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UPLC法同时测定野生刺五加果和根中5种主要成分的含量



全 文 :China Pharmacy 2016 Vol. 27 No. 12 中国药房 2016年第27卷第12期
刺五加Acanthopanax senticosus为五加科Araliaceae五加
属多年生落叶灌木,主要集中分布在我国辽宁、吉林和黑龙江
的东部地区,自然贮量约2万亩[1]。刺五加为药食两用植物,其
根、茎、叶、果都可以食用,其嫩茎既是人们习食的最佳山野
菜,又是新型的保健食品的原料。刺五加具有增强机体非特
异性防御能力的功能,除具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗辐
射及抗疲劳的作用外,还可用于治疗心脑血管疾病、糖尿病、
神经衰弱、高血压及增强机体免疫力等[2-3]。其皂苷所制成的
注射液对睡眠具有促进作用[4],其果在民间作为镇定安神药被
广泛应用,能促进睡眠,缓解心悸、健忘、乏力等症状,作用与
人参相似。
Δ基金项目:吉林省科技发展计划项目(No.20130206035YY);吉
林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(No.吉教科合字〔2012〕第357
号);吉林省大学生创业训练计划项目(No.thsys1061)
*副教授,博士。研究方向:药品新辅料新剂型及纳米给药系
统。E-mail:huiminyao0921@163.com
# 通信作者:教授,博士。研究方向:长白山生物资源开发。
E-mail:swx0527@163.com
UPLC法同时测定野生刺五加果和根中5种主要成分的含量Δ
姚慧敏 1*,关颖丽 1,朱俊义 1 #,葛延杰 2,黄 媛 1,张 萌 1(1.通化师范学院吉林省长白山药用植物研究重点实验
室,吉林通化 134002;2.沈阳鑫泰格尔医药科技开发有限公司,沈阳 110016)
中图分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2016)12-1668-04
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.12.28
摘 要 目的:建立同时测定野生刺五加果和根中5种主要成分紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷含
量的方法。方法:采用超高效液相色谱法。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3,流动相为乙腈-0.3%磷酸(梯度洗脱),流速
为0.2 ml/min,检测波长为300 nm,柱温为30℃,进样量为10 μl。结果:紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶、槲皮素-3-鼠李
糖苷检测质量浓度线性范围分别为24.56~184.2 μg/ml(r=0.999 3)、18.454~138.405 μg/ml(r=0.999 3)、8.416~63.12 μg/ml(r=
0.999 7)、3.286~24.645 μg/ml(r=0.999 3)、2.522~18.915 μg/ml(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<1%。刺五加
果中上述 5种成分的加样回收率分别为 99.14%~100.50%(RSD=0.48%,n=6)、99.03%~100.45%(RSD=0.50%,n=6)、
99.22%~100.44%(RSD=0.44%,n=6)、99.80%~100.80%(RSD=0.44%,n=6)、99.76%~101.10%(RSD=0.51%,n=6);刺
五加根中上述前 4种成分的加样回收率分别为 99.21%~101.20%(RSD=0.73%,n=6)、99.81%~101.20%(RSD=0.52%,n=
6)、100.00%~101.80%(RSD=0.62%,n=6)、99.22%~100.40%(RSD=0.47%,n=6)。结论:该方法操作简便、稳定、重复性
好,可用于野生刺五加果和根中紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷含量的同时测定。
关键词 刺五加果;刺五加根;超高效液相色谱法;含量测定
Simultaneous Determination of 5 Main Components in the Fruits and Root of Wild Acanthopanax senticosus
by UPLC
YAO Huimin1,GUAN Yingli1,ZHU Junyi1,GE Yanjie2,HUANG Yuan1,ZHANG Meng1(1.Changbai Mountain
Medicinal Plants Research Laboratory,Tonghua Normal University,Jilin Tonghua 134002,China;2.Shenyang
Xintai Ge’er Medical Science and Technology Development Co.,Ltd.,Shenyang 110016,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish a method for the 5 main components(original syringin,chlorogenic acid,eleutheroside
E,isofraxidin and quercetin-3-rhamnoside) in the fruits and roots of wild Acanthopanax senticosus. METHODS:UPLC was per-
formed on the column of Waters ACQUITY UPLC HSS T3 with mobile phase of acetonitrile-0.3% phosphoric acid(gradient elu-
tion)at a flow rate of 0.2 ml/min. Detection wavelength was 300 nm,column temperature was 30 ℃,and injection volume was 10
μl. RESULTS:The linear range was 24.56-184.2 μg/ml for syringin(r=0.999 3),18.454-138.405 μg/ml for chlorogenic acid(r=
0.999 3),8.416-63.12 μg/ml for eleutheroside E(r=0.999 7),3.286-24.645 μg/ml for isofraxidin(r=0.999 3)and 2.522-18.915
μg/ml for quercetin-3-rhamnoside(r=0.999 8);RSDs of precision,stability and reproducibility tests were lower than 1%;recover-
ies were 99.14%-100.50%(RSD=0.48%,n=6)for syringing in the fruits of A. senticosus、99.03%-100.45%(RSD=0.50%,n=6)
for chlorogenic acid in the fruits of A. senticosus、99.22%-100.44%(RSD=0.44%,n=6)for eleutheroside E in the fruits of A. sen-
ticosus、99.80%-100.80%(RDS=0.44%,n=6)for isofraxidin in the fruits of A. senticosus、99.76%-101.10%(RSD=0.51%,n=6)
for quercetin-3-rhamnoside in the fruits of A. senticosus;99.21%-101.20%(RSD=0.73%,n=6)for syringing in the root of A. senti-
cosus、99.81%-101.20%(RSD=0.52%,n=6)for chlorogenic acid in the root of A. senticosus、100.00%-101.50%(RSD=0.62%,
n=6)for eleutheroside E in the root of A. senticosus、99.22%-100.40%(RSD=0.47%,n=6)for isofraxidin in the root of A. senti-
cosus. CONCLUSIONS:The method is simple and stable with good reproducibility,and can be used for the simultaneous determi-
nation of original syringin,chlorogenic acid,eleutheroside E,isofraxidin and quercetin-3-rhamnoside in the fruits and root of wild
A. senticosus.
KEYWORDS Fruit of Acanthopanax senticosus;Root of Acanthopanax senticosus;UPLC;Content determination
··1668
中国药房 2016年第27卷第12期 China Pharmacy 2016 Vol. 27 No. 12
超高效液相色谱(Ultra performance liquid chromatogra-
phy,UPLC)法是近年发展起来的新型液相色谱技术,与传统
的高效液相色谱(HPLC)法相比,其速度、灵敏度及分离度均
有很大提高,可缩短分析时间。目前,HPLC法测定刺五加药
材及其浸膏中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的文献报道较多[5-11],
但对刺五加果中成分的相关研究较少,而且目前尚无UPLC法
检测刺五加果和根中成分的报道。因此,为了更好地对刺五
加果和根进行开发利用和扩大药源,本试验采用UPLC法,以
紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷
为检测指标成分,对野生刺五加果和根进行了定量分析。
1 材料
1.1 仪器
ACQUITY H-CLASS 型 UPLC 仪,包括紫外检测器、
Empower色谱工作站(美国Waters公司);KQ116型超声波清
洗器(昆山市超声仪器有限公司)。LC14型电子分析天平(瑞
士Mettler-Toledo公司)。
1.2 试剂
紫丁香苷对照品(批号:111574-200603,纯度:94.9%)、绿
原酸对照品(批号:110753-201314,纯度:96.2%)、刺五加苷E
对照品(批号:111713-200502,纯度:98.1%)、异嗪皮啶对照品
(批号:110837-201005,纯度:99.2%)均购自中国食品药品检
定研究院;槲皮素-3-鼠李糖苷对照品(上海融禾医药科技发展
有限公司,批号:201306,纯度:99.8%);甲醇、乙腈为色谱纯,
其余试剂均为分析纯,水为纯净水。
1.3 药材
刺五加果(批号:141001、141002、141003)、刺五加根(批
号:141101、141102、141103)采自吉林省通化市长白山区,经
通化师范学院生命科学学院朱俊义教授鉴定为真品。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Waters ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm × 2.1
mm,1.7 μm);流动相:乙腈(A)-0.3%磷酸(B),梯度洗脱(洗脱
程序见表1);流速:0.2 ml/min;检测波长:300 nm;柱温:30℃,
进样量:10 μl。
表1 梯度洗脱程序
Tab 1 Gradient elution
时间,min
0~1
1~3
3~7
7~9
9~13
A,%
2
2→7
7→32
32→50
50
B,%
98
98→93
93→68
68→50
50
2.2 溶液的制备
2.2.1 混合对照品溶液 取紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异
嗪皮啶、槲皮素-3-鼠李糖苷对照品各适量,精密称定,加甲醇
制成每 1 ml分别含紫丁香苷 1 228.0 μg、绿原酸 1 148.0 μg、刺
五加苷 E 502.0 μg、异嗪皮啶 108.4 μg、槲皮素 -3-鼠李糖苷
114.4 μg的混合对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液 取刺五加果和根,分别粉碎后过80目筛,
再分别取 1.0 g,精密称定,置于 25 ml量瓶中,加甲醇定容,超
声(功率:500 W,频率:40 kHz)处理 30 min,滤过,取续滤液,
即得二者的供试品溶液。
2.2.3 空白对照溶液 以甲醇作空白对照溶液。
2.3 系统适用性试验
取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品溶液、空白对照溶液
各适量,按“2.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱,详见图1。
结果,理论板数以紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和
槲皮素-3-鼠李糖苷峰计分别为 11 201、9 309、10 105、9 418、
9 737,分离度均>1.5,各成分基线分离良好。
2.4 线性关系考察
分别精密量取“2.2.1”项下混合对照品溶液 0.2、0.5、0.8、
1.0、1.2、1.5 ml,分别置于10 ml量瓶中,加甲醇定容,制成系列
混合对照品溶液。精密量取上述系列混合对照品溶液各10 μl,
按“2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面积。以紫丁香苷、绿
原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶、槲皮素-3-鼠李糖苷质量浓度(x,
μg/ml)为横坐标、峰面积(y)为纵坐标进行线性回归,得上
述5种成分回归方程分别为y=0.000 8x-0.859 1(r=0.999 3)、
y=9.0×10-6x-0.036 11(r=0.999 3)、y=0.000 6x+0.015 87
(r=0.999 7)、y=8.2×10-5x-0.193 0(r=0.999 3)、y=3.6×
10-6x-0.007 9(r=0.999 8)。结果表明,紫丁香苷、绿原酸、刺
五加苷E、异嗪皮啶、槲皮素-3-鼠李糖苷检测质量浓度线性范
围分别为24.56~184.2、18.454~138.405、8.416~63.12、3.286~
24.645、2.522~18.915 μg/ml。
2.5 精密度试验
取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量,按“2.1”项下色谱条
件连续进样测定 6次,计算日内RSD;连续进样测定 3 d,计算
日间RSD。结果,紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和
槲皮素-3-鼠李糖苷峰面积的日内RSD分别为0.38%、0.33%、
0.27%、0.33%、0.31%(n=6),日间 RSD 分别为 0.35%、
0.26%、0.25%、0.24%、0.21%(n=6),表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
取“2.2.2”项下供试品溶液(批号:141001、141101)适量,
分别于室温下放置 0、1、3、6、12 h时进样测定,记录峰面积。
结果,刺五加果中紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和
槲皮素 -3-鼠李糖苷峰面积的 RSD分别为 0.30%、0.32%、
0.31%、0.37%、0.38%(n=5),刺五加根中紫丁香苷、绿原酸、
刺五加苷E和异嗪皮啶峰面积的RSD分别为 0.30%、0.29%、
0.36%和0.31%(n=5),表明供试品溶液在12 h内基本稳定。
2.7 重复性试验
精密称取同一批样品(批号:141001、141101)适量,按
100
80
60
40
20
mA
U
0 2 4 6 8 10 12
t,min
A
100
80
60
40
20
mA
U
0 2 4 6 8 10 12
t,min
B
1
2
3 4 5
100
80
60
40
20
mA
U
0 2 4 6 8 10 12
t,min
C
1
2
3 4 5
100
80
60
40
20
mA
U
0 2 4 6 8 10 12
t,min
D
2
图1 高效液相色谱图
A.空白对照;B.混合对照品;C.刺五加果供试品;D刺五加根供试品;1.
紫丁香苷;2.绿原酸;3.刺五加苷E;4.异嗪皮啶;5.槲皮素-3-鼠李糖苷
Fig 1 HPLC chromatograms
A.blank solution;B.mixed reference substance;C.test sample of fruit of
A. senticosus;D.test sample of root of A. senticosus;1.syringin;2.chloro-
genic acid;3.eleutheroside E;4.isofraxidin;5.quercetin-3-rhamnoside
1 3 4
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China Pharmacy 2016 Vol. 27 No. 12 中国药房 2016年第27卷第12期
“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,共6份,再按“2.1”项下色谱
条件进样测定,记录峰面积并计算含量。结果,刺五加果中紫
丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷的
含量分别为 2.519、2.331、1.342、0.378和 0.260 mg/g,RSD分别
为 0.37%、0.42%、0.49%、0.51%和 0.56%(n=6);刺五加根中
紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷 E和异嗪皮啶的含量分别为
2.158、3.922、1.354和 0.161 mg/g,RSD分别为 0.39%、0.46%、
0.41%和0.51%(n=6),表明本方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
取已知含量样品适量,共 6份,分别加入一定质量的紫丁
香苷、绿原酸、刺五加苷E、异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷对照
品,按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,再按“2.1”项下色谱条
件进样测定并计算加样回收率,结果见表2、表3。
表2 刺五加果的加样回收率试验结果(n=6)
Tab 2 Results of recovery test for fruit of A. senticosus(n=6)
待测
成分
紫丁香苷
绿原酸
刺五加苷E
异嗪皮啶
槲皮素-3-鼠李糖苷
样品含量,
mg
0.629 2
0.629 2
0.629 2
0.629 2
0.629 2
0.629 2
0.582 2
0.582 2
0.582 2
0.582 2
0.582 2
0.582 2
0.333 0
0.333 0
0.333 0
0.333 0
0.333 0
0.333 0
0.094 5
0.094 5
0.094 5
0.094 5
0.094 5
0.094 5
0.066 5
0.066 5
0.066 5
0.066 5
0.066 5
0.066 5
加入量,
mg
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.054 2
0.054 2
0.054 2
0.054 2
0.054 2
0.054 2
0.057 2
0.057 2
0.057 2
0.057 2
0.057 2
0.057 2
测得量,
mg
1.240 0
1.246 3
1.243 0
1.237 0
1.242 0
1.240 0
1.156 0
1.155 0
1.152 0
1.150 0
1.158 0
1.154 0
0.585 0
0.584 0
0.583 5
0.582 5
0.582 7
0.582 0
0.149 0
0.148 6
0.148 9
0.149 1
0.148 6
0.148 6
0.123 8
0.123 6
0.124 3
0.123 6
0.123 8
0.123 5
加样回收
率,%
99.51
100.50
100.10
99.14
99.82
99.61
100.12
99.91
99.44
99.03
100.45
99.73
100.44
100.00
99.80
99.43
99.53
99.22
100.60
99.81
100.40
100.80
99.91
99.80
100.23
99.84
101.10
99.82
100.20
99.76
平均加样回
收率,%
99.78
99.78
99.74
100.20
100.10
RSD,

0.48
0.50
0.44
0.44
0.51
2.9 样品含量测定
取各批样品适量,分别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶
液,再按“2.1”项下色谱条件进样测定并计算含量,结果见表4。
3 讨论
本试验参考了文献报道的紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E、
异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷含量测定时的检测波长,即
210、240、265、300、340 nm。结果显示,在210~265 nm波长范
围内异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷由于紫外吸收相应较低,
检测限较高,且基线不平;在 340~360 nm波长范围内刺五加
苷E的检测限较高;而在300 nm波长下各成分基线稳定,检测
限均能满足含量测定的要求,且各峰的峰形好,理论板数较
高。因此,以300 nm作为检测波长。
表3 刺五加根的加样回收率试验结果(n=6)
Tab 3 Results of recovery test for root of A. senticosus(n=6)
待测
成分
紫丁香苷
绿原酸
刺五加苷E
异嗪皮啶
样品含
量,mg
0.546 2
0.546 2
0.546 2
0.546 2
0.546 2
0.546 2
0.982 0
0.982 0
0.982 0
0.982 0
0.982 0
0.982 0
0.336 7
0.336 7
0.336 7
0.336 7
0.336 7
0.336 7
0.041 7
0.041 7
0.041 7
0.041 7
0.041 7
0.041 7
加入量,
mg
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.614 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.574 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.251 0
0.054 2
0.054 2
0.054 2
0.054 2
0.054 2
0.054 2
测得量,
mg
1.157 0
1.167 0
1.160 0
1.155 0
1.157 0
1.156 0
1.562 0
1.561 0
1.554 0
1.562 0
1.562 0
1.561 0
0.590 5
0.587 7
0.592 2
0.591 2
0.591 5
0.590 7
0.095 5
0.095 5
0.096 1
0.095 5
0.095 5
0.095 5
加样回收
率,%
99.50
101.20
100.10
99.21
99.60
99.45
101.10
100.90
99.81
101.20
101.20
100.90
101.10
100.00
101.80
101.40
101.50
101.20
99.23
99.25
100.40
99.22
99.32
99.31
平均加样回
收率,%
99.85
100.8
101.1
99.46
RSD,

0.73
0.52
0.62
0.47
表4 样品含量测定结果(n=3,mg/g)
Tab 4 Results of content determination of samples(n=3,
mg/g)
待测
样品
刺五加果
刺五加根
样品
批号
141001
141002
141003
141101
141102
141103
紫丁
香苷
2.517
2.514
2.527
2.185
2.188
2.181
绿原

2.329
2.314
2.311
3.928
3.920
3.925
刺五加
苷E
1.332
1.330
1.345
1.347
1.351
1.342
异嗪
皮啶
0.378
0.381
0.374
0.167
0.158
0.163
槲皮素-3-鼠
李糖苷
0.266
0.273
0.262
未检出
未检出
未检出
本试验首先采用了Waters ACQUITY UPLC BEH Amide
(150 mm×2.1 mm,1.7 μm)作为分离色谱柱,发现紫丁香苷在
色谱柱上几乎不保留,与鞣质等极性较大的成分不能实现有
效分离;后采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm×2.1
mm,1.7 μm)作为分离色谱柱,发现紫丁香苷在色谱柱上保留
时间延长,与其他成分实现了有效分离。所以,最后采用后者
作为本试验的分离色谱柱。
本试验分别考察了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.3%磷酸等流
动相体系进行洗脱,结果发现样品中刺五加苷E与其他成分不
能得到有效分离。而在采用乙腈-0.3%磷酸作为流动相体系
进行洗脱时,峰形好且柱效高,通过优化二者比例确定了最佳
的梯度洗脱条件。
本试验首次对刺五加果和根中的 5种成分进行了含量测
定,结果表明,长白山区野生刺五加果中紫丁香苷、绿原酸、刺
五加苷E、异嗪皮啶和槲皮素-3-鼠李糖苷的含量均较高,与刺
五加根相比前4种成分中仅绿原酸的含量较低,刺五加苷E的
含量相当,异嗪皮啶的含量为刺五加根中含量的2倍;另外,刺
五加根中未检出槲皮素-3-鼠李糖苷。结果提示,在用药时可
考虑将刺五加果纳入刺五加药材中,不仅可扩大药源,同时也
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中国药房 2016年第27卷第12期 China Pharmacy 2016 Vol. 27 No. 12
提高了刺五加果的利用率。
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(收稿日期:2015-11-05 修回日期:2015-12-07)
(编辑:张 静)*药师。研究方向:临床药学。电话:0571-56005600
盐酸左氧氟沙星与卡络磺钠在 0.9%氯化钠注射液中的稳定性
考察
魏秀美*(杭州市第一人民医院,杭州 310000)
中图分类号 R917;R969.3 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2016)12-1671-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.12.29
摘 要 目的:探讨盐酸左氧氟沙星与卡络磺钠在0.9%氯化钠注射液中混合的稳定性,以期为二者的临床配伍使用提供一定的
参考。方法:采用高效液相色谱法同时测定。色谱柱为Phenomenex Gemini C18,流动相A为乙腈、流动相B为0.01 mol/L磷酸二氢
铵溶液(用磷酸调pH至3.0)(采用梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为295 nm(盐酸左氧氟沙星)、364 nm(卡络磺钠),柱温
为35℃,进样量为20 μl。考察二者在0.9%氯化钠注射液中混合后的含量、外观和溶液pH值的变化。结果:盐酸左氧氟沙星、卡
络磺钠检测质量浓度线性范围分别为7.03~80.06、1.70~34.04 μg/ml(r=0.999 5、0.999 8);精密度、重复性试验的RSD<2.0%;加
样回收率分别为 98.75%~100.63%、98.00%~100.83%,RSD分别为 0.65%、0.99%(n=9);二者在 0.9%氯化钠注射液中混合后
常温放置6 h内,含量未见明显降低,混合溶液外观和pH值未见明显变化。结论:盐酸左氧氟沙星与卡络磺钠在0.9%氯化钠注射
液中混合后,室温放置6 h内较稳定,临床可协同配伍使用。
关键词 高效液相色谱法;盐酸左氧氟沙星;卡络磺钠;0.9%氯化钠注射液;稳定性
Stability Analysis of Levofloxacin Hydrochloride and Carbazochrome Sodium Sulfonate in 0.9% Sodium
Chloride Injection
WEI Xiumei(The First People’s Hospital of Hangzhou,Hangzhou 310000,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To explore the stability of levofloxacin hydrochloride and carbazochrome sodium sulfonate in 0.9% So-
dium chloride injection,and provide reference for their compatible use in clinic. METHODS:HPLC was performed on the column
of Phenomenex Gemini C18 with mobile phase A of acetonitrile and B of 0.01 mol/L Ammonium biphosphate solution(adjusted to
pH 3.0 with phosphoric acid)(gradient elution)at a flow rate of 1.0 ml/min,the detection wavelength was 295 nm for levofloxa-
cin hydrochloride and 364 nm for carbazochrome sodium sulfonate,temperature was 30 ℃,and the injection volume was 20 μl.
The changes of contents,appearance and pH value of the solution in the mixture were investigated. RESULTS:The linear range
was 7.03-80.06 μg/mL for levofloxacin hydrochloride(r=0.999 5)and 1.70-34.04 μg/mL for carbazochrome sodium sulfonate(r=
0.999 8);RSDs of precision and reproducibility tests were no more than 2.0%;recoveries were 98.75%-100.63% and 98.00%-100.83%,
and RSDs were 0.65% and 0.99%(n=9),respectively. In normal temperature,the contents of levofloxacin hydrochloride and car-
bazochrome sodium sulfonate after mixing with 0.9% Sodium chloride injection within 6 h showed no significant decrease,and the
appearance and pH value showed no obvious changes. CONCLUSIONS:The mixing of levofloxacin hydrochloride and carbazo-
chrome sodium sulfonate with 0.9% Sodium chloride injection in room temperature is stable within 6 h,they can compatibly use
synergistically in clinic.
KEYWORDS HPLC;Levofloxacin hydrochloride;Carbazochrome sodium sulfonate;0.9% Sodium chloride injection;Stability
􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘􀤘
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