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中药成方复方香艾液抑菌作用的实验研究



全 文 :文章编号:1006-3110(2012)09-1296-03 ·论 著·
中药成方复方香艾液抑菌作用的实验研究
胡 捷 , 肖创清 ,杨常成 ,杨 东 ,何 龙 ,许江丽
  摘要: 目的 观察中药成方复方香艾液的抑菌作用及最低抑菌浓度。  方法 采用平皿法和试管法。以不同质
量浓度药物作用于培养的大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌 , 观察抑菌效果。  结果 复方香艾液能有效抑制实
验细菌生长 ,复方香艾液对大肠杆菌 MIC 为 31.25 mg/ ml(原液稀释 8倍),对金黄色葡萄球菌 MIC 为 7.8 mg/ ml(原液稀
释 32 倍), 对白色念珠菌 MIC 为 62.5 mg/ ml(原液稀释 4倍)。  结论 实验研究证实复方香艾液具有明显的抑菌作用 ,
能有效抑制空气中常见致病菌的生长。
关键词: 复方香艾液;抑菌作用;最低抑菌浓度
中图分类号:R285.5     文献标识码:A
Experimental Study on the Bacteriostasis of Chinese Patent Medicine Compound Xiangai aerosol HU Jie , XIAO Chuang -
qing , Y ANG Chang- cheng , et al.(The Second Af filiated Hospital of Hunan Normal University , PLA 163 Hospital ,
Changsha 410003 , Hunan , China)
Abstract: Objective  To investig ate the bacterio stasis and minimum inhibitory concentration (MIC)of the Chinese
patent medicine Compound Xiangai aerosol. Methods  The bacteriostasis o f Compound Xiangai aerosol at various concentra-
tio ns w as observed in Escherichia coli , Staphylococcus aureus and Candida albicans by the Petri dish and test tube method. 
Results  Compound Xiangai aerosol could effectively inhibit the g row th of the bacteria.The MIC of the aerosol diluted by 8
times in Escherichia coli was 31.25 mg/ml.The MIC of the aerosol diluted by 32 times in S taphyloccus aureus w as 7.8 mg/ ml.
The MIC of the aerosol diluted by 4 times in Candida albicans was 62.5 mg/ml. Conclusions  Compound Xiangai aerosol has
obvious bacteriostasis.It can effectively inhibit the grow th o f the common pathogenic bacteria in the air.
Key words: Compound Xiangai aerosol;Bacteriostasis;MIC
  中药复方香艾液是本院正在研究开发的纯天然
植物空气消毒剂 , 以中药公丁香 、艾叶等中药提取物
为主要原料研制而成 ,主要用于医院病房 、换药室 、流
动采血车及野战帐篷 、运兵车 、医疗方舱等封闭式空间
消毒用药。在前期研究中已证实 ,该药能有效防治特
定空间空气中细菌污染[ 1] ,为了探讨本制剂的抑菌作
用及最低抑菌质量浓度 ,遂进行了本实验 , 现将结果
报告如下 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品和试剂  复方香艾液 ,由本院制剂室提
供 , 主要含艾叶 、苍术 、公丁香 、贯众 、石菖蒲等中药
基金项目:湖南省教育厅科研项目(10C0995)
作者单位:湖南师范大学第二附属医院 , 中国人民解放军第 163医院
(湖南 长沙 410003)
作者简介:胡捷(1962-),男 ,湖南长沙人 ,主任医师 , 主要从事中西医
结合基础和临床研究工作 , E-mail:hjie163@sina.com。
有效成分提取物 , 含生药成份 5 g/10 ml。
1.1.2 实验菌种 大肠杆菌(ATCC 8739)、金黄色葡
萄球菌(ATCC 6538)、白色念珠菌(ATCC 10231),均
由本院微生物学实验室提供。
1.1.3 仪器及培养基  微量多点接种仪 ,普通恒温
箱 ,血培养平皿 ,无菌试管 ,Mueller.Hinton(M .H)肉
汤 ,沙堡液体培养基[ 2] 。
1.2 方法
1.2.1  最小抑菌浓度测定  参照《消毒技术规范
(2002版)》[ 3]最小抑菌浓度测定试验进行 ,观察含药
试管及血培养平皿中菌落生长情况 。以无细菌生长试
管内药物的最小浓度为此药对该菌株的最小抑菌浓度
即 MIC 。
1.2.2 菌液制备 将大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 2菌
种分别接种于牛肉汤液体培养基内 ,白色念珠菌接种
于沙堡液体培养基内 ,在 37 ℃恒温箱中培养 16 ~ 18 h
后 , 将培养菌液用生理盐水校正成 0.5麦氏比浊标准
1296 实用预防医学 2012年 9月 第 19卷 第 9期 Practical Preventive Medicine , Sep.2012 , Vol 19 , No.9
(含菌量约为 1 ~ 2×108cfu/ml)备用 。
1.2.3 含药培养基制备及培养方法 按常量倍比稀
释法测定复方香艾液的最低抑菌浓度。取 30支小试
管分 3排排列于试管架上 , 每组 10 支 ,分为 A 、B 、C
组 ,各组分别编号为 1 ~ 10号 。A 组用于培养金黄色
葡萄球菌 ,B组用于培养大肠杆菌 ,用 M .H 肉汤制成
培养基 ,每支小试管用移液管加 2.5 ml M.H 肉汤液
体培养基;C 组用于培养白色念珠菌 ,用沙堡液体培养
基 ,方法同上。用移液管吸取 2.5 m l复方香艾液放入
A 、B 、C 各排第 1管中 , 反复摇匀;接着从第 1管中吸
取2.5 ml混合液放入第 2管中 , 然后从第 2管中吸取
2.5 ml混合液放入第 3管 , 以此类推 , 直到第 8 管 ,
第 8管吸取 2.5 ml液体丢弃 ,使管内液体保持 2.5
ml ,反复摇匀 。第 9号 、第10号试管中不加药液 ,作为
阳性对照和阴性对照 。各组 1 ~ 8号管均含 2.5 m l倍
比稀释的药液 ,药液浓度分别为 1∶1 、1∶2 、1∶4 、1∶8 、1∶
16 、1∶32 、1∶64 、1∶128。用接种仪向第 1号至 9号试管
中各加 0.5麦氏比浊菌液 10 μl , 10号管作为阴性对
照组不加菌液。将各组分别加好菌液后 , 放入 37 ℃
恒温培养箱中培养 24 h 后取出 , 用接种环从每只试
管中取一环细菌 ,金黄色葡萄球菌和大肠杆菌接种于
含血琼脂培养平皿内 , 白色念珠菌接种于沙堡琼脂培
养平皿内 ,再放入 37 ℃培养箱中培养 24 h 后取出观
察结果 , 有细菌生长记为“+” ,无菌生长为“ -” ,本实
验连续进行三次 ,取三组最高浓度比计算 MIC 。
1.2.4 复方香艾液稳定性试验 取复方香艾液 3批
(110115 、110312 、110622)分别放置 90 、180 d ,于放置
前后分别观察药液有无颜色变化 、有无沉淀物 、悬浮
物 、pH 值变化等 ,并按微生物测定法检测药液抑菌效
果是否稳定[ 4] 。
1.3 统计学分析 各批次药液不同时间抑菌效果进
行统计学分析 ,各组药液计数资料以药物稀释倍率表
示 ,各组样本间比较 ,采用方差分析 、F 检验 ,所有数据
用 Excel2003进行统计分析[ 5] , P <0.05 为差异有统
计学意义 。
2 结果
2.1 抑菌实验 结果显示 ,复方香艾液稀释 8倍后对
大肠杆菌有抑菌效果 , M IC为 62.5 mg/ml;药液稀释
32倍后对金黄色葡萄球菌有抑菌效果 , M IC 为 7.8
mg/ml;稀释 4倍后对白色念珠菌有抑菌效果 ,M IC为
62.5 mg/ml ,见表 1 。
表 1 复方香艾液消毒剂抑菌情况表
香艾液稀释倍数
1 2 4 8 16 32 64 128
MIC(mg/ml)
大肠杆菌 - - - - + + + + 31.2
金黄色葡萄球菌 - - - - - - + + 7.8
白色念珠菌 - - - + + + + + 62.5
2.2 稳定性试验 3批样品外观颜色无变化 ,未见明
显悬浮物 ,110312批次在第 180 d观察有少许沉淀物 ,
摇匀后沉淀物能重新溶解 ,室温 28 ℃下测定 0 、90 、
180 d pH 值(校正用缓冲盐 pH 值为4.003和 6.86 ,斜
率:93%)分别为 4.22 、4.24 、4.24(110115), 4.23 、
4.24 、4.23(110312),4.23 、4.23 、4.24(110622)。将室
温下静置 90 、180 d的 3份样品 ,按微生物测定法测定
抑菌效果 ,按上法进行倍比稀释 ,测定其对大肠杆菌 ,
金黄色葡萄球菌 、白色念珠菌的抑菌效果 。同时取原
液 2.5 ml置入 M.H 肉汤中进行培养 ,观察有无细菌
生长 。检测结果表明 ,复方香艾液 90 、180 d后对大肠
杆菌 、金黄色葡萄球菌 、白色念球菌抑菌效果与放置前
基本一致 ,差异无统计学意义 ,结果见表 2 ~ 表 4。药
液培养无细菌生长。
表 2 复方香艾液(110115)静置药液抑菌效果表
90 d药液(稀释倍数)
1 2 4 8 16 32 64
MIC
(mg/ml)
180 d药液(稀释倍数)
1 2 4 8 16 32 64
M IC
(mg/ ml)
大肠杆菌 - - - - + + + 31.2 - - - - + + + 31.2
金黄色葡萄球菌 - - - - - + + 15.6 - - - - - + + 15.6
白色念珠菌 - - - + + + + 62.5 - - - + + + + 62.5
  与新配药液对照 ,静置 90 d 和 180 d 药液抑菌效
果统计学分析 ,差异无统计学意义(P >0.05),证明该
药 90 d和 180 d稳定性良好 。
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表 3 复方香艾液(110312)静置药液抑菌效果表
90 d药液(稀释倍数)
1 2 4 8 16 32 64
MIC
(mg/ml)
180 d药液(稀释倍数)
1 2 4 8 16 32 64
M IC
(mg/ ml)
大肠杆菌 - - - - + + + 31.2 - - - + + + + 62.5
金黄色葡萄球菌 - - - - - + + 15.6 - - - - + + + 31.2
白色念珠菌 - - - + + + + 62.5 - - - + + + + 62.5
表 4 复方香艾液(110622)静置药液抑菌效果表
90 d药液(稀释倍数)
1 2 4 8 16 32 64
MIC
(mg/ml)
180 d药液(稀释倍数)
1 2 4 8 16 32 64
M IC
(mg/ ml)
大肠杆菌 - - - - + + + 31.2 - - - - + + + 31.2
金黄色葡萄球菌 - - - - - + + 15.6 - - - - + + + 31.2
白色念珠菌 - - - + + + + 62.5 - - - + + + + 62.5
3 讨论
医院内空气质量与院内感染有密切关系 ,有研究
证实 ,院内感染仍以上 、下呼吸道感染为主[ 6~ 8] ,手术
室 、换药室 、介入治疗室等院内空间的空气质量 ,对预
防术后切口感染 ,降低院内感染至关重要 。医院内常
用消毒用品大多为化学合成制剂 ,虽然效果比较肯定 ,
但由于异味大 、对皮肤刺激性强 、稳定性差[ 9 , 10] ;消毒
后异味不能很快消除 ,给人们带来不愉快的刺激反应 ,
长期使用还会造成人体蓄积中毒。因此从天然植物中
寻找气味芳香无毒 ,有杀菌 、抑菌作用的药物已成为一
个重要的课题 。复方香艾液是在传统中医理论指导
下 ,结合现代医学有关知识 ,优选具有清热解毒 ,芳香
避秽的中药艾叶 、苍术 、公丁香 、贯众 、石菖蒲等采用现
代制剂工艺提取药物有效成分 ,根据实验要求配制成
30%(含生药 5 g/10 ml)溶液。有研究证实 ,上述中药
中均含有杀灭细菌的有效成分 ,已有多项研究证实含
上述药物的中药制剂能有效杀菌[ 11 ~ 13] 。为观察复方
香艾液对常见细菌的抑菌效果 ,本文选用空气中有代
表性的革兰阳性球菌金黄色葡萄球菌 、革兰阴性杆菌
大肠杆菌 、真菌白色念珠菌进行了此实验 ,研究证实复
方香艾液能有效抑制此三种细菌生长 ,其最低有效抑
菌浓度分别为大肠杆菌 M IC为 31.25 mg/ml ,金黄色
葡萄球菌 M IC 为7.8 mg/ml ,白色念珠菌 MIC为 62.5
mg/ml ,说明复方香艾液具有良好的抑菌效果 ,同时实
验研究证实该药具有良好的稳定性 ,能长期保存而抑
菌效果不受影响 。此外天然植物挥发油特有的芳香还
能缓解人们紧张的情绪 ,同时能有效避免化学消毒剂
对人体感官的刺激作用 ,因此具有较好的推广应用价
值 。
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(收稿日期:2012-05-08)
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