全 文 ：作用及抗酶解能力 〔12 , 13〕。
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〔2008-01-15收稿　 2008-05-25修回〕
(编辑　曲　莉)
头顶一颗珠对岗田酸致阿尔茨海默病大鼠脑组织抗氧化酶和
过氧化脂质的影响
黄丽亚　罗洪斌　张　宏　余　洁　(生物资源保护与利用湖北省重点实验室 ,湖北　恩施　445000)
　　〔摘　要〕　目的　观察头顶一颗珠(TTM)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马 、皮质抗氧化酶和过氧化脂质表达的影响。方法　用岗田酸
(OA)大鼠侧脑室注射制备大鼠阿尔茨海默病大鼠模型 , TTM注射液(750、 500、250mg/kg)腹腔注射 ,并用维生素C(VitC)腹腔注射作阳性对照。测
定正常组 、模型组 、阳性对照组 、药物实验组海马 、皮质超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的含量。结果　模型
组与正常组比较 , SOD、GSH-Px降低(P<0.05, P<0.001), MDA增高(P<0.001)。药物实验组与阳性对照组比较 , SOD、GSH-Px和 MDA在 TTM高 、
中剂量组差异明显(P<0.05),低剂量组差异不明显(P>0.05)。结论　TTM抗衰老作用与增强脑组织SOD、GSH-Px活性 、减少 MDA蓄积有关。
〔关键词〕　头顶一颗珠;阿尔茨海默病;岗田酸;超氧化物歧化酶;谷胱甘肽过氧化物酶;丙二醛
〔中图分类号〕　Q51;R282.71　　〔文献标识码〕　A　　〔文章编号〕　1005-9202(2008)18-1771-02
TheeffectofTTM onanti-oxidaseandlipaseperoxideinbraintissuesofAlzheimerdiseaseratsinducedbyokadiacacid
HUANGLi-Ya, LUOHong-Bin, ZHANGHong, etal.
HubeiProvinceKeyLaboratoryofBio-resourceProtectionandUsage, HubeiInstituteforNationalities, Enshi445000, Hubei,
China
【Abstract】　Objective　Toobservetheefectoftriliumtschonoskimaxim(TTM)onanti-oxidaseandlipaseperoxide(LPO)ex-
pressioningyrushippocampiandcerebralcortexofAlzheimerdisease(AD)ratsmodel.Methods　ADmodelratsweremadebyinjection
okadiacacid(OA)vialateralventricles.PositivecontrolgroupweregivenTTMandvitminCbyperitonealinjection.ThecontentsofSOD,
GSH-Px, MDAingyrushippocampiandcerebralcortexofnormal, model, positivecontrolandexperimentalgroupsweredetermined.Re-
sults　Comparednormalgroup, modelgrouphadthereducedSODandGSH-Px(P<0.01 orP<0.05), andtheincreasedMDA(P<
0.001).Comparedwithpositivecontrolgroup, experimentalgrouphadsignificantdiferenceinSOD, GSH-PxandMDAbetweenhighand
moderatedosegroup(P<0.05), buthadobviousorhadnoobviousdiferencebetweenlowdosegroup(P<0.05 orP>0.05).Conclu-
sions　TTMdelayingagingmightbeassociatedwiththeincreasedSOD, GSH-PxactivityandreducedMDA, inbraintissues.
【Keywords】　Triliumtschonoskimaxim(TTM);Alzheimerdisease(AD);Okadiacacid(OA);SOD;GSH-Px;MDA
基金项目:湖北省重点实验室资助项目(课题 2006-A03)
作者简介:黄丽亚(1955-),女 ,副教授 ,主要从事生物化学教学和恩施
州道地药材抗衰老作用的研究。
　　头顶一颗珠系百合科延龄草属头顶一颗珠 (Trillium
tschonoskiiMaxim, TTM)的干燥根状茎及根 , 为传统名贵中药 ,
味甘 , 性温 ,有小毒 〔1〕 , 主要成分含甾体皂甙延龄草甙和延龄草
·1771·黄丽亚等　头顶一颗珠对岗田酸致阿尔茨海默病大鼠脑组织抗氧化酶和过氧化脂质的影响　第 18期
二葡萄糖甙 , 分别为薯蓣皂甙元的葡萄糖甙和二葡萄糖甙 〔2〕 ,
具祛风舒肝 、活血止血 、镇痛消肿 、延年益寿等功效。民间用于
治疗头痛眩晕 、跌打损伤 、疔疮肿毒 、神经衰弱等疾病。本研究
用大鼠侧脑室注射岗田酸(OA)〔3〕 ,观察 OA致 AD大鼠脑组织
抗氧化酶和过氧化脂质表达变化 , 旨在探讨 TTM抗衰老作用
机理 , 为进一步开发利用提供科学依据。
1　材料与方法
1.1　材料 　雄性 Wistar大鼠 60只 , 40 ～ 50周龄 , 体重 300 ～
350g(华中科技大学同济医学院动物中心提供)。 TTM(恩施
自治州太山庙药材基地提供 ,用水提醇沉法制成含生药 30%的
注射液), OA(sigma, USA, 批号:2007/07), 超氧化物歧化酶
(SOD)试剂盒(批号:2007423-4)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-
Px)试剂盒(批号:2007413-2)、丙二醛(MDA)试剂盒(批号:
2007413-2),南京建成生物工程研究所生产 , 维生素 C(VitC)
(昆明金殿制药有限公司 ,批号 070608), WDF-U型脑立体定位
仪(西安西北光电仪器厂), TL-16型高速低温冷冻离心机(上
海实验仪器厂),全自动生化分析仪(酶免之星 ELISA-STAR,瑞
士哈美顿感公司)。
1.2　方法
1.2.1　模型制备与给药方法　大鼠随机分为正常组 (侧脑室
注射生理盐水)、 模型组 (侧脑室注射 OA)、 阳性对照组
(侧脑室注射 OA、 腹腔注射 VitC)、 药物实验组 (侧脑室注
射 OA、 腹腔注射 TTM)。 各组大鼠注射 20%戊巴比妥钠
(40mg/kg, iP)麻醉后 , 固定脑于立体定位仪上 , 颅顶正中
矢状切开 , 行立体定位 (前囟后 3.8 mm, 中线旁开 2.5 mm,
颅骨表面下 3 mm)。 模型组:5 μl注射器取 OA 1.5 μl
(0.392mmol/L), 针进侧脑室后于 10 min内缓慢注射 , 留针
5 min。正常组:侧脑室注射等体积生理盐水。药物实验组:
侧脑室注射 OA后 , 腹腔注射 TTM (高 、 中 、 低剂量分别为
750、 500、 250mg/kg), 15 d, 2次 /d。阳性对照组:侧脑室
注射 OA后 , 腹腔注射 VitC(3 mg/kg), 15 d, 2次 /d。术后
各组注射青霉素 (8万 U, im)3 d抗感染 , 正常喂养。
1.2.2　检测指标　待 TTM、VitC注射结束后 ,第 2天在清醒状
态下断颈处死大鼠 , 迅速取脑组织分离出海马和皮质 ,制成匀
浆并置 -80℃冰箱。用 SOD、GSH-Px、MDA试剂盒测定 SOD、
GSH-Px、MDA含量。
1.3　统计处理　数据用 x±s表示 ,行方差分析。
2　结　果
2.1　皮质 SOD、GSH-Px和 MDA变化　见表 1。与阳性对照组
比较 , SOD、GSH-PX和 MDA表达 , TTM高中剂量组差异明显
(P<0.05), 低剂量组 SOD差异明显(P<0.05)、GSH-Px和
MDA差异不明显(P>0.05)。
2.2　海马 SOD、GSH-Px和 MDA变化　见表 2。与阳性对照组
比较 , SOD、GSH-Px和 MDA表达 , TTM高中剂量组差异明显
(P<0.05),低剂量组差异不明显。
表 1　皮质 SOD、GSH-Px和 MDA变化(x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg)
SOD
(U/mgprot)
GSH-Px
(U/gprot)
MDA
(nmol/mgprot)
正常组 - 234.73±36.85 42.51±13.76 1.41±0.27
模型组 - 114.98±22.901)13.11±1.782) 5.38±2.762)
阳性对照组 - 177.87±13.23 20.33±2.53 1.95±0.45
药物高剂量组 750 225.37±34.643)42.24±8.383) 1.49±0.373)
药物中剂量组 500 217.04±32.303)37.92±3.733) 1.54±0.293)
药物低剂量组 250 208.10±35.083) 22.36±1.62 2.10±1.08
　与正常组比较:1)P<0.05, 2)P<0.001;与阳性对照组比较:3)P<
0.05;下表同
表 2　海马 SOD、GSH-Px和 MDA变化(x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg)
SOD
(U/mgprot)
GSH-Px
(U/gprot)
MDA
(nmol/mgprot)
正常组 - 219.49±34.64 38.90±8.36 1.28±0.70
模型组 - 159.94±14.671)12.25±1.472) 4.81±1.542)
阳性对照组 - 174.24±15.49 25.62±4.01 1.38±0.13
药物高剂量组 750 212.97±29.983)37.67±6.883) 1.05±0.063)
药物中剂量组 500 209.58±27.053)35.30±5.413) 1.13±0.173)
药物低剂量组 250 180.24±45.46 26.03±1.98 1.42±0.57
3　讨　论
　　衰老是人体全身性生理变化过程 ,各系统 、器官 、组织和细
胞都会出现这种过程 。现代医学认为 ,氧自由基对人体衰老影
响最大 , 包括氧阴离子自由基 、羟自由基 、脂氧自由基 、二氧化
氮和一氧化氮自由基 、氧化氢等。 SOD、GSH-Px是机体重要的
抗氧化酶系 , 其含量变化为检测衰老最可靠的指标 〔4〕。
　　本实验参照国内外研究 AD的有关报道 ,用大鼠侧脑室注
射 OA的方法建立 AD动物模型。在此基础上 , 用 TTM制成注
射液作模型大鼠腹腔注射 ,并用强氧化剂 VtiC作阳性对照 , 观
察 TTM对 OA致 AD大鼠海马和皮质 SOD、GSH-Px和 MDA含
量的变化。结果显示模型组 SOD、GSH-Px降低 , MDA升高 , 说
明 OA造模是成功的。药物组分别与阳性组比较 , TTM对 OA
诱导的 AD大鼠脑组织 ,有明显增强 SOD和 GSH-Px活性 、减少
MDA生成的作用。且 TTM与 VitC相比 , 增强 SOD和 GSH-Px
活性 、减少 MDA生成 , 在高中剂量时效果更强 , 低剂量时效果
相当。提示 TTM的抗衰老作用与增强脑组织 SOD、GSH-Px活
性 、减少 MDA生成有关。
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〔2007-10-09收稿　2007-12-30修回〕
(编辑　牛铁兵)
·1772· 中国老年学杂志 2008年 9月第 28卷