全 文 ：酸枣根中鞣质含量测定及提取工艺研究
李松涛，翟树林，车 勇 (山东医药技师学院，山东泰安 271016)
摘要 ［目的］优化酸枣根鞣质的提取工艺，建立稳定的酸枣根中鞣质的含量测定方法。［方法］用干酪素法测定总鞣质的含量，并以提
取物中鞣质含量为评价指标，以丙酮浓度、提取时间、料液比及提取次数为考察因素，采用正交设计法筛选酸枣根的提取工艺条件。［结
果］提取次数为主要影响因素;最佳提取条件为:超声提取的丙酮浓度为 70%，料液比为 1∶ 20(W/V，g /ml，下同)，提取时间为 30 min，提
取 3次;在此条件下，酸枣根中鞣质的含量为 6． 82%。［结论］所优选的鞣质提取工艺合理，操作简便可行。
关键词 酸枣根鞣质;干酪素法;含量测定;正交设计;提取工艺
中图分类号 S665． 1 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)33 －16107 －02
Determination of the Tannins in Ziziphus jujuba Roots and Its Extraction Technology
LI Song-tao et al (Shandong Medicine Technician College，Taian，Shandong 271016)
Abstract ［Objective］To optimize the extraction technology of tannins from Ziziphus jujuba roots，and to establish stable determination meth-
od of tannins content in Z． jujuba roots． ［Method］Content of total tannins was detected by casein method． With tannins content as the evalua-
tion index，the extraction time，solid-liquid ratio，extraction times，and acetone concentration were taken as the investigation factors． Extrac-
tion technology conditions were optimized by orthogonal design． ［Result］Results showed that extraction times was the major influencing fac-
tor． The optimal extraction condition was as follows:70% acetone concentration，1∶ 20(W/V，g /ml)solid-liquid ratio，30 min extraction time
and 3 extraction times． Under this condition，the tannins content in Z． jujuba roots reached 6． 82% ． ［Conclusion］The optimized extraction
technology was reasonable，simple and feasible．
Key words Tannins in Z． jujuba roots;Casein method;Content determination;Orthogonal design;Extraction technology
作者简介 李松涛(1962 －) ，女，山东威海人，高级讲师，从事中药炮制
和质量方面的教学与研究，E-mail:syxlst@ 163． com。
收稿日期 2012-07-06
鼠李科(Rhamnaceae)枣属植物酸枣(Ziziphus jujuba spi-
nosa(Bunge)Hu ex H． F． Chow)为落叶灌木或小乔木，生长适
应性很强，耐碱，耐旱，耐寒。其根、叶和肉在民间亦多药用。
酸枣仁(SEMEN ZIZIPHI SPINOSAE)是医学常用的宁心安神
药。酸枣根“味涩，性温”，“有明显安神作用，兼有止痛利尿
功效”;酸枣皮主治“涩精止血，治淋浊，白带，滑精，出血。”;
“活血止血、消炎生肌。主治便血、烫火伤，月经不调”［1］，民
间常用于治疗失眠和烧烫伤等多种疾病。现代药理研究发
现，酸枣根煎剂的镇静催眠、镇痛和抗惊厥等药理作用强于
同等剂量的酸枣仁煎剂［2］，并且具有明显加强心肌收缩力、
增加心输出量和提高机体耐缺氧能力的作用［3］。在对酸枣
根的化学成分进行研究时，发现其含有较多鞣质成分。近年
来，随着鞣质化学研究的深入，对鞣质的生物活性及开发利
用的研究也日益深入。研究发现，鞣质具有多方面生物活
性，主要表现为抗肿瘤、抗脂质过氧化、清除自由基、抗病毒、
抗过敏、疱疹以及止血、止泻和治烧伤等［4］。
目前，国内对鞣质提取的研究报道较多，但由于鞣质遇
酸、碱及在高温条件下不稳定，文献中对其提取方法的报道
分歧也较大。笔者采取紫外可见分光光度法测定提取液中
总鞣质含量，并以总鞣质含量为指标，运用均匀设计方案考
察影响鞣质提取的因素，优化各种提取条件，以期为酸枣的
进一步开发利用提供依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 研究对象。酸枣根，经鉴定为鼠李科(Rhamnaceae)
枣属植物酸枣(Ziziphus jujuba spinosa(Bunge)Hu ex H． F．
Chow)的新鲜根。
1． 1． 2 主要仪器。KUDOSSK5200H 型超声波清洗器，购自
上海科导公司;RE252A旋转蒸发器，购自上海亚荣生化仪器
厂;Sartorius BP211D电子天平，购自深圳怡华新电子有限公
司;HITACHIUV2800紫外 －可见分光光度计，购自北京联合
科仪科技有限公司。
1． 1． 3 主要试剂。没食子酸对照品，购自中国药品生物制
品检定所，批号:110831-200302;干酪素，购自北京奥伯星生
物技术有限责任公司，批号:20081125;钨酸钠、钼酸钠、硫酸
锂、磷酸、盐酸、溴等均为分析纯，市售;试验用水为蒸馏水，
自制。
1． 2 方法
1． 2． 1 对照品溶液的制备。按《中国药典》(2010 版一部附
录 XB)鞣质含量测定法制备［5］，使没食子酸对照品溶液浓度
为 0． 05 mg /ml。
1． 2． 2 线性关系的考察［5］。分别取 0． 5、1． 0、2． 0、3． 0、4． 0、
5． 0、6． 0和 7． 0 ml对照品溶液，至于 25 ml容量瓶中，用蒸馏
水溶解，并稀释至刻度，照紫外 －分光光度法在 760 nm波长
处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，进行线性
回归，计算线性回归方程。
1． 2． 3 样品溶液的制备。称取 1． 000 g 酸枣根粉末(过 40
目筛) ，置于 100 ml具塞锥形瓶中，按料液比 1∶ 20 加入浓度
70%的丙酮溶剂，超声提取30 min，提取3次，抽滤，减压挥去
溶剂，然后用蒸馏水溶解，移至 100 ml容量瓶中，加蒸馏水至
刻度，精密量取 5． 0 ml，用水稀释定容至 50 ml，摇匀，即得。
1． 2． 4 鞣质的含量测定［6］。按药典法操作测定，可得到鞣
质含量 =总多酚量 －不被吸附的多酚量。有文献报道干酪
素含有干扰试验的酚类物质，影响“不被吸附多酚”的含量测
定，试验对干酪素中的多酚成分含量进行了考察。称取干酪
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(33):16107 － 16108，16418 责任编辑 石金友 责任校对 卢瑶
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.33.036
素 0． 4、0． 6、0． 8、1． 0和 1． 2 g，置于 100 ml 锥形瓶内，每份样
品中加入 25 ml蒸馏水，置 30 ℃水浴中保温 1 h，时时振摇，
取出放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液 2 ml，置
25 ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法测定吸
光度。
1． 2． 5 提取溶剂的选择。精密称取 1． 000 g酸枣根粗粉，置
于 100 ml具塞锥形瓶中瓶中，分别加入 20 ml 蒸馏水、浓度
95%乙醇和浓度 50%丙酮为提取溶剂，超声提取 20 min，抽
滤，挥干溶剂备用。按“1． 2． 3”项下方法测定总鞣质含量，选
择最佳提取溶剂。
1． 2． 6 鞣质提取工艺条件研究［4］。鞣质的提取率受到溶剂
种类、溶剂浓度、溶剂用量、提取时间和提取次数等多因素交
叉影响，目前采用丙酮作提取溶剂较为理想。试验以总鞣质
含量为评价指标，考察丙酮的浓度、提取时间、料液比和提取
次数 4种因素对提取率的影响，应用 L9(3
4)正交设计研究影
响鞣质的提取工艺条件(表 1)。
表 1 正交试验因素及水平设计
水平
A丙酮浓
度∥%
B超声时
间∥min
C料液比
g /ml
D提取次数
1 50 10 1∶ 10 1
2 60 20 1∶ 20 2
3 70 30 1∶ 30 3
2 结果与分析
2． 1 线性关系的考察 计算得线性回归方程为:Y =
0． 100 8X +0． 001 4，R =0． 999 7。试验结果表明，没食子酸浓
度在 1． 0 ～14． 0 mg /L范围内与吸光度的线性关系良好。
2． 2 干酪素对不被吸附多酚含量测定的影响 图 1 表明，
干酪素水浸出液中含有影响试验的多酚成分。在空白试验
中，随着干酪素用量的增加吸光度也增加;故在“不被吸附多
酚”的含量测定中，应采用干酪素作空白试验，否则“不被吸
附多酚”数值会偏高，使总鞣质含量结果偏低。
图 1 干酪素对不被吸附多酚含量测定的影响
2． 3 提取溶剂的选择 图 2表明，3种提取溶剂提取的总酚
含量的大小顺序为:浓度 50%丙酮 ＞水 ＞浓度 95%乙醇，以
浓度 50%丙酮的提取效果最好。因此，试验选择浓度 50%
丙酮为提取溶剂。
2． 4 正交试验 经方差分析可知，提取次数及料液比对超
声提取工艺影响非常明显，提取时间对超声提取工艺影响略
微明显，而丙酮溶液的浓度对提取效率几乎无影响。对表 2
注:1为水;2为浓度 95%乙醇;3为浓度 50%丙酮。
图 2 不同溶剂的提取效果比较
数据进行分析处理可知，影响超声法的因素大小顺序为:D ＞
C ＞ B ＞ A，且超声法的最佳工艺条件为 A3B3C2D3，即料液比
为 1∶ 20，丙酮浓度为 70%，提取 3 次，每次 30 min;在此条件
下，酸枣根中鞣质的含量为 6． 82%。
表 2 正交试验结果
序号
因素
A B C D
酸枣根中鞣
质含量∥%
1 1 1 1 1 3． 63
2 1 2 2 2 5． 49
3 1 3 3 3 5． 87
4 2 1 2 3 5． 69
5 2 2 3 1 4． 46
6 2 3 1 2 4． 75
7 3 1 3 2 5． 21
8 3 2 1 3 5． 02
9 3 3 2 1 4． 83
k1 4． 997 4． 843 4． 467 4． 307
k2 4． 967 4． 990 5． 337 5． 150
k3 5． 020 5． 150 5． 180 5． 527
R 0． 053 0． 307 0． 870 1． 220
3 结论与讨论
试验采用超声法提取酸枣根中的鞣质，用干酪素法测定
总鞣质的含量，并以提取物中鞣质含量为评价指标，采用正
交设计法筛选酸枣根的提取工艺条件。试验结果表明，提取
的最佳工艺条件为:A3B3C2D3，即料液比为 1∶ 20，丙酮浓度为
70%，提取3次，每次30 min;在此条件下，酸枣根中鞣质的含
量为 6． 82%。
试验结果表明，在前期采用的鞣质吸附剂 －干酪素中含
有干扰试验的酚类物质，明显影响“不被吸附多酚”的含量测
定，而药典规定方法中，未进行干酪素空白对照试验，未扣除
干酪素空白试验值，故样品鞣质含量测定结果偏低，不能准
确反映鞣质实际含量。鞣质含量测定法在“不被吸附的多
酚”项增添干酪素的空白试验，计算时应予扣除，或应规定所
用干酪素中的酚类物质的限量。
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(下转第 16418页)
80161 安徽农业科学 2012 年
检查、奖惩管理办法;制定优惠政策，充分调动广大农民的积
极性。本着“谁投资谁受益”的原则，鼓励农民个人投资进行
土地整理。
3． 2 采取有力措施，改善农业生态环境和生产条件 严重
的水土流失威胁着全国的农业生产，这也是土地整理容易造
成的重要问题之一。因此，要从长远的角度来看待水土保持
的功效。要投入足够的人力、物力和财力去实施土地整理后
水土保持工程达到改善农业生态环境和生产条件，提高农业
生产能力的目的。通过土地整理可改善生态环境，减少灾情损
失，通过山、水、田、林、路综合整治，可避免耕地水土流失，促进
生态环境平衡，增加农业生态系统的调控能力［20］。在欧洲一
些国家，土地整理政策是根据空间规划制定的，并结合改善自
然条件和景观，要求土地整理项目进行环境影响评估［21 －22］，在
我国农村土地整理中，这些措施是非常值得借鉴的。
3． 3 增强后续管理，加大科技投入 首先，要提高管理者在
思想上和对项目可行性方面的认识。提高土地整理的科技
投入，成立工作组，深入第一线和农民一起针对于土地整理
的一些问题进行深入细致的讨论，掌握第一手资料，有针对
性的解决实际问题。另外还要加派技术人员深入田间地头
对农民进行科技培训和技术指导，让广大农民熟练的掌握各
种设施的使用与维护，让农民真正意义上了解土地整理能带
来的好处，让其彻底转变陈旧的耕种意识，能够真正理解土
地整理为他们带来的利益。在土地整理后还要加大后续的
资金与人力的投入，对整理后的土地进行有效管理和技术支
撑，保障耕地的可持续利用。土地整理是一个长期的人类活
动，只有在整理过程中不断的探索与研究，才能更好地发掘
土地潜力，达到最终的收效。
3． 4 土地整理过程中注重数量与质量并存 土地整理并不
是盲目的以增加耕地面积为目的的整理形式。在可以增加
耕地数量的同时，更注重提高整理区耕地的质量和品质。但
根据本地区的人口与社会经济水平，要使土地特别是耕地数
量达到怎样的规模，质量提高到怎样的水平才能满足本地区
可持续发展的需要，就应进行数量分析发展预测和综合体系
评价［23］。
4 建议及展望
依据我国国情，借鉴国外土地整理的成功经验，建议目
前我国的土地整理应该向目标综合化、类型多样化、投资多
元化、参与大众化的方向发展。我国土地整理应向可持续发
展方向迈进，充分遵守“提高耕地质量、注重整理后的技术和
资金投入、保护生态环境平衡”3 要素并重的理念，以促进土
地资源合理利用条件下生态文明建设及提高土地资源对可
持续发展的保障能力为根本目标，使经济建设和生态环境建
设在土地整理上达到统一和谐的发展目标，从生态的可持续
性、经济的有效性和社会的可承受性等方面实现整理后耕地
资源的可持续发展，维护国家及区域粮食安全，保障经济社
会的全面协调发展［24］。
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