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藤梨根提取物对裸鼠移植瘤的抑制作用研究



全 文 :藤梨根提取物对裸鼠移植瘤的抑制作用研究△
薛  瑞  王小平*   宁夏药品检验所 ( 750001)
 摘 要 目的: 观察藤梨根提取物对裸鼠 SGC-7901移植瘤的抑瘤作用 ,并探讨其可能的作用机
制。方法:将体外培养的人胃腺癌 SGC-7901细胞接种于 BALB /C-nu /nu裸鼠的皮下 ,建
立人胃癌移植瘤模型 ,共 30只 ,随机分为 5组:康力欣胶囊组、藤梨根提取物大、中、小剂
量组、阴性对照组。结果: 藤梨根提取物大、中、小各剂量、康力欣胶囊组与阴性对照组之
间移植瘤体积存在显著性差异 ( P < 0. 01) ,藤梨根提取物小、中、大剂量组和、康力欣胶囊
组对照组裸鼠脾脏指数明显高于阴性对照组 ( P < 0. 01)。结论: 藤梨根乙酸乙酯提取物具
有抑瘤作用 ,其作用机制之一作用可能是提高机体的免疫功能。
 主题词 @藤梨根 /药效学 动物 ,实验 鼠 肿瘤
    藤 梨 根 为 猕 猴 桃 科 ( Actinidiaceae ) 猕 猴 桃 属
( Ac tinidialindi)软枣猕猴桃 ( Actinidiaarguta ( Sieb. et Zucc. )
Planch的根 [1]。现代药理研究表明:藤梨根具有抗肿瘤、调节免
疫等作用 ,可用于治疗消化系统癌症、黄疸、消化不良、呕吐、腹
泻等症 [2, 3]。为筛选藤梨根抗肿瘤的活性部分 ,本实验观察藤梨
根乙酸乙酯提取物对肿瘤的抑制作用 ,以探讨其抗肿瘤作用及
机制。
1  材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 细胞: SGC-7901胃癌细胞株 由第四军医实验动
物中心提供 ,常规培养于含 10%小牛血清的 RPMI 1640培养
液中。
1. 1. 2  药物: RPMI-1640培养液 (美国 GIBCO公司 ) ;藤
梨根乙酸乙酯提取物在陕西中医学院中药化学实验室自制 ;康
力欣胶囊 (云南省名扬药业有限公司 )。藤梨乙酸乙酯根提取物
用双蒸水配制成浓度为 4mg /ml , 8 mg /ml , 16mg /ml,各
100m l,备用。 康力欣胶囊 ,完全除去囊壳 ,研细过 200目筛 ,恒
重 ,精密称取 0. 8g,用双蒸水配制成浓度为 8 mg /ml的溶液
100m l,备用。
1. 1. 3 动物: BALB /C-nu /nu裸小鼠 ,上海斯菜克实验动
物有限责任公司提供 ,许可证号: SCXK(沪 ) 2003-0003。4~ 6周
龄 ,体重 15~ 20g ,雄性 ,在无特定病原体 ( SPF)条件下饲养。
1. 2 实验方法: 取指数增殖期 SGC-7901细胞 ,用 0. 25%
胰蛋白酶消化制成单细胞悬液 ,调整细胞密度至 1. 0x 109 /ml,
台盼蓝染色计数活细胞占 95%以上。
于每只裸鼠右后肢腋下皮下接种 2. 0× 109个 ( 0. 2m1)细
胞 ,出瘤后用游标卡尺测量移植瘤的最小径 a、最大径 b,计算
出移植瘤体积 V= a2b /2[4]。根据裸鼠体重的大小 ,按照分层随
机的原则 ,将裸鼠分为阳性对照组、阴性对照组和藤梨根提取
物给药大、中、小剂量组 ,每组 6只。 采用灌胃法给药 ,每天 1
次 ,每次 0. 2m1,共 22d。药物剂量根据体表面积比值进行换算。
△陕西省科学技术研究发展计划 ( 2006K16-G13( 2) )
* 陕西中医学院 ( 721046)
   1. 3 观察指标
1. 3. 1 移植瘤生长情况及药物抑瘤效果: 给药后每 3-4d
用游标卡尺测量并计算移植瘤的体积 ,绘制移植瘤生长曲线。
22d后停止给药 24h ,每只断颈处死 ,切取移植瘤称重 ,计算药
物的抑瘤率。
IR= ( 1-实验组瘤重 /阴性对照组瘤重 ) x 100%
1. 3. 2 脾脏指数剖腹取出脾脏 ,称重 ,计算:脾脏指数=
(脾脏重量 /小鼠体重 ) x 100%。
1. 4 统计学方法: 采用 SPSS13. 0软件包进行分析 ,各项
数据均以 x-± s表示 ,用 t检验进行显著性检验。
2  结 果
2. 1 裸鼠移植瘤生长情况:各组裸鼠皮下接种 SGC-7901
胃癌细胞株细胞 , 6天后均明显形成瘤结节。 药物灌胃进行干
预 ,每 3d检测一次移植瘤体积 ,并绘制出移植瘤生长曲线 (见
图 1)。从图 1可见 ,阴性对照组移植瘤生长较快 ,而藤梨根乙酸
乙酯提取物小、中剂量组和阳性对照组移植瘤生长较为缓慢 ,
藤梨根乙酸乙酯提取物大剂量组生长最为缓慢。各组裸鼠第 22
天移植瘤体积见表 1。
632 陕西中医 2008年第 29卷第 5期
表 1  第 22d各组裸鼠移植瘤体积
组 别 n 肿瘤体积 ( mm3 , x-± s)
阴性对照组
康力欣胶囊组
藤梨根提取物小剂量组
藤梨根提取物中剂量组
藤梨根提取物大剂量组
6
6
6
6
6
40. 30± 0. 98
67. 25± 0. 41* *
70. 40± 1. 53* *
64. 60± 0. 63* *
51. 23± 0. 42* * ▲
  注: 与阴性对照组比较 * * P < 0. 01;与康力欣胶囊组比
较 ▲ P < 0. 05
  从表 1可以得出: 与阴性对照组比较 ,各给药组均有显著
的统计学意义 (P < 0. 01) ;与康力欣胶囊组比较 ,藤梨根乙酸
乙酯提取物大剂量组有统计学意义 (P < 0. 05)。
2. 2 各药物组对瘤重的影响 以瘤重计算各药物组相对
阴性对照组的抑瘤率 ,结果见表 2。
表 2  藤梨根乙酸乙酯提取物对裸鼠
移植瘤生长的抑制作用
组 别 n 肿重 ( g , x-± s) 抑瘤率 (% )
阴性对照组
康力欣胶囊组
藤梨根提取物小剂量组
藤梨根提取物中剂量组
藤梨根提取物大剂量组
6
6
6
6
6
0. 525± 0. 015
0. 252± 0. 017* *
0. 290± 0. 025* *
0. 261± 0. 014* *
0. 207± 0. 016* * ▲

52. 04
44. 76
50. 23
60. 65
  注: 与阴性对照组比较 * * P < 0. 01;与康力欣胶囊组比
较 ▲ P < 0. 05
  从表 2可以得出: 与阴性对照组比较 ,各给药组均有显著
的统计学意义 ( P < 0. 01);藤梨根乙酸乙酯提取物各剂量之间
比较均有显著的统计学意义 (P < 0. 01) ;与康力欣胶囊组比
较 ,藤梨根乙酸乙酯提取物大剂量组有统计学意义 (P < 0.
05)。以瘤重计算各药物组相对阴性对照组的抑瘤率 ,康力欣胶
囊组、藤梨根乙酸乙酯提取物大、中、小剂量组分别为 52. 04% 、
60. 65% 、 50. 23% 、 44. 76%。
2. 3 药物对裸鼠脾脏指数的影响: 以脾重计算脾脏指数 ,
各药物组对脾脏影响作用结果见表 3。
表 3  藤梨根乙酸乙酯提取物对荷瘤
裸鼠脾脏影响的指数
组 别 n 脾脏指数 (% ,x-± s)
阴性对照组
康力欣胶囊组
藤梨根提取物小剂量组
藤梨根提取物中剂量组
藤梨根提取物大剂量组
6
6
6
6
6
0. 43± 0. 05
0. 56± 0. 05* *
0. 48± 0. 02* *
0. 58± 0. 04* *
0. 61± 0. 04* *
  注: 与阴性对照组比较 * P < 0. 05,* * P < 0. 01
  从表 3可以得出: 与阴性对照组比较 ,康力欣胶囊组具有
显著统计学意义 (P < 0. 01)、藤梨根乙酸乙酯提取物各剂量组
均具有统计学意义 (P < 0. 01) ;脾脏指数随藤梨根乙酸乙酯提
取物剂量增加而增加 ,藤梨根乙酸乙酯提取物各剂量组之间比
较 ,小剂量组与大剂量之间具有统计学意义 (P < 0. 05)。
3  讨 论  本研究采用人 SGC-7901细胞株的细胞接
种于裸鼠皮下 ,建立裸鼠移植瘤动物模型 ,初步研究“藤梨根提
取物 “对移植瘤生长的抑制作用。 结果发现 ,第 22d时 ,藤梨根
乙酸乙酯提取物大、中、小三各剂量、康力欣胶囊组与阴性对照
组之间移植瘤体积存在极显著性差异 ,说明正常剂量的藤梨根
乙酸乙酯提取物能抑制 SGC-7901胃癌细胞移植裸鼠瘤的生
长 ,抑瘤作用显著。
脾脏是重要的外周免疫器官之一 ,成熟的淋巴细胞可定居
于脾脏。 脾脏同时也是对血源性抗原产生免疫应答的场所 ,还
可合成并分泌如补体、 IFN等生物活性物质 ,当机体免疫功能
增强时 ,脾脏的重量将会增加 ,因此 ,脾脏与机体重量的比值即
脾脏指数间接反映了机体的免疫状况 [5]。 本研究发现 ,藤梨根
提取物中、大剂量组和、康力欣胶囊组对照组裸鼠脾脏指数明
显高于阴性对照组 ,证实“藤梨根提取物”的抑瘤作用机制之一
是提高机体的免疫功能。
参考文献
[ 1]  国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草
(第三册 , 第九卷 ) [M ].上海:上海科学技术出版社 , 1999: 536-
537.
[ 2 ]  南京药学院《中草药学》编写组 .中草药学 (中册 )
[ M ].南京:江苏人民出版社 , 1976: 662-623.
[ 3]  陈贯诚 .猕猴桃 .中药材科技 [ J]. 1981, 4( 1): 30-31.
[ 4]  马双慰 .槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤抑制作用的
研究 [ J].肿瘤防治杂志 , 2004: 11( 3): 248-251.
[ 5]  龚非力 .医学免疫学 [ M ].北京:科学出版社 , 2003.
(收稿 2007-12-14;修回 2007-12-25)
633陕西中医 2008年第 29卷第 5期