全 文 ：第 31 卷
Vol． 31
第 1 期
No． 1
微 量 元 素 与 健 康 研 究
Studies of Trace Elements and Health
2014 年 01 月
Jan． 2014
收稿日期:2013 － 09 － 10
基金项目:贵阳中医学院研究生教育创新计划项目
(ZYYCX11023)
作者简介:王 烈(1988 －) ，女，在读硕士，研究方向:中药质量控
制与新药研究。通讯作者:茅向军，主任药师，硕士生导师。
黔产南板蓝根 HPLC特征图谱研究
王 烈1，茅向军2，杨 丹1
(1．贵阳中医学院，贵阳 550002;2．贵州省食品药品检验所，贵阳 550006)
摘要:目的:建立南板蓝根药材的 HPLC特征图谱。方法: 采用 HPLC法，色谱条件 ZorBax Eclipse XDB － C18
( Analytical 4． 6 mm × 250 mm，5μm) ;流动相为 0. 05%磷酸水溶液—甲醇，梯度洗脱进行分离;检测波长: 280
nm;柱温: 30℃ ;流速: 1. 0 ml /min;扫描波长: 280 nm，进样量: 20μl。结果: 建立了南板蓝根的 HPLC 指纹图
谱，对南板蓝根水溶性成分特征图谱进行了系统研究，建立了南板蓝根药材特征图谱方法，该特征图谱方法简
单可行，易于操作。经方法学考察，精密度、稳定性、重复性良好;标示出南板蓝根药材的 10 个共有峰。
关键词:南板蓝根;HPLC特征图谱
中图分类号:Ｒ284 文献标识码:A 文章编号:1005 － 5320(2014)01 － 0051 － 02
The Baphicacanthis Cusiae Ｒhizoma et Ｒadix HPLC characteristic spectrum in Guizhou
WANG Lie1，MAO Xiang － jun2，YANG Dan1
(1． Guiyang College of Traditional Chinese Medicine;2． Guizhou provincial food and Drug Inspection Institute，Guiyang
550006，China)
Abstract:Objective:To establish the HPLC fingerprint of Strobilan thes cusia． Methods:The HPLC was run on ZorBax Eclipse XDB －
C18(Analytical 4. 6 mm ×250 mm，5μm)with methanol ～ 0. 05 % phosphoric acid solution as mobile phase in gradient elution mode at
a flow rate of 1． 0 ml / min． The determine wavelength was 280 nm ，the temperature of column was 30℃ and the sample size was 20
μl． Conclusion:We establish the HPLC fingerprints of Strobilan thes cusia and investigate the water － soluble component of Strobilan
thes cusia． The fingerprint of Strobilan thes cusia is reliable and controllable． The methodology of this fingerprint including accuracy、
stability、repeatability were tested，and all results were good ． There are all 10 common peaks in the fingerprint of Strobilan thes cusia．
Key Words:Ｒhizoma et Ｒadix Baphicacanthis Cusiae ;characteristic spectrum
南板蓝根为爵床科植物马蓝 Strobilan thes cusia(N ees)
O． Ktze 的干燥根及根茎，有清热解毒，凉血的功用，用于温
病发斑，丹毒，流感，流脑［1］。
目前南板蓝根为《中华人民共和国药典》2010 版所收载
品种，为贵州道地药材。南板蓝根作为常用中药，是大青叶、
板蓝根药材及制剂的主要来源之一［2］。南板蓝根已被广泛
应用于各种复方制剂中，复方南板蓝根冲剂在抗病毒、消炎
散清等方面的疗效尤为突出。本实验对黔产南板蓝根的
HPLC特征图谱进行研究，建立南板蓝根的 HPLC特征图谱。
现行质量标准对于南板蓝根仅有定性和理化鉴别，仍缺乏特
征图谱等方法来鉴别药材的真伪优劣。该特征图谱的建立
可推广作为贵州南板蓝根药材的真伪、优劣的鉴别手段，能
为贵州南板蓝根的质量标准提升提供技术支撑。
1 材 料
1． 1 仪 器
Agilent高效液相色谱仪(安捷伦 1260 系列) ;二元泵，
二极管阵列检测器(DAD) ;Agilent Chemstation 色谱工作站，
AY120 型电子天平(日本岛津) ，HS10260D 型超声波清洗机
(天津恒奥科技公司，功率 250 W，频率 33kHz) ，DK －98 －Ⅱ
A电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器公司)。
1． 2 试 药
甲醇、乙腈均为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其他试剂均
为分析纯。南板蓝根药材均自采集，经贵阳中医学院魏升华
副教授鉴定为爵床科植物马蓝 Baphicacant huscusia(Nees)
Bremek的干燥根茎及根。样品来源及编号见表 1。
表 1 样品来源及其编号
编号 来源 编号 来源
1 小屯 01 7 台江 01
2 小屯 02 8 台江 02
3 独山 9 兴仁
4 关岭 1 10 赵家坪
5 关岭 2 11 者忙
6 兴义
1． 3 指纹图谱相似度评估软件
中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(国家药典委
员会，2004 年 A版)。
2 方法与结果
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微 量 元 素 与 健 康 研 究
Studies of Trace Elements and Health
2014 年 01 月
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2． 1 供试品溶液的制备
取本品粉末(过 80 目筛)0. 5 g，精密称定，置量瓶中，精
密加入 25 ml水溶液，称定重量，加热回流 1 h，放冷，再称定
重量，用水补足减失的重量，摇匀，离心，精密量取上清液 20
ml，置蒸发皿中，挥去溶剂，定容至 5 ml量瓶中，滤过，即得。
2． 2 方法学考察
2． 2． 1 色谱条件
ZorBax Eclipse XDB － C18 柱(Analytical 4. 6 mm × 250
mm，5μm) ;进样量 206μl，流速:1. 0 ml /min;检测波长为 280
nm，以流动相为 0. 05% 磷酸水溶液 －甲醇为流动相进行梯
度洗脱，柱温 30℃，梯度洗脱条件见表 2，色谱图略。
表 2 流动相洗脱梯度
时间(min) 0． 05%磷酸水(%) 甲醇(%)
0 98 2
10 98 2
60 50 50
65 50 50
2． 2． 2 空白试验
为考察流动相及样品液中溶剂对色谱基线的干扰，进行
空白试验:按已确定色谱条件进样 20 μl 水，进行梯度洗脱，
记录色谱图，结果表明:可见空白基线平稳、基本无干扰。
2． 2． 3 完整性试验
为考察指纹图谱的完整性，按已定条件记录 65 min 的
色谱图后，继以梯度结束时的流动相比例洗脱，并记录色谱
图至 130 min，结果表明:可见 65 min后基本检不出色谱峰，
按已定梯度洗脱运行 65 min即可记录完可检测成分。
2． 2． 4 稳定性试验
取同一份黔产南板蓝根供试品溶液，按已定色谱条件分
别于 0、2、4、8、12 h 进行检测，采用软件对其进行分析。结
果表明:稳定性试验考察的是样品在处理好后放置等待检测
的过程中是否发生变化，进而对分析结果产生影响。经计
算，所得到的 5 个色谱图中各共有峰保留时间，相对峰面积
ＲSD均小于 3. 0%，以标准图谱为对照计算相似度，相似度
结果均不小于 0. 99 表明供试品在 12 h内基本稳定。
2． 2． 5 精密度试验
此试验是为了考察检测样品的仪器是否稳定可靠。取
同一份黔产南板蓝根供试品溶液，按已定色谱条件进行测
定，连续进样 5 次，采用国家食品药品监督管理局推荐的中
药指纹色谱的相似度计算软件(国家药典委员会，2004 年 A
版)对黔产南板蓝根提取物重复性试验的图谱进行分析，并
考察了共有峰保留时间及面积的 ＲSD。结果表明:对南板蓝
根药材色谱图进行直观观察，其指纹图谱的全貌无明显变
化，从表可以看出，精密度试验相关系数(取中位数)均在
0. 90 以上，各主要色谱峰相对保留时间，相对峰面积的 ＲSD
为均小于 3%，说明仪器精密度良好。
2． 2． 6 重复性试验
分别取同一批号黔产南板蓝根药材 5 份，按已定方法制
备成供试品液体，按已定色谱条件进行测定采用软件对其进
行分析。结果表明:所得到的 5 个色谱图中各共有峰保留时
间，相对峰面积 ＲSD均小于 3. 0%，实验方法重复性良好，符
合建立特征图谱的要求。
根据以上方法学的考察，表明该实验方法测定南板蓝根
的指纹图谱，精密度、稳定性、重复性均较好，能够准确测定
该品的指纹图谱。
2． 3 样品的检测
取 11 批不同产地的南板蓝根药材，按 2． 1 项下条件制
备样品溶液。分别取样品溶液 20 μl，按 2． 2． 1 项下色谱条
件进行分析本实验对不同产地的 11 批南板蓝根药材进行了
研究，从整体上看，黔产南板蓝根的化学成分基本一致，根据
11 批样品的 HPLC图谱给出的相关系数及采用软件计算结
果，确定 10 个峰为共有峰。由于第 5 号峰分离度好，无杂质
干扰，峰面积较大，且比较稳定，故确定其为参照峰，鉴于实
验条件及时间所限，本研究未进行特征峰归属研究。将色谱
数据导入软件，用中位数法对相似性进行分析，自动匹配后
得到的图谱及数据如下，但含量上存在较大的差异。
2． 4 相似度评价
将所得的 11 批样品的 HPLC 图谱 AIA 格式依次导入
《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2004A 版》计算相似
度。结果 11 个样品相似度分别为 0. 993、0. 998、0. 992、
0. 997、0. 999、0. 997、0. 838、0. 949、0. 994、0. 982、0. 855、
1. 000。其中 2 批的相似度低于 0. 9，说明不同产地的南板蓝
根药材质量存在差异。
3 结 果
9 批贵州南板蓝根药材的相似性均较好，在 0. 949 ～
0. 999之间，说明由 9 批贵州产南板蓝根药材得出的指纹图
谱的共有模式具有代表性，可以反映贵州南板蓝根药材的指
纹特征。贵州产南板蓝根药材相似度均在 0. 83 以上，样品
中主要的色谱峰基本一致;其主成分基本相同，但含量有差
异。初步说明不同产地的南板蓝根各组分的含量有较大的
差异。
4 讨 论
在摸索供试品溶液的制备过程中，提取溶剂曾采用不同
浓度的乙醇进行比较，由于其出峰数量很少，而且分离度较
差，故文中并未附图谱，只比较了不同浓度的甲醇、乙酸乙
酯、水。由图谱可看出，水提取的化学成分最多，分离效果较
好，且峰面积高，故采用水为提取溶剂。
本实验经方法学考察，表明所建立的南板蓝根特征图谱
方法可行。本实验检测了贵州 11 批 8 个不同产地的南板蓝
根，共选择了 10 个共有特征峰，不同产地南板蓝根主要成分
基本相同，但峰面积差异较大，由于不用产地的样品受环境
因素影响，其主要成分含量差异较大。
由于 2010 版《中国药典》南板蓝根项下，未能对其进行
有效成分或指标成分的含量测定。本研究虽进行了南板蓝
根中腺苷、靛蓝、靛玉红化学成分的定量研究，含量虽较低，
但均在万分之一以下。鉴于实验条件及时间所限，本研究未
进行特征峰归属研究，建议后续项目继续深入。因此，对 5
号共有峰值即参照峰进行化学成分的鉴定和深入的药效学
研究，为南板蓝根的含量测定指标性成分或有效成分的确
定，提供新的定量指标。
参考文献:
［1］国家药典委员会．中国药典( 一部) ［S］．北京: 化学工业
出版社，2010．
［2］孙小兵，盛家荣，王定培．南板蓝根化学成分及药理作用
研究［J］．广西师范学院学报，2008，25( 4) : 66 － 69．
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