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均匀设计优选南板蓝根多糖的提取工艺



全 文 :Rb1:Y=231.91X+1.6924, r=0.9999,线性范围为
1.76 ~ 10.56 μg。
3.2.4 测定:分别取上述各三七提取液 ,用微孔滤
膜滤过 ,即得供试品溶液 。精密吸取 10μl,进样 ,按
上述色谱条件测定 ,结果见表 2。
表 2结果显示 ,三七醇提取时 ,三七皂苷的提取
率以三七片最低 ,提取率为 70%左右;三七粗粉末
居中 ,提取率为 85%左右;三七超细粉和三七超细
粉重构颗粒的提取率最高。水提冷浸和加热提取 ,
三七超细粉和三七超细粉重构颗粒三七皂苷的提取
率也较高。结果提示 ,三七超细粉重构颗粒在改变
物理性状的同时 ,没有改变三七超细粉易于三七皂
苷浸出的特点。
4  讨论
三七质地坚硬 ,汤剂中常磨细粉直接冲饮 ,现代
中成药生产工艺中则常磨粉制成制剂 ,或用乙醇提
取有效成分后制成制剂。在浸提过程中 ,原料的粗
细 ,是影响三七皂苷提取率的主要因素 。实验显示 ,
三七粗粉末有利于三七皂苷提取 ,而三七超微粉末
不但在乙醇中三七皂苷提取率高 ,且用水冷浸和加
热提取 ,三七皂苷提取率均较高 。但粉末及超微粉
末提取在工业生产中易发生糊化 ,固 、液体难于分
离 ,不利于工业生产中过滤操作。
本研究提供一种骨架剂 ,使三七超细粉发生质
地重构 ,形成重构颗粒。实验结果显示 ,三七重构颗
粒的醇提 、水煎及冷浸的三七皂苷提取率均高于三
七片醇提 ,与三七超微粉末相当 。而三七重构颗粒
更具药液过滤快速 ,提取液澄明 ,适用于工业生产 ,
成本降低的优点 ,是值得进行推广的技术。
参 考 文 献
1 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 .一部 .北京:
化学工业出版社 , 2005∶10
(2005-06-30收稿)
ATechnologicalStudyontheExtractionofUltra-FinePowderofPanaxnotoginsen
HuangYaohai, HuangMingqing, ZengHuifang, Guowei, XiPing
(GuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine, Guangzhou510405)
Abstract Objective:Toinvestigatetheextractionofultra-finepowderofPanaxnotoginsen.Methods:Theextractionrateofgin-
sengsaponinRg1, Re, Rb1, notoginsengsaponinR1 andfiltratedtimeweredeterminedbyalcoholicandaqueousextractionofPanax
notoginsenintablet, coarsepowder, ultra-finepowderandreconstitutiongranulesofultra-finepowder.Results:Thefilteredtimeoful-
tra-finepowderofPanaxnotoginsenextractionandthatofthetabletofPanaxnotoginsenextractionweresimilarly, whiletheextraction
ratesofvarioussaponinsofitwerehigh.Conclusion:Themethodofaqueousextractioninultra-finepowderofPanaxnotoginseniseasy
infiltrationer, higherinextractionrateofPanaxnotoginsenandlowerinproductioncost.
Keywords Panaxnotoginsen;Ultra-FinePowder;Extraction;Filtration;HPLC
均匀设计优选南板蓝根多糖的提取工艺
盛家荣 李 欣 陈佳伟 欧阳逊
(广西师范学院化学系 ,广西南宁 530001)
  摘要 目的:优选南板蓝根中多糖的提取工艺。方法:用均匀设计方法设计水提取工艺 , 以提取物中多糖含量
为测定指标 , 考察提取温度 ,提取时间 ,料液比三个因素对有效成分多糖提取的影响。结果:最佳工艺为提取温度
90℃,提取时间 2 h,料液比 1∶50(g/ml), 南板蓝根多糖的提取率为 3.26%。在此条件下 , 北板蓝根多糖的提取率
为 12.76%。
关键词 均匀设计;板蓝根;多糖
  药用板蓝根根据来源不同分为北板蓝根和南板
蓝根。北板蓝根为十字花科植物菘蓝(Isatisindigot-
icaFort.)的干燥根 ,主产于江苏 、河北一带 ,味苦 ,
性寒 ,有清热解毒 、凉血利咽等功效 ,用于温毒发斑 ,
舌绛紫暗 ,痄腮 ,喉痹 ,烂喉丹痧 ,大头瘟疫 ,丹毒 ,痈
肿〔1〕。南板蓝根为爵床科植物马蓝 [ Baphicacanthus
cusia(Nees)Bremek]的干燥根茎及根 ,主要分布在
我国华南 、西南地区 ,味苦 ,性寒 ,具有清热解毒 、凉
·1105·中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.12.026
血等功用 ,用于温病发斑 ,丹毒 。临床主要用于防治
流感 、流脑以及治疗肝炎等 。由于来源不同 ,南北板
蓝根的化学成分存在差别 ,临床应用的效果也有所
不同 ,南板蓝根在抗病毒方面优于北板蓝根〔2〕。
文献报道板蓝根中多糖组分具有免疫调节作
用 ,对特异性免疫和非特异性免疫 ,体液免疫或细胞
免疫均有一定的促进作用 〔3、4〕 ,此外尚有降血脂作
用 〔5〕。日本学者 Yamada认为欧洲菘蓝中抗病毒成
分之一为糖蛋白和多糖。为了有效地提取板蓝根多
糖 ,我们将均匀设计法用于南板蓝根的提取工艺中 ,
以期以较低的成本优选出最佳的提取工艺条件 。
1  仪器与材料
722型光栅分光光度计;Sartorius电子天平;
LD5-10离心机;D60-2F型电动搅拌机;DF-101S集
热式恒温加热磁力搅拌器 。
南板蓝根(采自广西恭城县栗木乡全会村),北
板蓝根(购于南宁市中尧路一心药业院内 20号 ,产
地:河北),南 、北板蓝根药材经广西中医学院刘寿
养副教授鉴定分别为爵床科植物马蓝 [ Baphicacan-
thuscusia(Nees)Bremek]和十字花科植物菘蓝
(IsatisindigoticaFort.)。实验试剂均为分析纯。
2  板蓝根粗多糖的提取
    板 蓝 根 用水洗净 60℃以下烘干 粉碎 板 蓝 根 干 粉
甲醇回流 5 h脱脂板蓝根粉干燥干脱脂板蓝根粉
按表 1的组合条件加水控温提取 3次
抽滤滤液 浓缩 、冷却 加 4倍量 95%乙醇 沉淀干燥粗多糖干品   
称量 、定容   硫酸-蒽酮法测吸光度   计算粗多糖中多糖含量及
多糖提取率。
3  提取工艺优选
3.1  实验方案设计 在南板蓝根(均为 10 g脱脂
干粉)粗多糖的提取工艺中 ,我们欲考察的主要因
素有:提取温度 、提取时间及料液比三个因素 ,根据
预试验它们的取值范围分别为:提取温度 X1:90℃
~ 100℃;提取时间 X2:2h~ 4.5 h;料液比 X3:1∶50
~ 1∶100(g/ml)。再根据各种因素的取值范围 、试
验精度要求以及均匀设计表 〔6〕中的 U*6 设计出实验
方案 ,见表 1。
 表 1  实验方案 U6(63)
NO 1 2 3 4 5 6
X1(℃) 90 90 95 95 100 100
X2(h) 2.5 3.5 4.5 2 3 4
X3(g/ml) 1∶70 1∶100 1∶60 1∶90 1∶50 1∶80
3.2  南板蓝根多糖含量的测定 —硫酸-蒽酮法 〔7、8〕
3.2.1 标准曲线的绘制:精密量取葡萄糖标准溶
液(1.000g/L)0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 ml,分别加入到 100
ml容量瓶中定容;分别吸取 1 ml于试管中 ,加 4 ml
蒽酮 -硫酸试剂 ,摇匀后迅速浸入冰水中冷却 5min,
各管加完后一起浸入沸水浴中 , 管口加塞 , 以防蒸
发。自水浴重新煮沸起 ,准确煮沸 10 min取出 ,用
自来水冷却;室温放置 10min,于 620nm处用 722型
分光光度计测其吸光度 ,得回归方程 C=0.2139A。
3.2.2  样品中多糖含量的测定:准确称取干燥恒
重的粗多糖各 10 mg左右:W1 =10 mg, W2 =14 mg,
W3 =12mg, W4 =14mg, W5 =11mg, W6 =13mg,用
蒸馏水溶解后于 250 ml容量瓶中定容 ,分别吸取 1
ml样品液于试管中 ,同标准曲线制作的操作一样 ,
测定粗多糖样品的吸光度 。测得样品的吸光度后 ,
根据标准曲线的回归方程及以下公式计算样品中多
糖的含量:样品中多糖的含量%=(C样 ×250×10-3 /
W样)×0.90×100%。
其中:C样 表示标准曲线上查得的样品浓度;W样 表示称取的粗
多糖样品的质量;0.90表示多糖的校正系数 〔8〕。
多糖提取率%=粗多糖提取物总质量 ×样品中多糖含量南板蓝根粉质量 ×100%
  每试验号的试验按实验方法重复两次 ,两次所
得结果取平均值作为该试验号的结果(见表 2)。
3.3 结果分析
3.3.1  实验结果:不同提取条件下南板蓝根多糖
提取率见表 2。
 表 2  多糖提取率表
NO. X1(℃) X2(h) X3(g/ml)
粗多糖提取物(g)
粗多糖中多糖含量%
多糖提取率%
1 90 2.5 1∶70 0.562 57.4 3.23
2 90 3.5 1∶100 0.665 37.4 2.49
3 95 4.5 1∶60 0.648 45.0 2.92
4 95 2 1∶90 0.671 41.3 2.77
5 100 3 1∶50 0.614 51.1 3.14
6 100 4 1∶80 0.692 38.9 2.69
3.3.2  数据处理及回归方程:对表 2的数据用微
机进行逐步回归分析 ,最终得到如下回归方程及相
应参数:
I=1  B=-2.001935E-02  F=22.40982
I=8 B=-3.432446E-03 F=40.4182
I=9 B=-8.951009E-07 F=246.8992
F=89.72642 R=0.9963056 S=3.675779E-02
Y=5.250432+(-2.001935E-02)X1 +(-3.432446E
-03)X32 +(-8.951009E-07)X33
方程有变量项的 F>F(0.05)=7.71,整个方程
的 F>F(0.05)=19.2,由回归方程可见 ,方程通过
F检验 ,置信度高。 X1(温度)、X2(提取时间)、X3
·1106· 中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
(料液比)对多糖的提取率(Y)均有影响 。
3.3.3 求最佳工艺条件:由回归方程不易看出提
取条件对多糖提取率的总体影响 ,为此我们通过网
络格优化法 〔9〕来求最大值 ,得到结果为:
X1 =90;X2 =2;X3 =1∶50;Y=3.309343
即理论上板蓝根多糖提取的最佳工艺为:提取
温度为 90℃,提取时间为 2 h,料液比为 1∶50(g/
ml),提取率最高为 3.31%。
4  验证与讨论
4.1  验证实验 为了验证优化计算结果的可靠
性 ,选 X1 =90℃;X2 =2 h;X3 =1∶50 (g/ml)进行验
证实验 ,用干脱脂原料 10.008 g,提出多糖为 0.625
g,称取 12 mg配制溶液 ,测其吸光度 ,计算得多糖含
量为 52.20%,多糖提取率为 3.26%。在 α=0.05
时 ,回归方程的置信区间为:Y=3.31 ±0.07,即得
置信区间为 [ 3.24, 3.38] ,验证试验结果落于置信
区间内 ,证明优选工艺条件是准确可信的 。
4.2  北板蓝根粗多糖的提取 选用南板蓝根粗多
糖的最佳提取条件 , 即:X1 =90℃;X2 =2 h;X3 =
1∶50(g/ml)进行北板蓝根粗多糖的提取实验 ,用干
脱脂原料 10.004g,提出多糖为 2.037g,称取 13 mg
配制溶液测其吸光度 ,计算得该样品多糖含量为
62.65%,多糖提取率为 12.76%。
4.3  讨论 实验结果表明 ,从南板蓝根中提取多
糖的最佳工艺条件为:提取温度为 90℃、料液比为 1
∶50(g/ml),提取时间为 2 h,南板蓝根多糖的提取
率最好 ,达 3.26%,提取物中多糖含量为 52.20%。
在此条件下北板蓝根的提取率达 12.76%,提取物
中多糖含量为 62.65%。说明从北板蓝根中提取的
粗多糖提取率及多糖的含量较南板蓝根为高 。
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目 (桂科攻
0424008-3E)
参 考 文 献
1 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 .一部 .北京:
化学工业出版社 .2000∶163
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(5)∶86
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药理与临床 , 1991, 7(2)∶22
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西医结合杂志 , 1991, 11(6)∶357
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药学报 , 1993, 8(增刊)∶75
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1994∶69
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出版社 , 1987∶7
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究 .天然产物研究与开发 , 1996, 8(3)∶5
9 夏念凌 .最优化问题的计算机实用算法 .北京:水利电
力出版社 , 1990∶196
(2005-06-23收稿)
StudyontheOptimalExtractionProcessofPolysaccharidefrom
Baphicacanthuscuaia(Nees)BremekwiththeUniformDesign
ShengJiarong, LiXin, ChenJiawei, OuyangXun
(DepartmentofChemistry, GuangxiTeachersEducationUniversity, Nanning530001)
Abstract  Objective:Tostudytheoptimalextractionprocessofpolysaccharidefrom Baphicacanthuscuaia(Nees)
Bremek.Methods:Theoptimalextractionprocesswasselectedwithuniformdesignandstatisticalanalysissystem(SAS).Thecontent
ofpolysaccharideintheextractwasdeterminedtoinvestigatetheinfluenceoftemperatureofextraction, thetimeofextractionandthe
solid-liquidratioonit.Results:Theoptimalextractionprocesswasextractiontemperature90℃with2 hoursandwith1∶50(g/ml)of
Baphicacanthuscuaia(Nees)Bremekweighttodistilledwater.TheoptimumextractionratesofPolysaccharidefromBaphicacanthus
cuaia(Nees)BremekandIsatisindigoticaFortwere3.26% and12.76%.
Keywords Uniformdesign;BaphicacanthusCuaia(Nees)Bremek;Polysaccharide
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·1107·中药材第 28卷第 12期 2005年 12月