全 文 :藤梨根提取物诱导胃癌细胞凋亡的实验研究
卫培峰1 焦晨莉1 张三印2
(1.陕西中医学院 ,陕西 咸阳 712083;2.成都中医药大学博士 ,四川 成都 610075)
关键词:藤梨根提取物;胃癌细胞凋亡;实验研究
中图分类号:R735.2 R73-3 文献标识码:B 文章编号:1002-168X(2005)03-0052-01
软枣猕猴桃又称软枣 、洋枣 ,始载于《开宝本
草》 ,其根茎称为藤梨根 ,含熊果酸 、剂墩果酸 、琥珀
酸 、胡萝卜甙等成分 ,并富含 Fe 、Cu 、Mn 、Se 等元
素 ,该药具有清热解毒作用 ,通过近些年的一些文
献报道证实 ,藤梨根及其制剂具有较好的抗癌作
用 ,故而我们进行了实验研究以观察藤梨根提取物
对胃癌细胞凋亡产生的影响。
1.材料与方法
1.1 实验药物
藤梨根乙醇提取物(配成乳剂),每毫升含生药
5g ,由成都中医药大学制剂教研室提供。
1.2 药物血清制备
将Wistar 大白鼠 24 只分成二组 ,每组 12只 ,
藤梨根提取物组和正常血清组 ,藤梨根提取物组每
天插管喂藤梨根提取物 2ml ,正常血清组每天插管
喂生理盐水2m l , 7天后心脏取血 ,离心分离血清备
用 ,另取正常Wistar大白鼠血清作为对照组 。
1.3 细胞和试剂
SGC7901胃癌细胞由中科院细胞生物学研究
所提供 ,用含有 10%胎牛血清的 RP -M11640培
养基 37℃培养。
1.4 药物血清细胞培养[ 1]
取生长状态良好的 SGC7901胃癌细胞 ,制成
细胞悬液 ,计数 2×105/ml ,以每瓶 3ml 分别接种
于培养瓶内。将药物血清 1ml加入到上述培养瓶
内 ,另设正常鼠血清为对照组。每间隔 48 、72 、96
小时各取上述培养瓶 ,经胰酶消化 、Hank s液洗
涤 、离心后的胃癌细胞用流式细胞仪分析各组细胞
的凋亡及死亡率[ 2 , 3] 。
1.5 形态学观察
上述加入藤梨根提取物胃癌细胞经过培养后 ,
各组分别取 3个孔的细胞 ,离心后用 PBS 洗两次 ,
做细胞涂片 ,自然风干 , 4%的甲醛固定 25min后 ,
做瑞氏染色 ,光镜高倍镜下观察并记录其形态变
化。
2.结果
2.1 细胞凋亡率比较
藤梨根提取物在培养 48-96小时的胃癌细胞
与对照组细胞的凋亡率和死亡率有显著的差异 ,见
表 1。
表 1 二组不同时间培养对胃癌细胞凋亡率及死亡率的影响
项 目 n/只 48h凋亡 死亡
72h
凋亡 死亡
96h
凋亡 死亡
藤梨根提取稀 12 0.76 8.10 7.15 17.40 17.90 25.00 P<0.05
对照组 12 0.27 4.00 0.72 9.00 1.55 13.00
2.2 瑞氏染色后光镜下的细胞形态
对照组的细胞呈大小较一致的圆形 ,核大浆
少 ,形态完整。加藤梨根提取物血清组的细胞胞体
缩小 。核不规则 ,可见凋亡细胞胞体缩小 ,胞质内
呈颗粒小块状等凋亡细胞的形态学特征 。
3.讨论
藤梨根为猕猴桃科软枣猕猴桃的根 ,近年发现
该属植物均具有抗癌 、降血脂等活性 ,藤梨根是清
热解毒类中药 ,具有抗癌作用 ,尤其是对消化道癌
的作用应较为明显。但目前尚未发现对单味药藤
梨根抗癌作用的深入研究 ,所以藤梨根的抗癌作用
尚未得到证实及推广应用 ,因此我们开展对藤梨根
提取物的研究以期初步探讨其作用机理 。通过本
研究结果提示 ,藤梨根提取物对胃癌细胞有明显的
杀伤作用 ,有确切的抗癌作用 ,故可进一步对其进
行化学成分的筛选研究 ,寻找藤梨根中有效的抗肿
癌成分。
参考文献:
[ 1]蒋振明 , 蒋勇 , 张存钧 , 等.张镜人经验方对胃癌细
胞凋亡的实验研究.浙江中西医结合杂志 , 2003 , 13(3):
140.
[ 2] 徐力 , 王明艳 , 许冬青 , 等.康尔爱片诱导人腺癌
SGC-7901 细胞凋亡及对 P53 基因表达影响的研究.南京
中医药大学学报 , 1999 , 15(6):347.
[ 3]张百红 , 岳红云 , 李新坤 ,等.苦参碱抗癌作用与诱
导肿瘤细胞凋亡.肿瘤研究与临床 , 1999 , 11(6):402.
(收稿日期:2004-11-04)
52 陕 西 中 医 学 院 学 报Journal of Shaanxi Colleg e of Traditional Chinese Medicine Vol.28.No.3.2005.5
DOI :10.13424/j.cnki.jsctcm.2005.03.030