全 文 ：收稿日期: 2005- 01- 06
基金项目:广东省科技计划项目( 2004B33001022)
作者简介:魏刚( 1969- ) ,男,副主任中药师,硕士研究生导师。
文章编号: 1009 - 5276( 2005) 07 - 1249 - 03
五指毛桃 GC-MS特征指标成分群探讨
魏 刚,刘春玲,何建雄,庞程罗
(广州中医药大学第一附属医院实验中心,广东 广州 510405)
摘 要: 目的:建立五指毛桃 GC - MS 分析色谱条件, 初步拟定其乙醇提取液特征指标成分群, 为五指
毛桃药材质量评价筛选指标。方法: 采用 GC - MS 法对不同产地(韶关、清远、从化、帽峰山、湛江、揭阳、河
源) , 不同采收年份( 1、2、3、4 年生) ,不同农家类型(不裂型、大叶型、大果型、细叶型) , 不同采收季节品种共
17个五指毛桃样品进行分析。结果: 17 个样品乙醇提取液中均含有成分 A(未鉴定)、补骨脂素、十六酸、佛
手内酯、油酸、亚油酸、十八酸等主要成分。结论: 7 个主要成分的出峰先后顺序及相对含量具备特征性, 形
成了五指毛桃特有的 GC - MS 指纹地貌, 可作为五指毛桃内在质量评价和鉴定的依据。补骨脂素应是五指
毛桃指标成分群中最有价值的质量评价指标,其次为佛手内酯。
关键词: 五指毛桃;特征指纹图谱; 补骨脂素; 佛手内酯; GC - MS
中图分类号: R2851 5 文献标识码: B
五指毛桃为桑科植物粗叶榕 Ficus hirta Vahlde的干
燥根, 华南地区习用中药材, 具有健脾益气、化湿行气之
功效。本品除药用外, 在广东民间大量食用,尤其褒汤香
味浓郁, 深受客家民众喜爱。为探讨其芳香来源, 林
励 [1 ]、刘春玲 [2 ]曾采用 GC - MS 对其挥发性成分进行初
步分析, 结果显示挥发油含量仅为 01 025 ~ 01 03mL /
100g ,且组分除含大量脂肪酸外, 未见有明显特征性成
分。再进一步采用乙醚、乙醇提取, 经 GC - MS 分析, 发
现乙醇提取物组分较有特征性 [2 ] ,含有大量的补骨脂素、
佛手内酯等香豆素类物质。游离的香豆素溶于沸水, 从
而散发出香气。由此基础我们对不同产地、采收年份、农
家类型、采收季节样品的乙醇提取液进行了比较分析, 报
道如下。
1 仪器与样品
11 1 仪器与试药 岛津 GCMS - QP5000 型气相色谱质
谱联用仪; 针筒式微孔滤膜过滤器由天津市腾达过滤器
厂生产; 乙醚、乙醇等试剂均为分析纯。
11 2 样 品 不同产地 (韶关、清远、从化、帽峰山、湛
江、揭阳)的五指毛桃均采集于原产地野生品种; 不同年
份产( 1、2、3、4 年生) ,不同农家类型(不裂型、大叶型、大
果型、细叶型)等样品均 2003 年 8 月采自河源市五指毛
桃规范化种植基地; 不同季节品种 ( 1、4、7、10 月)分别于
2003 年 1 月、4 月、7 月、10 月采自河源市五指毛桃规范
化种植基地。以上样品经广州中医药大学中药学院药植
鉴定教研室鉴定为粗叶榕 F icus hir ta Vahlde的根, 洗净,
凉干, 粉碎后干燥保存。
2 方法与结果
21 1 样品制备 取五指毛桃粗粉 3g ,置 10mL 具塞试管
中, 加乙醇至 10mL, 超声提取 30min,室温静置挥发至上
清液约 1mL 供分析用。
21 2 色谱条件 GC: DB - 1 石英毛细管色谱柱( 30m @
01 25mm) ;进样口温度 250 e ,接口温度 230e ; 载气为高
纯度氦气, 流速为 11 3m L /min; 柱前压为 80kPa, 分流比
3: 1, 进样量为 110LL; 峰面积归一法计算各化合物的相
对含量;升温程序: 柱温 60 e , 平衡 3min, 以 10e / min
的速率升到 280 e , 保持 3min, 可达到较好分离; MS: EI
源( 70ev) , 双灯丝; 质量范围 m /z 40 - 400 全程扫描, 扫
描间歇 11 0s。
21 3 样品检测 取每批次样品 1mL 针筒式微孔滤膜过
滤,取 110LL进样分析, 总离子流图见图 1。通过计算机
自动检索与标准图谱对照,在 161 5~ 23min时段, 鉴定了
其中 6 个化合物,结果见图 1, 表 1、表 2。
21 4 指标成分群特征分析 由表 1可见: ¹ 7 个不同产
地的品种均含有上述成分,其中补骨脂素、佛手内酯为香
豆素类成分,十六酸、油酸、亚油酸、十八酸均为脂肪酸类
成分,这些成分在沸水中煎出均能产生香气,五指毛桃的
香味应是这些成分综合作用的结果。º从相对含量来
看,脂肪酸类均值合计为 74104% , 明显较香豆素类的
171 79%为高, 但其变异系数 22168% ~ 33194% 则较两
个香豆素的变异系数 951 53%、851 76% 明显稳定, 表明
两个香豆素成分因产地不同含量差异较大, 提示香豆素
类成分似更能体现出药材质量的差异。»将 7 个产地样
品的两个香豆素类成分的相对含量进行相关分析, 结果
显示两者具有高度相关性。以补骨脂素为自变量、佛手
内酯为因变量,结果 y= 01 414+ 01 160x, R = 01 950、P=
01 001,提示两个香豆素类成分具有内源性, 或者同一生
成途径。
21 5 药材质量评价指标的拟订 采收年份 从药农实
际经验来看,河源地区的药农一般种植 3~ 4 年后采收。
由表 2 可见,补骨脂素、佛手内酯随着年限的增长, 含量
明显不断增大,尤其第 4年的补骨脂素突进,佛手内酯增
第 23卷 第 7期
2 0 0 5 年 7 月
中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 23 No. 7
Jul . , 2 0 0 5
中医药
1249
学刊
DOI：10.13193/j.archtcm.2005.07.91.weig.039
图 1 五指毛桃醇提液 GC - MS 总离子流图
11 未鉴定A; 21 补骨脂素; 31十六酸; 41 佛手内酯; 51 油酸+ 亚油酸; 61 十八酸
表 1 不同产地五指毛桃主要特征成分 GC - MS 检测结果
成分相对含量%
未鉴定A 补骨脂素 十六酸 佛手内酯 油酸+ 亚油酸 十八酸
产地 韶关 1148 37179 23179 5129 22135 617
清远 1182 15154 33142 2199 30108 11132
从化 1197 9174 39111 1187 26143 14109
帽峰山 1171 5101 39117 1142 31187 12168
湛江 1143 3167 41145 0191 27122 16131
揭阳 1114 1159 32191 0135 50110 7143
河源 2193 31154 22159 6182 21157 718
均值 1178 ? 0158 14198 ? 14131 33120 ? 7153 2181 ? 2141 29194 ? 9164 10190 ? 3170
RSD% 32158 95153 22168 85176 32120 33194
表 2 河源种植基地不同年份、季节、农家类型主要特征成分 GC - MS 检测结果
成分相对含量%
未鉴定A 补骨脂素 十六酸 佛手内酯 油酸+ 亚油酸 十八酸
年份 一年生 3141 3101 41158 1165 24160 21111
二年生 2178 6138 30137 1170 48116 6166
三年生 2194 9180 32167 4169 3410 0105
四年生 2193 31154 22159 6182 21157 718
季节 一月 1193 5123 37151 0189 32194 12194
四月 1113 0138 34162 0143 44183 13166
七月 2194 9180 32167 4169 3410 0105
十月 1104 29141 14144 26133 21135 4116
农家型类 不裂型 1110 0152 37187 0122 27152 19155
大叶型 0184 0143 44186 0123 26123 21179
大果型 2106 2106 44198 0162 26137 17145
细叶型 2134 35185 26128 1137 18124 8172
加也明显。可见药农的经验有一定依据。
采收季节 有文献载五指毛桃全年可采[ 3] , 也有认
为五指毛桃应在 8 月份后采 [4 ]。由表 2 可见,补骨脂素、
佛手内酯在 10 月份含量明显增大,尤其佛手内酯突进,
提示五指毛桃应在秋季采收。
农家类型 不同叶型的补骨脂素含量差异明显, 尤
其细叶型高达 351 85%。而药农的经验判断, 一般也认
为叶片细,分裂多的五指毛桃气味浓,质量较好。
综上所述,可见药农的实际经验 ( 3~ 4 年、秋季采、
细叶型)与补骨脂素、佛手内酯的相对含量呈现明显相关
性,尤其补骨脂素的含量均显著增高 ,可见补骨脂素应是
五指毛桃指标成分群中最有价值的质量评价指标, 其次
为佛手内酯。
中 医 药 学 刊 2005 年第 23卷
中医药
1250
学刊
3 讨 论
补骨脂素既是五指毛桃指标成分群中最有价值的质
量评价指标, 可针对基地品种比较 3 年、4 年的秋季样
品, 最终确定应种植 3 年还是 4 年。
在明确生长年限后,可采用 HPLC 测定大量批次样
品中补骨酯素、佛手内酯的绝对含量, 制定其含量限度,
作为质量评价的含量测定标准。
五指毛桃采用挥发油提取法以及乙醚超声提取, GC
- MS 检测其特征性均不明显, 而乙醇超声提取是较好
的方法之一。其次选择 161 5~ 23min 时段, 是因为在此
收稿日期: 2005- 01- 11
基金项目:贵州省卫生厅科研资助课题( 0018)
作者简介:吴晓勇( 1979- ) ,男, (苗族 ) ,贵州铜仁人, 2002级硕
士研究生,主要从事中西医结合治疗血液病研究。
时段出峰较多且高大, 基线又平稳, 特征性强, 而其余时
段多为不规则的小峰, 特征性不强。这也提示局部的指
纹特征(图谱)也可作为药材鉴别的手段之一, 达到目的
即可。
参考文献:
[1 ] 林励,钟小清,魏 刚.五指毛桃挥发性成分的GC - MS分
析[ J] .中药材, 2000, 23( 4) : 206
[2] 刘春玲,魏刚, 何建雄,等.五指毛桃不同采收部位挥发油
及醇提物成分的分析 [ J ] . 广州中医药大学学报, 2004, 21
( 3) : 204
[3 ] 中国医学科学院药物研究所.中药志 [ M ] .北京:人民卫生
出版社, 1982. 273
[4 ] 宋立人.现代中药学大词典(上册) [S ] . 北京:人民卫生出
版社, 200, . 355
文章编号: 1009 - 5276( 2005) 07 - 1251 - 02
补肾调肝化瘀法对再障大鼠造血系统细胞因子的影响
吴晓勇 ,刘育明,张雅丽 指导:傅汝林 教授
(贵阳中医学院, 贵州 贵阳 550002)
摘 要: 目的:建立白消安诱发造血功能障碍大鼠模型, 胃饲补肾调肝化瘀中药,观察细胞因子 IL - 2、
TNF - a、IL - 1B分泌水平的变化。结果: 白消安诱发造血功能障碍大鼠 IL - 2、TNF - a显著高于正常对照
组( P < 0105) , IL - 1B低于正常对照组( P < 01 05)。补肾调肝化瘀中药组 IL - 2、TNF - a 显著低于模型组
( P < 0105) , IL - 1B显著高于模型组( P < 0105)。结论:补肾调肝化瘀治疗可改善造血系统细胞因子分泌异
常, 减轻免疫因素对机体的损害,促进骨髓造血功能的恢复。
关键词: 再生障碍性贫血;补肾调肝化瘀法;细胞因子
中图分类号: R2561 4 文献标识码: B
再生障碍性贫血( aplastic anemia, AA , 再障 )是一组
由于化学、物理、生物因素及不明原因所致的骨髓干细胞
及(或)造血微环境损伤, 以红髓向心性萎缩,被脂肪髓代
替,外周血全血细胞减少为特征的疾病。其发病机制与
造血干细胞损伤、异常免疫反应及造血微环境缺陷有关。
我院已故著名中医血液病专家许玉鸣教授用补肾调肝化
瘀法治疗再障临床疗效较好。笔者以白消安诱发再障大
鼠模型, 从造血系统细胞因子变化的角度探讨补肾调肝
化瘀法治疗再障的作用机理。
1 材料与方法
11 1 实验动物 SD 大鼠, 雌雄各半, 8~ 10W 龄, 体重
180~ 200g, 共 50 只。由贵阳医学院实验动物中心提供
合格证号 SOXK(黔) 2002 - 2001。
11 2 再障模型的建立 参照文献 [1 ]白消安 35mg /kg 体
重腹腔注射, 建立大鼠再障模型。
11 3 实验用药 ¹ 白消安(上海华联制药公司 )。º甲
睾酮片(成都药业股份有限公司)。临用时用生理盐水配
成 1mg /mL 混悬液。»补肾调肝化瘀法, 药用:巴戟天、
菟丝子、旱莲草、仙茅、淫羊藿、柴胡、白芍、红花、鸡血藤
等组成,常规煎制成 3g /mL(生药浓度)。
11 4 实验分组 将 SD 大鼠随机分为 4 组, 每组 10 只,
分为正常对照组( A 组) , 模型对照组( B 组) ,甲睾酮组( C
组)、补肾调肝化瘀组( D 组) , C、D 两组于造模后分别按
比例给予甲睾酮混悬液和补肾调肝化瘀中药煎剂灌胃,
11 5mL /100g 体重灌胃, 1 次 /d, 连用 14 天后处死大鼠。
B组造模后予等量生理盐水灌胃; A 组每日以等量生理
盐水灌胃,不作任何处理。A、B 两组的其他处理同 C、D
组。
11 5 试剂 IL - 2、TNF - a及 IL - 1B放免测定药盒均
购自中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所。
11 6 仪器 CSF - 820 型全自动细胞学记数分析仪(日
本光电公司产品 ) ; 80 - 2 离心沉淀器 (上海手术器厂产
品) ; KDC - 2044 低速冷冻离心机(中国科技大学科技实
业总公司中佳光电仪器公司产品) ; GC - 1200C放射免疫
计数器(科大创新股份有限公司中佳分公司产品) ; IFCX
-0128 型低温冰箱( Made in Italy) ; 显微镜(日本 Olym-
pus 公司产品)。
11 7 血清 IL - 2、TNF - a、IL - 1B水平测定 IL - 2、
第 23卷 第 7期
2 0 0 5 年 7 月
中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 23 No. 7
Jul . , 2 0 0 5
中医药
1251
学刊