全 文 ：丫 、
HP L C 内做测定干姜和炮姜中 6 一姜酚的含量
南京中医药大学 (南京 21 X( 犯9 ) 朱国元 彭国平 文红梅
摘要 目的 :建立一种测定干姜和炮姜中 吞姜酚含量的方法 。 方法 : 以禁为内标物 ,吞姜酚作为对照品 , 采用
扭 , ￡ 内标法 。 K or alsn i】c
一
18 色谱柱 ( 4 . 6 ~ x 乃 0 ~ , 5四 ) ;流动相为甲醇一 0 . 1% 三氟乙酸水溶液 ( 67 : 33 ) ,紫外检
测波长为 Z18 unr ;结果 : ` 姜酚的线性范围为 53 . 6 一 1 . 6乃 子官 m l , r = o 注刃 , 〕 ( n = 6) ,平均回收率为 10 . 43 % 』S D 为
0
.男% 。 结论 :该法测定干姜和炮姜中姜酚的含量 ,操作简便 ,结果准确 。
关键词 干姜 炮姜 扭几C 内标法
干姜为姜科植物姜 云呀淤 r 动陇 i而 le R胎 C . 的干
燥根茎 ,炮姜为干姜的饱制加工品 。 两者均为临床
上常用的中药 , 干姜具有温 中散寒 , 回阳通脉 , 燥湿
消痰的功效 ;炮姜具有温中散寒 , 温经止血 的功效 。
干姜和炮姜都主含挥发油 、 姜辣素类及二苯基庚烷
类化合物 。 其 中 6 一姜 酚 ( 6 一S h o , 户灵 )为姜辣素类 中
的主要成分 ,具有抑制血小板聚集 、 清除 自由基 、 抗
炎 、镇痛 、 增强心肌收缩力和增加心率等广泛的药理
作用〔’ 〕。 张维勤图曾报道用分光光度法测定干姜中
总姜辣素的含量 。 鹿野美弘等阎报道用 H p l￡外标
法测定干姜中 6一姜酚的含量 。 本文运用 Hr l刃 内标
法对干姜和炮姜中的 6 一姜酚进行 了含量测定 , 本法
操作简便 ,结果准确 ,可作为控制干姜和炮姜质量的
一种有效方法 。
1 仪器与试剂
W a te 花 51 5 泵 , W a tesr 24 87 紫外一可见检测 器 ,
础耐” e 进样器 , 中科 院大 连化学 物理所 W D L 95
色谱工作站 。 6一姜酚对照品 (自制 , 经理化试验及波
谱分析鉴定 , HP LC 面积归一化法测 得含量纯度为
9
.
0% ) ;甲醇为色谱纯 (淮 阴精细化工研究所 ) , 水
为重蒸馏水 , 其余试剂均 为分析纯 。 干姜及炮姜药
材购自安徽毫州 ,我校生药学教研室吴启南 副教授
对其进行鉴定 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 K or m as i1 C一 18 色谱柱 , 4 .6 ~ x
25 0 ~
,
5 脚 ;流动相为甲醇一 1% 三氟 乙酸水溶液
( 67
: 3 3 )
, 流速为 1 . O lnI /而 ;n 检测波长为 Z18 ln ;柱
温 30 ℃ ;理论塔板数以 6一姜酚计算为 7 % ,吞姜酚与
内标的分离度为 3 . 25 。
2
.
2 对照品溶液及供试品溶液的制备
2
.
2
.
, 对照品溶液及内标溶液的制备 : 精密称取
减压干燥至恒重的 6一姜酚对照品 2 . 68 gm , 置于 10
而 容量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 , 即得
对照品溶液 (每 1 而 中含姜酚 0 . 26 8 mg ) 。 精密称
取减压干燥至恒 重的 内标物蔡 10 mg , 置 于 l o ml
,
65 2
.
容量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,湘 , 即得内
标溶液 (每 1 耐 中含蔡 0 . l mg ) 。 -
2
.
2
.
2 供试品溶液的制备 : 精密称取炮姜 O ; 3 9,
置 50 d 容量瓶 中 , 加 , 7 0% 甲醇 40 耐 超声提取 20
ha n
,精密加人 内标蔡溶液 ( 0 . 1 n l酬而 ) 1 而 , 再加
70 % 甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 过 0 . 45 脚 微孔滤膜 ,即得供试品溶液 。 精密称敢炮姜 q. 3 9 , 置 50 而 容
量瓶中 , 加 7 0 % 甲醇 O4 血 超声提取 20 而 n , 再加
70 % 甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 过 0 . 45 脚 微孔滤膜 ,
即得不含内标的样品溶液 。
2
.
3 线性关系考察 精密量取 吞姜酚对照 品溶液
( 2
.
68 1
丈岁而 ) Z ml , 采用逐级稀释 法分别配成 53 . 6
拼留而 、 26 . 8 仁g/ 血 、 13 . 4 1丈留d 、 6 . 70 1之酬而 、 3 . 35 “ 岁
血 、 1 . 68 拜岁血 的系列对照品溶液 , 分别吸取上述溶
液 5 川 ,注入液相色谱仪 , 测定 , 以 峰面积为纵坐标
(Y )
,对照品浓度 (解mI )为横坐标 ( x ) ,绘制标准曲
线 ,得 回归方程 : Y 二 3
0
.望污旧 ( n = 6 ) , 6一姜酚
+ 798 1
.
48 1 :
r =
.
6 一 1
.
67 5 1
上岁而
之间具有 良好的线性关系 。
2
.
4 相对较正因子的测定 精密量取 6 一姜酚对照
品溶液 ( 268 拌留耐 ) 2 而 , 内标蔡溶液 ( 10 拌留 d ) 1 . 5
血 ,置 10 而 量瓶中 ,加流动相稀释至刻度 ,摇匀 ,制
成混合对照品溶液 。 再按 2 倍数逐级稀释 5 份 ,分
别吸取上述溶液 5 闪 , 注人液相色谱仪 , 测定 , 计算
各自的相对校正因子 ,结果见表 1 。
表 1 姜酚对蔡的相对校正因子测定结果
姜酚对照品 内标物蔡编
号 浓度
尸岁浏 峰面积
浓度
产唱 / d 峰面积
姜酚相 /
对校正因子
平均值 卿又% )
1 53
2 26
3 13
2
.
5
6以) 1 . 习肠 x l护
8X( ) 9
,
4 36 x l护
冲以〕 4 .即 3 x l护
7 (X) 2
.
3 56
x l护
3印 1 . 23 7 x l护
67 5 .6 24 7 x l护
精密度试验
l 5 3 3() 6
.
6 19 x l护 1 1 . 559
7
.肠5 3 . 1璐 x l护 11 . 5 16
3
.
83 2 l
.
5 74 x l护 11 . 月仅i
1
.
9 16 7
.
,砧 x l护 1 1 . 5 3 1 1 1 46 5 0 . 93
0
.
95 8 4
.肠 2 x 105 1 1 . 45 5
0
.
4 79 2
.
o l Z x l护 1 1 . 2 63
精密吸取供试品液 ,依法重复
中药材第 24 卷第 9 期 2以 ) 1年 9 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2001. 09. 016
子 、
进。 5 次 , ,。, 。 _姜酚含纂果 DSR = 。 . 3 2% 、 n =
5)
。
2
.
6 稳定性试验 精密吸取供试品液 ,隔 Z h 测一
次 ,共测七次 , 结果 咫D 二 1 . 03 % ( n = 7 ) , 测定结果
表明本品供试液中 6一姜酚在 12 h 内稳定 。
.2 7 重复性试验 精密称取同一批样品 6 份 , 按 `
供试品溶液的制备方法制备 , 测定 6 一姜酚含量 ,结果
邢D 二 0 . 29 % ( n = 6 ) 。
2
.
8 回收率试验 精密称取 已知含量的同批样品
6份 ,分别精密加人 吞姜酚对照品 ,按供试品溶液的
制备方法 进行 制备 , 依 法 测 定 , 平 均 回 收 率 为
1的 . 43 % , SR D 为 0 . 94 % ( n = 6) 。
2
.
9 样品测定 取干姜样品 6 批 , 炮姜样 品 6 批 ,
依法测定 ,结果见表 o2
表 2 六批样品中已姜酚含 t 测定结果
解 ,作为对照品有一定 的局限性 。 因此我们设计 了
H P LC 内标法来测定它的含量 。 通过大量筛选 , 我们
选用了容易得抓纯度高的晶体蔡作为内标 ,有效地
解决了测定油状化合物含量中许多不利因素 。 该方
法样品预处理简单 , 操作简便 , 回攻率 、 稳定性符合
要求 , 重现性好 , 克服 了比色法专属性较差 、准确度
低等缺点 ,也解决了 HP LC 外标法对照 品 6一姜酚不
易贮藏 、不利于操作等缺点 ,可作为控制干姜和炮姜
药材质量的一种有效方法 。
3
.
2 6 批不同的干姜和炮姜中 、 姜蘸酥含量有着较大的差异 ,而且炮姜中 6一姜 酚的平均含量较干姜
中 6 一姜酚的平均含量要高 。 这种差异是否与药材的
产地 、采收季节 、加 J习包制有直接关系 , 有待进一步
研究 。
献
、文、考参
样品 -6 姜酚含量
(% )
平均含量 ( % ) 样品
吞姜酚含量
(% )
平均含量 (% )
23
=1姜 0 . 321 、 0 . 155 、
0
.
03 5
、
0
.哭 9 、
0
.
143
、
0
.
0乃
0
.
17 1
炮姜 0 . 4 17 、 0 . 313 、
0
.加 5 、 0 . 169 、
0
.
2 82
、
0
.
20 1
0
.
265
1 陈惠芳 植物活性成分辞典 (第一册 ) . 北京 : 中国 医药
科技出版社 , 2X() :l 如2
张维勤 . 姜辣素的含
讨论
-6 姜酚是干姜和炮姜 中的主要成分 , 但其为
鹿野美弘 ,等 . 汉水浸
草药 , 19 2 ,抖 ( 2 ) : 110
质量鉴定 (第 2 报 ) “ 干qé内O
油状化合物 , 不易分离纯化 , 且长时间贮藏后容易分
姜 ” 中的 ` 姜酚 . 生药兰i群全杂志 , 19 盯 , 4 1 (4) : 2 7 7
(双幻1 一 m 一仍 收稿 )
加勒比松叶挥发油成分分析 海南师范学院化学系 (海 口 571 15 8) 陈光英 宋小平 韩长 日 严红莲 程 斌
摘要 利用气相色谱一质谱一计算机联用技术对加勒比松叶挥发油成分进行分析 ,结果分出 36 个色谱峰 ,鉴定
了 29 个化合物 ,占总量的 97 . 172 % 。 其中主要成分是 : 草澄茄烯 (21 . 95 3% )和 件水芹烯 (21 . 抖2% ) 。
关键词 加勒比松 挥发油 色谱一质谱联用
加勒比松 (几溯 ca ibr ae M o况 le t )属于松科松属
植物 ,中国树木学名为古巴树川 。 我 国松科松 属植
物约有 38 种 12 变种 , 其中引种栽培有 16 种 2 变
种 ,而加勒 比松有 3 变种 。 加勒比松属热带松类 ,为
世界上最速生的针叶树种之一 , 原产加勒比海国家 ,
在海南的澹县 、 屯昌等地有大量栽培图 ,资源十分丰
富。 由于其速生高产 , 已在世界各热带和亚热带国
家普遍引种 。 目前每年除提供大量木材外 , 并未对
其丰富的挥发油加以利用 。 为了更好地开发利用加
勒比松资源 , 我们采用气相色谱 一质谱联用法对加勒
比松叶挥发油成分进行了分析 , 通过计算机检索并
与DATABS E/ N珊 98 . L 质谱库提供的标准精细谱
图对照鉴定了化合物 ,且确定 了各成分的相对含量 。
1 实验部分
,
.
1 药材及挥发 油提取 加勒 比松 叶采 自海 口
市 ,经本校生物系何敏碧讲师鉴定为松科松属加勒
比松 尸。秘 C a ibr 咬配 a M O此纯t 的升 。 将 47 3 . 5 9加勒 比
松叶切碎 ,进行水蒸汽蒸馏 , 收集蒸出液 ,用 乙醚萃
取 ,合并乙醚萃取液 , 用无水硫酸钠干燥后 回收乙
醚 , 得浅绿色具清香气味的挥发油 1 . 108 9 , 得油率
约为 0 . 2 3% 。
,
.
2 实验仪器及条件 Er - 68卯 型气相 色谱与
H-P 5 97 3 型 质谱仪联 用 。 色 谱条 件 : H P~州 NOW云
柱 ,柱长 30 m , 内径 0 . 25 ~
,镀膜厚度 0 . 25 脚 , 载
气 eH , 分流 比 印 : 1 , 柱 前压 5 6 . 7 K l、 , 流量 I n方
而 n ,进样 口温度 25 0 ℃ ,接 口温度27 0 ℃ , 自动进样 ,
中药材第 解 卷第 9 期 2X() 1 年 9 月