免费文献传递   相关文献

香叶天竺葵油抗氧化作用及其化学表征



全 文 :收稿日期:2005-05-11
作者简介:王淳凯(1980~ ),男 ,硕士研究生 ,研究方向:药用植物化学 ,电话:021-62233584, E-mail:wchunkai@yahoo.com.cn。
*通讯作者:瞿伟菁。
参考文献:
[ 1]  AL-ChaerED, KawasakiM, PasrichaPJ.Anewmodelofchronic
visceralhypersensitivityinadultratsinducedbycolonirritation
duringpostnataldevelopment[ J] .Gatroenterol, 2000, 119(5):
1276-1285.
[ 2]  刘雁冰 ,袁耀宗,陶然君等.大鼠肠道高敏性模型的建立及其
内脏敏感性评估 [ J] .中华消化杂志.2003, 23(1):34-38.
[ 3]  MonnikesH, RuterJ, KonigM, etal.Differentialinductionofc-
fosexpressioninbrainnucleiby(noxious)andnon-noxiousco-
lonicdistension:RoleofaferentCfibersand5-HT3receptors[ J].
BraiRes.2003, 966(2):253-264.
[ 4]  董文珠 ,李兆申 ,许国铭 ,等.肠易激综合征肥大细胞与 P物
质免疫反应阳性神经纤维的实验研究 [ J] .中华消化杂志 ,
2002, 22(11):656-660.
[成分分析 ]
香叶天竺葵油抗氧化作用及其化学表征
王淳凯 ,  瞿伟菁* ,  孙 伟 ,  李玉菊
(华东师范大学生命科学学院 上海 200062)
关键词:香叶天竺葵油;抗氧化;化学表征
摘要:目的:研究香叶天竺葵油(PLO)的化学表征 ,寻找抗氧化作用的物质基础。方法:测定 PLO体外抑制豚鼠心 、肝 、肾
脂质过氧化 、清除 O· 2 、· OH、二苯代苦味基自由基(DPPH· )和抑制 H2O2 诱导的红细胞氧化溶血的作用 , 用气相色谱
法对 PLO进行化学表征 ,测定其单体对 DPPH·的清除作用。结果:经方差分析表明 , PLO对豚鼠肝 、肾 、心自发脂质过
氧化 、CCl4 诱导的肝脂质过氧化及中高剂量抑制 H2O2 诱导的红细胞溶血作用有极显著的(P<0.01)抑制作用。对 O
· 2 和 DPPH·的清除作用与阴性对照相比有极显著的差异(P<0.01)。气相色谱和单体抗氧化实验证实占 PLO组分
30.06 的香茅醇抗氧化能力与 PLO接近。结论:PLO有抗氧化能力 , 香茅醇是主要抗氧化成分。
中图分类号:R284.1     文献标识码:A     文章编号:1001-1528(2006)06-0855-06
Antioxidationandchemicalcharacterizationofessential
oilfromPelargoniumgraveolens.L Her
WANGChun-kai,  QUWei-jing,  SUNWei,  LIYu-ju
(SchoolofLifeScience, EastChinaNormalUniversity, Shanghai200062 , China)
KEYWORDS:essentialoilfromPelargoniumgraveolens.L Her;antioxidation;chemicalcharacterization
ABSTRACT:AIM:Tostudymedicalefectoftheantioxidationactivityofessentialoilfromsmelstorusbil(Pel-
argoniumgraveolens, L Her)(PLO)METHODS:Freeradicals(O· 2 、· OHandDPPH· )scavengingactivities
wereinvestigatedindiferentspecialchemicalsystems.Itsanti-lipoperoxidantionactivitywasstudiedwithMDA
generationmodelinvitro.TheefectofthehemolysisofcavyRBCinducedbyH2O2 wasalsostudied.Thecompo-
nentsofPLOwasidentifiedbyGC-FID.RESULTS:ItwasfoundthatPLOshowedhigheranti-lipoperoxidantion
onMDAgenerationspontaneouslyinhomogenatesofcavyheart, liverandkidney.Thereweresignificantdiferences
onlipidperoxidantofthecavyliverhomogenateinducedbyCCl4 betweencontrolgroupandPLO.Therewerehigher
scavengingefectoftheextractsoffoliageonO· 2 andDPPH· PLOcouldstronglyinhibitthehemolysisofcavy
RBCinducedbyH2O2.TheresultofGC-FIDandDPPH· scavengingactivitiesindicatedthattheantioxidantionof
citronelolwassimilarwithPLO.CONCLUSION:PLOisagoodantioxidationandcitronelolisthemainantioxi-
datedsubstanceinPLO.
855
2006年 6月
第 28卷 第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2006
Vol.28 No.6
  香叶天竺葵(Pelargoniumgraveolens.L Her.)
是? 牛儿苗科(Geraniaceae)天竺葵属多年生亚灌
木 ,原产非洲 ,我国自六十年代初引种云南以来 [ 1] ,
鉴于香叶天竺葵精油(又称香叶油)的经济价值 ,现
各地均有栽培 , 同时无性快速繁育技术也有发
展 [ 2] 。香叶天竺葵药用基原 , 《中药大词典》载:“香
叶 ”,为 “香叶天竺葵的全草 ”,性味功效 , 《广西中药
志 》载:“味辛 ,气香。性温散。”主治 “风湿 ,疝气 ”
等 , “内服 ,外敷”均可 。香叶油是香叶天竺葵茎叶
中的主要有效成分 ,也是日用化工和食品轻工产品
中玫瑰香型调香的主要母体原料 ,其化学成分已有
若干分析研究 ,证明香叶油中含有 30多种不同组
分 [ 3] ,含量 >0.5 的有 19种[ 4] 。随着资源深度利
用和经济发展 ,香叶油的药用价值得以研究关注 ,有
报道香叶油中香茅醇 、甲酸香茅酯和乙酸香茅醇分
别对宫颈癌 [ 5]和白血病细胞株 HL— 60以及 S180腹
水癌等肿瘤具有一定的细胞毒作用[ 3] ,此外 ,复方
香叶油治疗尖锐湿疣具有一定疗效 [ 6] 。搞清天然
产物的组效关系是确定生药资源主要药效物质基础
的重要途径 [ 7] ,香叶油的化学组成复杂 ,而且不少
成分热敏挥发性很强 ,这给深入研究其作用机理及
其药效物质基础的表征带来一定的困难。为解析香
叶油药效作用的可能机理 ,本文试就研究尚未涉及
的香叶油清除自由基和抗脂质过氧化作用 ,结合气
相色谱法定量分析和化学归类方法 ,以期对香叶油
抗氧化作用和药效物质基础进行表征 。
1 材料与方法
1.1 实验材料
香叶天竺葵 (Pelargoniumgraveolens.L Her.)
由本校生物站提供 ,并经本单位植物分类学研究室
李宏庆副教授鉴定。
1.2 香叶油
(EsentialoilofPelargonium graveolens, 缩写
PLO,文中下同):本室制备 ,将采集的香叶天竺葵叶
1 kg和水 1 L放入自制挥发油蒸馏器中经水蒸气蒸
馏法蒸馏 1 h制得 ,按文献 [ 11] 将挥发油以:挥发油
吐温 -80:水(1.019∶1∶7.981)制成 100 mg/mL
的母液 。
1.3 药品
二苯代苦昧基自由基(DPPH· )、吐温 -80为
Sigma产品 ,硫代巴比妥酸 (TBA),抗坏血酸 ,三氯
乙酸 ,氯化钠 、乙醇 、肝素钠 、盐酸 、三羟甲基氨基甲
烷 、邻苯三酚 、过氧化氢 、硫酸亚铁 、四氯化碳 ,邻菲
罗啉为国产分析纯。
1.4 实验仪器
721分光光度计(上海第三分析仪器厂);岛津
GC-9A气相色谱仪;C-R2AX微积分仪;FID检测器。
1.5 实验动物
豚鼠♀,体重(601.25±30.10)g,中科院上海
实验动物中心供应 。
2 方法
2.1 PLO对豚鼠心 、肝 、肾自发性脂质过氧化的影

豚鼠禁食 12 ~ 16 h,乙醚麻醉处死 ,迅速取心
脏 、肝脏 、肾脏 ,在 0 ~ 4 ℃下用生理盐水制成 10
的组织匀浆。实验分为对照组(生理盐水)和 3个
剂量的 PLO组(分别为 1.0 , 0.1, 0.01 mg/mL每组
平行 6管 ,每管加 0.5 mL组织匀浆 ,混匀 。 37 ℃温
育 2 h,按硫代巴比妥酸(TBA)法测 MDA含量[ 12] 。
抑制率 =(1 -ADrug/Acontrol)×100
2.2 PLO对 CCl4 诱导豚鼠肝脂质过氧化的影
响[ 13]
实验前将豚鼠禁食 12 ~ 16h,乙醚麻醉 ,迅速取
出肝脏置预冷至 0 ~ 4 ℃的生理盐水中洗去表面残
血 ,滤纸吸干。以预冷的 Tris-HCl缓冲液在低温下
制成 10 肝匀浆.取肝匀浆 lmL,置具塞玻璃离心
管中 ,加入 lmL不同浓度的 PLO和 lmLCCl4 ,实验
分为对照组(Tris-HCl缓冲液)和 3个剂量的 PLO
组(分别为 1.0, 0.5, 0.1 mg/mL),每组平行 6管。
反应终体积为 3.0mL,在 37℃温育 90min.取下加
入 1.0 mL20 TCA中止反应 ,混匀后静置 10 min.
离心 10min(3000 r/min),取上清液 2.5 mL,加 1.5
mL0.67 TBA沸水浴加热 10 min.取下在冷水中
迅速冷却至室温 ,离心 5 min(2000 r/min),然后在
721分光光度计上测定 A532nm值 。
抑制率 =(1 -ADrug/Acontrol)×100
2.3 PLO对 H2O2诱导红细胞氧化溶血的影响
实验前将豚鼠禁食 12 ~ 16h,乙醚麻醉 ,心脏取
血 ,取得肝素抗凝豚鼠全血 , 用生理盐水 2 000 r/
min, 5min离心洗涤 3次 , 配成 0.5 的红细胞悬
液 , PLO组分为 0.5、0.1、0.01 mg/mL三种浓度及
阴性对照组(生理盐水)、阳性给药对照组(1 mg/mL
Vc)。将红细胞悬液(1 mL)与各浓度的药液(0.2
mL)37℃温育 10 min后加 100 mmol/LH2O2 继续
温育 30 min,稀释 4倍后离心 ,取上清液在 415 nm
处测光密度(A),以对照组为 100 溶血计算加药
后的溶血度和抑制率
溶血度 =(ADrug/AControl)×100
856
2006年 6月
第 28卷 第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2006
Vol.28 No.6
抑制率 =[ 1 -(ADrug -ABasal)/(AControl-ABasal)]
×100
2.4 PLO对 O· 2的清除作用
按文献 [ 14]方法进行 ,每组分为 1, 0.5, 0.1 mg/
mL三个浓度及阴性对照组(2次蒸馏水)、阳性给药
对照组(1 mg/mLVc),
清除率 =[ 1 -ADrug/(AControl-ABasal)] ×100
2.5 PLO对 ·OH的清除作用
参照文献[ 15]的方法进行 ,分组同上 。
清除率 =[ (ADrug-AControl)/
(ABasal-AControl)] ×100
2.6 PLO对 DPPH·的清除作用:
向 2.5mL65 μmol/LDPPH·溶液中加入 0.5
mL不同浓度的试样(以终浓度计),阴性对照组(2
次蒸馏水)、阳性给药对照组(50 mg/mLVc)同上 ,
总体积 3mL。用力摇匀 ,于室温下放置 30 min后于
光径 1 cm比色皿中测定 DPPH·混合溶液在 517
nm处的吸光值(A517)。
抑制率( )=(1 -ADrug/AControl)×100
2.7 PLO主要成分气相色谱分析
使用日本岛津 GC-9A气相色谱仪 , C-R2AX微
积分仪 , SE-54(AC-5)石英毛细管分析柱 ,柱长 30
m,直径 0.25 mm, FID检测器 ,柱温 90 ~ 220 °C, 10
°C/min程序升温 ,气化温度:230°C,检测器温度 220
°C,以 N2为载气 ,流量 40 mL/min,柱前压 1.7 ~ 2.0
kg/cm2 ,以 H2为燃气 ,流量 40 mL/min,压力 0.5 kg/
cm2进样量 0.12μL,用保留时间直接定性法鉴定挥
发油中各成分 ,面积归一化法定量分析单体含量。
2.8 PLO主峰重现性实验
精密吸取样品 0.12 μL,注入气相色谱仪中 ,按
上述色谱法进行实验 ,取同一天提取的香叶挥发油
6份 ,考察色谱峰保留时间的一致性 。
2.9 统计分析
将所得数据用 SPSS11.5计算平均值和标准
差 , 并进行 OnewayANOVAMultipleComparisons、
One-SampleKolmogorov-SmirnovTest和 Bibariate
Corelations统计学处理 。
3 结果
3.1 PLO对豚鼠心 、肝 、肾自发性脂质过氧化和
CCl4诱导肝脂质过氧化的影响
  由表 1可见除 PLO低剂量对肾的作用外 ,各组
PLO与阴性对照相比 ,对豚鼠肝 、肾 、心自发脂质过
氧化和 CCl4诱导的肝脂质过氧化有极显著的(P<
0.01)抑制作用。对高剂量组进行统计分析表明
PLO对豚鼠各器官脂质过氧化作用有极显著的差异
(P<0.01)其中对肝 、肾和心自发脂质过氧化抑制
作用最强 , PLO对肝 、肾能剂量依赖性地抑制 MDA
的生成 ,且有极显著的相关性(P<0.01)。其 IC50
为:140μg/mL(肾)。
3.2 PLO对 O· 2、· OH和 DPPH·的清除作用
  表 2和表 3中的结果表明各种浓度 PLO对
O· 2和 DPPH·的清除作用与阴性对照相比有极显
著的差异(P<0.01)。 1 mg/mLPLO对 O· 2 清除
作用及 PLO对· OH清除作用与阳性给药对照相比
无显著(P>0.05)的差异。高剂量组的统计分析显
示 PLO对 O· 2 、· OH自由基的清除作用有显著差
异(P<0.05), 对 O· 2 的清除作用显著地 (P<
0.05)高于 · OH组 。PLO对三种自由基的清除率
随药物浓度增大而增大 ,且有显著(P<0.05)的相
关性 。
3.3 PLO对 H2O2诱导红细胞氧化溶血的影响
如表 4所示 , PLO中 、高剂量抑制 H2O2诱导的
表 1  香叶油对豚鼠脏器自发性脂质过氧化和 CCl4诱导肝脂质过氧化的影响
Table1 EffectoftheessentialoilofPelargoniumgraveolens.L Her..leafonMDAgenerationspontaneouslyinhomoge-
natesofcavyvisceraandinducedbyCCl4 ( x, n=6)
Liver Kidney Heart CCl4 induced
Drug(mg/mL) A532 Inh( ) A532 Inh( ) A532 Inh( ) A532 Inh( )
control 0.685±0.029 - 0.188±0.008 - 0.223±0.031 - 0.608±0.018 -
PLO 1 0.457±0.021* 33.3 0.07±0.015* 62.8 0.08±0.018* 64.1 0.362±0.01* 40.5
  0.5 0.45±0.01* 26.0
  0.1 0.477±0.014* 30.4 0.097±0.011* 48.4 0.068±0.025* 70.0 0.505±0.014* 17.0
  0.01 0.577±0.026* 15.8 0.173±0.011 8.0 0.093±0.035* 58.3 -  - -
r -0.648 -0.735 -0.040 -0.981
Pr 0.004 0.001 0.874 0.000
  *P<0.01与 control比较。
857
2006年 6月
第 28卷 第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2006
Vol.28 No.6
表 2  香叶油对 O· 2 , 和· OH的清除作用
Table2  ThescavengingeffectofPLOonO· 2 and· OH ( x±s, n=6)
O· 2 · OH
Drug(mg/mL) A420 Sca( ) A536 Sca( )
control 0.598±0.021 - 0.334±0.013 -
PLO 1 0.522±0.008* 12.1 0.367±0.018* 8.3
 0.5 0.53±0.02* 10.8 0.354±0.01 5
 0.1 0.543±0.012* 8.6 0.348±0.007 3.5
 Vc 0.505±0.024*□ 15 0.348±0.018 3.5
Basal 0.004±0.005 - 0.733±0.012 -
 r 0.554 0.556
 Pr 0.017 0.017
  *P<0.01与 control比较 , □P<0.01与 Vc比较。
表 3  香叶油对 DPPH·的清除作用
Table3 ThescavengingeffcetofPLOonDPPH·
( x±s, n=6)
Drug(mg· mL-1) A517 Sca( )
control 0.494±0.005
167 0.052±0.003*□ 89.47
133 0.067±0.003*□ 86.44
100 0.091±0.004*□ 81.58
67 0.145±0.007*□ 70.65
Vc 0.031±0.001* 93.81
r -0.953 Pr 0.000
  *P<0.01与 control比较 , □P<0.01与 Vc比较。
表 4  香叶油对 H2O2诱导红细胞氧化溶血的影响
Table4 EffectofPLOthehemolysisofcavyRBC
inducedbyH2O2 ( x±s, n=6)
Drug(mg/mL) A415 Hemolysisextent/ Inh( )
control 1.500±0.032 100 -
PLO  0.5 0.443±0.522* 29.5 72.6
   0.1 0.933±0.108*□ 62.2 39.0
   0.01 1.283±0.075□ 85.5 14.9
Vc 0.425±0.042* 28.3 73.9
Basal 0.045±0.014 3.0 -
r 0.969  Pr 0.000
  *P<0.01与 control比较 , □P<0.01与Vc比较。
红细胞溶血作用极显著地(P<0.01)高于阴性对
照 , 0.5 mg/mL的 PLO与同剂量的 Vc对照抑制溶
血作用无显著性差异(P>0.05)。PLO的 IC50为:
179 μg/mL。且 PLO对红细胞溶血抑制作用有极显
著(P<0.01)的相关性。
  从上述结果中可以看出 , PLO具有抗氧化作用 ,
为进一步揭示药效物质基础 ,研究采用气相色谱法
对其组分进行了表征分析。
3.4 香叶天竺葵挥发油的表征分析
  香叶天竺葵叶中提取的挥发油得率为(1.87 ±
0.46)mL/kg。从表 5中可以看出 ,从 PLO中共鉴
定出 25种化合物 ,含量高于 2 的主要成分有香茅
醇。香叶醇 、甲酸香茅酯 、异薄荷酮 、β-古芸烯 、芳樟
醇 、丁酸香叶酯 、甲酸香叶酯 、β-丁香烯 、丙酸香叶酯。
对其进行归类发现 , PLO的组分中含有大量醇 、酮和
烯类还原性较强的物质 ,醇类含量最高为 45.56 ,酯
类含量次之(25.2 ),烯烃(8.5 ),酮类(7.75 ),
醚类(0.81 ),醛类(0.16 )。检出的主要成分中酯
类有 11种 ,醇类 5种 ,烯烃 4种 ,醚和酮各 2种 ,醛类
1种。
表 5  香叶天竺葵挥发油化学表征归类
Table5  MainchemiclcompositionofPLO
类别 名称 Name 含量( )Content 类别 名称Name 含量( )Content
醇 芳樟醇 Linallol 3.12 酯 甲酸香茅酯 Citronelylformate 10.3
薄荷醇 Menthol 0.16 甲酸香叶酯 Geranylformate 2.62
α-松油醇 α-Terpineol 0.28 香叶酸甲酯 Methylgeranate 0.53
香茅醇 Citronelol 30.06 乙酸香茅酯 Citronellylacetate 0.48
香叶醇 Geraniol 11.94 乙酸香叶酯 Geranylacetate 0.54
烯烃 波旁烯 Bourbonene 0.84 丙酸香叶酯 Geranylpropionate 2.02
β-丁香烯 β-Caryophylene 2.28 丁酸香茅酯 Citronelylbutyrate 1.66
β-古芸烯 β-Guaiadene 4.09 己酸-β-苯乙酯 Caproate-β-phenylethyl 1.1
木罗烯 Muurolene 1.29 丁酸香叶酯 Geranylbutyrate 3
酮 薄荷酮 Menthone 0.15 戊酸香茅酯 Citronelylvalerate 1.27
异薄荷酮 Isomenthone 7.6 戊酸香叶酯 Geranylvalerate 1.68
醚 C-玫瑰醚 C-roseoxide 0.55 醛 香茅醛 Citronela 0.16
T-玫瑰醚 T-roseoxide 0.26
858
2006年 6月
第 28卷 第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2006
Vol.28 No.6
3.5 PLO主峰重现性实验
  从表 6色谱数据中 ,我们选择了各类别的代表
化合物及含量超过 3 的峰进行相对标准偏差
(RSD)分析 ,考察色谱峰保留时间的一致性 ,各化合
物色谱峰保留时间的 RSD小于 0.440 。各组峰平
均相对总面积 71.219 ,占绝大部份。
表 6  各类代表化合物峰的保留时间
Table6  Theretentiontimeofeachmaincomponents
类别 名称 Name 保留时间(min) RSD
1 2 3 4 5 6
醇类 芳樟醇 Linalol 4.875 4.833 4.883 4.875 4.883 4.876 0.388
香茅醇 Citronelol 6.642 6.592 6.650 6.642 6.650 6.633 0.330
香叶醇 Geraniol 7.008 6.958 7.017 7.008 7.025 7.008 0.336
酮类 异薄荷酮 Isomenthone 5.842 5.783 5.850 5.842 5.850 5.825 0.440
酯类 甲酸香茅酯 Citronellylformate 7.142 7.083 7.150 7.150 7.150 7.133 0.367
烯烃 β-古芸烯 β-Guaiadene 9.450 9.400 9.450 9.458 9.458 9.442 0.232
醚类 C-玫瑰醚 c-roseoxide 5.000 5.017 5.017 5.017 4.967 5.008 0.390
T-玫瑰醚 t-roseoxide 5.225 5.242 5.242 5.242 5.192 5.233 0.373
醛类 香茅醛 Citronela - 5.508 5.500 5.508 - 5.500 0.084
3.6 PLO单体对 DPPH·的抗氧化清除作用
  为进一步确定 PLO挥发油组分中抗氧化作用
的主要物质基础 , 研究选取 7种 PLO的单体 ,以
10 的浓度考察其对 DPPH·的清除作用。从表 7
中可见含量占 PLO组分中 30.06 的香茅醇抗氧化
能力与 PLO接近 ,乙酸香茅酯 、松油醇和乙酸香叶
酯虽有较强抗氧化作用但其总含量仅为 1.3 。提
示 ,香茅醇可能在 PLO的抗氧化中起主导作用。
表 7  PLO单体对 DPPH·的清除作用
Table7 TheantioxidantionofmonomerofPLO
A517 Sca( )
香叶油 PLO 0.191±0.004 59.40
乙酸香茅酯 Citronelylacetate 0.215±0.015 44.87
松油醇 Terpmeol 0.293±0.012 25.00
乙酸香叶酯 Geranylacetate 0.239±0.013 38.78
芳樟醇 Linalol 0.366±0.012 6.09
香叶醇 Geraniol 0.353±0.005 9.62
二甲基硫醚 Dimethylsulfide 0.375±0.010 3.85
香茅醇 Citronelol 0.176±0.005 54.81
4 讨论
脂质过氧化反应是指自由基与细胞膜上的不饱
和脂肪酸发生酶促或非酶氧化反应 ,生成对细胞具
有毒性作用的过氧化物的过程 [ 18] 。丙二醛(MDA)
是体内脂质过氧化代谢产物 ,一般常用其反映体内
脂质过氧化代谢情况 ,作为评定自由基生成及其对
膜脂双层结构破坏的指标 。本实验中 PLO显示出
很强的抗脂质过氧化作用 。
四氯化碳能在肝脏中被代谢形成自由基 ,引起
脂质过氧化并损害肝脏 [ 19, 20] 。以往 ,用 CCl4 研究
中毒性肝炎和肝功能障碍模型多为体内实验 ,按照
文献介绍的 [ 10]模型研究了 PLO在 CCl4引发自由基
反应中的作用 ,发现其 PLO抑制 CCl4 肝损伤的能
力都极显著地(P<0.01)高于对照 。
氧自由基可引起细胞损伤和死亡 ,皮肤衰老及
某些皮肤疾病的发生。致使抗自由基生物学 、医药
学与功能食品科学的研究成为一个十分活跃的研究
领域 [ 22] 。从表 2结果可见 , 虽然 PLOSC50高于 1
mg/mL,但是与阴性对照相比有极显著时差异(P<
0.01),仍显示出一定的自由基清除作用 ,其中 PLO
高剂量对 · OH清除作用与 Vc相比无显著(P>
0.05)的差异。
香叶挥发油能明显抑制 H2O2诱导的红细胞氧
化溶血却对 H2O2 产生的 · OH清除作用不强提示
该挥发油不直接作用于 · OH,但可阻止· OH对细
胞膜的破坏作用。
不同收获期所得到的挥发油对其得率和各成分
的含量及组成有一定的影响 [ 23] 。因此 ,对香叶天竺
葵挥发油进行化学表征是进一步分析其药效的基
础。本实验中所提取的挥发油中色谱分析表明 ,醇
类物质(45.56 )含量最高 ,单体抗氧化实验证明 ,
香茅醇对 DPPH·的清除作用与 PLO对照接近 ,提
示该部分物质在 PLO中承担了抗氧化的主导作用 。
综上研究结果表明 PLO有很强的抗氧化和抑
制 H2O2 诱导红细胞氧化溶血作用 ,其抗氧化能力
和组分的关系 ,初步显示香茅醇可能是 PLO抗氧化
的主要物质基础。
致谢:香叶天竺葵挥发油气相色谱分析由云南昆明
艾谐香料有限公司完成 。
参考文献:
[ 1]  杨凤刚 ,怎样使香叶天竺葵产量高出油多 [ J] .云南农业科
859
2006年 6月
第 28卷 第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2006
Vol.28 No.6
技 , 1995, (2)24-25.
[ 2]  张存旭 ,宋 敏 , 张粉粉 ,等.香叶组培快速繁殖的研究 [ J] .
西北林学院学报 , 2003, 18(2):40-41.
[ 3]  方洪钜 ,苏绣玲.刘红岩 ,等.香叶天竺葵挥发油的化学成分
及抗瘤作用 [ J] .药学学报 , 1989, 24(5):366-371.
[ 4]  李大红 ,姚 雷,黄 健.两种天竺葵的精油成分和矿物元素
的研究香料香精化妆品 [ J] .2004, (01):8-12.
[ 5]  周仲良.香叶天竺葵抗肿瘤有效成分研究 [ A] ,全国挥发油成
分研究学术讨论会论文摘要汇编 [ C] .杭州:中国植物学会 ,
1981:87.
[ 6]  韩国柱 ,姜文华 ,薛华忠 ,等.复方香叶天竺葵油治疗尖锐湿
疣临床疗效报告 [ J] .临床皮肤科杂志 , 1993, 5:249-251.
[ 7]  王 毅 ,程翼宇.中药组效关系辨识方法学与计算理论研究
思路与策略 [ J] .中国天然药物 , 2003, 1(3):178-181.
[ 8]  许申鸿.天竺葵花抗氧化作用的研究 [ J].中国药学杂志 ,
2000, 35(4):234-236.
[ 9]  张承曾.天然香料手册 [ M] .北京:轻工业出版社 , 1989:196.
[ 10]  中国香料植物栽培与加工编写组.中国香料植物栽培与加工
[ M] .北京:轻工业出版社 , 1985:272.
[ 11]  陈 奇.中药药理研究方法学 [ M].北京:人民卫生出版社 ,
1993:76.
[ 12]  陈 奇.中药药理研究方法学 [ M].北京:人民卫生出版社 ,
1993:941.
[ 13]  李海蓉 ,侯少范.CCl4 体外引发自由基反应的简易实验方法
[ J].中国环境科学 , 2000, 20(5):422-424.
[ 14]  郑荣梁.自由基生命科学进展 [ C].第 7集.北京:原子能出版
社 , 1999:118-119.
[ 15]  金 鸣 ,蔡亚欣 , 李金荣 , 等.邻二氮菲 -Fe2+氧化法检测
H2O2 /Fe2+产生的羟自由基 [ J] .生物化学与生物物理进展 ,
1996, 23(6):553-555.
[ 16]  CoteleNicle, BemierJean-Luc:CateauJean-Pierre, etal.Antiox-
idantpropertiesofhydroxy-flavones[J] .FreRadBiolMed, 1996,
20(1):35-43.
[ 17]  MdlorsA, TappelAL.TheinhibitionofMitochondrialPeroxida-
tionbyUbiquinoneandUbiquinol[ J].JBiolChem, 1966, 24
(19):4353-4356.
[ 18]  仲 飞 ,李秀锦.脂质过氧化对机体的作用及其在兽医学研
究中的意义 [ J] .河北农业技术师范学院学报 , 1996, 10(4):
59-64.
[ 19]  李 伟 ,郭 英 ,杨淑娟.葡萄籽提取物对四氯化碳诱导大鼠
脂质过氧化反应的影响 [ J] .白求恩医科大学学报 , 2001, 27
(6):606-607.
[ 20]  彭爱军 ,贺 德.阿魏酸钠对四氯化碳急性染毒大鼠肝脏脂
质过氧化与抗氧化酶的影响 [ J] .中华实用医药杂志 , 2004, 4
(4):298-299.
[ 21]  薛建华 ,刘忠权 ,李政年 ,等.维生素 C和谷胱甘肽对离体肺
泡巨噬细胞超微弱发光的影响 [ J] .营养学报 , 2000, 20(4):
322-324.
[ 22]  雷学军.清除氧自由基的功能性食品 [ J] .食品工业 , 2002,
(3):41-44.
[ 23]  Bruneton.Pharmacognosy, phytochemistry, medicinalplants
[ M].Paris:Technical& DocumentationPublisher, 1999:483-
578.
新疆桑叶中挥发油化学成分的 GC/MS分析
孙 莲 1 ,  符继红 2 ,  张丽静 2 ,  孟 磊 1 ,  刘雅婷 1
(1.新疆医科大学药学院分析 /药分教研室 新疆 乌鲁木齐 830054;2.新疆大学理化中心 新疆 乌鲁木齐
830054)
收稿日期:2005-08-15
作者简介:孙 莲(1961~ ),女 ,副教授 ,硕士 ,从事天然药物的研究 ,电话:0991-4362471。
关键词:桑叶;挥发油;气相色谱质谱联用
摘要:目的:建立一种新疆桑叶中挥发油的化学成分分析的方法。方法:采用乙醚超声萃取-水蒸气蒸馏的方法提取桑叶
中的挥发油 , 用气相色谱-质谱法对桑叶中挥发油的化学成分进行了分析 。共分离出 80余峰 , 鉴定出了 55种物质 ,占挥
发油总成分的 90 以上。用面积归一化法确定了各组分的相对含量。结果:所分离出的化合物中含有烷烃(C10 ~ C40)、
烯烃 、不饱和醇 、不饱和醛 、不饱和酮 、羧酸 、酯 、杂环化合物及芳香族化合物。主要成分为正十八烷(9.11 )、邻苯二甲
酸二(2-甲基)丙酯(8.92 )和 3, 7, 11, 15-四甲基-2-十六碳烯-1-醇(7.19 )。挥发油中还含有少量的萜类化合物。结
论:本方法稳定可靠 ,重现性好 ,适用于中药挥发油的化学成分分析。
中图分类号:R284.1     文献标识码:A     文章编号:1001-1528(2006)06-0860-05
ChemicalcomponentofessentialoilinMulberryLeavesbyGC-MS
860
2006年 6月
第 28卷 第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2006
Vol.28 No.6