全 文 ：·化学成分 ·
香叶树叶精油的 C G一 M S分析与抑菌活性
中山大学生命科学学院 (广州 1502 7 5) 杨得坡 王发松 彭劲甫
中山大学测试中心 (广州 1502 7 5) 任三香
摘要 本文采用 C G一 M S技术分析了香叶树 (几刀凌m c o
~
H e
l ns l
.
)叶精油的化学组成 ,测定了 23
种成分的结构 与相对含量 。 主要成分为 (一 )一斯巴 醇 ( 2 . 50 % ) 、 1 , 3 , 3一三 甲基一内一 2 一降冰片烷醇乙 酷
( or
.伪% ) 、氧化丁香烯 ( 6 . 74 % )和大根香叶烯 (B 6 . 7l % )等 。 体外对八种人体皮肤真菌或细菌抗菌试
验表明 ,该挥发油具有强大的抗菌活力 , MI C值位于 0 . 08 一 0 . s n d / L 之间 。
关键词 香叶树 精油 气一质联用 抗真菌 抗细菌
香叶树 (及刀拢阳
~
H
elnS
I
.
)为樟科山
胡椒属常绿植物 , 中国半特有种 , 主要分布在
湖北 、 陕西 、 浙江 、 广东 、 云南等省 以及 中南
半岛北部 。 常见于干燥砂质土壤 , 散生或棍生
于常绿或半常绿阔叶林中。 该植物是我国部分
少数民族地区 (如广西 、 云南等 )民间使用 的草
药 , 叶及树皮味微苦涩 、 性温 , 有 祛 风 、 散
热 、 杀虫 、 消炎 、 止血等功效 , 可用于治疗支
气管炎 、 跌打损伤及疮疥癣症等 。 本品历代本
草均未记载 , 仅在 ( 中国植物志 》 ( v of . 3 1 ) 、 《中
药大词典》及有关地方植物志等有形 态学 的描
述 。 直到 目前为止 , 尚未见有关其化学成分和
药理活性的研究报道 。 笔者 1998 年 8 月在湖
北西南山区进行了香叶树植物资源的调查 , 采
集了植物标本 , 进行了系统的植物化学和药理
作用的研究 , 本文是关于该植物精油 叶的 GC -
M S 分析与抗菌 (皮肤真菌和细菌 )的研究结果 。
该项工作对于挖掘民间药用植物和临床用药经
验 , 开发利用香叶树资源 , 寻找新的天然抗菌
新药等均有重要意义 。
, 材料与方法
1
.
1 样品来源和挥发油提取 香叶树 (及刀拢 ar
~
H~ l) 叶采自湖北 巴东
, 经 中山大学
生命科学学院张宏达教授和缪汝槐教授鉴定 。
样品阴干后粉碎 , 用水蒸气蒸馏 法提取精油 ,
油蓝绿色 , 出油率 0 . 32 % (W W ) 。
1
.
2 C-C MS 分析条件 分析在 美 国 iF n igan
v o y昭e r GC 一MS 仪上进行 , 色谱柱 SE一54 ( 30 m
x o
.
2 5 m
x 0
.
2 5 脚 ) 。 载 气为氦气 , 流速 l
12 8
.
司 /而 n ; 电离方式 lE , 电离能 70 eV ; 柱初温
60 ℃ ( 1 而 n) , 程序升温 10 ℃ / 而 n ,终温 2 80 ℃ ( 1
而n) ;无分流进样 。 标 准谱库为美国 l Bix 和
N IS T谱库 , 相对含量的确定采 用面积 归一化
法 。
1
.
3 抑菌药敏实验
1
.
3
.
, 供试菌种及来源 : 四种供试真菌 为从
皮肤病患者身上分离的野生菌株 (中山医科大
学 ) , 保存和培养 于萨氏培养基 ; 四 种细菌是
中山大学生命科学学院微生物室保藏的典型实
验菌株 , 培养于营养琼脂培养基 。 这些微生物
的敏感性对临床应用有代表性意义 , 多数是国
家中药新药研究的推荐菌株 。
1
.
3
.
2 接种与最低抑制浓度 ( M l c )测定〔` , 3〕:
小抱子菌 (M ic or spo ur n l )如羊毛状小抱子菌和石
膏样小抱子菌是将培养 5 一 or 天的菌落切成 5
~
x s ~ 的小方块
, 以菌落面平铺在药物培
养基表面进行接种 ; 其他真菌如新型 隐球菌 、
申克氏抱子丝菌和细菌均用无菌水制成一定浓
度的袍子悬浮液 , 涂布于培养基表面接种 。 能
够完全抑制真菌或细菌生长的最低浓度为该菌
种的 M IC 。 首先将精油用 95 % 乙醇配制成 1%
一 10 % (Wv) 的药物母液 。 把该母液均匀混合
于约 60 ℃的热培养基 中 , 制成 0 . 01 一 1 拜F 而
的系列浓 度梯度药物 培养基 。 冷却后接种培
养 , 观察真菌和细菌的生长情况 , 确定 MI oC
所有八种供试菌 M IC 的实验条件 (培养温度和
时间 )随菌种而异 (表 2 ) , 其数值为 5 次重复实
验的平均值 。
中药材第 2 卷第 3期 19 9年 3 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1999. 03. 013
2 结果与讨论 3一三甲基 一醋酸基一内 一2 一降冰片烷醇 ( 1 0. 0 6% )、
2
.
, 通过 GC一 M S技术 , 我们共分离鉴定了 26 氧化丁香烯 ( 6 . 74 % )和大根香 叶烯 B ( 6 . 71 % ) ,
个峰 (图 l) ,确定了其中 23 种组分的化学结构 结构式如图 2 所示 。 另外 ,根据我们分析发现 ,
与相对 含量 , 鉴定 成分 占总 组分 的 93 . 25 % 香叶树 (几刀珑 ar co
~
is )果实精油 的主要成分
(表 1 ) 。 这些 成分均为菇类及其含氧衍生物 , 为双 ( 2一经 乙基 )月 桂酞 胺 ( 43 . 5% ) 、 正 癸 酸
其中包括单菇类三种 , 占总含量的 6 . 5 % ; 单 ( 35 . 82 % ) , 与叶的 主要成分完全不 同 , 抗菌活
菇含氧衍生 物 1 种 , 占 1.0 60 % ; 倍半菇 10 性也有差异 (将另文报道 ) 。
种 , 占 3 0 . 67 % ; 倍半砧含 氧衍生物 9 种 , 占 2 . 2 由表 2 可以看出 , 在含 0 . 8 111 / L 的药物
45
.
45 %
。 从相对含量的高低可 以看 出 , 该挥 培养基上 , 香叶树叶精细能够完全抑制所有八
发油的主要成分为 (一 ) 一斯 巴醇 ( 2 . 50 % ) 、 1 , 3 , 种供试微生物的生长繁殖 与菌落形成 ,包括 四
表 , 香叶树叶精油的化学成分与相对含 , (% )
峰号 化合物名称 分子量 相对含量 (% )
1 3
,
6, -6三甲基 一 2一降旅烯 2一 oN单~
,
3
,
6, -6 tinr
l e thy l
一
136 1
.
2
2 茨烯 。 四 Pll e en 136 3 · 85
3 ( 15
,
5 5 )
一
(
一
)
一
2 ( 10卜旅烯 2 ( 10 )一 R en , ( 1 5 , 5 5 ) 一 (一 )一 13 6 1
.
4
4 1
,
3
,
3
一三甲基 一内一2 一降冰片烷醇乙醋 2 ~ N o r场 m an o l , 1 , 3 , 3 - t n l刀 e t ll y l~ , ac et aet , e nd -o , 1% 1.0 肠
5 3 ( Z
,
E )
一
1
,
5
一二甲基 一 8一 ( 1一甲基乙烯基 )一 1 , 5一环癸二烯 204 5 . 39
1
,
5
~
C yc led
e c碱en , l , 5 ,山me ht yl . 8一 ( 1~ n l e thy le ht e l l y l~ )一 , 导 ( z , E ) -
6 丁香烯 C娜 o p l l yl e n e Z以 .2 以
7 (
一
)马兜铃烯 (一 ) ~ A ir s t o len Z以 1
.
21
8 ( l aR
,
7 R
,
7aR
,
7比 )一 ( + )一 l a , 2 , 3 , 5 , 6 , 7 , 7 a , 7卜八氢化一 1 , l , 7 , 7-a 三甲基 一 I-H 环丙基蔡 2以 2 . 6飞H一vcC lon吧〔( l正 , 7 R , 7 aR , e ne , l a , 2 , 3 , 5 , 6 , 7 , 7 a , 7卜 co t a hy cl-or l , l , 7 , 7 a- t e t ran l e thy卜1 ,
供以件乙,`今ù9 1 ( 1 0 ) , 11一雅槛兰二烯 E r e mo p ih l a- l ( 10 ) , 11一id en
10 1 (5 )
,
11
一愈创木二烯 uG 苗a . 1 (5 ) , 11一 id en
11 3
,
4
,
4 a
,
5
,
8
,
8卜六氢化斗异丙基一 l , -6 ,二甲基 一蔡
N a p ll thal e ne
,
3
,
4
,
4
a , 5
,
8
,
s a- h e x al w dl 卜4 一 iso p or p yL I , 6 idl n e thy l~
12 1 ( 10 )
, 率草澄茄二烯 C a山的a ~ 1 ( 10 ) ,今 id e ne
13 1 (5 )
,
7 ( 1 1 )
一愈创木二烯 C u ia -a 1 (5 ) , 7 ( 11 )一山 e ne
14 大根香叶烯 B C短mr 配。 ne B
巧 未鉴定
16 。 )一斯巴醇 (一 ) ~ Sp a t llul e n o l
17 未鉴定
18 氧化丁香烯 Q叮叩 hy l e ne 面de
19 未鉴定
20 檀香醇 黝叫目d
2
.
08
2
.
34
4
.
75
2 1 l aR ( l ` , 4 a
1体 cCr lo Por P
: 7旦) 一 l , 1
L
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,
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一三甲基斗甲烯基一十氢化一 l 一 H一环丙基莫一 7一醇
1
.
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、
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.
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1
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.
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.
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一服山朋d , 1~ m e thy l 一 8 -界醇~ n ae thy lehltr
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26 白葛蒲醇 1 . 6 1
中药材第 2 卷第 3期 19卯 年 3 月
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图 1 香叶树叶精油组分的总离子流图
再、 峪O 了
1,3
,
3
一三 甲基一 2一内降冰片烷醇乙脂 (峰 4 ) (一卜斯巴醇 (峰 16 )
仁分 下人根香叶烯 B (峰 14 )
氧化丁香烯 (峰 18 )
图 2 香叶树叶精油四种主要成分的化学结构式
表 2 香叶树叶精油对八种供试菌的 扮n C 值
, , 培养温度 MI C菌种 J公二黑紧 , v1黑 、, “ 和时间 (司 / L)
真菌菌株
新型隐球菌 伪似毗玛 砚晌
~
37 ℃ 2天 .0 2
申克氏抱子丝菌 枷。功乙厉众 : hce 爪汤11 25 ℃ 3天 .0 45
羊毛状小抱子菌撇浏卿二 如叨帅 25 ℃ 6天 0 . 4
石膏样小抱子菌 M . 匀哪翻抓 25 ℃ 6天 .0 4
细菌菌株
大肠杆菌 凡 c触成知油 col i 37 ℃ 1天 0 . 8
枯草杆菌 丑叱沼。 : ubt 汉15 37 ℃ 1天 .0 08
白葡萄球菌 5吻 hy奴众 c山 确二 37 ℃ 2天 .0 08
四联球菌 材必现配 c山 似似卯川” 37 ℃ 2天 0 . 2
种皮肤致病真菌 , 其中新型隐球菌的精油敏感
性最高 , 该真菌主要引起脑 、 肺及皮肤的深层
感染 (隐球菌病 C乃 , toc oc c os is ) , 最近研究发现 ,
8 一 30 % 的爱滋病患 者都有隐球菌并发感染 ,
130
.
而到 目前 为止 , 还没 有一个 药物能 够完全治
疗陈 , 〕 ; 申克氏抱子丝菌可引起皮肤及皮下淋
巴管的慢性感染 (抱子丝菌病 Sop o t icr h os i S ) , 而
小抱子菌则可侵犯人与动物 (宠物猫 、 狗等 ) ,
引起皮肤的表皮癣 菌病 ( D e n 刀 a to ph yt o s is )如头
癣 、 体癣和股癣等困 。 在抗细菌实验中 , 枯草
杆菌和 白葡萄球菌最敏感 , M IC 为 0 . 08 n 1F L ,
而大肠肝菌稍弱 , M IC 为 0 . 8 d / L , 这些细菌
的抗性对药物筛选 有重要 指导意 义 。 一般来
讲 , 在药物培养基上 , M IC 大于 0 . 5 而 / L 的精
油作为外用或内服药物使用 时 , 会产生刺激 、
过敏等副反应 。 从化学结构与药效关系分析 ,
香叶树叶精油 的抗菌活性可能 与其重要成分
(
一
)
一斯 巴醇或氧化丁香烯等 的存在有关 , 但 因
其组成成分复杂 , 该活性表达也可能是多种成
分协同作用的结果 。
3 结论
香叶树广泛分布在我国黄河 以南各省 区 ,
常绿 , 叶四季可采 。 其精油或挥发油对人体常
见的致病真菌和 细菌均表现 出很好的抑 制作
用 , 最小抑制浓度 M IC 很低 , 从治疗 和 临床
使用的角度讲 , 这是一个不会产生任何刺激或
皮肤耐药性反应的浓度 。 另外 , 香叶树叶精油
具迷人香气 , 这是一种比较理想的芳香疗法天
然药物 , 植物化学成分的分析有助于了解精油
的抗菌作用机制 。 我们认为 : 香叶树叶精油是
一种很有研究价值和开发前景的中药或芳香油
植物资源 , 在医药或香精香料工业上将会有很
好的应用前景 。 我们将在抗菌药理活性指标的
指引下 , 从该植物 (果 、 叶等 )的挥发或非挥发
部分 , 分离和纯化抗菌有效成分 , 并测定新化
合物的结构 , 筛选天然抗菌药物 。
二 本课题系广东省自然科学基金资助项 目
参 考 文 献
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中药材第 2 卷第 3 期 1卯 9 年 3 月
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.
MS
; 儿吐伍川邵l ; A刀d ha e ietr 以
旱柳叶中抗血栓 、 抗动脉硬化活性成分的研究
吉林农业大学中药材学院 (长春 1301 18) 张 晶 郑毅 男 韩立冲 `
摘要 本文从早柳叶中分离并鉴定了 3 个单体化合物 , 即芹黄素一7 一 0 一件D一毗喃葡萄糖醛酸贰 、 木择
草素一7 一 -o 件-D 毗喃葡萄糖醛酸贰及化合物 1 。 前两者为首次从柳属植物叶片中获得 , 后者为首次发现
的新化合物 。 测定它们对花生四烯酸代谢的影响 ,结果发现 :它们均可选择性抑制花生 四烯酸代谢产物
12
~
HD陀 的生成量 ,预示它们可防治动脉硬化及过敏症 ;芹黄素一7 一。 件D一毗喃葡萄糖醛酸贰水解后的贰
元芹黄素可抑制 .以几 的生成量 ,提示其对血栓的形成有防治功效 。
关键词 早柳叶 芹黄素 一7 一 -o 件-D 毗喃葡萄糖醛酸贰 木梅草素一 7 一仆卜卜毗喃葡萄糖醛酸贰
旱柳 叶是杨柳科柳属植物旱柳 (阮撇 恻-`战勿an oK idZ )的叶片 , 据载 “ 旱柳嫩叶或枝叶 ,
其性寒 、 味微苦 , 具散风 、 祛湿 、 清湿热 、 治
黄疽型肝炎 、 风湿性关节炎 、 湿疹 、 地方性 甲
状腺肿等功效 ” 〔’ 〕。 旱柳叶化学成分的研究目
前国内外尚未见报道 。 现将旱柳叶化学成分的
分离鉴定和药理活性测试结果报道如下 。
1 材料与方法
中药材第 2 卷第 3 期 19卯 年 3 月
1
.
, 实验材料 旱 柳 ( as 低 anI tS I拓阮an )叶 : 5
月 中旬采集于吉林农业大学校 园内 , 采后室温
阴干 。 实验动物 : iw s atr 鼠 , 150 一 20 9 。 ’ 4 c 一标
记花生 四烯酸购 自 N ew E n gl a n d Nuc leal 。 高效
薄层板 ( H团几C ) : 德国 eM er k 公司生产 。 其它
试剂均为分析纯 。
1
.
2 实验方法
,
.
2
.
1 化合物 的分离 : 干燥柳叶用 乙 醚脱脂
13 1