全 文 :杏香兔耳风中五种单体对NIH3T3
细胞内PGE2生成的影响
谢 斌1,吴 蓓2,欧阳辉1,黎田儿1,李 艳1,张武岗1,杨世林1,冯育林1*
(1.江西中医药大学 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西 南昌330006;
2.南昌市食品药品检验所,江西 南昌330038)
摘 要:目的:观察从杏香兔耳风中分离得到的木犀草素、木犀草苷、绿原酸、3.5-二咖啡酰基奎宁酸(3,
5-DCQA)和4.5-二咖啡酰基奎宁酸(4,5-DCQA)五种中药单体对 NIH3T3细胞内PGE2生成的影响,
从而初步筛选出具有抗炎作用的中药单体。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组细胞内前列
腺素E2(PGE2)的含量。结果:五种单体可浓度依赖性降低细胞内PGE2的生成,且浓度越大,PGE2的
含量越低。五种单体各浓度之间,木犀草素的作用最强,但其作用仍显著低于布洛芬组,其次为木犀草
苷和绿原酸,3,5-DCQA和4,5-DCQA的作用最弱。结论:杏香兔耳风中五种中药单体通过抑制PGE2
的合成从而发挥一定的抗炎作用。
关键词:杏香兔耳风;五种单体;前列腺素E2;炎症
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2016)01-0009-03
DOI:10.11954/ytctyy.201601005
收稿日期:2015-09-23
基金项目:国家自然科学基金(81560636,81102787);江西省自然科学基金重点项目(20133ACB21005)
作者简介:谢斌(1975-),男,江西中医药大学副教授,研究方向为中医药抗感染。
通讯作者:冯育林(1976-),男,江西中医药大学教授,研究方向为中药化学成分分析。E-mail:f engyulin2003@hotmail.com
炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的
防御反应,是多种疾病中十分常见而又重要的基本病理过
程。故抗炎是疾病治疗过程中不可避免的环节,然而现有
的抗炎药物多为西药且不能完全满足临床用药的需求,因
此开发安全有效的纯中药抗炎制剂成为治疗的研究热点。
目前临床上使用最广泛的抗炎药物为非甾体类抗炎
药,其机理为抑制花生四烯酸环氧酶从而抑制前列腺素
(PGs)的生成,尤其以PGE2被认为是炎症反应的主要调节
因子。正常含量的PGE2具有阻止血小板聚集、调节血压、
舒张支气管平滑肌、降低通气阻力、调节胃肠道等多种生物
学功能,同时具有免疫抑制和参与全身炎症反应等作用[1-2]。
当机体受到促炎因子刺激时能使PGE2合成显著上调,
导
问题;再者,很多术语已有普遍认可且唯一的译名,那么在
译文中通过加注括号的方式来突显某种译名只会令人困
惑。
“[]”通常是写作中用来表达意见、评论,或用于进行内
容更正的专用符号,现在常用来标示行文中的补缺或订误、
国际音标、参考文献等。《内经》年代久远,且经历辗转传
抄,其中缺漏及讹误部分必然大量存在,补缺时可采用“[]”
进行标注,但李氏译文却将英汉语言形式结构差异所产生
的衔接词的缺失标注出来,是对该符号的误解和误用。
4 结语
在强调文化自信及传统文化走出去的当下,越来越多
的译者开始尝试将中医的传统理论、中医典籍中的传统文
化以较为保留且完整的方式介绍给西方世界,从而使我们
听到了越来越高涨的异化翻译、东方情调化翻译的呼声。
面对中医翻译的诸多难题,李氏译法不可谓不勇敢,不可谓
不创新,但笔者坚定地认为一切刻意而为、违背语言及阅读
习惯的做法很难被认可,只有从语言文字作为交流手段的
本质出发,从读者的阅读目的出发,顺应读者的阅读习惯和
文字表达习惯,译文才能历久弥新,长盛不衰。
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—9—
致血管扩张、微血管通透性增加,激活外周感觉神经元,并
能诱导促炎细胞因子如IL-1β、IL-6的生成,进而引发一系
列炎症反应[1]。本实验通过观察从杏香兔耳风中分离得到
的木犀草素、木犀草苷、绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸(3,5-
DCQA)和4,5-二咖啡酰奎宁酸(4,5-DCQA)对NIH3T3细
胞内PGE2生成的影响,判断这五种中药单体是否具有抗
炎作用。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
五种中药单体木犀草甘、木犀草素、绿原酸、3,5-DC-
QA、4,5-DCQA均由本实验提取。PEG2 试剂盒购自Elab-
science公司,货号为E-EL-0034c。高糖 DMEM 购自 Hy-
clone公司,货号为SH30021。FBS购自BinInd公司,货号
为04-001-EA。
1.2 主要仪器
CO2细胞培养箱(Thermo Scientific 8000),低速离心机
(上海卢湘仪 TDZ4B-WS),酶标仪(Thermo M3)、倒置显微
镜(Olympus IX71)。
1.3 细胞培养及处理
NIH3T3细胞系由本实验室提供,置于37℃、5% CO2
的培养箱中孵育。于96孔细胞培养板中每孔加入200μL
细胞悬液,2×104个细胞/孔,将培养板置于CO2 培养箱中
培养24h。分别加入20μg/mL布洛芬100μL,作为阳性对
照,木犀草苷、木犀草素、4,5-DCQA、绿原酸、3,5-DCQA的
4个不同浓度(100、200、400、800μg/mL)各加100μL,每个
浓度设3个平行孔,另设正常对照孔。加药后,培养板于微
孔板振荡器上振荡混匀,置于37℃CO2 培养箱中继续培养
24h。
1.4 PGE2含量检测
吸取培养液上清,根据说明书进行PGE2含量检测,用
酶标仪于450nm处测定,绘制标准曲线,计算样品中PGE2
含量。
1.5 统计学处理
所得实验数据用(珚x±s)表示,用单因素方差分析法
(ANOVA)进行分析,组间显著性差异用Bonferroni Test。
P<0.05表示有统计学差异。
2 结果
从表1中可以看出用20μg/mL布洛芬处理后NIH3T3
细胞内PGE2生成显著减少,低于正常对照组(P<0.01)。
分别用五种单体处理后NIH3T3细胞内PGE2生成也较正
常组降低,但仍显著高于布洛芬组(P<0.01)。此外,随着
浓度的增加,这五种单体对细胞内PGE2生成的抑制作用
越强,当木犀草素的浓度增加至800μg/mL时,此时PGE2
的含量仍显著高于布洛芬组(P<0.01)。从表1中还可以
得出五种单体各浓度之间,木犀草素的作用最强,但其作用
仍显著低于布洛芬。其次为木犀草苷和绿原酸,3,5-DCQA
和4,5-DCQA的作用最弱。
表1 不同药物单体对NIH3T3细胞内PGE2生成的影响
(珚x±s)
组别 浓度(μg/mL) 细胞内PGE2含量(μg/mL)
正常对照组 - 82.82±0.05
布洛芬 20 36.94±0.12*
木犀草素 100 62.51±0.03*#
200 54.28±0.07*#
400 48.03±0.14*#
800 43.25±0.08*#
木犀草苷 100 65.32±0.07*#
200 56.41±0.03*#
400 53.26±0.07*#
800 47.12±0.30*#
绿原酸 100 67.89±0.05*#
200 62.57±0.04*#
400 58.71±0.07*#
800 52.27±0.25*#
3,5-DCQA 100 70.27±0.06*#
200 67.53±0.04*#
400 63.36±0.04*#
800 57.56±0.08*#
4,5-DCQA 100 72.17±0.06*#
200 67.72±0.13*#
400 64.05±0.08*#
800 58.30±0.07*#
注:与正常对照组比较,*P<0.01;与布洛芬组比较,#P<0.01。
3 讨论
布洛芬因其抗炎、解热的作用而在临床上广泛使用,其
作用远比阿司匹林强。布洛芬的抗炎作用机制尚未完全阐
明,有研究认为其作用于炎症组织局部,通过抑制前列腺素
或其他递质的合成而发挥作用[3]。故本实验采用布洛芬作
为阳性对照组。
本实验选取的五种中药单体均由本实验室合成,其中
木犀草素和木犀草苷均属天然黄酮类化合物,存在于多种
植物中。木犀草苷,又名木犀草素-7-O-葡萄糖苷,两者均具
有抗肿瘤、抗炎抗病毒、保护心血管等作用[4-10]。绿原酸是
植物体在有氧呼吸过程中合成的一种苯丙类物质,也具有
抗菌消炎、免疫调节、抗病毒、抗肿瘤等多种药理学功
能[11-12]。而3,5-DCQA和4,5-DCQA的活性目前尚不清
楚。本实验表明这五种单体都能一定程度抑制细胞内
PGE2的合成从而具有抗炎活性,且单体浓度越大,抑制作
用越强,但所有单体的抑制作用仍远低于布洛芬。早前有
研究表明木犀草素的抗炎活性与抑制NO及其他炎性细胞
因子如TNFα、IL-6的产生,抑制蛋白质络氨酸的磷酸化以
及核转录因子κB介导的基因表达有关[13-14]。这些单体的
具体作用机制还有待于进一步研究阐明。
中药对于炎症性疾病的治疗具有良好的效果,但很多
中药有效成分不明、作用机制不清楚,极大地限制了中药的
发展。随着对中药有效成分研究的深入,从中草药中提取
有效活性成分成为新药研发的一条有效途径,但对其作用
及机制的研究还有待于进一步深入。只有明确其作用、机
制及安全性,才能研发出安全有效且抗炎效果更好的药物。
—01—
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(责任编辑:魏 晓)
Effect of Five Kinds of Monomer in Ainsliaea Fragrans Champ on PGE2Generation of NIH3T3Cels
Xie Bin1,Wu Bei 2,Ouyang Hui 1,Li Tianer1,Li Yan1,Zhang Wugang1,Yang Shilin1,Feng Yulin1*
(1.National Pharmaceutical Engineering Centre for Solid Preparation in Chinese Herbal Medicine,Jiangxi
University of Traditional Chinese Medicine,Nanchang 330006,China;2.Nanchang Institute for
Drug Control,Nanchang 330038,China)
Abstract:Objective:To observe the isolated from Ainsliaea fragrans Champ luteolin,luteolin,chlorogenic acid,quinine Na solution
coffee acyl acid(3,5-DCQA)and 4.5-coffee acyl quinine acid(4,5-DCQA)of five kinds of Chinese medicine monomer effects on
NIH3T3cels of PGE2production,from the preliminary screening has anti-inflammatory effect of traditional Chinese medicine mono-
mer.Methods:the contents of PGE2in each group were determined by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).Results:five
kinds of single physical ability concentration dependent decrease of intracelular PGE2,and the concentration of PGE2was lower.Be-
tween the five kinds of monomer concentration,the strongest effect of luteolin,but its role was significantly lower than that of the
ibuprofen group,the second for luteolin and chlorogenic acid,and 4,5-DCQA 3,5-DCQA effect is the weakest.Conclusion:a.fra-
grans in five kinds of traditional Chinese medicine monomer by inhibiting the synthesis of PGE2can play a certain anti-inflammatory
ability.
Keywords:Ainsliaea Fragrans Champ;Five Monomers;PGE2;Inflammation
—11—