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沉香叶与沉香药材降血糖作用的比较研究



全 文 :收稿日期:2012-02-25; 修订日期:2013-04-16
基金项目:广东省中医药局科技基金资助项目( No. 20112060) ;
广东省中山市科技计划资助项目( No. 20122A036) ;
广东省中山市医药科技基金资助项目( No. 2007069)
作者简介:梅全喜( 1962-) ,男( 汉族) ,湖北蕲春人,现任广州中医药大学
附属中山医院教授,主任中药师,硕士生导师,主要从事药学史及广东产
药材研究工作.
沉香叶与沉香药材降血糖作用的比较研究
梅全喜1,李红念1,林焕泽2,吴秀荣2,梁林源2,杨华蓝2,蓝 忠2
(1.广州中医药大学附属中山医院,广东 中山 528401; 2.广东省茂名市人民医院,广东 茂名 525000)
摘要:目的 与沉香药材进行对比,研究沉香叶对糖尿病小鼠模型的降血糖作用。方法 采用尾静脉注射四氧嘧啶( 65
mg /kg) 造成小鼠糖尿病模型,用血糖仪测定小鼠空腹血糖值,选取血糖值 11. 0 ~ 30. 0 mmol /L为造模成功小鼠。将入选
小鼠随机分成模型组,沉香叶低、中、高剂量组( 2. 0,4. 0,8. 0 g /kg) ,沉香药材组( 2 g /kg) 及二甲双胍组( 1. 0 g /kg) ,灌胃
2次 /d,连续 15 d,第 16 天用血糖仪( 葡萄糖氧化酶法) 测小鼠空腹血糖值。结果 沉香药材组及沉香叶醇提物高剂量组
四氧嘧啶模型小鼠血糖值明显降低( P < 0. 05 或 P < 0. 01) 。结论 沉香叶醇提物高剂量组对四氧嘧啶所致糖尿病模型
小鼠有降血糖作用,效果与沉香药材相当。
关键词:沉香叶; 沉香药材; 四氧嘧啶; 糖尿病; 降血糖
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2013. 07. 027
中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 07-1606-02
沉香是广东地产药材之一,来源于瑞香科植物沉香 Aquilaria
agallocha Roxb.和白木香 Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含树脂的
木材。自 2005 年版《中国药典》开始,沉香的来源只收载白木香
一种[1]。沉香叶为瑞香科植物白木香 Aquilaria sinensis(Lour.)
Gilg的叶子。沉香味辛、苦,性微温,具有行气止痛、温中止呕、纳
气平喘的功效,现代研究表明沉香有解痉、平喘、降压、镇静、镇痛
等作用[2]。现代有关沉香降血糖的研究较少,有研究表明沉香
叶醇提物具有降血糖作用[3,4]。糖尿病主要是胰岛素 β 细胞受
损引起胰岛素分泌不足或者是因细胞膜胰岛素受体后天缺陷导
致胰岛素不敏感、不能发挥作用,造成糖代谢紊乱。本实验采用
化学物质四氧嘧啶诱导糖尿病动物模型,四氧嘧啶 (alloxan)为
丙酮二酸的酰脲,可由尿酸氧化合成,对胰岛的 β 细胞具有特殊
的破坏作用,中止胰岛素的分泌,导致血胰岛素不同程度下降伴
血糖升高 ,引起动物实验性四氧嘧啶糖尿病[5]。目前,沉香叶与
沉香药材降血糖方面的对比研究,未见报道,本文与沉香药材对
比,初步探讨沉香叶的降血糖作用,为扩大沉香的药用资源来源
提供依据,现将实验结果报道如下。
1 材料与仪器
1. 1 药物与试剂 沉香叶(于 2011 年 9 ~ 10 月份采自茂名市电
白县沉香山) ,沉香药材(广东君元药业有限公司,批号:100401)
经广东省中山市中医院曾聪彦主任中药师鉴定为植物 Aquilaria
sinensis(Lour.)Gilg的干燥叶及含树脂的木材粉末。四氧嘧啶
(sigma公司,批号:600969) ;盐酸二甲双胍肠溶片(贵州圣济堂
制药有限公司,20111127)。
1. 2 动物 SPF级昆明小鼠,(20 ± 1)g,雄性,购于广东省医学实
验动物中心,动物生产许可证号:SCXK(粤)2008 - 0002。饲养于
广东省中山市中医院中药药理实验室。
1. 3 仪器 拜安捷TM2 血糖仪 (德国拜耳) ;拜安捷TM2 血糖检测
试碟(德国拜耳) ;无菌手术刀片(上海联辉医疗用品有限公司)。
1. 4 拜安捷TM2 血糖仪检测原理 测量葡萄糖和试纸电极上的
试剂产生反应所形成的电流强度。血糖试纸依靠毛细管吸取血
样,血样中的血糖和试纸试剂中的葡萄糖氧化酶和铁氰化钾产生
反应,形成电流。电流强度和血样中的血糖浓度成正比。血糖值
会在 5 s后显示在血糖仪的显示屏上。
2 方法与结果
2. 1 沉香叶醇提物的制备 称取沉香叶 1 500 g,用打粉机粉碎
成粉末,加入 70%乙醇,回流提取 2 次,每次 2 h,收集合并两次
的滤液,4℃冰箱冷藏 24 h 后抽滤,使用旋转蒸发仪,减压蒸馏,
挥至无醇味,加生理盐水配成 0. 8 g /mL。取适量浓缩液对半稀
释,配制成高、中、低剂量,供实验用。沉香粉末 150 g,加入乙醇
(70%) ,回流提取 2 次,每次 2 h,收集合并两次的滤液,4 ℃冰箱
冷藏 24 h后抽滤,使用旋转蒸发仪,减压蒸馏,挥至无醇味,加生
理盐水配成 0. 2 g /mL。
2. 2 糖尿病模型的制备[6,7] 取雄性小鼠 96 只,禁食不禁水 12
h,用 65 mg /kg浓度的四氧嘧啶生理盐水进行小鼠尾静脉注射,
剂量为 0. 1 ml /10g。注射 72 h后,禁食不禁水 12 h,用无菌手术
刀片割尾取血 1 μl,用血糖仪测小鼠空腹血糖值,选取血糖值
11. 0 ~ 30. 0mmol /L为糖尿病模型小鼠。
2. 3 分组及给药方法[8] 取造模成功小鼠 60 只,按血糖值均匀
分为 6 组:模型组(等容量生理盐水) ;阳性对照组(二甲双胍1. 0
g /kg) ;沉香叶低、中、高剂量组(2. 0,4. 0,8. 0 g /kg) ;沉香药材组
(2. 0 g /kg)。另取正常小鼠 10 只作为空白对照组(等容量生理
盐水)。各组均以 10 ml /kg 给药容量灌胃给药,2 次 /d,连续 15
d,末次给药前禁食不禁水 12 h,给药 2 h 后割尾取血 1 μl,用拜
安捷TM2 血糖仪测小鼠空腹血糖值。并记录观测给药前及给药
后 7 d、14 d小鼠体重及饮水量。采用 SPSS 13. 0 for Windows 软
件处理。数据用 珋x ± s表示,采用单因素方差分析,进行 Dunnet -
t或 t'检验。
2. 4 沉香叶醇提物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠体重的影响 表
1 结果显示,与模型组比较,正常组有显著性差异(P < 0. 01) ,各
给药组与模型组比较,均无显著性差异,说明糖尿病模型小鼠体
重比正常小鼠明显减轻,并且各给药组对糖尿病模型小鼠体重减
轻均无明显的影响。
2. 5 沉香叶醇提物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠饮水量的影响
表 2 结果显示,糖尿病模型小鼠的饮水量明显高于正常小鼠,给
药后饮水量有所下降,各给药组的饮水量均低于模型组。说明相
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 7 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 7
比于正常组,糖尿病小鼠饮水量增加,呈现口渴多饮的现象;二甲
双胍组、沉香药材组、沉香叶醇提物各剂量组均可以降低小鼠饮
水量。
表 1 沉香叶醇提物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠体重的影响(珋x ± s)
组别
剂量 /
g·kg - 1
体重 /g
给药前 给药 7 d 给药 14 d
正常对照 - 18. 28 ± 1. 15 30. 31 ± 1. 63** 34. 03 ± 2. 02**
模型对照 - 17. 71 ± 1. 04 22. 78 ± 2. 22 23. 14 ± 3. 92
二甲双胍 1. 0 17. 48 ± 0. 65 20. 43 ± 2. 72 21. 53 ± 3. 10
沉香叶(低) 2. 0 17. 38 ± 0. 94 21. 90 ± 2. 23 23. 87 ± 3. 09
沉香叶(中) 4. 0 17. 68 ± 1. 08 21. 85 ± 3. 58 23. 24 ± 4. 05
沉香叶(高) 8. 0 17. 78 ± 1. 10 21. 10 ± 2. 81 22. 06 ± 4. 75
沉香药材 2. 0 17. 42 ± 1. 36 21. 93 ± 3. 56 20. 91 ± 3. 06
与模型组比较,**P < 0. 01;n =10
表 2 沉香叶醇提物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠饮水量的影响
组别
剂量 /
g·kg - 1
饮水量 /ml
给药前 给药 7 d 给药 14 d
正常对照 - 4. 75 8. 09 9. 08
模型对照 - 28. 96 31. 00 37. 50
二甲双胍 1. 0 22. 04 18. 91 19. 91
沉香叶(低) 2. 0 31. 09 25. 09 25. 58
沉香叶(中) 4. 0 24. 97 30. 45 28. 50
沉香叶(高) 8. 0 25. 20 20. 91 16. 36
沉香药材 2. 0 28. 5 31. 17 29. 42
n =10
2. 6 沉香叶醇提物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠空腹血糖值的影
响 表 3 结果显示,给药前与模型组比较,正常组血糖值有显著性
差异(P < 0. 01) ,说明糖尿病小鼠模型造模成功。给药后,模型
组小鼠血糖处于较高水平,与模型组相比,二甲双胍组血糖值有
显著性差异(P < 0. 01) ,沉香叶醇提物高剂量组血糖值有显著性
差异(P < 0. 01) ,沉香药材组也有明显差异(P < 0. 05) ,沉香叶醇
提物高剂量组与沉香药材组无明显差异。说明沉香药材和沉香
叶醇提物高剂量组可以明显降低四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠空
腹血糖值。
表 3 沉香叶醇提物
对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠空腹血糖值的影响(珋x ± s)
组别
剂量 /
g·kg -1
给药前血糖值 /
mmol·L -1
给药 15d血糖值 /
mmol·L -1
正常对照 - 4. 90 ± 1. 04** 4. 98 ± 0. 81**
模型对照 - 17. 59 ± 6. 12 22. 41 ± 3. 52
二甲双胍 1. 0 20. 07 ± 4. 63 14. 39 ± 3. 79**
沉香药材 2. 0 18. 10 ± 6. 83 18. 22 ± 3. 79*
沉香叶(低) 4. 0 17. 55 ± 4. 05 19. 98 ± 4. 27
沉香叶(中) 8. 0 17. 74 ± 4. 19 19. 23 ± 5. 50
沉香叶(高) 2. 0 16. 44 ± 6. 44 15. 29 ± 4. 16**
与模型组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05;n = 10
3 讨论
本实验采用四氧嘧啶诱导糖尿病模型,此模型与人类Ⅰ型糖
尿病类似。表1和表2结果表明,实验期间,模型小鼠和正常小
鼠相比,出现了典型的糖尿病患者的“三多一少”症状(即多饮、
多尿、多食、消瘦)。表 3 实验结果表明,沉香叶醇提物高剂量组
可以显著降低糖尿病小鼠空腹血糖值(P < 0. 01) ,沉香药材也有
明显的降血糖作用(P < 0. 05) ,而沉香叶醇提物低、中剂量组未
见明显效果。沉香叶醇提物高剂量组与沉香药材组相比,无显著
性差异,表明沉香叶醇提物高剂量组与沉香药材发挥降血糖作用
方面,效果相当。
沉香作为广东地产药材之一,经济价值较高,生长周期长,结
香率低,资源已经相当匮乏,是我国特有而珍贵的药用植物。但
沉香叶的资源较为丰富,且有广阔的开发前景[9],因此开展沉香
叶与沉香药材的降血糖作用的比较研究,可以扩大沉香的药用部
位,同时为临床应用提供依据。有研究表明沉香叶含有 2α -羟
基熊果酸和丹参酮,其中熊果酸已被证实有降血糖的作用,而丹
参酮与酚妥拉明联用治疗糖尿病,正常服用降糖药,治愈率更高,
丹参酮是治疗糖尿病的辅助药。因此,沉香叶降血糖作用可能与
沉香叶含有 2α -羟基熊果酸和丹参酮有关[10 ~ 12],其降血糖的机
制有待进一步深入研究。
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