Inula britannica Linn．;1-O-acetyl-britannilactone
欧亚旋覆花为菊科植物欧亚旋覆花(Inula bri-
tannica L．)的干燥头状花序，夏、秋两季花开放时采
收，除去杂质，阴干或晒干。主产于新疆、黑龙江、吉
林、内蒙古及河北等地，具有降气，消痰，行水，止呕
之功效，用于风寒咳嗽、痰饮蓄结、胸膈痞满、咳喘痰
多、呕吐噫气、心下痞硬等症。《中国药典》2010 年
版一部“旋覆花”项下只有一个显微鉴别及采用药
材为对照的薄层色谱定性鉴别试验，无含量测定项
目。由于 1-O-乙酰旋覆花内酯缺少发色团，只在紫
外末端波长具有吸收，用常见的紫外检测器测定时
干扰较大，色谱峰分离较差且前处理步骤多，ELSD
是一种质量型检测器，很好地解决了这个弊病［1，2］。
本文采用 HPLC-ELSD 法测定了不同产地欧亚旋覆
花中 1-O-乙酰旋覆花内酯含量，建立了稳定可靠且
重复性好的含量测定方法，为控制中药材欧亚旋覆
花的质量提供了科学依据。
1 仪器与试药
日本岛津 LC-20AT 溶剂输液泵;美国奥泰
ELSD 2000ES 蒸发光检测器;日本岛津 LC solution
色谱工作站;德国赛多利斯 BP211D分析天平。
1-O-乙酰旋覆花内酯对照品由吉林省中医药科
学院植物化学研究所自制，经结构鉴定为 1-O-ace-
tyl-britannilactone，批号:XFHC 5-2-4-3-2009-01(以
峰面积归一化法和不加校正因子的主成分自身对照
法测定 1-O-乙酰旋覆花内酯的纯度，测得其含量分
数分别为99． 24%和99． 33%，符合含量测定用对照
品要求)。所用试剂乙腈为色谱纯，其余试剂均为
分析纯。
欧亚旋覆花药材由不同产地购入，经吉林省中
医药科学院严仲凯研究员鉴定为菊科旋覆花属植物
欧亚旋覆花(Inula britannica Linn．)的干燥头状花
序。
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中国药师 2012 年第 15 卷第 4 期 China Pharmacist 2012，Vol． 15 No． 4
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱:Diamonsil ODS C18(250 mm × 4． 6 mm，
5 μm) ;柱温:30℃;流动相:以乙腈为流动相 A，以
水为流动相 B，按表 1 程序进行梯度洗脱;ELSD 条
件:漂移管温度:100℃，载气流速:2． 8 L·min －1。
理论塔板数按 1-O-乙酰旋覆花内酯峰计算不低于 5
000，在此条件下，1-O-乙酰旋覆花内酯和样品中的
其它物质可以得到良好的分离，对照品溶液和供试
品溶液均进样 10 μl，结果见图 1。
表 1 梯度洗脱程序
时间(min) 流动相 A(%) 流动相 B(%)
0 ～ 25 20→30 80→70
25 ～ 55 30 70
55 ～ 58 30→20 70→80
58 ～ 66 20 80
A．对照品 B．欧亚旋覆花 1． 1-O-乙酰旋覆花内酯
图 1 HPLC-ELSD色谱图
2． 2 对照品溶液的制备
精密称取 1-O-乙酰旋覆花内酯对照品13． 6 mg，
置 5 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即
得。
2． 3 供试品溶液的制备
取欧亚旋覆花药材粉末(过三号筛)3． 0 g，精密
称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 90 ml，称定重
量，浸泡 1 h，超声处理(250 W，35 kHz)30 min，放
冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤
过，精密量取续滤液 60 ml，蒸干，残渣加甲醇使溶
解，转移至 5 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，
取续滤液作为供试品溶液。
2． 4 线性关系的考察
精密吸取对照品溶液0． 2，0． 4，0． 6，0． 8，1． 0，
1． 4 ml于 2 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各
进样 10 μl，按上述色谱条件测定峰面积，以 1-O-乙
酰旋覆花内酯的进样量(X，μg)为横坐标，色谱峰面
积(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为 Y =
2． 439 4X + 4． 143 5，r = 0． 999 8，线性范围2． 72 ～
19． 00 μg。
2． 5 精密度试验
精密吸取欧亚旋覆花供试品溶液 10 μl，在上述
同一色谱条件下，重复进样测定 6 次，结果 1-O-乙酰
旋覆花内酯峰面积的 RSD为0． 36%(n = 6)。
2． 6 稳定性试验
分别取欧亚旋覆花同一供试品溶液，分别在 0，
1，2，4，6，8 h 分别进样，进行测定，结果 1-O-乙酰旋
覆花内酯峰面积的 RSD分别为1． 24%(n = 6) ，可见
供试品溶液在 8h内稳定性良好。
2． 7 重复性试验
分别称取欧亚旋覆花药材粉末各 5 份，精密称
定，按“2． 3”项下方法操作，依法测定，测得 1-O-乙
酰旋覆花内酯的平均含量为0． 988 mg·g －1，RSD为
2． 02%(n = 5)。
2． 8 回收率试验
取已知含量的药材样品粉末约1． 5 g，精密称
定，加入一定量的 1-O-乙酰旋覆花内酯对照品溶液
(0． 804 5 mg·ml －1)2． 0 ml，挥干溶剂，依法进行测
定，计算得 1-O-乙酰旋覆花内酯的平均回收率为
98． 91%，RSD为2． 20%(n = 6)。
2． 9 样品的含量测定
分别称取不同产地的欧亚旋覆花，分别按供试
品溶液制备方法制备，另取 1-O-乙酰旋覆花内酯对
照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 ml 含1． 2 mg
·ml －1的溶液，作为对照品溶液。分别精密吸取对
照品溶液 5、10 μl及供试品溶液各 10 μl，注入液相
色谱仪，测定峰面积值，将峰面积及浓度均取自然对
数后，用外标法计算，求出供试品浓度的自然对数，
再转换成供试品的含量即得，结果如表 2。
表 2 不同产地欧亚旋覆花 1-O-乙酰旋覆花内酯
的测定结果(mg·g －1，n =3)
来源 含量(mg·g － 1)
吉林省 0． 666 ± 0． 018
新疆 1． 025 ± 0． 016
新疆 2． 150 ± 0． 007
黑龙江 1． 375 ± 0． 012
黑龙江 0． 809 ± 0． 005
结果表明，不同来源药材中 1-O-乙酰旋覆花内
酯的含量差异较大，有待于进一步研究。
2． 10 耐用性试验
2． 10． 1 不同品牌色谱柱 分别精密称取同一样品
粉末 6 份，各 3 g，按供试品溶液制备方法制备，分别
采用三种色谱柱:①Diamonsil ODS C18(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ;②Alltima C18柱(250 mm ×4． 6 mm，
5 μm) ;③ Shim-pack VP-ODS 柱 (250 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ，进样测定，计算 1-O-乙酰旋覆花内
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www． zgys． org 研究论文
酯含量。结果表明，三种色谱柱均精密度良好，RSD
= 1． 32%(n = 6)。
2． 10． 2 柱温 分别精密称取同一样品粉末 6 份，
各 3 g，按供试品溶液制备方法制备，分别用柱温
25℃、30℃、35℃，依法测定，计算 1-O-乙酰旋覆花内
酯含量。分析结果表明三种色谱柱分离效果良好，
理论板数均 5 000 以上，RSD = 1． 65%(n = 6)。结
果表明，柱温变化对测定结果影响较小。
2． 10． 3 流速 分别精密称取同一样品粉末 6 份，
各 3 g，按供试品溶液制备方法制备，分别用流速
0． 6，0． 8，1． 0 ml·min －1，依法测定，计算 1-O-乙酰
旋覆花内酯含量。结果流速变化对测定结果影响较
小，RSD = 1． 38%(n = 6)。
3 讨论
采用 HPLC-ELSD)法测定旋覆花药材中 1-O-乙
酰旋覆花内酯的含量。不同梯度洗脱条件对分离的
影响研究结果表明线性梯度洗脱可使 1-O-乙酰旋
覆花内酯与相邻组分色谱峰达到基线分离;漂移管
温度和雾化气流量对检测的影响研究结果表明随着
漂移管温度的升高和雾化器的载气流速的升高，1-
O-乙酰旋覆花内酯色谱峰面积降低，故选择 S /N 最
大的漂移管温度 100 ℃和雾化器载气流速2． 8 L·
min －1;提取溶剂、提取方法和提取时间对提取的影
响研究结果表明甲醇超声提取 30 min 为最佳工艺;
不同来源药材含量测定结果表明旋覆花药材中 1-
O-乙酰旋覆花内酯的含量差异较大。1-O-乙酰旋覆
花内酯是旋覆花药材中含量高较高，为具有特征性
结构 α-亚甲基-γ-内酯的倍半萜类化合物，可作为药
材的质量评价指标。
参 考 文 献
1 中国药典［S］． 2010 年版．一部． 305
2 周嵩煜，刘吉成，林琼芳，等． HPLC 法测定正骨 1 号片中三七皂
苷 R1、人参皂苷 Rg1 及 Rb1 的含量［J］．中国药师，2010，13(8) :
1122-1124
3 王隶书，赵大庆，陶华明，等． HPLC-ELSD 法测定黑藜芦主根、须
根及地上茎叶残基中藜芦碱的含量［J］． 中国药师，2008，11(1) :
14-15
(2012-01-16 收稿 2012-02-13 修回)
通讯作者:谢艳萍 Tel:13967849484 E-mail:xyp13967849484@ 126． com
氯雷他定柔性脂质体的制备及体外透皮研究
谢艳萍 (宁波市第一医院 浙江宁波 310100)
摘 要 目的:制备氯雷他定柔性脂质体并研究该脂质体中氯雷他定的体外透皮情况。方法:用逆向蒸发法制备柔性脂质
体，采用改良的 Franz扩散池进行体外透皮吸收试验。结果:与普通脂质体相比较，柔性脂质体能提高氯雷他定的透皮速率。
结论:柔性脂质体可显著促进氯雷他定的透皮吸收情况。
关键词 氯雷他定;柔性脂质体;体外透皮
中图分类号:R945 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2012)04-0445-04
Preparation of Loratadine-loaded Ultraflexible Liposomes and Percutanous Penetration in vitro
Xie Yanping (Ningbo No． 1 Hospital，Zhejiang Ningbo 310100，China)
ABSTRACT Objective:To prepare ultraflexible liposomes of loratadine and study the permeation through the excised rat skin．
Method:Reverse － phase evaporation method was used to prepare the ultraflexible liposomes，and in vitro skin permeation experiment
was performed using modified Franz diffusion cells with excised rat skin as the barrier． Result:Compared with the ordinary liposomes，
the ultraflexible liposomes could increase diffusion rate of loratadine through the skin of rats． Conclusion:Ultraflexible liposomes can
significantly enhance the diffusion rate of loratadine through the skin of rats．
KEY WORDS Loratadine;Ultraflexible liposomes;Percutanous penetration in vitro
氯雷他定为长效三环抗组胺药，临床上用于治
疗过敏鼻炎、慢性荨麻疹、结节性瘙痒、湿疹、接触性
皮炎等过敏性皮肤病。常用的制剂有片剂、胶囊剂、
颗粒剂、糖浆剂，但口服后易出现胃肠道的损伤和肝
功能的异常［1］，开发透皮给药制剂可以达到缓释及
减少不良反应的目的。脂质体以其良好的生物相容
性和促进药物透皮吸收的特性日益受到人们的重
视，而柔性脂质体是在传统脂质体的类脂质材料中
加入适量表面活性剂，能明显增加脂质体的变形能
力。据报道［2］，其能通过自身体积 1 /5 的小孔，并可
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