全 文 ：松塔（Pinecone）系松科（Pinaceae）松属（Pinus）
植物的球果，别名松实、松元、松果、松球，其植物来
源有华山松、云南松、红松、油松及思茅松等〔1〕，松
塔提取物具有抗肿瘤、抗HIV、抗炎、抗菌、增强免
疫力等功效〔 2 〕，而分布在云南的云南松（Pinus
yunnanensis Faranch）资源十分广泛，其松塔主要被
当做燃料使用。
现代药理实验表明，原儿茶酸具有抑制黑色素
生成的作用〔3〕、对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护
作用〔4〕等多种药理活性。文献报道云南松松塔中含
有原儿茶酸〔5〕，且云南松分布广泛，因此选择松塔
为试材对云南松松塔中原儿茶酸的提取工艺进行
考察研究，以期为云南松松塔药材的开发利用及原
儿茶酸的来源提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象 云南松松塔样品于2012年8月采
集于云南省曲靖市麒麟区，标本由大理学院段宝忠
副教授鉴定，粉碎，过60目筛，置于阴暗处备用。
1.1.2 主要仪器 Agilent 1200型高效液相色谱仪
（美国Agilent公司）；AL104电子分析天平（梅特勒一
托利多仪器有限公司）；KQ5200DB型数控超声波清
洗器（昆山市超声仪有限公司）；旋转蒸发仪RE-
3000（上海亚荣生化仪器厂）。
1.1.3 主要试剂 原儿茶酸对照品（成都曼思特生
物科技有限公司，批号：MUST-11103006）；流动相
甲醇为色谱纯（Merck公司）；其余试剂均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 对照品溶液的配制 精密称取原儿茶酸对
照品4.957 mg，置于5 mL容量瓶中，加浓度为甲醇溶
云南松松塔中原儿茶酸提取工艺的研究
吴道勋1，2，刘 璐1，2，王 莹1，2，刘 熙1，2，张海珠1，2*
（1.大理学院药学与化学学院，云南大理 671000；
2.云南省昆虫生物医学研发重点实验室，云南大理 671000）
［摘要］目的：优化云南松松塔中原儿茶酸的提取工艺。方法：以不同溶剂对云南松松塔中原儿茶酸的提取效率为指标，用高效
液相色谱法进行含量测定，采用L9（34）正交设计试验以确定最佳提取工艺。结果：最佳提取工艺：以乙酸乙酯为提取溶剂，加入
0.1 mol/L的HCl 3 mL，料液比为1∶40（mg/mL），超声时间90 min，超声温度40 ℃。结论：优化后的提取工艺简单、稳定、提取率高。
［关键词］云南松；松塔；原儿茶酸；正交试验
［中图分类号］R284 ［文献标志码］A ［文章编号］1672-2345（2014）04-0004-03
Extraction Process of Protocatechuic Acid in the Pinecone of Pinus yunnanensis
WU Daoxun1，2，LIU Lu1，2，WANG Ying1，2，LIU Xi1，2，ZHANG Haizhu1，2*
（1.College of Pharmacy and Chemistry，Dali University，Dali，Yunnan 671000，China；
2.Yunnan Provincial Key Laboratory of Entomological Biopharmaceutical R&D, Dali, Yunnan 671000, China）
〔Abstract〕Objective：To optimize the extraction process of the pinecone of protocatechuic acid in Pinus yunnanensis. Methods：
Different solvents were used to extract protocatechuic acid in Pinus yunnanensis. Their extraction efficiency was taking as index；
content was determined by using HPLC chromatography. Finally，L9（34）orthogonal design experiment was used to determine the
optimum the extraction process. Results：The optimum extraction process：with ethyl acetate as the extraction solvent，0.1 mol/L HCl
3 mL was added into it. Material-liquid ratio was 1∶40（mg/mL）；ultrasonic time 90 min；ultrasonic temperature 40 ℃. Conclusion：
The Optimized extraction process is simple，stable and have high extraction rate.
〔Key words〕Pinus yunnanensis Faranch；pinecone；protocatechuic acid；orthogonal test
［DOI］10. 3969 / j. issn. 1672-2345. 2014. 04. 002
大理学院学报
JOURNALOFDALIUNIVERSITY
第13卷 第4期 2014年4月
Vol.13 No.4 Apr. 2014
4
2 云南松松塔中原儿茶酸的提取工艺研究
2.1 工艺筛选 以乙酸乙酯作为提取溶剂，采用
L9（34）正交试验设计，对料液比（A）、超声时间（B）、
超声温度（C）、HCl浓度（D）的不同水平进行考察，见
表2。称取松塔粉末9份（过60目筛，1.0 g），按L9（34）
实验安排。见表3。制备样品9份，过滤，减压浓缩，回
收乙酸乙酯，残渣用甲醇溶解，置于10 mL容量瓶
中，并稀释至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜过滤，进样
量10 μL，用高效液相色谱仪测定含量并进行方差
分析。见表4。
表2 因素水平表
解并稀释定容至刻度，摇匀，得浓度为0.995 mg/mL
的对照品储备液。
1.2.2 供试品溶液的制备 称取松塔粉末1.0 g置于
100 mL具塞锥形瓶中，加入0.1 mol/L的HCl 3 mL，20
mL乙酸乙酯，超声温度40 ℃，超声时间60 min，过
滤，减压浓缩，回收乙酸乙酯，残渣用甲醇溶解，置
于10 mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，备用。
1.2.3 色谱条件 Phenomenex Gemini C18（250×
4.60 mm，5 μm）色谱柱；甲醇-0.1%磷酸水溶液（11∶
89，V/V）为流动相；流速1 mL/min；柱温30 ℃；检测
波长298 nm，进样量10 μL。见图1。
1.2.4 标准曲线的绘制 分别精密量取对照品储
备液0.1，0.15，0.2，0.3，0.35，0.4 mL置于10 mL容量
瓶中，用甲醇稀释至刻度，得梯度对照品溶液，用高
效液相色谱仪测定其峰面积，进样量10 μL。以对照
品溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回
归计算，得到回归方程Y=1 110X-43.011，r=0.999 9。
测定结果显示，原儿茶酸在9.95～39.80 μg/mL范围
内线性关系良好。
1.2.5 方法学考察 精密度试验结果RSD为0.60%。
称取松塔粉末6份（过60目筛，1.0 g），按照
“1.2.2”项方法进行操作，得到重复性试验样品中
原儿茶酸的平均含量为131.93 μg/g，RSD为0.65%。
稳定性试验，每隔4 h测定样品液，连续考察
24 h，RSD为1.1%。
回收率试验显示，所测样品回收率平均值为
99.03%，RSD为0.6%。见表1。
方法学考察结果显示本测定方法精密度、重复
性、稳定性、回收率良好，样品液在24 h内基本稳定，
该方法适用于云南松松塔中原儿茶酸的提取及含
量测定。
表1 加样回收率实验结果
A B
注：A为云南松松塔样品色谱图；B为原儿茶酸对照品色谱图；
1为原儿茶酸。
图1 云南松松塔样品、原儿茶酸对照品色谱图
编号 样品含量/μg 加入量/μg 测得量/μg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
1 8.23 10 18.02 99.70
2 11.51 10 21.54 100.3
3 9.93 10 19.81 98.85
4 18.46 10 28.43 99.73 99.03 0.596
5 12.01 10 21.94 99.31
6 10.85 10 20.48 99.30
编号 A料液比
B超声时间/
min
C 超声温度/
℃
D HCl浓度/
（mol/L）
3 1∶40 90 60 1
1 1∶20 30 25 0.1
2 1∶30 60 40 0.5
吴道勋，刘 璐，王 莹，等 云南松松塔中原儿茶酸提取工艺的研究 第 13卷总第 124期
14
12
10
8
6
4
2
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
2.
50
5
3.
01
0
10
.3
87
14
.8
96
17
.3
82
18
.4
75
m
AU
min
1000
800
600
400
200
0
m
AU
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
min
10
.4
46
5
表3 正交试验安排及结果
表4 方差分析
注：*为差异有统计学意义。
经方差分析可知，各因素对提取效率的影响大
小顺序为：A＞B＞C＞D，即料液比为主要影响因素，超
声时间次之，其中HCl浓度对结果影响较小。同时，
方差分析也表明超声时间与料液比对结果有显著
意义。综合分析表明，云南松松塔中原儿茶酸的最
佳提取工艺为A3B3C2D1。
2.2 验证试验 按正交试验结果，称取云南松松塔
粉末4份（过60目筛，1.0 g）置于100 mL具塞锥形瓶
中，精密称定，加入0.1 mol/L的HCl 3mL，40 mL乙酸
乙酯，超声温度40 ℃，超声时间90 min，过滤，减压
浓缩，回收乙酸乙酯，残渣用甲醇溶解，置于10 mL
容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀。照“1.2.3”项下色谱
条件测定并计算含量。见表5。
表5 样品含量测定
3 结论与讨论
3.1 提取溶剂的选择 比较了水、甲醇、乙醇、乙酸
乙酯4种提取溶剂，发现以乙酸乙酯作为提取溶剂，
采用加热超声提取的效果最佳，提取效率最高且
杂质干扰少〔6〕。同时，确定了云南松松塔中原儿茶
酸的最佳提取工艺：以乙酸乙酯为提取溶剂，加入
0.1 mol/L的HCl 3 mL，料液比为1∶40（mg/mL），超声
时间90 min，超声温度40 ℃，24 h内基本稳定。
3.2 流动相的选择 文献中〔7-10〕流动相多采用乙
腈-冰醋酸、乙腈-甲酸、乙腈-磷酸、乙腈-磷酸二氢
铵等系统，但乙腈价格较昂贵，本试验中将流动相
优化以甲醇-磷酸（11∶89，V/V），分离效果良好，且
价格低廉，实用性强。
优化后的提取工艺简单、稳定、提取率高，该工
艺适合工业化生产，为云南松松塔中原儿茶酸的提
取提供了依据，所以本实验的研究具有一定的实用
意义。
［参考文献］
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子酸、原儿茶酸和虎耳草素的含量〔J〕.西北药学杂志，
组数 C D
原儿茶酸的含
量/（μg/g）
1 1 1 110.7
A
1
B
1
2 2 2 108.71 2
3 1 3 3 3 126.8
4 2 1 2 3 113.2
5 2 2 3 1 86.3
6 2 3 1 2 120.6
7 3 1 3 2 153.8
8 3 2 1 3 135.9
9 3 3 2 1 169.8
K1 115.40 125.90 122.40 122.27
K2 106.70 110.30 130.57 127.70
K3 122.30 125.30153.17 139.07
R 46.47 28.77 8.27 5.43
因素 F比 F临界值 显著性
A 82.306 19.000 *
偏差平方和
3 661.162
自由度
2
B 27.972 19.000 *1 244.242 2
C 135.042 2 30.306 19.000
D 44.482 2 1.000 19.000
误差 44.48 2
编号
1
原儿茶酸的含量/（μg /g）
172.5
2 169.9
3 171.4
4 172.1
大理学院学报总第 124期 医学
6
2011，2（26）：88-90.
〔7〕丁小娟，丁珊珊，吕凌，等.HPLC法同时测定宣木瓜中五
种有机酸和原儿茶酸的含量〔J〕.安徽医药，2013，17（9）：
1496-1497.
〔8〕刘艳妮，李慧敏，徐融，等.不同产地山茱萸中4种活性成
分含量的HPLC分析〔J〕.植物资源与环境学报，2013，22
（2）：108-110.
〔9〕黎强，张晓娟，罗玲.高效液相色谱法同时测定盆炎净片
中原儿茶酸、咖啡酸和芍药苷含量〔J〕.中国药业，2012，
21（11）：26-27.
〔10〕赵严丽，曾奇风.高效液相色谱法测定田七痛经胶囊中
原儿茶酸含量〔J〕.中国药业，2013，22（3）：1-12.
［基金项目］国家自然科学基金资助项目（81260632）
［收稿日期］2014-01-02 ［修回日期］2014-03-18
［作者简介］吴道勋，药学专业2010级本科生.
*通信作者：张海珠，讲师.
（责任编辑 李 杨）
感冒是生活中最为常见而又最易反复发生的
疾病之一，发病率高，是一种易感的常见病，故抗感
冒药是使用率最高的药物之一，常为家庭的必备
药。目前市场上的抗感冒药多为复方制剂，种类繁
多，虽然这些药物的名称各不相同，但其组成成分
是类似的，如患者缺乏相应医药知识，在选药时又
不了解药物的成分及其作用，在应用过程中难免发
生重复用药、过量用药，造成剂量增大，最终导致严
抗感冒药的组方分析与合理用药
孔艳娥1，方慧祥2
（1.曲靖医学高等专科学校，云南曲靖 655000；2.曲靖市食品药品检验所，云南曲靖 655000）
［摘要］目的：探讨医药工作者如何正确引导患者选用抗感冒药，促进抗感冒药的临床合理应用。方法：查阅相关书籍、文献、说
明书，结合实际工作经验，对抗感冒药的处方组成及各成分的药理作用、不良反应进行分析、归纳。结果：不同种类的抗感冒药
所适应的症状不同。结论：人们应根据感冒症状、年龄、病理状况，慎重准确地选择抗感冒药，以达到安全、有效、经济、合理的用
药目的。
［关键词］抗感冒药；成分；不良反应；合理用药
［中图分类号］R96 ［文献标志码］A ［文章编号］1672-2345（2014）04-0007-04
Analysis of Cold Medicines and Rational Drug Prescription
KONG Yane1，FANG Huixiang2
（1. Qujing Medical College，Qujing，Yunnan 655000，China；
2.Qujing Institute for Food and Drug Control，Qujing，Yunnan 655000，China）
〔Abstract〕Objective：To investigate the medical workers how to correctly guide the patients to choose the cold medicines，and
promote the clinical rational use of cold medicines. Methods：The prescription composition of cold medicines currently on the market
was analyzed；pharmacological effects of each component and adverse reactions were introduced by referring to the relevant books，
documents and description，and combining with the actual work experience. Results：Different symptoms should choose different
kinds of cold medicines. Conclusion：In order to achieve the purpose of safe，effective，economic and rational use of cold
medicines，people should measured accurately choose cold medicines according to cold symptoms，age and pathological status.
〔Key words〕cold medicines；component；adverse reactions；rational use of drug
［DOI］10. 3969 / j. issn. 1672-2345. 2014. 04. 003
大理学院学报
JOURNALOFDALIUNIVERSITY
第13卷 第4期 2014年4月
Vol.13 No.4 Apr. 2014
7