全 文 ：2014 年 10 月第 21 卷第 10 期 中国中医药信息杂志 ·89·
HPLC 测定贯叶金丝桃滴丸中绵马贯众素含量
周鹏,曹广尚
山东中医药大学附属医院,山东 济南 250011
摘要：目的 建立贯叶金丝桃滴丸中绵马贯众素含量测定的高效液相色谱方法。方法 采用 Kromasil-C18
(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-三氯甲烷-异丙醇-0.5%磷酸(52∶8∶30∶10),流速 1.0 mL/min,
检测波长 285 nm,柱温 25 ℃。结果 绵马贯众素进样量在 0.236～2.124 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 9)。
绵马贯众素的平均加样回收率为 99.64%(RSD＝1.90%)。结论 该方法简便、准确,适用于贯叶金丝桃滴丸中绵
马贯众素的测定。
关键词：贯叶金丝桃滴丸；绵马贯众素；高效液相色谱法
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.10.027
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2014)10-0089-03
Content Determination of Dryocrassine in Guanye Jinsitao Drop Pills by HPLC ZHOU Peng,
CAO Guang-shang (The Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250011, China)
Abstract：Objective To develop an assay of HPLC for the content determination of dryocrassine
in Guanye Jinsitao drop pills. Methods The column was Kromasil-C18 (150 mm×4.6 mm, 5 μm)；
mobile phase was acetonitrile-chloroform-isopropanol-0.1% phosphoric acid (52∶8∶30∶10)；
flow rate was 1.0 mL/min；UV detection was performed at 285 nm；detected drift tube temperature
was set at 25 ℃. Results The calibration curves were linear in the range of 0.236-2.124 μg for
dryocrassine (r＝0.999 9). The average recovery rate of dryocrassine was 99.64% (RSD＝1.90%).
Conclusion The method is simple and accurate. It is suitable for the determination of dryocrassine
in Guanye Jinsitao drop pills.
Key words：Guanye Jinsitao drop pills；dryocrassine；HPLC

基金项目：国家科技重大专项-重大新药创制(2009ZX09102-142)；山东省科技发展计划(2012GGB14018)
通讯作者：曹广尚,E-mail：cgs198041@163.com

宝藿苷Ⅰ与 50%甲醇提取时含量相当；而以 50%甲醇
提取时所测 4 个组分提取均较为充分。故采用 50%甲
醇作为供试品制备的提取溶剂。
根据本研究测定的各组分含量平均值的 80%,暂
定本品每片含补骨脂素不得低于 0.36 mg,含异补骨
脂素不得低于0.23 mg,含淫羊藿苷不得低于0.32 mg,
含宝藿苷Ⅰ不得低于 0.28 mg。
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(收稿日期：2014-03-17；编辑：陈静)
·90· Chinese Journal of Information on TCM Oct.2014 Vol.21 No.10
贯叶金丝桃滴丸(本院协定处方)是由贯叶金丝
桃、绵马贯众等药味经现代工艺制备的中药六类新
药,具有清热、解毒、透表功效,主要用于流行性感冒
的预防或辅助治疗。方中贯叶金丝桃和绵马贯众共为
君药。课题组前期已对贯叶金丝桃中主要活性指标成
分金丝桃苷进行了质量控制[1]。绵马贯众素为绵马贯
众的主要活性成分[2],为保证制剂抗流感临床疗效,适
应现代中药制剂多成分控制质量的要求,本研究建立
贯叶金丝桃滴丸中绵马贯众素的含量测定方法,为该
制剂更为全面的质量控制提供参考。
1 仪器与试药
LC-2010 高效液相色谱仪(日本岛津公司,
SPD-10A 检测器,ClASS-VP 工作站),AE200s 电子分析
电平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司),KQ5200 超
声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)。
绵马贯众素对照品为本课题组从绵马贯众药材
中经提取、反复精制纯化而得,为黄色板状结晶,分子
式 C43H48O16,纯度为 99%。乙腈、磷酸、异丙醇为色谱
纯,水为重蒸水,其他试药均为分析纯。贯叶金丝桃滴
丸(课题组依托本单位国家中医药管理局中药制剂三
级实验室自制,批号 131101、131102、131103、131217、
131218、131219)。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液 精密称取绵马贯众素对照品
11.25 mg,置 250 mL 容量瓶中,加三氯甲烷溶解并定
容至刻度,摇匀,即得。
2.1.2 供试品溶液 取本品研碎,取约 0.2 g,精密
称定,置具塞锥形瓶中,精密加入三氯甲烷 25 mL,密
塞,称定质量,超声处理(功率250 W,频率40 kHz)30 min,
放冷,再称定质量,用三氯甲烷补足减失的质量,摇
匀,滤过,取续滤液,以 0.22 μm 微孔滤膜滤过,即得。
2.1.3 阴性对照溶液 按处方比例取不含绵马贯众
的群药,按剂工艺制得缺绵马贯众的滴丸制剂,精密
称取该制剂 0.2 g,按“2.1.2”项下方法制备,即得。
2.2 色谱条件与专属性试验
以 Kromasil-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱
柱；以乙腈-三氯甲烷-异丙醇-0.5%磷酸(52∶8∶
30∶10)为流动相,流速 1.0 mL/min,进样量 10 μL,检
测波长 285 nm,柱温 25 ℃,理论板数按绵马贯众素峰
计算应不低于 5000[3]。
精密吸取“2.1”项下 3 种溶液各 10 μL,在上述
色谱条件下测定。结果显示阴性对照无干扰,绵马贯
众素峰与相邻峰的分离度＞1.5,色谱图见图 1。

A

B

C
注：A.对照品；B.供试品；C.阴性对照；1.绵马贯众素
图 1 贯叶金丝桃滴丸中绵马贯众素 HPLC 图
2.3 线性关系考察
精密称定绵马贯众素对照品 11.8 mg,置 50 mL
量瓶中,加三氯甲烷稀释至刻度,即得对照品贮备液。
再分别精密量取 1、3、5、7、9 mL,分别移至 10 mL
量瓶中,加三氯甲烷稀释至刻度,分别精密进样10 μL,
以绵马贯众素进样量(μg)为横坐标、相应峰面积(A)
为纵坐标,计算得线性回归方程 Y＝2 633 456.53X－
642.76,r＝0.999 9。结果表明,绵马贯众素进样量在
0.236～2.124 μg 范围内线性关系良好。
2.4 精密度试验
精密吸取对照品溶液 10 μL,重复进样 6 次,分别
测定峰面积,结果绵马贯众素 RSD＝0.95%(n＝6),表
明仪器精密度良好。
2.5 稳定性试验
精密称取滴丸 0.2 g,按“2.1.2”项下方法制备
供试品溶液,分别于 0、2、4、6、8、10、12 h 进行
测定,结果绵马贯众素峰面积 RSD＝1.98%,表明供试
品溶液在 12 h 内稳定。
t/min
1
1
2 4 6 8 10 12 14 16 18
2 4 6 8 10 12 14 16 18
2 4 6 8 10 12 14 16 18
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2.6 重复性试验
称取滴丸(批号 131101)6 份,每份 0.2 g,精密称
定,按“2.1.2”项下方法制备,依法测定,结果绵马贯
众素含量 RSD＝1.45%,表明本法重复性好。
2.7 加样回收率试验
精密称取已知含量的滴丸约 0.1 g,共 6 份,分别
精密加入 0.911 mg/mL 的对照品溶液 1 mL,挥干溶剂,
按“2.1.2”项下方法制备并测定,计算加样回收率,
结果见表 1。
表 1 绵马贯众素加样回收率试验
取样量
(g)
样品中
含量(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
0.101 7 0.856 3 0.911 1.774 2 100.76
0.103 6 0.872 3 0.911 1.807 4 102.65
0.093 1 0.783 9 0.911 1.672 9 97.59
99.64 1.90
0.100 1 0.842 8 0.911 1.736 8 98.13
0.093 8 0.789 8 0.911 1.688 6 98.66
0.101 5 0.854 6 0.911 1.766 0 100.04
2.8 样品含量测定
取贯叶金丝桃滴丸样品 6 批,按“2.1.2”项下方
法制备,在“2.2”项色谱条件下测定,计算平均值,结
果见表 2。
表 2 样品中绵马贯众素含量测定结果(mg/g, n＝3)
批号 含量 批号 含量
131101 8.42 131217 7.66
131102 7.98 131218 8.59
131103 8.23 131219 7.87
3 讨论
关于制剂中绵马贯众素含量测定方法的报道很
少,现行药典和有关标准也未收载其测定方法。本研
究考察了多种流动相系统,如采用简易的乙腈-水系
统、乙腈-磷酸等常规系统,供试品各峰分离度很差,
更无法分离指标成分,后经参考文献[4]反复调试流
动相比例,最终确定流动相为乙腈-三氯甲烷-异丙
醇-0.5%磷酸(52∶8∶30∶10)时,指标成分绵马贯众
素峰保留时间适中,基线低平,供试品中绵马贯众素
峰与杂质峰分离好。
对绵马贯众素对照品溶液进行紫外扫描,结果在
240 nm 和 285 nm 处有最大吸收,考虑到本流动相系统
为多元系统,为避免干扰,选择 285 nm 作为检测波长,
与文献[4-5]报道基本一致。
本试验所用对照品绵马贯众素在甲醇中难溶,而
在三氯甲烷、乙醚中易溶,综合考虑,选用三氯甲烷为
供试品制备溶剂。试验考察了三氯甲烷回流、超声 2
种提取方法,结果表明超声与回流的结果相当,故选
择超声方法；又考察了超声 15、30、45 min 的结果,
发现超声 30 min 后含量不再增加；溶剂用量考察了
15、25、50 mL,结果表明 25 mL 比 15 mL 提取的含量
高,而与 50 mL 提取的含量相当。因此提取条件为加
25 mL 三氯甲烷超声处理 30 min。
参考文献：
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(收稿日期：2014-02-12；编辑：陈静)