全 文 :沉香叶与沉香药材镇痛作用的对比研究
李红念1,梅全喜1* ,林焕泽2,戴卫波1,梁林源2,蓝 忠2
(1.广州中医药大学附属中山医院,广东 中山 528401;
2.广东省茂名市人民医院 525000)
摘要:目的 与沉香药材对比,初步探讨沉香叶的镇痛作用,为沉香叶的深入研究提供科学依据。方法 采用小鼠热板法
和扭体实验法,测定痛阈值和扭体次数,观察沉香叶醇提物疼痛反应的影响。结果 沉香叶醇提物低、中剂量组对热板及
醋酸引起的疼痛均具有显著的抑制作用,沉香叶醇提物各剂量组与沉香药材组间无显著性差异。结论 沉香叶在镇痛方
面与沉香药材作用近似。
关键词:沉香叶; 沉香药材; 镇痛作用; 热板; 扭体
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 08. 049
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)08-1958-01
沉香是中医常用药之一,历版《中国药典》均有记载,来源于
瑞香科植物沉香 Aquilaria agallocha Roxb. 和白木香 Aquilaria
sinensis (Lour.)Gilg含树脂的木材。自 2005 年版《中国药典》开
始,沉香的来源只收载白木香一种[1]。沉香叶为瑞香科植物白
木香 Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg 的叶子。沉香味辛、苦,性微
温,具有行气止痛、温中止呕、纳气平喘的功效,用于治疗胸腹胀
闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急[2]。现代研究表明,沉香
叶含有挥发油、黄酮及其苷类、酚类、三萜类、多糖、氨基酸,这些
化学成分具有抗炎镇痛等多种生理活性[3]。白木香叶为白木香
的非药用部位,其相关研究还很少。为扩大沉香的药用资源来
源,本文将沉香叶与沉香药材对比,初步探讨沉香叶的镇痛作用。
现将实验结果报告如下。
1 材料
1. 1 药材及受试样品制备 沉香叶(于 2011 年 9 ~ 10 月份采自
茂名市电白县沉香山) ,沉香药材(广东君元药业有限公司)经广
东省中山市中医医院曾聪彦主任中药师鉴定为植物 Aquilaria
sinensis(Lour.)Gilg含树脂的干燥木材粉末。
称取沉香叶 1 500 g,用打粉机粉碎成粉末,加入 70%乙醇,
回流提取 2 次,每次 2 h,收集合并两次的滤液,4℃冰箱冷藏 24 h
后抽滤,使用旋转蒸发仪,减压蒸馏,挥至无醇味,加生理盐水配
成 0. 8 g /ml。取适量浓缩液对半稀释,配制成高、中、低剂量,供
镇痛实验用。沉香粉末 150 g,加入乙醇(70%) ,回流提取 2 次,
每次 2 h,收集合并两次的滤液,4℃冰箱冷藏 24 h 后抽滤,使用
旋转蒸发仪,减压蒸馏,挥至无醇味,加生理盐水配成 0. 2 g /ml。
1. 2 仪器及试药 仪器:HH - S4 数显恒温水浴锅(金坛市医疗
仪器厂) ,金属板,机械秒表(上海星钻秒表有限公司)。
试药:消炎痛(吲哚美辛肠溶片,江苏亚邦爱普森药业有限公司;
批号:1003002);冰醋酸(广州化学试剂厂;批号:20070902 -2)。
1. 3 动物 SPF级昆明小鼠,(20 ± 2)g,雌雄各半,购于广东省医
学实验动物中心,动物生产许可证号:SCXK(粤)2008 - 0002。饲
养于广东省中山市中医院中药药理实验室。
2 方法及结果
2. 1 对小鼠热刺激致痛的影响[4,5] 在(55 ± 0. 5)℃的热板预选
出痛阈值在 5 ~ 30s的健康雌性小鼠(18 ~ 22 g)60 只,间隔 5 min
重新测定痛阈值 1 次,取两次平均值作为给药前的小鼠的痛阈
值。按体质量随机分为空白对照组、消炎痛对照组和沉香叶醇提
物高、中、低剂量组,沉香药材组。各组 10 只,雌雄各半。空白对
照组灌予生理盐水 10 ml /kg;沉香叶醇提物高、中、低剂量组分别
以 0. 8 g生药 /ml、0. 4 g 生药 /ml,0. 2 g 生药 /ml 灌胃给药;沉香
药材组以 0. 2 g生药 /ml 灌胃给药,灌胃体积均为 10ml /kg 体质
量。1 次 /d,连续给药 7 d。实验第 7 天消炎痛组 1. 3mg /ml消炎
痛生理盐水混悬液灌胃 1 次,灌胃体积为 10 ml /kg 体重。于末
次给药后 0. 5,1,1. 5,2 ,2. 5,3. 0 h 时的痛阈。以小鼠舔后足反
应作为痛阈指标,并剔除好发生其他反应的小鼠。若小鼠在热板
上 60 s仍无痛觉反应,即取出,按 60 s计。比较各组各时段痛阈
差值,并计算最大镇痛率。痛阈提高百分率(%) = (药后痛阈
值 - 药前痛阈值)/药前痛阈值 × 100%。结果进行 t 检验处理,
计算给药组与对照组的差异显著性。结果见表 1。
收稿日期:2012-03-14; 修订日期:2012-04-28
基金项目:广东省中医药局科技基金资助项目(No. 2010167) ;
广东省中山市医学科技基金资助项目(No. 2007069)
作者简介:李红念(1988-) ,女(汉族) ,湖北荆门人,现为在读硕士研究生,
主要从事广东地产药材研究工作.
* 通讯作者简介:梅全喜(1962-) ,男(汉族) ,湖北蕲春人,现任广州中医药
大学教授,主任中药师,硕士研究生导师,学士学位,主要从事广东地产药
材研究与开发工作.
表 1 沉香叶醇提物对小鼠热板痛阈值的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C / g·kg -1
给药前痛阈值
t / s
给药后痛阈值 t / s
30 min 60 min 90 min 120 min 150 min 180 min
对照 - 14. 68 ± 5. 64 14. 26 ± 3. 08 14. 37 ± 5. 78 12. 69 ± 4. 39 12. 26 ± 3. 38 13. 03 ± 6. 72 16. 07 ± 10. 68
消炎痛 0. 013 14. 33 ± 5. 37 18. 87 ± 6. 20* 24. 69 ± 13. 98* 23. 64 ± 13. 93* 24. 53 ± 12. 99* 26. 23 ± 16. 69* 28. 71 ± 17. 72
沉香药材 2. 0 14. 84 ± 4. 13 15. 54 ± 4. 40 16. 16 ± 6. 38 20. 94 ± 15. 08 23. 97 ± 16. 98 28. 28 ± 17. 69* 26. 72 ± 16. 29
沉香叶(低) 2. 0 14. 11 ± 5. 30 15. 53 ± 5. 22 22. 30 ± 13. 12 17. 58 ± 4. 1 21. 97 ± 15. 13 26. 34 ± 8. 87* 20. 63 ± 11. 39
沉香叶(中) 4. 0 12. 54 ± 2. 36 14. 90 ± 6. 33 16. 90 ± 7. 25 20. 09 ± 15. 41 23. 43 ± 17. 34 29. 11 ± 19. 94* 25. 46 ± 18. 72
沉香叶(高) 8. 0 14. 19 ± 4. 87 15. 43 ± 4. 13 16. 18 ± 7. 01 15. 96 ± 4. 39 17. 28 ± 11. 21 22. 03 ± 9. 40 19. 39 ± 10. 13
与空白对照组比较,* P < 0. 05;n = 10
实验表明,沉香叶醇提物低剂量组、中剂量组及沉香药材组在给
药后 150 min 痛阈值提高,与对照组比较有显著性差异(P <
0. 05)。沉香叶醇提物低剂量组、中剂量组与沉香药材组间无显
著性差异。可见,沉香叶及沉香药材对于物理性疼痛发挥镇痛药
效需要较长时间。
2. 2 对小鼠醋酸致痛扭体的影响[6,7] 取体质量 18 ~ 22g的健康
雄性小鼠 60 只,,按如上方法随机分为 6 组。动物按照如上方法
·8591·
时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 8 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 8
灌胃给药,1 次 /d,连续灌胃 7 d。实验第 7 天消炎痛组 1. 3 mg /
ml消炎痛生理盐水混悬液灌胃 1 次,灌胃体积为 10 ml /kg 体质
量。于末次给药后 1h,腹腔注射 0. 7%冰醋酸生理盐 0. 1 ml /
10g。观察注射醋酸后 20 min 内小鼠的扭体次数(扭体反应:小
鼠腹部内凹,躯干与后肢伸长,臀部高起) ,比较各组的扭体次数,
并计算抑制率。抑制率(% ) = (阴性组扭体次数 - 给药组扭
体次数)/阴性组扭体次数 × 100%。结果进行 t 检验处理,计算
给药组与对照组的差异显著性。结果见表 2。
表 2 沉香叶醇提物对小鼠醋酸致痛扭体的影响(珋x ± s)
组别 剂量 C /g生药·kg - 1 扭体次数 抑制率(%)
空白对照 - 49. 50 ± 16. 43 -
消炎痛对照 0. 013 10. 20 ± 6. 51** 79. 39
沉香药材 2. 0 30. 90 ± 6. 90** 37. 58
沉香叶醇提物(低) 2. 0 36. 20 ± 19. 40* 26. 87
沉香叶醇提物(中) 4. 0 33. 70 ± 12. 64* 31. 92
沉香叶醇提物(高) 8. 0 39. 20 ± 15. 60 20. 81
与空白对照组比较,* P < 0. 05,**P <0. 01;n =10
实验表明,沉香叶与沉香药材对小鼠醋酸所致疼痛产生的扭
体反应有明显抑制作用。沉香叶醇提物低、中剂量组与空白对照
组有显著差异(P < 0. 05) ;沉香高剂量组与空白对照组比较无显
著差异(P﹥ 0. 05) ;沉香原药材与空白对照组有显著差异(P <
0. 01)。沉香叶醇提物各组与沉香药材醇提物组间无显著性差
异。
3 讨论
沉香作为广东地产药材之一,经济价值较高,是我国特有而
珍贵的药用植物。由于沉香的市场需求量大,价格昂贵,生长周
期长,繁殖率低,资源已经相当匮乏。白木香只有含树脂的木材
作为药用,其他部位如叶、树枝、不含树脂的木材均被作为废物处
理,造成资源的大量浪费。对沉香叶药用价值的开发研究,可以
充分利用资源,变废为宝,扩大沉香的药用部位。
本文对沉香叶的镇痛作用进行探讨,首次将其与沉香药材展
开对比研究。本实验选用热板法和扭体法分别为热刺激模型和
化学刺激模型,热板法间接反映了药物的镇痛作用是否具有一定
的中枢抑制作用,扭体反应反映了外周性作用的致痛程度。两个
实验结果一致表明,沉香叶低、中剂量组均有镇痛效果(P <
0. 05) ,均表明沉香叶高剂量对疼痛无抑制作用,说明沉香叶对疼
痛的抑制作用不随着剂量的增大而增大。沉香叶低、中剂量组与
沉香药材组相比,无显著性差异,表明低、中剂量的沉香叶与沉香
药材发挥镇痛作用方面,效果相当。
参考文献:
[1] 中华人民共和国药典委员会.中国药典,一部[S].北京:化学工业
出版社,2005:128.
[2] 梅全喜.现代中药药理与临床应用手册[M]. 北京:中国中医药出
版社,2009:404.
[3] 林焕泽,李红念,梅全喜,等. 沉香叶的研究进展[J]. 今日药学,
2011,21(9) :547.
[4] 陈 奇.中药药理研究方法学[M]. 北京:人民卫生出版社,1993:
377.
[5] 范文昌,梅全喜,高玉桥. 12 种广东地产清热解毒药的镇痛作用实
验研究[J].今日药学,2010,20(2) :12.
[6] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学,第 2 版[M].北京:人民
卫生出版社,1994:695,700.
[7] 钟希文,梅全喜,林 慧. 蛇鳞草抗炎镇痛作用的实验研究[J].山
西中医学院学报,2009,10(6) :15.
收稿日期:2011-12-29; 修订日期:2012-05-08
基金项目:广东省科技厅攻关课题(No. 2007B031408005)
作者简介:李 翎(1963-) ,女(汉族) ,辽宁铁岭人,现任广州中医药大学
第一附属医院副研究员,主要从事中药药理研究工作.
醒神喷鼻液对脑出血大鼠脑组织的钙离子浓度
及线粒体膜电位的影响研究
李 翎,方永奇,邹衍衍,何玉萍
(广州中医药大学第一附属医院,广东 广州 510405)
摘要:目的 观察醒神喷鼻液对脑出血模型大鼠脑组织的钙离子浓度、线粒体膜电位的影响。方法 SPF级 SD大鼠随机
分为醒神喷鼻液高、中、低剂量组、醒脑静组和模型对照组,各组大鼠滴鼻给药 3 d后,造脑出血模型,进行神经症状评分
判断模型成功与否,造模成功动物再给药 1 天,24 h后断头取脑。应用流式细胞术测定脑组织的钙离子浓度和线粒体膜
电位。结果 醒神喷鼻液能明显降低脑出血大鼠的神经症状评分,并呈一定量效关系。高、中剂量能降低模型大鼠脑组
织的钙离子平均荧光强度,高剂量能升高线粒体膜电位的平均荧光强度。结论 醒神喷鼻液可抑制脑出血时脑组织的钙
离子超载、保持线粒体膜电位的稳定,减轻脑损害程度,其作用机制可能与钙拮抗作用和细胞凋亡机制有关。提示脑出
血时药物对脑细胞有保护作用。
关键词:醒神喷鼻液; 脑出血; 钙离子浓度; 线粒体膜电位
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 08. 050
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)08-1959-02
醒神喷鼻液为我院自行研制的纯中药制剂,由石菖蒲、猪牙
皂和冰片等组成,前期研究显示石菖蒲挥发油能够进入大鼠大脑
发挥作用[1],能减少脑皮质神经细胞凋亡,对脑皮质神经细胞有
保护作用[2]。脑出血时,造成脑组织损伤,兴奋性氨基酸释放引
起的 Ca2 + 通道开放和细胞膜损伤离子转运功能紊乱,使大量
Ca2 +内流;细胞内增加的 Ca2 + 激活磷脂酶 C,最终释放更多
Ca2 +,使细胞内 Ca2 +超载,神经细胞内钙超载对引起细胞死亡及
脑组织损伤起关键作用[3],因此在出现脑出血时,对 Ca2 +超载的
控制显得尤为重要。细胞在正常的状况下,线粒体的跨膜电位是
线粒体发挥正常生理功能所必需的,维持线粒体膜电位的稳定才
能保证线粒体的正常功能。本文通过大鼠脑出血模型,研究醒神
喷鼻液对脑出血后脑组织的钙离子浓度及线粒体膜电位的影响。
1 材料与仪器
1. 1 动物 SPF级 SD大鼠 60 只,雌雄各半,体质量 200 ~ 220 g。
动物许可证号:SCXK(粤)2008 - 0020,动物购自广州中医药大学
·9591·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 8 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 8 期