全 文 ：食用菌学报２０１３．２０（４）：６～１０
收稿日期：２０１３－０４－１１原稿；２０１３－０７－０３修改稿
基金项目：北京市教委科技成果转化和产业化———林下经济关键技术示范与转化（编号：ＰＸＭ２０１３　０１４２０７
００００７７）、北京市财政项目２０１３山区林下野生品种人工扩繁试验示范（编号：ＰＸＭ２０１３１５４２０８０００００８）的
部分研究内容
作者简介：牛玉蓉（１９８５－），女，在读硕士，主要从事野生食用菌的生理生化研究工作。
＊本文通讯作者　Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｑｊ３３０５＠１２６．ｃｏｍ
文章编号：１００５－９８７３（２０１３）０４－０００６－０５
点柄粘盖牛肝菌菌种分子鉴定与最适培养条件研究
牛玉蓉１，王明花１，张国庆１，陈青君１＊，刘　松２，蒋　玮２
（１北京农学院植物科学技术学院，北京１０２２０６；２北京市园林绿化局防沙治沙办公室，北京１０００２９）
摘　要：点柄粘盖牛肝菌（Ｓｕｉｌｕｓ　ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ）是一种菌根性食用菌，在对其菌种进行分子鉴定的基础上进行了
最适培养条件研究，结果表明：由孢子分离得到的菌种为点柄粘盖牛肝菌纯菌种；菌丝生长最佳的营养元素为葡
萄糖、氯化铵与硝酸铵，最适温度为２５℃，３１℃时菌丝不萌发，最适ｐＨ值为４．５，喜偏酸性的环境。
关键词：点柄粘盖牛肝菌；分离；转录间隔区；生长条件
　　点柄粘盖牛肝菌（Ｓｕｉｌｌｕｓ　ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ），又名
栗壳牛肝菌，属担子菌纲（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）、伞菌
目（Ａｇａｒｉｃａｌｅｓ）、牛肝菌科（Ｂｏｌｅｔａｃｅａｅ）、粘盖牛肝
菌属（Ｓｕｉｌｌｕｓ）［１］。它是一种外生菌根食用菌，常
见于夏秋季节的松林及混交林地［２］，是北京油松
林地的优势菌根性食用菌之一［３］，同时，也是北
京地区野生食用菌中的珍品［４］。点柄粘盖牛肝
菌味道鲜美，富含多种营养成分，同时可用于大
骨节病的治疗［５］，子实体中的活性提取物对多种
肿瘤细胞有较强的抑制作用［６］，具有较高的经济
价值及药用价值；由于其与松树形成外生菌根并
促进松树生长，在森林生态系统中也发挥重要作
用，是一类重要的菌根菌资源［７，８］。
由于点柄粘盖牛肝菌目前还无法进行人工栽
培，获得真实的菌株并明确其培养条件是下一步驯
化栽培的基础之一。利用ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区段的ＤＮＡ
序列对菌种进行分子鉴定，是一种精确的对未知菌
种进行鉴定的方法［９］，近几年该技术也较多运用于
外生菌根真菌的鉴定［１０，１１］及亲缘关系的研究。笔
者对北京山区野生点柄粘盖牛肝菌进行分子鉴定，
并对其菌丝体生长适宜条件进行研究，以期为点柄
粘盖牛肝菌的人工驯化栽培提供参考。
１　材料与方法
１．１材料
　　野生点柄粘盖牛肝菌（Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ）子
实体于２０１０年７月下旬至９月份两次采集于
北京市延庆四海镇油松林地，样本经中国科学
院微生物研究所卯晓岚先生进行形态学分类
鉴定为点柄粘盖牛肝菌（Ｓｕｉｌｌｕｓ　ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ）。
菌种由野生点柄粘盖牛肝菌子实体孢子分离
得到。
１．２基于ｒＤＮＡ　ＩＴＳ序列分析的分子鉴定
１．２．１样品ＤＮＡ的提取
　　采用“Ｂｉｏ　ＴｅＫｅ”新型快速植物基因组ＤＮＡ
提取试剂盒（离心柱型，北京百泰克生物技术有
限公司）对点柄粘盖牛肝菌子实体、孢子分离菌
丝体ＤＮＡ进行提取。
１．２．２样品ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区段的ＰＣＲ扩增、测序及
分析比对
　 　 试 验 所 选 用 引 物 为 ＩＴＳ１
（５ＴＣＣＧＴＡＧＧＴＧＡＡＣＣＴＧＣＧＧ３）与 ＩＴＳ４
（５ＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＡＴＴＧＡＴＡＴＧＣ３），由上海
生工生物工程技术服务有限公司合成。ＰＣＲ扩
增反 应 使 用 “ＴＩＡＮ　ＧＥＮ”２× Ｔａｑ　ＰＣＲ
Ｍａｓｔｅｒｍｉｘ（天根生化科技北京有限公司）（体系
组成为：２×Ｔａｑ　ＰＣＲ　ＭａｓｔｅｒＭｉｘ　２５．０μＬ，模板
ＤＮＡ２．０μＬ，引物（１０μｍｏｌ／Ｌ）ＩＴＳ１、ＩＴＳ４分别
１．５μＬ，ｄｄＨ２Ｏ２０．０μＬ），在ＢＩＯ－ＲＡＤ　Ｃ１０００
Ｔｈｅｒｍａｌ　Ｃｙｃｌｅｒ　ＰＣＲ仪上进行。
ＰＣＲ扩增程序：９４℃预变性５　ｍｉｎ；３４个循
环（９４℃变性４０　ｓ；５６℃退火４０　ｓ；７２℃延伸
第４期 牛玉蓉，等：点柄粘盖牛肝菌菌种分子鉴定与最适培养条件研究
８０　ｓ）；最后７２℃延伸１０　ｍｉｎ，４℃保存。
ＰＣＲ产物检测：取ＰＣＲ扩增产物５μＬ，经
１．０％的琼脂糖凝胶电泳检测，在紫外凝胶成
像仪下检测 ＰＣＲ 扩增产物的分子量大小并
拍照。
ＰＣＲ产物测序：将扩增产物直接交由上海生
工生物工程技术服务有限公司进行测序。
序列分析比对：样品ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区段 ＤＮＡ
序列用 ＤＮＡＭＡＮ（Ｖｅｒｓｉｏｎ　６．０．３）软件进行分
析，并运用 ＧｅｎＢａｎｋ中的ＢＬＡＳＴ工具在 ＤＮＡ
序列数据库中对所获序列同源性进行分析比较，
判断所测样品的物种。
１．３最适营养元素筛选
　　第一组：分别使用２０ｇ果糖、甘露醇、蔗糖、
乳糖、麦芽糖、淀粉替换ＰＤＡ培养基中的葡萄
糖，以ＰＤＡ培养基为对照，每处理３个重复。
使用直径为５ｍｍ的打孔器，在ＰＤＡ培养基上
培养２０ｄ的点柄粘盖牛肝菌菌落边缘打孔取
块，分别接种于供试培养基中央，每皿１块，置
于２５℃恒温培养箱中暗培养。接种６ｄ后每
５ｄ测量菌落直径，以最先满皿的培养时间为记
录截止日期，记录菌丝生长情况，计算菌丝生长
速度等［１３］。
第二组：分别向ＰＤＡ培养基中添加０．５％氯
化铵、硝酸铵、硝酸钾、牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸
膏、尿素，并以ＰＤＡ培养基为对照，每处理３个
重复。接种培养及观测方法同第一组。
１．４最适培养温度筛选
　　采用 ＰＤＡ 培养基进行试验，接种方法同
１．３。将接种后的培养基分别置于１５、１７、１９、２１、
２３、２５、２７、２９、３１℃的恒温培养箱中进行暗培养，
每处理３个重复，接种后２５ｄ测量菌落直径，并
将培养基融化后水洗，过滤收集菌丝体，于１００℃
烘干称取菌丝体干重。
１．５最适ｐＨ值筛选
　　用１ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ和１ｍｏｌ／Ｌ　ＨＣｌ，分别将
ＰＤ培养液ｐＨ值调节为２．５、３．５、４．５、５．５、６．５、
７．５、８．５、９．５、１０．５，每处理３个重复。
使用无菌研钵将ＰＤ培养液中培养１５ｄ的
点柄粘盖牛肝菌菌球研碎，并吸取３ｍＬ菌液加
入不同ｐＨ值供试培养液中。置于２５℃恒温振
荡培养箱中１２５ｒ／ｍｉｎ进行暗培养，１９ｄ后过滤
收集培养液中菌球并于１００℃烘干称取菌丝体
干重。
２　结果与分析
２．１点柄粘盖牛肝菌分子鉴定
２．１．１样品ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区段的ＰＣＲ扩增结果
　　使用引物ＩＴＳ１与ＩＴＳ４对点柄粘盖牛肝菌
不同样品ＤＮＡ的ＩＴＳ序列进行ＰＣＲ扩增，获得
大约６５０ｂｐ产物（图１为不同样品ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区
段ＰＣＲ产物电泳结果）。条带Ｓ１、Ｓ２对应的样
品分别是点柄粘盖牛肝菌子实体Ｓ１、孢子分离菌
丝体Ｓ２。
泳道 Ｍ：分子量标记；泳道Ｓ１，Ｓ２：子实体、孢子分离菌丝体
Ｌａｎｅｓ：Ｍ，Ｍａｒｋｅｒｓ；Ｓ１ａｎｄ　Ｓ２，ｔｈｅ　ｗｉｌｄ　ｆｒｕｉｔｉｎｇ　ｂｏｄｙ　ａｎｄ
ｍｙｃｅｌｉａ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍＳ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｓｐｏｒｅ
图１　样品ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区段ＰＣＲ产物电泳结果
Ｆｉｇ．１　Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｒＤＮＡ　ＩＴＳ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｐａｔｔｅｒｎｓ
２．１．２样品ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区段的序列分析比对
　　供试点柄粘盖牛肝菌子实体与菌丝体的
ｒＤＮＡ　ＩＴＳ序列Ｓ１、Ｓ２长度均为６５３ｂｐ，并且二
者碱基排列一致。将样品的ｒＤＮＡ　ＩＴＳ序列与
ＧｅｎＢａｎｋ核酸序列数据库进行序列相似性检索
（ＢＬＡＳＴ），二者皆与 ＧｅｎＢａｎｋ中点柄粘盖牛肝
菌ＩＴＳ序列（ＡＪ２７２４０９．１）相似程度达到９９％，说
明供试样品均为点柄粘盖牛肝菌组织，与形态学
分类鉴定结果相一致，证实由孢子分离得到的菌
丝体为点柄粘盖牛肝菌纯培养菌种。
２．２点柄粘盖牛肝菌培养条件的优化
２．２．１最适营养元素的筛选
　　第一组中，不同营养元素对点柄粘盖牛肝菌
菌丝生长的影响如表１所示。菌丝在接种后３～
５ｄ开始萌发，其中以在葡萄糖上生长最快，日均
生长量达到３．３３ｍｍ，显著高于其它处理，菌丝
在葡萄糖培养基上生长浓密，颜色洁白，点柄粘
盖牛肝菌菌丝体生长最佳营养元素为葡萄糖。
７
食　用　菌　学　报 第２０卷
表１　第一组营养元素对点柄粘盖牛肝菌菌丝生长的影响
Ｔａｂｌｅ１　Ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｏｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ
营养元素
Ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅ
萌发天数
Ｄａｙｓ　ｏｆ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ（ｄ）
菌丝长速
Ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ（ｍｍ／ｄ）
菌丝长势
Ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｖｉｇｏｒ＊
葡萄糖 Ｇｌｕｃｏｓｅ　 ３　 ３．３３±０．０６ａ ＋＋＋
果糖Ｆｒｕｃｔｏｓｅ　 ３　 ２．８８±０．０４ｂ ＋＋
麦芽糖 Ｍａｌｔｏｓｅ　 ４　 １．８３±０．１１ｃ ＋＋
甘露醇 Ｍａｎｎｉｔｏｌ　 ５　 １．６４±０．１７ｄ ＋＋＋
乳糖 Ｌａｃｔｏｓｅ　 ５　 １．５５±０．０６ｄ ＋
淀粉Ｓｔａｒｃｈ　 ５　 １．２９±０．０８ｅ ＋
蔗糖Ｓｕｃｒｏｓｅ　 ５ — —
＊＋＋＋菌丝生长浓密，＋＋菌丝生长密，＋菌丝生长稀疏，—未检测到；数据为３次重复的平均值±标准误；不同小写字母表示在
０．０１＜０．０５水平上差异显著
＋＋＋ｌｕｘｕｒｉａｎｔ，＋＋ｄｅｎｓｅ，＋ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ　ｓｐａｒｓｅ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ，—ｎｏ　ｇｒｏｗｔｈ；Ｖａｌｕｅｓ　ａｒｅ　ｔｈｅ　ｍｅａｎｓ（ｎ＝３）±ＳＤ ；Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｏｗｅｒ　ｃａｓｅ
ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ａｔ　Ｐ０．０５
　　第二组对点柄粘盖牛肝菌菌丝体生长的影
响如表３所示。菌丝体在含不同氮源的培养基
中生长情况有较大差异。除添加尿素的培养基
菌丝体不能萌发，其它均可在接种后２～３ｄ开始
萌发。在以氯化铵、硝酸铵、牛肉浸膏为氮源的
培养基上，菌丝体生长最快，日均生长量均达到
４ｍｍ左右，显著高于其它处理；菌丝体在含牛
肉浸膏、蛋白胨与酵母浸膏的培养基上生长，中
心出现褐色老化现象，而添加氯化铵、硝酸铵的
培养基上菌丝体浓密洁白。因此，点柄粘盖牛
肝菌菌丝体生长适宜的营养元素为氯化铵与硝
酸铵。
表２　第二组营养元素对点柄粘盖牛肝菌菌丝生长的影响
Ｔａｂｌｅ　２　Ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｏｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ
营养元素
Ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅ
萌发天数
Ｄａｙｓ　ｏｆ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ（ｄ）
菌丝长速
Ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ（ｍｍ／ｄ）
菌丝长势
Ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｖｉｇｏｒ
氯化铵
Ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ
２　 ４．２７±０．０３ａ ＋＋＋
硝酸铵
Ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｎｉｔｒａｔｅ
２　 ４．０９±０．１１ａ ＋＋＋
牛肉浸膏
Ｂｅｅｆ　ｅｘｔｒａｃｔ
３　 ３．９９±０．１７ａ ＋＋
蛋白胨
Ｐｅｐｔｏｎｅ
３　 ３．４１±０．３４ｂ ＋＋＋
酵母浸膏
Ｙｅａｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔ
３　 １．９７±０．２６ｃ ＋＋＋
硝酸钾
Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｎｉｔｒａｔｅ
３　 １．９４±０．１９ｃ ＋＋
尿素 Ｕｒｅａ — — —
对照 Ｃｏｎｔｒｏｌ　 ３　 ３．３３±０．０６ｂ ＋＋＋
注释同表１　Ｆｏｏｔｎｏｔｅ　ａｓ　ｉｎ　ｔａｂｌｅ　１
２．２．２最适培养温度的筛选
　　由表３可知，点柄粘盖牛肝菌菌丝体在１５～
２９℃均可萌发生长，３１℃时不萌发，且菌落形态
和菌丝生长情况不同。
从点柄粘盖牛肝菌接种后萌发天数、日均
生长量、菌丝体干重以及菌丝的生长情况综合
分析，适宜点柄粘盖牛肝菌菌丝生长适宜温度
范围是２３～２５ ℃，最适温度为２５ ℃；低于
２３℃时，菌丝生长缓慢；低于１７℃，在接种块
表面出现深褐色液滴；高于２５℃时，菌丝正常
生长受阻，菌落形态出现畸形；温度３１℃菌丝
不萌发。
８
第４期 牛玉蓉，等：点柄粘盖牛肝菌菌种分子鉴定与最适培养条件研究
表３　不同温度对点柄粘盖牛肝菌菌丝体生长的影响
Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ
ｏｆ　Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ
温度
Ｔｅｍｐ．（℃）
萌发天数 （ｄ）
Ｄａｙｓ　ｏｆ
ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
菌丝长速
Ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ
ｒａｔｅ（ｍｍ／ｄ）
１５　 ４　 １．３７±０．１０ｅ
１７　 ４　 １．７０±０．６０ｄ
１９　 ３　 ２．３３±０．３３ｃ
２１　 ３　 ２．４９±０．１０ｃ
２３　 ３　 ３．０９±０．１５ｂ
２５　 ３　 ３．８４±０．１１ａ
２７　 ３　 ２．４８±０．１３ｃ
２９　 ３　 １．４４±０．１２ｄｅ
３１ — —
注释同表１　Ｆｏｏｔｎｏｔｅ　ａｓ　ｉｎ　ｔａｂｌｅ　１
２．２．３最适ｐＨ值的筛选
　　由表４可知，不同ｐＨ环境对点柄粘盖牛肝菌
菌丝体生长有较大影响。ｐＨ为３．５～９．５时，菌丝
体可在接种后３～５ｄ萌发并开始形成菌球，ｐＨ为
２．５与１０．５时，菌丝不能萌发。经过液体振荡培养
１９ｄ后形成的菌丝体干重存在差异，ｐＨ　３．５～５．５
时，形成菌丝体干重间无显著性差异，但三者均显
著高于ｐＨ　６．５～９．５时形成的菌丝体干重，其中
ｐＨ　４．５时菌丝体干重最高为１１７８．７ｍｇ。不同ｐＨ
条件下形成菌球的大小及数量不同。ｐＨ　４．５～５．５
时，形成菌球体积大且数量多。因此，点柄粘盖牛
肝菌菌丝生长适宜的ｐＨ值为４．５，喜偏酸性的
环境。
表４　不同ｐＨ值对菌丝体生长的影响
Ｔａｂｌｅ　４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐＨ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ
ｐＨ
菌丝体干重
Ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｄｒｙ　ｗｅｉｇｈｔ
（ｍｇ）
菌球长势
Ｍｙｃｅｌｉａｌ
ｇｒｏｗｔｈｖｉｇｏｒ
２．５　 ２１１．８±２１．９ｆ —
３．５　 １０８０．３±５１．５ａｂ ＋＋
４．５　 １１７８．７±１２４．６ａ ＋＋＋
５．５　 １００３．７±６２．０ａｂ ＋＋＋
６．５　 ９２１．８±５６．８ｂ ＋＋
７．５　 ８７４．１±１０１．２ｃ ＋＋
８．５　 ７００．５±１２６．３ｄ ＋
９．５　 ３９８．２±３７．４ｅ ＋
１０．５　 １９０．１±５１．１ｆ —
＋＋＋体积大且数量多，＋＋体积中等数量居中，＋菌球体积小
且数量少；其它注释同表１
＋＋＋ｂｕｌｋ　ａｎｄ　ｍｏｒｅ，＋＋ ｍｏｄｅｒａｔｅ，＋ｓｍａｌ　ａｎｄ　ｌｅｓｓ；Ｏｔｈｅｒｓ
ｆｏｏｔｎｏｔｅ　ａｓ　ｉｎ　ｔａｂｌｅ　１
３　小结
　　真实菌种是进行菌根食用菌研究的前提，但
由于菌根食用菌的菌种分离存在难度而且难以在
人工培养条件下形成子实体，因此对其菌种真伪
的鉴定无法依靠传统栽培实验来实现。目前主要
通过对菌根食用菌菌种ｒＤＮＡ　ＩＴＳ区段进行分析
比对来验证菌种的真伪，例如，张灵等［１４］对松茸
（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｍａｔｓｕｔａｋｅ）子实体与分离出的菌丝
体采用ｒＤＮＡ　ＩＴＳ序列进行分析比对；付立忠
等［１５］针对四个红菇科（Ｒｕｓｓｕｌａｃｅａｅ）菌株采用
ｒＤＮＡ　ＩＴＳ序列分析并进行系统发育的研究。在
本实验中对采集的野生点柄粘盖牛肝菌子实体及
其孢子分离产生的菌丝体进行分子鉴定，其结果
表明，二者与ＧｅｎＢａｎｋ中记录的点柄粘盖牛肝菌
ＩＴＳ序列有９９％的相似度，说明经孢子分离得到
点柄粘盖牛肝菌纯菌种。笔者还发现，同一个区
域内的粘盖牛肝菌在菌柄长短、盖的大小、颜色上
存在差异，有关油松林地牛肝菌的种类以及点柄
粘盖牛肝菌种群结构和遗传多样性还有待于深入
研究。
点柄粘盖牛肝菌培养条件的研究是进行人
工驯化栽培的前提条件，也是菌种扩繁、菌剂制
备等研究的基础，目前人们在多种菌根食用菌中
开展了相关研究［１６－２１］，但对于点柄粘盖牛肝菌培
养条件的研究报道很少。本实验中，点柄粘盖牛
肝菌菌丝体生长的最佳营养元素为：葡萄糖，氯
化铵与硝酸铵，适宜的温度范围是２３～２５℃，最
适温度为２５℃，最适ｐＨ值为４．５，这与他人研
究报道中点柄粘盖牛肝菌最适ｐＨ 为７～８不
同［７］，这种结果的差异可能与菌种原生地生境不
同有关。
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Ｗｉｌｄ　Ｓｕｉｌｌｕｓ　ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　Ｆｒｕｉｔ　Ｂｏｄｉｅｓ　ａｎｄ
Ｏｐｉｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｅｌｅｃｔｅｄ　Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ
ＮＩＵ　Ｙｕｒｏｎｇ１，ＷＡＮＧ　Ｍｉｎｇｈｕａ１，ＺＨＡＮＧ　Ｇｕｏｑｉｎｇ１，
ＣＨＥＮ　Ｑｉｎｇｊｕｎ１＊，ＬＩＵ　Ｓｏｎｇ２，ＪＩＡＮＧ　Ｗｅｉ　２
（１　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０２２０６，Ｃｈｉｎａ；
２　Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｍｕｎｉｃｉｐａｌ　Ｂｕｒｅａｕ　ｏｆ　Ｌａｎｄｓｃａｐｅ　ａｎｄ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００２９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓｕｉｌｕｓ　ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｉｓ　ａ　ｋｉｎｄ　ｏｆ　ｅｄｉｂｌｅ　ｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌ　ｆｕｎｇｉ，ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｗｉｌｄ　Ｓｕｉｌｕｓ　ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ　ｆｒｕｉｔ
ｂｏｄｉｅｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｐｉｎｅ　ｆｏｒｅｓｔ　ｉｎ　Ｓｉｈａｉ　Ｃｏｕｎｔｙ，Ｙａｎｑｉｎｇ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｓｐｏｒｅ　ｏｆ　Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ，
ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ａ　ｈｉｇｈ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ（９９．２５％）ｗｉｔｈ　Ｓ．ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ（ＡＪ２７２４０９．１）．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ
ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｆｏｒ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗｅｒｅ　ｇｌｕｃｏｓｅ，ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ　ａｎｄ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｎｉｔｒａｔｅ．ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　２５℃，ｗｈｅｎ　ｉｔ　ｗａｓ　３１℃，ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｃｏｕｌｄ　ｎｏｔ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｗａｓ　４．５．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｕｉｌｕｓ　ｇｒａｎｕｌａｔｕｓ；ｉｓｏｌａｔｅｄ；ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ　ｓｐａｃｅｒｓ（ＩＴＳ）；ｇｒｏｗｔｈ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
［本文编辑］　王瑞霞
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