全 文 ：关键词：三叶青；总黄酮；紫外－可见分光光度法
中图分类号：R284.1 文献标志码：B 文章编号：1004-5627（2013）03-0044－02
三叶青为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤
Tetrastigrna hemsleyanum Diels et Gilg.的块根或全
草，别名为金线吊葫芦、丝线吊金钟、三叶扁藤、石
老鼠、小扁藤、石猴子、土经丸、三叶对、一粒珠等。
味微苦，性平，具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛
的功能。 其内服可治疗小儿高热惊厥、痢疾、支气
管炎、肺炎、咽喉炎、肝炎及病毒性脑膜炎；外敷可
治疗毒蛇咬伤、扁桃体炎、蜂窝织炎、跌打损伤等
［1］。不同产地的三叶青总黄酮含量的测定方法已有
报道 ［2-3］，但未见福建省三叶青的质量评价报道。
因福建的福安、顺昌、泰宁等地已开始大量种植三
叶青， 急需建立测定闽产三叶青总黄酮含量的方
法，为评价闽产三叶青种植栽培质量提供依据；同
时我们也对比了省外三叶青样品， 为闽产三叶青
的开发利用提供实验依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器 KQ-500E 型超声波清洗器（昆山市超
声仪器有限公司）；UV9100 紫外－可见分光光度计
（北京瑞利分析仪器公司）；DV215CD 型十万分之
一电子天平（美国奥豪斯公司）。
1.2 试药 三叶青于 2012 年 8～12 月实地采自
或购自福安、顺昌、泰宁、福鼎、柘荣等地，经福建
中医药大学中药鉴定教研室卢伟教授鉴定为葡萄
科崖爬藤属植物三叶崖爬藤 Tetrastigrna hems-
leyanum Diels et Gilg. 的块根。 芦丁对照品（中国
药品生物制品检定所， 批号：110774-201113）；甲
醇（德国 Merck 公司，色谱纯）；水为重蒸水，其它
试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液制备 精密称定芦丁对照品
44.80 mg，置 100 mL 瓶中，加甲醇溶解并稀释至
刻度，得每 1 mL 含芦丁 448 μg 的对照品溶液。
2.2 供试品溶液制备 取三叶青供试品 100 g 粉
碎过 40 目筛，取粉末 2 g，精密称定，置具塞锥形
瓶中，加入甲醇 50 mL，称定重量，超声处理（250
W，40 kHz）30 min，放冷，用甲醇补足减失的重量，
摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 总黄酮含量测定 精密吸取供试品溶液 5
mL 置 25 mL 瓶中，加入 1 mL 15%亚硝酸钠溶液，
摇匀后放置 6 min， 加入 1 mL 的 10%硝酸铝溶
液，摇匀放置 6 min 后，加入 10%氢氧化钠溶液 10
mL，用甲醇定容，摇匀后放置 15 min，以相应试剂
作空白，在 500 nm 波长处，测定吸光度值。
2.4 方法学考察
2.4.1 线性范围 精密吸取对照品溶液 0.5、1、
2、3、4 mL 置 25 mL 瓶中，加甲醇至 5 mL，得不同
浓度的对照品稀释液， 然后滴加 1 mL 的 15%亚
硝酸钠溶液，摇匀放置 6 min，再加入 1 mL 的10%
硝酸铝溶液，摇匀放置 6 min 后，加入 10%氢氧化
钠溶液 10 mL，最后用甲醇稀释至刻度，摇匀后放
置 15 min，以相应试剂作空白，在紫外-分光光度
计的 500 nm 波长处测定其吸光度值。以吸光度值
（A）为横坐标 ，以对照品溶液的浓度 （C）为纵坐
标，绘制标准曲线，得总黄酮线性回归方程：
A＝3.9103C＋0.041 r＝0.9995
线性范围为 8.96～71.68 μg ／mL。
2.4.2 精密度试验 分别精密吸取供试品溶液 5
mL，共 6 份，按 2.3 项测定吸光度值，得总黄酮吸
光度值的 RSD 为 0.16%。
2.4.3 重复性试验 称取同一批次三叶青样品 6
份，按照 2.2 项下方法，制备供试品溶液，吸取供
试品溶液 5 mL，按 2.3 项测定吸光度值，得供试品
中总黄酮吸光度值的 RSD 为 2.24%。
2.4.4 稳定性试验 吸取供试品溶液 5 mL，按
不同产地三叶青中总黄酮含量的比较
范世明，林 婧，许 文，林炎彬，卜占峰，陈 丹
（福建中医药大学药学院，福建 福州 350122）
收稿日期：2013-04-09
基金项目：福建省科技计划项目（20102004）
作者简介：范世明（1964—），男，高级实验师，主要从事中药鉴定与资源评价研究。
通讯作者：陈丹（1961—），女，教授。 E-mail：gscd2@163.com
Journal of Fujian University of TCM June 2013，23 （3）
福建中医药大学学报 2013 年 6 月 第 23 卷 第 3 期
44
DOI:10.13261/j.cnki.jfutcm.002815
表 1 加样回收试验
样品
1
2
3
4
5
6
样品的芦丁含量 ／mg
4.259
4.262
4.250
4.263
4.256
4.252
加入芦丁对照品量 ／mg
4.48
4.48
4.48
4.48
4.48
4.48
测得量 ／mg
8.718
8.703
8.684
8.621
8.699
8.648
回收率 ／%
99.53
99.14
98.98
97.28
99.17
98.12
平均回收率 ／%
98.70
RSD ／%
0.85
表 2 不同产地三叶青根总黄酮的含量测定
产 地
福安白沙野生
福安白沙栽培
福安白云山野生
福安市售
柘荣野生
福鼎野生
福州北峰野生
顺昌大布栽培
顺昌大布野生
顺昌九龙山栽培
顺昌九龙山野生
泰宁寨下野生
泰宁杉城镇栽培
湖南沅陵县野生
浙江磐安栽培
贵州安顺野生
亳州药材市场市售
n
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
总黄酮含量 ／%
0.0785
0.4245
0.0920
0.1956
0.1599
0.2771
0.1849
0.0828
0.2674
0.1710
0.3354
0.3374
0.4567
0.2674
0.2017
0.1655
0.1539
RSD ／%
1.08
1.01
1.95
1.14
2.06
2.00
2.01
2.18
1.04
2.43
2.09
2.11
1.37
2.81
1.52
1.69
0.51
2.3 项方法， 于室温下放置 0、15、30、60、120 min
后，测定总黄酮的吸光度值的 RSD 为 2.28%，表明
供试液在 2 h 内稳定。
2.4.5 回收率试验 分别精密称取同一批次已知
总黄酮含量的三叶青 1 g，共 6 份，加入适量的芦
丁对照品，按 2.2 项下方法制备供试品溶液，依法
测定，结果见表 1。
2.5 样品含量测定 取不同产地三叶青样品，按
2.2 项方法制备供试品溶液，按 2.3 项方法测定吸
光度值，每批测定 3 份，根据标准曲线计算样品中
总黄酮的含量，按干燥品计，结果见表 2。
3 讨 论
3.1 我们采用紫外－可见分光光度法测定闽产三
叶青中总黄酮含量，操作简单，为闽产三叶青的进
一步开发利用提供了质量控制和评价的实验依
据。
3.2 通过闽产三叶青的含量测定，各个产地的三
叶青根总黄酮含量存在明显差异，其中福安、泰宁
的三叶青总黄酮含量较高，达 0.42%以上，提示闽
产三叶青中这 2 个产地的品质相对较好， 适合开
发利用。
参考文献：
［1］ 陈丽芸， 郭素华 . 三叶青的化学成分及药理作用研究进展
［J］. 浙江中医药大学学报，2012，36（12）：1368-1370.
［2］ 卢爱芳，祁明君，李宗亮，等. 三叶青愈伤组织培养及其总黄
酮含量的研究［J］. 中药材，2010，33（7）：1042-1045.
［3］ 郑军献，胡轶娟，梁卫青，等. 紫外可见分光光度法测定三叶
青中总黄酮的含量［J］. 中国中医药科技，2009，16（5）：386-
387.
第 3期 范世明等：不同产地三叶青中总黄酮含量的比较 45