全 文 ：［收稿日期］ 20140517(011)
［基金项目］ 贵州省教育厅自然科学研究项目(20090119);黔南民族医学高等专科学校项目(QNYZ201328)
［第一作者］ 李雪营，助教，从事天然药物质量控制研究，Tel:15285359735，E-mail:lixueying021@ 163. com
［通讯作者］ * 魏学军，副教授，从事中药与民族药质量控制研究，Tel:0854-8308038，E-mail:qndywxj@ 163. com
黔产铁苋菜不同炮制品中活性成分含量比较
李雪营1，刘晓梦2，余跃生1，孙晓惠1，魏学军1*
(1. 黔南民族医学高等专科学校，贵州 都匀 558003;
2. 贵阳医学院 第三附属医院，贵州 都匀 558004)
［摘要］ 目的:比较铁苋菜不同炮制品中没食子酸、总黄酮的含量，探讨炮制方法对铁苋菜活性成分的影响。方法:采用
HPLC测定没食子酸含量，流动相乙腈-0. 05%磷酸(4∶ 96)，检测波长 270 nm;以芦丁为指标成分，运用 UV测定总黄酮含量，检
测波长 515 nm。比较铁苋菜炒黄品、炒焦品、炒炭品、酒炙品、醋炙品、生品中没食子酸和总黄酮的含量差异。结果:铁苋菜炮
制前后没食子酸和总黄酮的含量发生了变化。各炮制品中没食子酸含量排序为炒黄品 ＞酒炙品 ＞醋炙品 ＞炒焦品 ＞生品 ＞
炒炭品;总黄酮含量排序为醋炙品 ＞酒炙品 ＞炒焦品 ＞炒黄品 ＞生品 ＞炒炭品。结论:炮制方法对黔产铁苋菜中没食子酸和
总黄酮含量具有一定影响，炒炭品中这 2 种成分含量最低。
［关键词］ 铁苋菜;炮制方法;没食子酸;总黄酮;芦丁
［中图分类号］ Ｒ283. 3;Ｒ283. 1;Ｒ284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2015)02-0033-03
［doi］ 10. 13422 / j． cnki． syfjx． 2015020033
［网络出版地址］ http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /11． 3495． Ｒ． 20141204． 1001． 007． html
［网络出版时间］ 2014124 10:01
Content Comparison of Active Ingredients in Different Processed Products of Acalypha australis in Guizhou
LI Xue-ying1，LIU Xiao-meng2，YU Yue-sheng1，SUN Xiao-hui1，WEI Xue-jun1* (1. Qiannan Medical
College for Nationalities，Duyun 558003，China;2． The Third Affiliated Hospital of Guiyang Medical University，
Duyun 558004，China)
［Abstract］ Objective:By comparing contents of gallic acid and total flavonoids from different processed
products of Acalypha australis to explore influence of processing methods on the content of active ingredients in
A． australis． Method:HPLC was adopted to determine the content of gallic acid with mobile phase of acetonitrile-
0. 05% phosphoric acid (4∶ 96)and detection wavelength at 270 nm． UV was employed to determine the content
of total flavonoids with rutin as index components and detection wavelength ar 515 nm． Compared content
differences of these two ingredients from different processed products of A． australis． Ｒesult:There were changes
after concocted on contents of gallic acid and total flavonoids in A． australis． Order of the content of gallic acid in
each product was fried yellow product ＞ wine sunburn product ＞ vinegar sunburn product ＞ fried coke product ＞ raw
product product ＞ fried carbon product， the content of total flavonoids was in the order of vinegar sunburn
product ＞ wine sunburn product ＞ fried coke product ＞ fried yellow product ＞ raw product ＞ fried carbon product．
Conclusion:Processing methods have a certain influence in contents of gallic acid and total flavonoids， the
minimum contents of these two ingredients are both in fried carbon product．
［Key words］ Acalypha australis;processing method;gallic acid;total flavonoids;rutin
铁苋菜主要成分包括黄酮类、生物碱类、鞣质
等，具有清热利湿、收敛止血的功能［1］。由于资源
丰富、疗效显著，在贵州苗族聚集区被广泛应用，是
一种重要的药食同源品种，苗药亦称海蚌含珠［2］，
具有良好的开发应用前景。没食子酸和总黄酮是铁
苋菜的重要活性成分，具有抗菌消炎、止泻、止血、平
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第 21 卷第 2 期
2015 年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 21，No． 2
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喘、抗衰老和增强机体免疫等药理作用［3-7］。中药
炮制作为增强天然药物疗效的重要技术手段，在药
物的开发应用中意义显著。在前期研究基础上［8］，
本实验为探讨炮制对铁苋菜活性成分和药效的影
响，以总黄酮和没食子酸为指标成分，通过 HPLC 和
UV分别测定并比较不同炮制品中指标成分含量，
为该药材的药效学和炮制方法研究提供实验依据。
1 材料
LC-10ATvp型高效液相色谱仪(日本岛津公
司)，WMLSP 色谱工作站(南宁威玛龙公司)，Cary
100 型双光束紫外-可见分光光度计(美国安捷伦公
司)，2. 0Ｒ 型低速离心机(德国 Heraeus 公司)，
AE240 型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)。
铁苋菜于 2013 年 7 月采自本校植物园试验田，
经本校药学系朱文仁副教授鉴定为大戟科植物铁苋
菜 Acalypha australis 的干燥全草。绍兴黄酒、山西
陈醋均购自当地超市，没食子酸、芦丁对照品(中国
食品药品检定研究院，批号分别为 110831-200803，
100080-200707)，乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其
他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 铁苋菜炮制品的制备 将新鲜净制的铁苋菜
摘取全叶，切成 5 mm宽丝;根、茎切成 10 mm长段，
干燥后混匀，得生品。另按《中国药典》2010 年版一
部附录ⅡD 炮制通则制备得炒黄品、炒焦品、炒炭
品、酒炙品、醋炙品。
2. 2 没食子酸和总黄酮的含量测定［8］
2. 2. 1 色谱条件 Diamonsil C18色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm)，流动相乙腈-0. 05%磷酸(4∶ 96)，检
测波长 270 nm，柱温室温，流速 1 mL·min －1，进样量
20 μL。理论塔板数按没食子酸峰计算应不低于
6 000，见图 1。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 精密称取过 3 号筛并
干燥至恒重的不同铁苋菜炮制品粉末 2. 0 g，加 20
倍量水于 80 ℃回流提取 2 次，每次 3 h，合并提取
液，过滤，离心(3 000 r·min －1，5 min)，浓缩后加水
定容至 100 mL量瓶中，摇匀，冷藏备用。
2. 2. 3 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对
照品 22 mg，用流动相定容至 100 mL量瓶中，摇匀，
得没食子酸对照品溶液。精密称取芦丁对照品
22 mg，加 60%乙醇溶解并定容至 100 mL 量瓶中，
摇匀，得芦丁对照品溶液。
2. 2. 4 标准曲线的制备 精密移取没食子酸对照
品溶液 1 mL 至 10 mL 量瓶中，用流动相定容至刻
A．对照品;B．供试品;1. 没食子酸
图 1 铁苋菜生品 HPLC
Fig． 1 HPLC chromatogram of raw product of Acalypha australis
度，精密移取不同体积对照品溶液按 2. 2. 1 项下色
谱条件测定，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，
得线性方程 Y = 3. 412 × 107X － 3 192. 454(r =
0. 999 9)，线性范围 0. 022 ～ 0. 22 μg。
精密移取芦丁对照品溶液 0，0. 5，1. 0，1. 5，
2. 0，2. 5，3. 0 mL分别置于 10 mL量瓶中，加 60%乙
醇稀释至 5 mL，加入 5%亚硝酸钠溶液 0. 5 mL，摇
匀，放置 6 min;加 10%硝酸铝溶液 0. 5 mL，摇匀，放
置 5 min;加 4% 氢氧化钠溶液 4 mL，摇匀放置
12 min。以第 1管溶液作为空白对照，于 515 nm处测
定吸光度(A)，以芦丁质量浓度(C)为横坐标，A为纵
坐标，得线性方程 A = 5. 724C － 0. 005(r = 0. 999 2)，
线性范围 11 ～ 66 μg。
2. 2. 5 精密度试验 取没食子酸对照品溶液，按
2. 2. 1 项下色谱条件连续进样 6 次，计算没食子酸
峰面积的 ＲSD 1. 1%。另取芦丁对照品溶液
2. 0 mL，按 2. 2. 4 项下标准曲线制备条件连续测定
6 次，计算 ＲSD 0. 9%，表明仪器精密度良好。
2. 2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别在
0，2，4，6，8 h按 2. 2. 1 项下色谱条件测定，计算没食
子酸峰面积的 ＲSD 1. 4%，说明供试品溶液在 8 h内
稳定性良好。另取同一供试品溶液 2. 0 mL，按
2. 2. 4 项下芦丁标准曲线制备条件在 0，30，60，90，
120，150，180 min 各测定 1 次，计算 A 的 ＲSD
1. 3%，说明供试品溶液在 180 min内稳定。
2. 2. 7 重复性试验 取铁苋菜生品 5 份，按 2. 2. 2
项下制备供试品溶液，按 2. 2. 1 项下色谱条件测定，
计算没食子酸含量的 ＲSD 1. 4%。另取同一供试品
溶液 2. 0 mL，按 2. 2. 4 项下芦丁标准曲线制备条件
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Vol． 21，No． 2
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测定，计算 A的 ＲSD 2. 1%。
2. 2. 8 加样回收率试验 取已知没食子酸含量
(7. 28 mg·g －1)的铁苋菜生品 6 份，各加入没食子酸
对照品 2. 20 mg，按 2. 2. 2 项下制备供试品溶液，按
2. 2. 1 项下色谱条件测定，结果没食子酸平均回收
率 100. 23%，ＲSD 2. 4%。另取已知总黄酮含量
(4. 17 mg·g －1)的铁苋菜生品 6 份，各加入芦丁对照
品 2. 20 mg，按 2. 2. 2 项下方法制备供试品溶液，取
供试品溶液 2. 0 mL，按 2. 2. 4 项下芦丁标准曲线制
备条件测定，平均回收率 98. 87%，ＲSD 1. 4%。
2. 2. 9 样品测定 取铁苋菜不同炮制品适量，按
2. 2. 2 项下制备供试品溶液，按 2. 2. 1 项下色谱条
件测定没食子酸含量。另取不同炮制品的供试品溶
液 2. 0 mL，按 2. 2. 4 项下芦丁标准曲线制备条件测
定总黄酮含量，结果见表 1。
表 1 铁苋菜不同炮制品中没食子酸及总黄酮含量的比较(n = 3)
Table 1 Comparison of gallic acid and total flavonoids in different
processed products of Acalypha australis(n = 3)
样品
没食子酸
/mg·g － 1
ＲSD
/%
增加率
/%
总黄酮
/mg·g － 1
ＲSD
/%
增加率
/%
生品 7. 37 1. 44 0 4. 19 2. 36 0
炒黄 8. 92 1. 67 21. 03 4. 63 1. 41 10. 50
炒焦 7. 67 2. 38 4. 07 4. 68 2. 43 11. 69
炒炭 5. 61 1. 51 － 23. 88 3. 64 1. 35 － 13. 13
酒炙 8. 54 1. 78 15. 88 4. 71 1. 62 12. 41
醋炙 8. 13 1. 63 10. 31 4. 82 1. 54 15. 04
3 讨论
本文铁苋菜炮制品的选择，一方面是基于当地
苗医有酒泡、醋泡铁苋菜内服治疗喘咳和腹泻、红白
痢疾症，将其炭化(程度不一)治疗外伤出血的应
用;另一方面结合辛散酸收的性味与疗效关系，炒炭
增强止血作用的理论基础，故选择酒炙品、醋炙品和
炒炭品为考察对象。同时考虑到炭化程度存在不统
一的状况，继而扩展考察炒黄品和炒焦品。
供试品溶液的制备选择水为提取溶媒，比较回
流法、超声法、微波法的提取效率，结果以回流法为
最佳。采用正交试验对影响回流提取的料液比、提
取温度、提取时间和提取次数进行优化，最终确定了
提取方法。铁苋菜含有芦丁［9］，故选择芦丁为总黄
酮含量测定的指标成分。
不同炮制方法对铁苋菜中没食子酸和总黄酮量
有一定影响。没食子酸量除炒炭制品较生品降低外，
其余制品均有不同程度增高，顺序依次为炒黄品 ＞酒
炙品 ＞醋炙品 ＞炒焦品 ＞生品 ＞炒炭品，原因可能与
没食子酸作为可水解鞣质的结构单元和辅料性质有
关。炒黄品、酒炙品及醋炙品均用文火炒制，温度较
低，有利于鞣质水解，故含量较高;随着炒制温度的升
高，水分大量蒸发，不利于鞣质水解，故炒焦品(中火、
温度较高)增加不明显，炒炭品(武火、温度高)降低
明显。前期研究表明乙醇是提取没食子酸的良好溶
剂［10］，因而酒炙品中没食子酸含量相对较高，醋炙品
亦有一定相关性;炒炭过度或灰化可能是导致炒炭品
中该成分含量降低的相关因素。
总黄酮量除炒炭品较生品降低外，其余炮制品
均有不同程度增高，顺序依次为醋炙品 ＞酒炙品 ＞
炒焦品 ＞炒黄品 ＞生品 ＞炒炭品，原因可能与辅料
性质［11］和温度对总黄酮的溶出有关。辅料醋、酒有
利于总黄酮的溶出，因而含量较生品增高;温度升高
一定范围，药材质变松脆，利于总黄酮的溶出，过高
温度则破坏总黄酮的结构，故炒焦品和炒黄品中总
黄酮含量有所增加，但炒炭品中则降低明显。
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［责任编辑 刘德文］
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