全 文 ：6黑牛肝菌降血脂及抗氧化作用的实验研究
王一心 ,杨桂芝 ,狄 勇 ,苏永刚
(大理学院检验学系 ,云南大理 671000)
[摘要] 目的:探讨黑牛肝菌的降血脂及抗氧化作用 。方法:雄性 SD大鼠 40只随机分为高 、低
两个剂量组和高脂模型组及正常对照组 , 前三个组给予高脂饲料喂养 , 并每日分组灌胃给
6.50%、3.25%黑牛肝菌匀浆液和蒸馏水 1ml/100g体重 , 连续 30d。分别测定血脂及抗氧化指
标。结果:黑牛肝菌高 、低剂量组血清总胆固醇 、低密度脂蛋白胆固醇 、甘油三酯和丙二醛含量
明显低于高脂模型组(P<0.01),而血清高密度脂蛋白胆固醇含量和血清及肝脏的超氧化物歧
化酶活力明显高于高脂模型组(P<0.01)。结论:黑牛肝菌对大鼠有明显的降血脂及抗氧化作
用。
[关键词] 黑牛肝菌;高脂血症;大鼠;降血脂
[中图分类号] Q949.329+.7 R589.2 [文献标识码] A [文章编号] 1672-2345(2004)03-0006-03
医学研究表明 , 高脂血症和高脂质过氧化物
含量是导致动脉粥样硬化(atherosclerosis , AS)的
重要因素。因此降低血脂和脂质过氧化物含量是
防止AS发生 、预防心脑血管疾病的重要措施。某
些药物确有明显的降血脂效果 , 但有副作用。开
发有效低毒的降脂药物及降脂食品对防治高脂
血症有重要意义。黑牛肝菌(Boletus aereus ,BA)是
云南省资源较丰富的一种野生食用菌 , 其味道鲜
美 、营养价值较高 、含有丰富的矿质元素及适合
的氨基酸组分 , 其中天冬氨酸 、苏氨酸 、丝氨酸 、
谷氨酸 、异亮氨酸 、亮氨酸 、苯丙氨酸 、酪氨酸 、赖
氨酸 、组氨酸 、精氨酸等氨基酸的含量较高 [ 1 ,2]。有
关黑牛肝菌降血脂及抗氧化作用未见报道 。本实
验利用产自云南的野生 BA对高脂血症大鼠进行
了降血脂及抗氧化作用方面的研究。
1 材料与方法
1.1 动物 SD大鼠 , 雄性 , 40只 , 体重 190 ～
230g , 由昆明医学院动物科提供 , 合格证明书编
号:0001370。
1.2 BA的来源及制备 新鲜 BA从市场上购买 ,
制成干品。取 26g BA干品加 300ml蒸馏水浸泡 4h
后再定容到 400ml , 煮沸 30min ,再经匀浆得 400ml
匀浆液 , 浓度相当于每 100ml中含有 6.50g 干
品 。取一份 6.50%匀浆液按 1∶1比例用蒸馏水
稀释成相当于 3.25%浓度的匀浆液 。制备好的匀
浆液保存于冰箱中备用 。
1.3 试剂 胆固醇:分析纯 , 中国医药(集团)上
海化学试剂公司产品 ,批号:F20021023。脱氧胆酸
钠:进口分装 , 中国医药(集团)上海化学试剂公
司产品 ,批号:F20010518。丙硫氧嘧啶片:北京红
惠生物制药股份有限公司生产 , 批号:020101 ,
100mg/片 。
1.4 饲料 基础饲料:由昆明医学院动物科提
供 。高脂饲料配制:用 1%胆固醇 , 10%猪油 ,
0.2%丙硫氧嘧啶 , 0.3%脱氧胆酸钠 , 5%蔗糖及
83.5%基础饲料配制而成。
1.5 造模与给药方法 用基础饲料适应性喂养大
鼠 5d后 , 随机分为 4组 , 每组 10只 , 分别为正常
对照组 、高脂模型组 、BA高剂量组和 BA低剂量
组 。正常对照组每日给予基础饲料 20g/只喂养 ,
其余各组每日给予高脂饲料 20g/只喂养。BA高 、
低两个剂量组 ,每天上午每只分别灌胃给6.50%、
[收稿日期] 2003-12-18
[基金项目] 云南省教育厅科研基金资助项目(0112594);
大理州科技局科技项目经费资助项目
[作者简介] 王一心(1958-),女 , 云南宾川人 , 副教授 , 主
要从事生物化学研究 .
第 3卷 第 3期 大理学院学报 Vol.3 No.3
2004年 5月 JOURNAL OF DALI COLLEGE May.2004
73.25%BA匀浆液 , 1ml/100g体重 。正常对照组 、
高脂模型组每天上午每只分别灌胃给蒸馏水
1ml/100g体重 。所有动物自由饮水 , 连续灌胃
30d。
1.6 样本采集 所有大鼠于末次灌胃后禁食 12h ,
眼球摘除取血 , 分离血清用于测定血脂 、丙二醛
(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)。取血后处死大
鼠取肝脏 , 制备肝组织匀浆 , 用于测定 MDA和
SOD。
1.7 观察项目及测定方法 总脂固醇(TC)、低密
度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇
(HDL-C)和甘油三酯(TG)采用酶法 , 按试剂盒
说明书进行测定。MDA采用 TBA法;SOD采用黄
嘌呤氧化酶法;组织蛋白含量采用考马斯亮兰
法 , 按试剂盒说明书进行测定。 ①胆固醇检测试
剂盒 、高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒 、甘油三
酯检测试剂盒 , 由上海荣盛生物技术有限公司生
产 ,批号:20030101。 ②LDL-C测定试剂盒 ,由四
川省迈克科技有限责任公司生产 ,批号:030218。
③MDA测定试剂盒 、SOD测试盒及考马斯亮兰测
定试剂盒 , 均由南京建成生物工程研究所生产 ,
批号分别为 20030307 、20030318及 20030402。
1.8 统计处理 将测定数据输入电脑 , 应用
SPSS软件进行方差分析和 t检验 。
2 结果
2.1 BA对高脂血症大鼠血脂的影响 实验结果
见表 1所示。高脂模型组大鼠血清的 TC 、LDL-C
含量均显著高于正常对照组(P<0.01);TG含量
高于正常对照组 , HDL-C含量低于正常对照组 ,
但在统计学上没有显著性差异(P>0.05)。同时
给予 6.50%BA组的大鼠血清 TC 、LDL-C 、TG较
高脂模型组显著降低 , 降低百分率分别为
45.4%、 62.2%、50.0%(P<0.01), 且显著升高
HDL-C ,升高百分率为 52.3%(P<0.01)。同时
给予 3.25%BA组的大鼠血清 TC 、LDL-C 、TG较
模型组显著降低 , 降低百分率分别为 39.4%、
51.9%、66.7%(P<0.01),且显著增高 HDL-C ,
升高百分率为 26.1%(P<0.01)。
表 1 BA对大鼠血清脂类的影响 (xˉ±s)
组别 鼠数 TC LDL -C HDL-C TG
(mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) (mmol/L)
正常对照组 10 1.79 ±0.22 0 .75 ±0.39 1.16 ±0.21 0.73 ±0.18
高脂模型组 10 8.85 ±1.95■ ■ 6 .49 ±1.67■ ■ 1.11 ±0.11 0.78 ±0.19
6.50%BA组 10 4.83 ±1.38* * 2.45±2.15* * 1.69 ±0.32* * 0.39±0.10* *
3.25%BA组 10 5.36 ±0.94* * 3.12 ±1.52* * 1.40 ±0.19* * 0.26 ±0.10* *
注:与正常组比较■ P<0.05 , ■■ P<0.01;与模型组比
较 * P<0.05 , ** P<0.01。
2.2 BA对高脂血症大鼠血清 MDA和 SOD的影
响 由表 2可见 , 6.50%BA组 、3.25%BA组血清
MDA含量与高脂模型组比较明显降低(P <0.01 、
P<0.05)。高脂模型组血清 SOD活力比正常对照
组低(P<0.01), 提示高脂血症大鼠同时伴有血
清 SOD活力下降 。6.50%BA组和 3.25%BA组血
清 SOD的活力与高脂模型组比较明显增加 (P
<0.01)。
表 2 BA对大鼠血清 MDA和 SOD的影响(xˉ±s)
组别 鼠数 MDA(nmol/ml) SOD(U/ml)
正常对照组 10 5.97 ±0.28 231.93 ±15.95
高脂模型组 10 6.42 ±0.65 162.88±28.82 ■ ■
6 .50%BA 组 10 5 .29±0.61 * * 344.30 ±16 .57* *
3 .25%BA 组 10 5 .82±0.53 * 341.98±18.87 * *
注:与正常组比较■ P<0.05 , ■■ P<0.01;与模型组比
较 *P<0.05 , ** P<0.01。
2.3 BA对高脂血症大鼠肝组织 MDA和 SOD的
影响 表 3结果显示 ,高脂模型组肝组织 MDA含
量造模后比正常对照组 MDA 有明显增高 (P
<0.01), 而 6.50%BA组和 3.25%BA组肝组织
MDA含量与高脂模型组比较没有显著性差异 (P
<0.05)。高脂模型组肝组织 SOD活力显著低于
正常组 (P<0.01)。6.50%BA组和 3.25%BA组
肝组织 SOD活力与高脂模型组比较显著增加 (P
<0.01)。
表 3 BA对大鼠肝组织MDA和 SOD的影响(xˉ±s)
组别 鼠数 MDA(nmol/mgprot) SOD(U/mgprot)
正常对照组 10 0.27 ±0.06 120.97±34.31
高脂模型组 10 0.43 ±0.10 ■ ■ 55.46 ±12.22 ■ ■
6 .50%BA 组 10 0 .54±0.29 139 .59±35 .19* *
3 .25%BA 组 10 0 .49±0.13 166 .32±53 .62* *
注:与正常组比较■ P<0.05 , ■■ P<0.01;与模型组比
总第 15期 第 3卷王一心等 黑牛肝菌降血脂及抗氧化作用的实验研究
8较 * P<0.05 , **P<0.01。
3 讨论
高脂血症与动脉粥样硬化的发病关系十分
密切。而 AS又是许多心脑血管疾病的主要病理
基础。大量资料表明 , 血浆中 TC 、TG 、LDL-C的
升高能促进 AS的发生 , 是导致心脑血管疾病的
重要因素。而 HDL-C是防止AS斑块形成的有利
因子 , 其在血浆中的浓度与 AS的发生率呈明显
的负相关[ 3 , 4]。因此 ,认为降低升高的血脂 ,特别是
TC及 LDL-C可防止或减低 AS的发生 。本实验
研究表明 , BA两个剂量组能显著降低高脂血症
大鼠血清中 TC 、LDL-C 、TG的含量 ,并使 HDL-
C的水平有明显的提高 , 具有明显的降血脂功
能 。因而提示 , BA对高脂血症及由此所引起的动
脉粥样硬化和心脑血管疾病可能有良好的防治
作用。
脂质过氧化物及抗过氧化物酶也与 AS的形
成有关 。AS在形成过程中 ,氧自由基导致脂质过
氧化 , 引起细胞膜损伤 , 进而促进 AS的发生和发
展 , 而 SOD能清除超氧离子自由基 , 可保护脂质
免遭过氧化 , 进而减少脂质过氧化物的生成 , 具
有防止 AS形成的作用 [5 ,6]。SOD活力的高低间接
反映了机体清除氧自由基的能力 。肝脏是脂质及
脂蛋白代谢的主要器官 , 肝细胞受损 , 脂质及脂
蛋白代谢紊乱可引起血脂升高。MDA是脂质过氧
化的代谢物 , 可以反映机体内脂质过氧化物的程
度 。肝组织 MDA含量反映了肝组织脂质过氧化
程度 , 间接反映了肝细胞损伤及代谢障碍的程
度 。而血 MDA含量反映了全身组织脂质过氧化
程度 , 间接反映整体脂质代谢障碍的程度 。本研
究表明 , BA能明显降低高脂血症大鼠血清中的
MDA含量 ,能明显提高血清和肝组织中的 SOD活
力 ,提示 BA能增加机体清除氧自由基 ,在体内具
有明显的抗氧化作用。这对防治 AS十分重要。
[参考文献]
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Research of Boletus Aereus on Effect of Lowering Hyperlipidemia and Antioxidation in Rats
WANGYi-xin , YANGGui-zhi , DI Yong , SU Yong-gang(The Faculty of Laboratory Medicine ,Dali College , Yunnan Dali 671000 , China)
[ Abstract] Objective:To study the effect of Boletus aereus to lowering blood lipid and antioxidation in the hyper-
lipidemia rats.Methods:The male SD rats were divided randomly into four groups , i.e.,high-dosage group , low-
dosage group , hyperlipidemia model group and control group.High-dosage group , low-dosage group and hyper-
lipidemia model group were fed on high lipid feed and were given wi th 1ml/100g weight of 6.50%, 3.25%Boletus
aereus and distilled water by stomach perfusion for thirty days , respectively.Then the blood lipid and antioxidation
were tested.Results:The serum level of total cholesterol(TC), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C),
triglyceride(TG) and malondialdehyde(MDA)in the high and low -dosage group were significantly lower(P
<0.01) than that in the hyperlipidemia model group and the serum level of high density lipoprotein cholesterol
(HDL-C)and activities of superoxide dismutase(SOD)in serum and liver were significantly higher(P <0.01)
than that in the hyperlipidemia model group.Conclusion:Boletus aereus has a distinct effect of lowering the blood
lipid and antioxidation in rats.
[ Key words] Boletus aereus;Hyperlipidemia;Rat;Lowering lipoidemia
总第 15期 2004年第 3卷第 3大理学院学报 期