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人面子叶提取物抑菌作用研究



全 文 :中国药房 2010年第21卷第23期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 23
延长呕吐潜伏期,减少水貂的干呕次数及呕吐次数(P<0.01),
与昂丹司琼组作用相似;能减少阿朴吗啡所致的水貂的干呕
次数和呕吐次数,对潜伏期无显著性影响。以上结果说明辣
椒具有止呕作用。
近年来的研究表明[6],5- HT、P物质及其受体在呕吐,尤其
是化疗呕吐中起着重要的作用。5- HT是介导化疗呕吐的神
经递质,通过5- HT3受体在中枢和外周起作用。PBG是5- HT3
受体的特异激动药,通过激动 5- HT3受体,引起 5- HT大量释
放进入血液循环,经迷走神经传入冲动,最终刺激催吐化学感
受区引发呕吐。研究结果表明,辣椒对PBG引起的呕吐行为
有抑制作用,能够延长呕吐的潜伏期、减少干呕次数和呕吐次
数(P<0.05),但作用不及昂丹司琼(P<0.05)。说明其止呕作
用可能与减少5- HT的释放或拮抗5- HT3受体有关。
P物质及其免疫反应样物质存在于脑干中与呕吐有关的2
个重要部位,即孤束核和最后区。由于嗜铬细胞、迷走神经、
孤束核、最后区均是化疗呕吐产生的关键部位,因而P物质可
能参与呕吐。对狗和雪貂的研究表明,全身注射P物质可致呕
吐。本课题组用免疫组化的方法,以胃窦组织P物质的释放为
靶点,研究发现辣椒组胃窦肌层P棕色颗粒的分布范围较顺铂
模型组有所减少,说明其对水貂胃窦组织P物质的释放具有抑
制作用,而人们对辣椒中有效成分辣椒素药理作用机制的研
究也发现其与P物质的释放、耗竭有关。
本课题组研究结果证实了中医古籍中记载的辣椒具有止
呕作用一说,并通过前期实验在大鼠异嗜呕吐模型上也同样
得到了验证[7],其详细机制亟待进一步探讨。
参考文献
[ 1 ] 南京中医药大学编.中药大辞典(下册)[M].第2版.上海:
上海科学技术出版社,2006:3 619.
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Cancer Treat Rev,1987,14:333.
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土模型大鼠的止呕作用 [J].中国新药杂志,2007,16
(20):1 682.
(收稿日期:2010- 01- 04 修回日期:2010- 04- 17)
人面子叶提取物抑菌作用研究Δ
苏秀芳*,农万廷(广西民族师范学院化学与生物工程系,崇左市 532200)
中图分类号 R285;R97 文献标识码 A 文章编号 1001- 0408(2010)23- 2115- 03
摘 要 目的:研究人面子叶石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇部位的抑菌作用。方法:采用纸片扩散法进行抑菌试验研究。结
果:人面子叶的乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌抑菌作用最强,最小抑菌浓度(MIC)为每片 0.117~
0.234 mg;正丁醇部位抑菌作用次之,MIC为每片0.496 mg。结论:人面子叶乙酸乙酯部位抑菌作用较其它提取部位强,可为其后
期开发提供理论依据。
关键词 人面子叶;提取部位;抑菌作用;最小抑菌浓度
Study on Antimicrobial Activity of Extracts from Dracontomelon duperreanum
SU Xiu-fang,NONG Wan-ting(Dept. of Chemistry and Biological Engineering,Guangxi Normal University for
Nationalities,Congzuo 532200,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study antimicrobial activity of petroleum ether,chloroform,ethyl acetate and n- butanol extracts from
Dracontomelon duperreanum. METHODS:The disk diffusion method was applied for antimicrobial activity. RESULTS:The ethyl
acetate extracts showed the strongest activity against Staphylococcus aureus,Escherichia coli,Bacillus subtilis with minimal inhibitory
concentration(MIC)of 0.117~0.234 mg/disc,followed by n- butanol extracts with MIC of 0.496 mg/ disc . CONCLUSION:Ant-
imicrobial activity of ethyl acetate extract from D. duperreanum is superior to other extracts,which can provide theoretical basis for
further development of D. duperreanum.
KEY WORDS Dracontomelon duperreanum;Extract;Antimicrobial activity;Minimal inhibitory concentration
Δ广西教育厅科研项目(桂教科研2007- 34号)
*副教授,硕士。研究方向:天然产物活性成分的提取分离、分析
及药理活性研究。电话:0771- 7870719。E- mail:suxiufang_88@sina.
com
􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂
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China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 23 中国药房 2010年第21卷第23期
漆树科人面子属植物人面子Dracontomelon duperreanum
Pierre主要分布于浙江、福建、湖北、湖南、广东、广西、云南等
省。其果实、果核、叶及根皮均有药用,叶味苦、酸,性凉,具有
解毒敛疮功能,主治烂疮、褥疮[1]。笔者采用水蒸气蒸馏法从
人面子茎皮、根和叶中提取挥发油,用气相色谱-质谱联用技
术对挥发油化学成分进行了分析[2~4]。本研究着重对人面子叶
提取物的抑菌效果进行观察,以为临床应用提供理论依据。
1 材料
1.1 仪器
LDZX- 50KBS型立式电热压力蒸汽灭菌器(上海申安医
疗器械厂);ZHJH- C1214B型垂直流超净工作台(上海智城分
析仪器制造有限公司);GNP- 9270型隔水式恒温培养箱(上海
精寄宏试验设备有限公司);SPH- 211B型摇床培养箱(上海世
平试验设备有限公司)。
1.2 试药
人面子叶采摘于广西民族师范学院龙州校区校园内,由
广西民族师范学院化学与生物工程系黄秋婵副教授鉴定为真
品;氨苄西林注射液(河北平安行药业有限公司,批号:
090306);M- H琼脂、M- H肉汤(笔者自制);其余试剂均为分
析纯。
1.3 菌种
枯草杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均由广西大学农学
院提供。
2 方法
2.1 人面子叶提取物的提取
原料阴干,用95%的乙醇浸泡3 d,减压回收乙醇后,依次
用石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇萃取,各部位于60℃以下
干燥,置4℃冰箱贮藏,备用。
2.2 抑菌试验[5]
2.2.1 细菌悬液的制备:将 3种供试菌种分别接种于干M- H
琼脂斜面上,于33℃下培养24 h,进行菌种活化。活化后的细
菌做10倍系列稀释,并活菌计数。用M- H肉汤将细菌分别配
制成5×105 cfu·mL- 1浓度的细胞悬浮液。
2.2.2 抑菌圈的测定:小滤纸片(8 mm)放入干燥培养皿中,用
立式电热压力蒸汽灭菌器,于121℃下灭菌20 min。从每种菌
种吸取100 μL,放入到相应的培养皿中,把培养基倒入培养皿
中,使菌悬液与培养基混合均匀,制成平板。将试药浸泡的纸
片置于平板内,于35℃左右恒温培养,24 h后观察结果。如果
滤纸片周围无菌则说明有抑菌作用,即有抑菌圈;有明显抑菌
的测其抑菌圈的直径。
3 结果
3.1 抑菌活性初筛
人面子叶乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯
草杆菌有较强的抑制作用,因此对其乙醇提取物的石油醚、氯
仿、乙酸乙酯及正丁醇部位进行抑菌试验(浓度均为每片1.88
mg)。人面子叶乙醇提取物的抑菌圈直径见表1;人面子叶各
组分提取物的抑菌效果见表2。
由表2可知,石油醚、氯仿部位对金黄色葡萄球菌、大肠杆
菌及枯草杆菌无抑制作用;乙酸乙酯、正丁醇部位对金黄色葡
萄球菌、大肠杆菌及枯草杆菌有抑制作用。
3.2 人面子叶乙酸乙酯和正丁醇部位最低抑菌浓度
将人面子叶乙酸乙酯和正丁醇部位用水对半稀释为系列
浓度,按“2.2.2”项下方法进行抑菌活性检测(每皿6片)。人面
子叶乙酸乙酯部位的抑菌圈直径见表3。
表 3 人面子叶乙酸乙酯部位的抑菌圈直径
Tab 3 Diameters of antibacterial circle of ethyl acetate extr-
act from D. duperreanum
提取物浓度/(mg/片)
1.875
0.938
0.469
0.234
0.117
0.059
金黄色葡萄球菌/mm
16.2
13.8
12.6
9.3
8.2
-
大肠杆菌/mm
15.8
12.4
10.8
8.6
-
-
枯草杆菌/mm
20.0
15.2
12.7
11.0
-
-
由表3可知,人面子叶乙酸乙酯部位为每片1.875、0.938、
0.469、0.234 mg浓度时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆
菌的抑制效果较强。人面子叶正丁醇部位的抑菌圈直径见
表4。
表 4 人面子叶正丁醇部位的抑菌圈直径
Tab 4 Diameters of antibacterial circle of n- butanol extract
from D. duperreanum
提取物浓度/(mg/片)
1.875
0.938
0.469
0.234
金黄色葡萄球菌/mm
12.1
10.3
8.6
-
大肠杆菌/mm
18.5
14.1
8.9
-
枯草杆菌/mm
13.5
11.2
8.4
-
由表 4可知,人面子叶正丁醇提取物浓度大于每片 0.469
mg时,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草杆菌的抑制效果较
强。
3.3 氨苄西林的对照试验
将氨苄西林注射液配制成系列浓度,用滤纸浸泡不同浓
度,按照“2.2.2”项下方法进行抑菌活性检测(每皿6片)。氨苄
西林的抑菌圈直径见表5。
由表5可知,氨苄西林浓度为每片0.117 mg以上时对金黄
色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草杆菌有很强的抑制作用;人面子
叶提取物在相同浓度下对3种菌的抑制作用相对较弱,但其作
为一种植物药,具有安全、无毒的特点,值得深入研究。
4 讨论
表 1 人面子叶乙醇提取物的抑菌圈直径
Tab 1 Diameters of antibacterial circle of ethanol extracts fr-
om D. duperreanum
提取物浓度/(mg/片)
1.88
0.938
0.469
0.234
金黄色葡萄球菌/mm
15.1
12.8
9.6
-
大肠杆菌/mm
17.8
11.6
-
-
枯草杆菌/mm
16.1
15.6
9.0
-
注:“- ”表示无抑菌效果
note:- means no antimicrobial activity
表 2 人面子叶各组分提取物的抑菌效果
Tab 2 Antimicrobial activity of each extract from D. duperr-
eanum
石油醚部位
氯仿部位
乙酸乙酯部位
正丁醇部位
金黄色葡萄球菌
-
-
+
+
大肠杆菌
-
-
+
+
枯草杆菌
-
-
+
+
注:“+”表示有抑菌效果;“- ”表示无抑菌效果
note:+ mean antimicrobial activity;- means no antimicrobial act-
ivity
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中国药房 2010年第21卷第23期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 23
Khan U等[6]以甲醇提取人面子叶,用石油醚、二氯甲烷、乙
酸乙酯及正丁醇萃取,用纸片扩散法分别对各部位进行抑菌
作用研究。结果表明,其均具有一定的抑菌作用,其中正丁醇
部位抑菌作用最强,二氯甲烷部位次之,石油醚、乙酸乙酯部
位抑菌作用最弱。本研究结果为乙酸乙酯部位对金黄色葡萄
球菌、大肠杆菌、枯草杆菌的抑制效果最强,正丁醇部位抑制
效果次之,石油醚、氯仿部位对供试菌无抑制作用。这可能与
提取物的提取方法、抑菌研究方法及人面子叶的来源有关。
有关人面子植物的生理活性研究值得深入拓展。
参考文献
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(收稿日期:2009- 12- 15 修回日期:2010- 03- 02)
伤肌宁胶囊含药血清对阿霉素所致心肌细胞损伤的保护作用研究Δ
张景红 1*,樊 秦 2(1.华侨大学分子药物研究所,泉州市 362021;2.甘肃省中医学院中心试验室,兰州市
730000)
中图分类号 R285.5;R965 文献标识码 A 文章编号 1001- 0408(2010)23- 2117- 03
摘 要 目的:研究伤肌宁胶囊含药血清对阿霉素(ADR)所致心肌细胞损伤的保护作用。方法:以SD乳鼠心肌细胞做原代培
养,复制ADR损伤心肌细胞模型,测定培养上清液中多项生化指标,并运用流式细胞仪检测凋亡细胞。结果:ADR(终浓度为10-6
mol·L- 1)可致上清液乳酸脱氢酶(LDH)释放量增加,同时细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力下降而丙二醛(MDA)含量升高;高、中、
低剂量伤肌宁胶囊均可降低LDH活力,增加细胞SOD活力和降低MDA含量。流式细胞仪检测伤肌宁胶囊能降低心肌细胞凋亡
率。结论:伤肌宁胶囊能够拮抗ADR引起的心肌细胞自由基脂质过氧化,抑制心肌细胞的凋亡,具有保护心肌细胞损伤的作用。
关键词 伤肌宁胶囊含药血清;阿霉素;原代心肌细胞;损伤;保护作用
Protective Effect of Serum Containing Shangjining Capsules on Myocardial Cell Damage Induced by Adria-
mycin
ZHANG Jing-hong(Institute for Molecular Medicine,Huaqiao University,Quanzhou 362021,China)
FAN Qin(Central Laboratory,Gansu College of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730000,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study protective effect of serum containing Shangjining(SJN)capsules on myocardial cell dam-
age induced by adriamycin(ADR). METHODS:Primary culture of myocardial cell in neonatal SD rat was conducted and ADR- in-
ducing myocardial cell damage model were established. Biochemical index of supernatant fluid were detected and flow cytometry
was used to determine the apoptosis of myocardial cell. RESULTS:ADR increased the content of supernatant fluid LDH and MDA
while decreased the activity of SOD. High,middle and low dose of SJN capsule can decreased the activity of LDH and the content
of MDA and increased the activity of SOD. Results of flow cytometry showed SJN could reduce cell apoptosis. CONCLUSION:
SJN capsule could inhibit ADR- inducing peroxidation of myocardial cell free radical and cell apoptosis and protect myocardial cell
damage.
KEY WORDS Serum containing Shangjining capsules;Adriamycin;Primary myocardial cell;Damage;Protective effect
Δ福建省科技计划项目(2008Y0055)
*副教授,硕士研究生导师,博士。研究方向:中药生物工程和肿
瘤免疫学。电话:0595- 22691829。E- mail:zjh@hqu.edu.cn
表 5 氨苄西林的抑菌圈直径
Tab 5 Diameters of antibacterial circle of ampicillin
提取物浓度/(mg/片)
1.875
0.938
0.469
0.232
0.117
金黄色葡萄球菌/mm
49.5
48.0
46.8
44.7
41.5
大肠杆菌/mm
46.0
40.5
37.3
33.7
30.0
枯草杆菌/mm
47.5
46.3
45.4
43.0
40.0
􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋
伤肌宁胶囊(SJNJN)为中药复方制剂,是本课题组在多年
实践中探索出的经验方,主要成分有黄芪、西洋参和三七等 5
味中药[1]。临床应用表明,该药具有改善患者心功能、逆转心
肌损伤的作用,对冠心病、病毒性心肌炎和扩张性心肌病具有
很好的治疗作用。为了进一步探讨其作用机制,笔者用阿霉
素(ADR)复制心肌细胞损伤模型,观察SJNJN含药血清对体
··2117