全 文 :川贝雪梨膏抗炎解热及免疫调节作用的研究
陈奇有 周一平 陈四艳 何立华
(湖北省医药工业研究院药理室·武汉 430061)
川贝雪梨膏为中国药典收载品种 , 由梨清膏 、川贝母 、麦
冬 、百合 、款冬花 5 味中药组成 , 具有润肺止咳 、生津利咽之
功效 , 临床多用于治疗阴虚肺热 , 咳嗽 、喘促 、口燥咽干[ 1] 。
本文观察了该药的抗炎 、解热及免疫调节作用 ,结果如下。
1 材料
1.1 动物 昆明种小鼠 ,体重 18 ~ 22g , ♂♀各半;SD 大鼠 ,
体重 180~ 250g , ♂♀各半 ,均由华中科技大学同济医学院动
物学部提供 ,动物合格证号分别为:医动字第 19-052 号 ,医
动字第 19-020 号。
1.2 药物
川贝雪梨膏由湖北随州市制药厂生产 , 批号 990701。雪
梨膏由湖北省中垣药业有限公司生产 , 批号 990602。双氯芬
酸钠由本院合成室提供 ,批号 960506。角叉菜胶由辽宁省药
物研究所生产。氢化可的松为山西省晋新制药总厂生产 ,批
号980326-3。环磷酰胺(Cy)为上海华联制药公司生产 , 批
号960201。二硝基氟苯(DNFB)为美国 ACROS 公司生产(临
用前用等量丙酮:麻油混合溶媒配制),批号 9846701。
2 方法和结果
2.1 抗炎实验
2.1.1 小鼠二甲苯耳肿胀法
♂性小鼠随机分为 6 组 , 每组 10 只 , 分别按 20ml/ kg 体
重灌胃给予蒸馏水 , 川贝雪梨膏(3.5 , 7 , 14g/ kg), 雪梨膏
(14g/kg),双氯芬酸钠(10mg/kg)。空白对照组 、川贝雪梨膏
组和雪梨膏组每 d给药 1 次 ,连续 2d。双氯芬酸钠组在实验
第2d(d2)给药 1次。同时 d2 各组动物给药后1h右耳两面滴
二甲苯 0.05ml/只致炎 , 30min 后颈椎脱臼致死 , 用直径 9mm
的打孔器取左 、右两耳同一部位圆耳片 , 用 10-6扭力天平称
重。以两耳片重量之差作为肿胀度进行 t检验。
结果:川贝雪梨膏 7 和 14g/kg 组和双氯芬酸钠组均对二
甲苯致小鼠耳肿有显著性抑制作用。雪梨膏对小鼠无明显
影响 ,与川贝雪梨膏间无统计学差异。见表 1。
表 1 川贝雪梨膏对小鼠耳肿胀度的影响
组别 动物数(只)
剂量
(g/ kg)
耳肿胀度
(mg)
空白对照组 10 - 16.8±3.6
川贝雪梨膏低剂量组 10 3.5 14.7±2.7
川贝雪梨膏中剂量组 10 7 13.1±3.6*
川贝雪梨膏高剂量组 10 14 12.4±4.2*
雪梨膏组 10 14 14.0±2.9
双氯芬酸钠组 10 0.01 13.8±2.3*
与空白对照组比较*P<0.05
2.1.2 大鼠角叉菜胶足跖肿胀法
按文献[ 2]实验前按微量吸管测量法测定大鼠右后足容
积 , 然后随机分为 6 组 ,每组 10 只 ,分别按 20ml/kg 体重灌胃
给予蒸馏水 , 川贝雪梨膏(2.5 , 5 , 10g/kg),雪梨膏(10g/ kg),双
氯芬酸钠(10mg/kg)。给药 1h 后 , 右后足跖 SC1%角叉菜胶
0.1ml/只致炎。测定大鼠致炎后 1、2、3 、4 和 6h 足跖容积 , 致
炎前后足跖容积之差为肿胀度。
结果:川贝雪梨膏 10g/ kg和双氯芬酸钠对角叉菜胶致大
鼠足跖肿胀有明显抑制作用 , 雪梨膏对大鼠无明显影响 , 与
川贝雪梨膏间无统计差异。见表 2。
表 2 川贝雪梨膏对大鼠足跖肿胀度的影响
组别 动物数(只)
剂量
(g/ kg)
致炎前体积
(ml)
致炎后肿胀度(ml)
1h 2h 3h 4h 6h
空白对照组 10 - 1.220±0.132 0.327±0.242 0.521±0.170 0.708±0.185 0.856±0.201 1.053±0.205
川贝雪梨膏 10 2.5 1.308±0.138 0.268±0.121 0.412±0.169 0.609±0.139 0.638±0.160 0.936±0.162
低剂量组
川贝雪梨膏 10 5 1.271±0.227 0.276±0.257 0.392±0.225 0.547±0.248 0.749±0.236 1.002±0.185
中剂量组
川贝雪梨膏 10 10 1.268±0.142 0.177±0.206 0.311±0.203* 0.395±0.240* 0.656±0.199* 0.997±0.148
高剂量组
雪梨膏 10 10 1.224±0.162 0.234±0.126 0.365±0.110 0.545±0.144* 0.669±0.158 0.940±0.231
双氯芬酸钠 10 0.01 1.271±0.121 0.142±0.154 0.223±0.167* 0.311±0.185* 0.475±0.123* 0.662±0.136*
与对照组比较*P<0.05 , **P<0.01
2.2 解热作用 按文献[ 3] 大鼠实验前预先测肛温 3 次 , 取
平均值为实验前正常体温。然后分组 、给药方法 、途径 、剂
量 、致热方法同大鼠角叉菜胶足跖肿胀法。测量角叉菜胶注
射后第 6、7 、8、9h 大鼠体温。 以各组给药不同时间的变化值
(实测体温—实验前正常体温)进行 t检验。
结果:川贝雪梨膏 10g/kg 在第 8 和 9h 对角叉菜胶致大
鼠发热有明显的降低作用 ,而相同剂量的雪梨膏对大鼠无明
显影响 ,两者无统计学差异。见表 3。
·358· 中国中医药科技 2001 年第 8卷第 6 期
表 3 川贝雪梨膏对大鼠角叉菜胶致热作用的影响
组别 动物数(只)
剂量
(g/ kg)
体温(℃)
实验前 6h 7h 8h 9h
空白对照组 10 — 38.07±0.29 39.22±0.36 38.99±0.21 39.06±0.17 38.77±0.26
川贝雪梨膏低剂量组 10 2.5 38.20±0.24 38.99±0.46 38.87±0.52 38.97±0.36 38.82±0.43
川贝雪梨膏中剂量组 10 5 38.20±0.25 39.24±0.55 39.03±0.55 39.03±0.54 38.80±0.46
川贝雪梨膏高剂量组 10 10 38.24±0.16 39.18±0.35 39.02±0.34 38.84±0.32* 38.63±0.18*
雪梨膏组 10 10 38.13±0.04 38.98±0.43 38.75±0.41 38.94±0.36 38.73±0.31
双氯芬酸钠组 10 0.01 38.17±0.27 38.40±0.28** 38.20±0.27** 38.24±0.27** 38.22±0.34**
与空白对照组比较*P<0.05 , **P<0.01
2.3 免疫调节作用
2.3.1 小鼠尾静脉注射碳粒廓清法
按文献[ 2]雄性小鼠随机分为 6 组 , 每组 10 只 , 分别按
20ml/kg 体重灌胃给予蒸馏水 , 川贝雪梨膏(3.5 , 7 , 14g/ kg)、
雪梨膏(14g/kg), 连续给药 5d , 氢化可的松组在 d3 起 s.
c50mg/ kg ,连续 3d。最后 1 次给药 24h 后 , 小鼠尾 iv 中华墨
汁(生理盐水稀释 10 倍)10ml/kg , 注射后 1和 5min , 各从眼眶
血管丛取血 20μl , 加入 0.1%Na2CO3 溶液 2ml 中 , 摇匀 , 于
680nm 波长下比色测定光密度 , 计算各组的碳廓清指数(k),
并用 t检验进行统计学处理。同时在 5min 时取胸腺和脾脏
称重 , 以胸腺或脾脏重量(mg)与体重(g)之比作为胸腺或脾
指数进行显著性 t检验。
结果:川贝雪梨膏组对正常小鼠碳粒廓清无明显影响 ,
对正常小鼠胸腺和脾脏重量亦无明显影响。见表 4 和表 5。
表 4 川贝雪梨膏对小鼠碳粒廓清的影响
组别 动物数(只)
剂量
(g/ kg)×(d)
K值
( X±S)
空白对照组 10 - 0.1145±0.0503
川贝雪梨膏低剂量组 10 3.5×5 0.0930±0.0240
川贝雪梨膏中剂量组 10 7×5 0.0884±0.0251
川贝雪梨膏高剂量组 10 14×5 0.0933±0.0216
雪梨膏组 10 14×5 0.1333±0.0466
氢化可的松组 9 0.05×3 0.0532±0.0305*
与空白对照组比较*p<0.05
表 5 川贝雪梨膏对小鼠胸腺和脾脏指数的影响
组别 动物数(只)
剂量
(g/kg)×(d) 胸腺指数 脾指数
空白对照组 10 - 3.53±0.58 5.8±1.4
川贝雪梨膏低剂量组 10 3.5×5 3.30±0.55 5.2±0.6
川贝雪梨膏中剂量组 10 7×5 3.34±0.41 5.0±1.4
川贝雪梨膏高剂量组 10 14×5 3.30±0.52 5.4±0.8
雪梨膏组 10 14×5 3.38±0.78 6.0±1.4
氢化可的松组 9 0.05×3 1.04±0.36* 1.8±0.54*
与空白对照组比较*p<0.05
2.3.2 DNFB 诱导小鼠 DTH
按文献[ 2]小鼠腹部脱毛剂去毛(范围约 3×3cm2)。然后
随机分为 10组 , 即空白对照组 , Cy100mg/kg 组 , 正常和 Cy诱
导免疫低下的川贝雪梨膏 3.5 、7 和 14g/kg 组 , 正常和 Cy 诱
导免疫低下的雪梨膏 14g/kg 组 ,各组动物灌胃给药容量均为
20ml/kg 体重 ,空白对照组和 Cy 组给予等量的蒸馏水。 d1 每
鼠腹部去毛处涂抹 1%DNFB50μl致敏 , d2 同法强化 1 次。同
时在致敏 d1与 d3 , ip Cy100mg/kg.d 共 2 次诱导 DTH 低下模
型。
各组连续灌胃给药 6d , d6每鼠右耳廓两面均匀涂擦 1%
DNFB 10μl/只攻击 , 24h 后颈椎脱臼处死小鼠 ,用直径 9mm 打
孔器分别打下左 、右两耳同一部位圆耳片称重 , 以左 、右耳片
重量之差作为肿胀度进行显著性 t检验。
结果:川贝雪梨膏 14g/ kg 能明显抑制正常小鼠 DTH , 但
川贝雪梨膏对Cy 诱导免疫低下小鼠的 DTH 无明显影响。见
表 6。
表 6 川贝雪梨膏对小鼠 DNFB性 DTH的影响
组别 动物数(只)
剂量
(g/kg)×(d)
DTH
(mg)
空白对照组 10 - 15.8±4.3
川贝雪梨膏低剂量组 10 3.5×6 12.3±3.3
川贝雪梨膏中剂量组 10 7×6 14.4±3.0
川贝雪梨膏高剂量组 10 14×6 9.1±3.3*
雪梨膏组 10 14×6 10.5±2.7*
Cy组 10 0.1×2 4.2±2.7**
Cy+川贝雪梨膏低剂量组 10 0.1×2+3.5×6 5.0±4.9
Cy+川贝雪梨膏中剂量组 10 0.1×2+7×6 6.0±5.9
Cy+川贝雪梨膏高剂量组 10 0.1×2+14×6 5.9±5.4
Cy+雪梨膏组 10 0.1×2+14×6 4.6±4.8
与空白对照组比较*P<0.05, **P<0.01
3 结论
本实验研究表明 ,川贝雪梨膏可显著抑制二甲苯致小鼠
耳廓肿胀度和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀度 , 可显著降低角叉
菜胶致热大鼠体温升高 , 对碳粒廓清 、免疫器官重量及免疫
功能低下的小鼠 DTH 无明显影响 , 但显著抑制正常小鼠的
DTH。以上结果提示川贝雪梨膏具有抗炎解热作用 , 但对细
胞免疫有抑制作用 ,其药理机制有待进一步研究。
参考文献
1 中华人民共和国药典.1995(I 部).中华人民共和国药内委员会
编
2 徐叔去等主编.药理实验方法学.人民卫生出版社 , 1999
3 陈奇主编.中药药理研究方法学.人民卫生出版社 , 1993
(收稿:2001-01-10)
·359·2001年第 8 卷第 6 期 中国中医药科技