全 文 ：第19卷 第9期
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2013年 9月
September.2013Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
分，可鉴别斑点较多，后续研究将建立素馨花药材的TCL指纹
图谱，并以标准品进行对照。
本文通过对素馨花的显微鉴别和薄层鉴别研究，补充和
完善了素馨花的鉴别特征，补充了素馨花在显微鉴别及薄层
色谱鉴别的空白，为完善其质量标准，以及临床应用、科研开
发提供了依据。
参考文献
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（收稿日期：2013-03-15 编辑：李海洋）
河源产五指毛桃TLC鉴别和HPLC指纹图谱研究
陈慕媛，罗 骞，席 萍，蔡庆群，黄月纯
（广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405）
[摘要] 目的：建立快速、有效的评价河源产五指毛桃质量的方法。方法：采用TLC法，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲
酸（20∶4∶5∶0.7）为展开剂，补骨脂素对照品，紫外灯（365 nm）鉴别河源产五指毛桃药材中补骨脂素；采用HPLC法，Zorbax E－
clipse XDB C18为色谱柱，流动相为甲醇-水（梯度洗脱），检测波长为246 nm；柱温为30 ℃；流速为1.0 mL·min-1。结果：薄层色谱
图斑点清晰,分离效果好。高效液相色谱指纹图谱共标示13个色谱峰，9批样品的相似度在0.969-0.996之间。结论：方法简便，
重复性好，可用于五指毛桃药材质量的鉴别。
[关键词] 河源五指毛桃；补骨脂素；TLC；HPLC；指纹图谱
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2013）09-0076-03
Study on Radix Fici from Heyuan by Thin-layer Chromatography and HPLC Fingerprint Analysis
CHEN Mu-yuan, LUO Qian, XI Ping, CAI Qing-qun, HUANG Yue-chun
(The First Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM, Guangdong Guangzhou 510405, China)
[Abstract] Objective: To establish the rapid and effective evaluable methods on Radix Fici from Heyuan by thin-layer
chromatography and HPLC fingerprint analysis. Methods: TLC method was adopted with psoralen for reference standards, and
developer was n-hexane-chloroform-ethyl acetate-formic acid (20∶4∶5∶0.7). HPLC was used with the Zorbax Esclipe XDB C18
column; the acetonitrile-water (gradient elution) was employed as a mobile phase; detection wavelength was 246 nm; column
temperature was 30 ℃ , and flow rate was 1.0 mL·min-1. Results: The spots were distinctive and well separated on TLC. 13
Common peaks were separated on HPLC fingerprint in samples. The similarities of 9 batches of samples were between 0.969-
0.996. Conclusion: These methods are reliable and accurate, which are valuable to identify the quality of Heyuan Radix Fici.
[Key Words] Radix Fici from Heyuan ; Psoralen; TLC; HPLC; Fingerprint
五指毛桃（radix fici）为桑科植物粗叶榕（ficus hirta vahl.） 的干燥根。具有健脾补肺、行气利湿、舒筋活络之功，岭南地
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2013.09.049
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区的中医或少数民族民间医生常用于治疗脾虚浮肿、食少无
力、肺痨咳嗽、盗汗、带下、产后无乳月经不调、风湿痹痛、水
肿等症[1]。有学者报道[2-3]采用HPLC法和HPLC-MS法评价五指
毛桃质量，说明采用HPLC法具有一定科学性。目前在广东河
源已有五指毛桃GAP产区，席萍等[4]曾对不同产地的五指毛桃
根和根茎的进行HPLC指纹图谱研究，发现河源产五指毛桃
根质量较好，但采用TLC鉴别和HPLC指纹图谱评价河源产五
指毛桃质量的研究暂无报道，因此本实验建立薄层色谱法快
速检出河源五指毛桃指标成分补骨脂，通过色谱指纹图谱信
息更全面的鉴定药材的质量优劣。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪（HP-1100，安捷伦）；二极管阵列检测器
（DAD）；薄层层析硅胶G（青岛海洋化工有限公司，化学纯）；
定量毛细管（Drummond Scientific Co. by USA.）；补骨脂素对
照品（批号：110739-200309，含量测定用）购自中国药品生物
制品检定所；液相用甲醇为色谱纯，液相用水为纯化水，其他
试剂均为分析纯。
2 实验材料
收集9批河源五指毛桃新鲜药材，经席萍主任药师鉴定
为桑科植物粗叶榕Ficus hirta Vahl.的根。（见表1）
表1 五指毛桃新鲜药材
编号 样品来源 编号 样品来源
1 河源GAP基地栽培 6 河源栽培
2 河源GAP基地栽培 7 河源栽培
3 河源野生 8 河源野生
4 河源野生 9 河源野生
5 河源野生
3 TLC鉴别
3.1 方法
3.1.1 供试品溶液的制备 取五指毛桃阴干样品（粉碎，过
60目筛）1 g，加入乙醚40 mL，密闭，超声30 min（40 Hz，70%，
冰水超声，防止溶剂乙醚挥发），滤过，滤液挥去乙醚，残渣加
乙醇0.5 mL，制成供试品溶液。
3.1.2 对照品溶液制备 精密称取补骨脂素对照品2.85 mg，
加甲醇制成0.57 mg·mL-1的对照品溶液。
3.1.3 薄层色谱 吸取供试品溶液各5 μL和补骨脂素对照
品溶液2 μL，分别点于同一以0.2％羧甲基纤维素钠为黏合剂
的硅胶G薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（20∶
4∶5∶0.7）为展开剂，薄层板预饱和15 min，展开，取出，晾干，喷
以10％硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。置于紫
外灯（365 nm）下检视。
3.2 结果 供试品色谱图中, 在与对照品色谱相应的位置
上，显相同淡蓝色荧光的斑点，斑点清晰，分离效果好，结果
易于分辨。（见图1）
1-补肾脂素对照品 2-10 河源五指毛桃1-9号样品
图1 河源五指毛桃薄层色谱
4 HPLC指纹图谱研究
4.1 色谱条件[11] 色谱柱为Zorbax Eclipse XDB C18（4.6 mm×
250mm，5μm，安捷伦）；流动相为甲醇-水；梯度洗脱：0-20min：
甲醇为15%，20-40 min：甲醇由15%变为55%，40-45 min：甲
醇由55%变为85%，45-50 min：甲醇由85%变为100%；检测波
长：246 nm；柱温：30℃；流速：1.0 mL·min-1。
4.2 对照品溶液制备 精密称取补骨脂素对照品2.85 mg，加
甲醇制成0.57 mg·mL-1的对照品溶液。
4.3 供试品溶液制备 称取五指毛桃药材粉末（过60目筛）5 g，
置锥形瓶中，加入甲醇50 mL，浸泡过夜，超声30 min，滤过。滤
液蒸干，残渣加甲醇溶解，定容为2 mL。
4.4 样品测定 取供试品溶液10 μL，依法检测。
4.4.1 共有峰确定 9批河源产五指毛桃HPLC色谱图均有13
个共有峰。经二极管阵列检测器的紫外光谱分析，不同批次
河源产五指毛桃所对应的同一共有峰紫外光谱一致，表明河
源产五指毛桃均具有相似主要特征成分。各批样品的共有峰
的相对保留时间与峰面积百分比分别见表2和表3，且各共有
峰相对含量较稳定，具有指纹图谱特征性，可初步拟定为河
源产五指毛桃的指标成分群。经对照品对照及紫外光谱对
照，5号峰为补骨脂素峰，为第一大峰，其峰面积百分含量在
32.27%-47.85%范围内。（见图2，表2-3）
A-补骨脂素
B-河源产五指毛桃样品
图2 河源五指毛桃药材HPLC色谱图
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表2 9批河源五指毛桃共有峰的相对保留时间（α）值
批次
样1 样2 样3 样4 样5 样6 样7 样8 样9
1 0.199 0.208 0.200 0.201 0.202 0.201 0.199 0.187 0.200 0.200±0.006 2.796
2 0.452 0.457 0.440 0.436 0.438 0.438 0.455 0.477 0.445 0.449±0.013 2.893
3 0.668 0.676 0.656 0.642 0.645 0.659 0.643 0.675 0.656 0.658±0.013 1.990
4 0.895 0.901 0.878 0.872 0.874 0.876 0.861 0.891 0.876 0.880±0.013 1.429
5 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000±0.000 0.002
S1 1.112 1.109 1.109 1.107 1.109 1.110 1.110 1.101 1.115 1.109±0.004 0.353
6 1.142 1.141 1.142 1.142 1.142 1.142 1.142 1.145 1.141 1.142±0.001 0.093
7 1.218 1.214 1.214 1.214 1.216 1.216 1.217 1.210 1.221 1.216±0.003 0.256
S2 1.345 1.344 1.347 1.345 1.346 1.347 1.345 1.354 1.342 1.346±0.003 0.245
8 1.454 1.453 1.448 1.442 1.441 1.440 1.436 1.429 1.442 1.443±0.008 0.543
S3 1.673 1.673 1.676 1.677 1.677 1.676 1.676 1.695 1.675 1.677±0.007 0.403
S4 1.744 1.751 1.745 1.749 1.748 1.745 1.740 1.746 1.739 1.745±0.004 0.227
9 1.807 1.809 1.810 1.810 1.810 1.808 1.804 1.828 1.800 1.810±0.008 0.434
峰号 x±s RSD(%)
表3 9批河源五指毛桃共有峰的峰面积百分比（％）
峰 批次
号 样1 样2 样3 样4 样5 样6 样7 样8 样9
1 4.53 5.46 4.63 5.02 7.01 5.71 3.46 5.99 6.69
2 5.02 4.09 3.16 1.19 1.60 4.97 0.50 1.15 2.38
3 9.76 6.09 7.34 2.85 3.27 6.25 1.50 2.86 6.93
4 1.52 1.47 2.34 4.68 1.90 3.22 4.76 1.84 4.44
5 40.46 42.95 41.47 44.65 47.85 32.28 45.87 34.38 44.51
S1 2.45 0.71 2.17 2.94 3.50 2.73 3.85 4.29 1.10
6 9.38 14.88 10.27 8.96 4.23 4.27 8.24 8.36 3.15
7 6.22 2.19 4.92 7.71 6.77 4.86 4.95 3.84 2.11
S2 0.20 0.59 0.71 0.46 0.95 0.33 1.04 0.58 1.03
8 0.88 0.77 0.59 0.81 0.78 0.67 0.83 0.34 0.85
S3 0.58 0.30 0.47 1.00 0.40 1.26 0.70 1.57 0.57
S4 1.39 0.76 1.33 1.18 0.88 1.26 1.43 2.24 1.34
9 5.70 5.13 6.12 5.91 4.09 7.34 5.75 7.19 9.38
4.4.2 指纹峰相似度分析 河源产五指毛桃9批药材样品指
纹图谱与相似度计算机软件（SPSS）得出的共有模式相比较，
其相似度在0.969-0.996之间。（见表4）
表4 9批样品的相似度
编号 样1 样2 样3 样4 样5 样6 样7 样8 样9
相似度（夹角余旋） 0.986 0.985 0.996 0.99 0.991 0.962 0.993 0.969 0.988
5 讨 论
5.1 TLC鉴别 本文比较了甲醇、乙酸乙酯、乙醚的超声提
取液的薄层色谱。结果发现乙醚提取的供试品溶液有10个斑
点，其斑点最多，斑点颜色较深。试验先后比较了正己烷－乙
酸乙酯（8∶2）[5]、正己烷-乙酸乙酯（4∶1.2）[6]、正己烷-三氯甲
烷-乙酸乙酯-甲酸（20∶4∶5∶0.7）[1]，经反复实验，选择了正己
烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（20∶4∶5∶0.7）为展开剂可获得满
意的、重现性好的薄层色谱效果，补骨脂素Rf值为0.60。考察
了不同温湿度对色谱的影响，结果发现温度在27 ℃以下，相
对湿度小于52％，展开后的色谱斑点集中，边缘效应小，补骨
脂素Rf值在0.45-0.60间。
5.2 HPLC指纹图谱分析 本试验分析了9批河源产五指毛
桃的HPLC指纹图谱，结果显示河源产五指毛桃13个共有峰，
其中S1-S4号共有峰在非河源产五指毛桃中含量甚微，峰1-9
号共有峰面积含量均比非河源产五指毛桃高，说明河源产五
指毛桃质量较好。
试验采用TLC法鉴别和HPLC指纹图谱法评价了五指毛
桃的质量，TLC法取样量少，提取分离效果好，且斑点清晰，操
作简便、省时，重复性好，快速、直观地分辨药材质量的优劣。
该方法可用于评价五指毛桃药材质量。
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