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美味牛肝菌菌丝体营养特性分析



全 文 :第 3 期
收稿日期:2012-03-26
基金项目:重庆市科技攻关项目(cstc2011AC1004);重庆市自然科学基金项目(cstc2012jjA80026);重庆市教委科研项目(KJ121303)
作者简介:陈今朝(1964-),男,重庆人,教授,硕士,主要从事菌物学、微生物学的教学与研究工作,(电话)13658266280(电子信箱)
chenjinzhao@126.com;通讯作者,戴 玄,(电子信箱)sherdai@gmail.com。
第 52 卷第 3期
2013年 2 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 52 No.3
Feb.,2013
美味牛肝菌(Boletus edulis Bull.:Fr)属牛肝菌
科(Boletaceae)牛肝菌属(Boletus)[1]。其味道鲜美,营
养丰富,含有二十多种氨基酸、多种维生素、矿物
质、多糖和碱性蛋白质等[2]。美味牛肝菌可预防腰腿
疼痛、手足麻木、四肢抽搐等症;其多糖、碱性蛋白
可抗肿瘤和病毒,并可调节人体的免疫功能[3]。目前
对美味牛肝菌的液体培养研究较多 [4-6],而对美味牛
肝菌的生物学特性,特别是菌丝体在不同基质上的
生长速度的报道不多。 因此,对美味牛肝菌菌丝体
在不同基质中的生长速度进行了试验,现将结果报
道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌种 美味牛肝菌由长江师范学院生物技
术实验室分离保存。
1.1.2 母种培养基 PDA 加富培养基:去皮马铃薯
20.0%, 葡萄糖 2.0%,MgSO4·7H2O 0.20%,KH2PO4
0.40%,维生素 B1(VB1)0.001 0%,琼脂 2.0%。
1.1.3 碳源、氮源基本培养基 葡萄糖 2.0%,酵母
膏 0.20% ,KH2PO4 0.40%,MgSO4·7H2O 0.20%,VB1
0.001 0%,pH自然[6]。
1.2 方法
1.2.1 单因素试验 将 0.5 cm2美味牛肝菌菌丝体
接种于母种培养基中央,28 ℃恒温培养,4 d 后每隔
1 d 观测一次菌丝长势和菌落直径, 计算美味牛肝
菌菌丝体的生长速度,每个处理 3 次重复。 试验结
果用 LSD法进行统计分析[7]。
1.2.2 正交试验 以葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4/MgSO4·
7H2O 和 VB1设计 L9(34)正交试验(表 1),28 ℃恒温
美味牛肝菌菌丝体营养特性分析
陈今朝,秦家顺,王慧超,谭永忠,戴 玄
(长江师范学院生命科学与技术学院,重庆 408100)
摘要:研究了美味牛肝菌(Boletus edulis Bull.:Fr)菌丝体的营养特性。 结果表明,美味牛肝菌生长的最适
碳源是葡萄糖, 最适氮源是蛋白胨, 最适无机盐是 KH2PO4, 最适维生素是 VB1, 最适培养基为葡萄糖
3.0%、蛋白胨 0.20%、KH2PO4 0.60%、MgSO4·7H2O 0.20%和 VB1 0.000 5%,最适 pH 为 5.0,最适温度为
28 ℃,此时菌丝体生长速度最快,长势最好。
关键词:美味牛肝菌(Boletus edulis Bull.:Fr);菌丝体;生长速度;生长势
中图分类号:S646.3 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2013)03-0607-03
Study on the Nutritional Characteristics of Boletus edulis Bull. : Fr Mycelium
CHEN Jin-zhao,QIN Jia-shun,WANG Hui-chao,TAN Yong-zhong,DAI Xuan
(College of Life Science and Technology, Yangtze Normal University, Chongqing 408100, China)
Abstract: In this paper, the nutritional characteristics of Boletus edulis Bull.: Fr mycelial were investigated by optimizing the
foundation medium. The results showed that the optimal carbon was glucose, the optimal nitrogen was peptone, the optimal
inorganic salt was KH2PO4, the optimal vitamin was VB1. The optimum medium is: soluble starch 3.0% , peptone 0.20% ,
KH2PO4 0.60%, MgSO4·7H2O 0.20%, and vitamin B1 0.000 5%. The optimum pH value and the optimum temperature were
5.0 and 28 ℃ respectively. When all the conditions above were met, the mycelial growth of Boletus edulis Bull.:Fr would be
the fastest and best.
Key words: Boletus edulis Bull.:Fr; mycelium; growth speed; growth vigor
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.03.060
湖 北 农 业 科 学 2013 年
培养,筛选最佳培养条件。 以正交试验得出的最适
培养基分别进行 pH、温度试验。
2 结果与分析
2.1 美味牛肝菌菌丝体生长单因素试验结果
1)碳源对菌丝体生长的影响。 用蔗糖、麦芽糖、
乳糖、甘露醇和可溶性淀粉(在培养基中含量均为
2.0%)代替碳源培养基中的葡萄糖进行试验。从表 2
可以看出,葡萄糖为碳源时美味牛肝菌菌丝体长势
最好、生长速度最快,其菌丝体生长速度与其他碳
源培养基中的菌丝体生长速度之间差异极显著;乳
糖为碳源时菌丝体长势最差、生长速度最慢。 因此
葡萄糖是菌丝体生长的最适碳源。
2)氮源对菌丝体生长的影响。 用牛肉膏、蛋白
胨、硝酸铵、尿素和甘氨酸(在培养基中含量均为
0.20%)代替氮源培养基中的酵母膏。 从表 3可以看
出,蛋白胨为氮源时菌丝体长势最好、生长速度最
快,其菌丝体生长速度与其他氮源培养基中的菌丝
体生长速度之间差异极显著;硝酸铵为氮源时菌丝
体长势最差、生长速度最慢。 可见蛋白胨为菌丝体
生长的最适氮源。
3)无机盐对菌丝体生长的影响。 在培养基中分
别添加 KH2PO4、CaSO4·0.5H2O、NaCl、MgSO4·7H2O、
MnSO4·H2O 和 ZnSO4·7H2O (在培养基中含量均为
0.60%)进行试验。 从表 4 可以看出,添加 KH2PO4的
菌丝体长势最好,生长速度最快,菌丝体生长速度
与添加其他无机盐的菌丝体生长速度之间差异极
显著;添加 MgSO4·7H2O 的菌丝体长势次之,生长速
度也较快,菌丝体生长速度与添加其他无机盐的菌
丝体生长速度之间差异极显著, 添加 NaCl 时菌丝
体长势最差、生长速度最慢。所以,KH2PO4是菌丝体
生长的最适无机盐, 但 Mg、S、K和 P是微生物生长
的必需大量元素, 因此在正交试验中将 KH2PO4 /
MgSO4·7H2O 结合作为一个因子进行试验, 探索菌
丝体生长的最适培养基配方。
4)维生素对菌丝体生长的影响。 在培养基中加
入叶酸、VB1、VB2、VB6和 VC (在培养基中含量均为
0.001 0%),菌丝体生长结果见表 5。 从表 5 可以看
出,添加 VB1时菌丝体长势最好,生长速度最快,与
添加其他维生素的菌丝体生长速度之间差异极显
著;添加 VB6时菌丝体长势最差、生长速度最慢。 因
此,菌丝体生长的最适维生素为 VB1。
2.2 美味牛肝菌菌丝体生长正交试验结果
美味牛肝菌菌丝体生长正交试验结果如表 6。
从表 6 可以看出, 葡萄糖是菌丝体生长的关键因
子,其次是蛋白胨和 KH2PO4 / MgSO4·7H2O,VB1影响
最小。 最佳组合为 A3B2C2D1。 因此,菌丝体生长的最
适培养基配方为葡萄糖 3.0% 、 蛋白胨 0.20% 、
KH2PO4 0.60%、MgSO4·7H2O 0.20%和 VB1 0.000 5%。
表 1 L9(34)正交试验因素水平表
水平
1
2
3
A(葡萄糖)
%
1.0
2.0
3.0
B(蛋白胨)
%
0.10
0.20
0.30
C(KH2PO4/MgSO4·7H2O)
0.40%/0.20%
0.60%/0.20%
0.80%/0.20%
D(VB1)
%
0.000 5
0.001 0
0.001 5
因素
表 2 碳源对菌丝体生长的影响
碳源
葡萄糖
麦芽糖
甘露醇
可溶性淀粉
蔗糖
乳糖
菌丝体长势
+++
+++
++
++


菌丝体生长速度//mm/d
7.19 aA
6.81 bB
6.48 cC
6.30 dD
6.28 dD
6.07 eE
注:“+++”表示菌丝体长势最强,“++”表示菌丝体长势强,“+”表
示菌丝体长势一般;数据后不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),
不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。 下同。
表 3 氮源对菌丝体生长的影响
氮源
蛋白胨
牛肉膏
酵母膏
甘氨酸
尿素
硝酸铵
菌丝体长势
+++
++
++
++


菌丝体生长速度//mm/d
7.21 aA
6.96 bB
6.71 cC
6.43 cC
5.15 dD
5.09 dD
表 4 无机盐对菌丝体生长的影响
无机盐
KH2PO4
MgSO4·7H2O
MnSO4·H2O
ZnSO4·7H2O
CaSO4·0.5H2O
NaCl
菌丝体长势
+++
++
++



菌丝体生长速度//mm/d
6.17 aA
5.74 bB
5.33 cC
5.07 dD
4.82 eD
4.71 eD
表 5 维生素对菌丝体生长的影响
维生素
VB1
VB2
VC
叶酸
VB6
菌丝体长势
+++
++
++
++

菌丝体生长速度//mm/d
6.35 aA
6.02 bB
5.73 cB
5.58 cB
5.47 dC
608
第 3 期
(责任编辑 王晓芳)
表 8 温度对菌丝体生长的影响
温度//℃
28
26
30
24
22
菌丝体长势
+++
++
++


菌丝体生长速度//mm/d
7.12 aA
6.81 bB
6.39 cB
6.24 cC
5.53 dD
2.3 pH对美味牛肝菌菌丝体生长的影响
pH对菌丝体生长的影响见表 7。 从表 7可以看
出,pH 5.0 时菌丝体长势最好, 生长速度最快;pH
6.5 时菌丝体长势最差,生长速度最慢。 因此,菌丝
体生长的最适 pH为 5.0。
2.4 温度对美味牛肝菌菌丝体生长的影响
在 22、24、26、28和 30 ℃下培养,菌丝体生长结
果见表 8。 从表 8 可以看出,28 ℃时菌丝体长势最
好,生长速度最快,其菌丝体生长速度与其他温度
下的菌丝体生长速度差异极显著;22 ℃时菌丝体长
势最差、生长速度最慢。 故菌丝体生长的最适温度
为 28 ℃。
3 小结
美味牛肝菌菌丝体的最适碳源是葡萄糖,最适
氮源是蛋白胨,最适无机盐是 KH2PO4,最适维生素
是 VB1。 最适培养基组成为葡萄糖 3.0%、 蛋白胨
0.20% 、KH2PO4 0.60% 、MgSO4·7H2O 0.20%和 VB1
0.000 5%。 最适 pH 5.0,最适温度 28 ℃,此时菌丝
体长势最好,生长速度最快。
美味牛肝菌菌丝体无论是蛋白质、多糖、氨基
酸还是维生素含量均与子实体类似,有的甚至超过
了子实体[8,9]。试验中筛选出的培养基及其培养条件
可用于生产美味牛肝菌菌丝体,以菌丝体为原料可
生产食品、药品和保健品;或者通过培养菌丝体来
提取所需要的美味牛肝菌蛋白质、 多糖等代谢产
物。
参考文献:
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组分分析[J].食品工业科技,2010,31(5):164-166.
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表 6 L9(34)正交试验结果
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
x1
x2
x3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
6.17
6.70
7.11
0.94
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
6.26
6.80
6.50
0.54
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
6.64
6.88
6.46
0.42
D
1
2
3
3
1
2
2
3
1
6.78
6.59
6.61
0.19
菌丝体生长速度//mm/d
5.86
6.46
6.19
6.47
6.76
6.88
6.44
7.17
7.71
表 7 pH 对菌丝体生长的影响
pH
5.0
4.5
5.5
6.0
4.0
6.5
菌丝体长势
+++
+++
+++
++
++

菌丝体生长速度//mm/d
5.93 aA
5.66 abAB
5.64 abAB
5.59 bAB
5.54 bB
5.19 cC
陈今朝等:美味牛肝菌菌丝体营养特性分析 609