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2 0 9
· 中国药事2 0 5年第 9 1卷第 5期
抗感颗粒中绵马贯众的鉴别和赤勺的含量测定
梁洪华 , 邓君 丽 (山东省烟台市药品检验所 , 2 64 0 0 0)
摘要 : 采用 IT JC 法及 H IP J C 法对抗感颗粒中的绵马贯众进行鉴别及对赤勺的主要成分芍药普进行含量测
定 。 T LC 法中 , 以氯仿 一 丙酮 一 冰醋酸 ( 16 : :4 0 . 3) 作 为展开剂 ; HP L C 定量分析 中 , 以 HyP er isl B D S
C
, 8为色谱柱 , 乙 睛 一 水 一 磷酸 ( 20 : 90 : 0 . 1) 为流动相 , 检 测 波长 为 23 0n m , 芍 药普在 20 . 31 -
20 3
.
1此 · m l 一 ’ 范围内线性 关系良好 ( : = 0 . 9 9 ) , 其平均回收率为 9 . 57 % , R s D 为 0 . 96 % 。 TL c 法专
属性较强 , H P LC 法分 离效果好 、 准确 可靠 , 可为抗感颗粒的质量控制提供科学依据 )
关键词 : 杭感颗粒 ; TL C ; 绵马贯众 ; H P L C ; 芍药普
中图分类号 : R9 27 . 2 文献标识码 : A 文章编号 : 10 0 2 一 7 7 7 7 ( 2 0 0 5 ) 0 5 一 0 2 9 0 一 0 3
I ds
n t in c a t i o n o f R五i z o m a D yr o P t e r i s C r as i r h i z o m a it s a n d D e t e r m i n a t io n o f R a山 x P a eo in a e R u b r a i n
K a n g g a n G r a n ul e s
L ia n g H o n g h u a a n d D e n g Ju n li ( Y a n t a i I n s t i t u te fo
r D ur g C o n t or l
,
S h a n d o n g P or
v i n e e 2 6 4 0 0 0 )
A B S T R A C T A T LC m e t h o d fo r t h e i d e n ti if e a t io n o f hr i
z o m a d w o p te r i s e r a s s i
r h i z o m a ri s a n d a H PL C m e th o d fo r
t h e d e te mr i
n a t io n o f r a d i
x p a e o n ia e ur b r a i n K
a n g g a n g r a n u l e s w e er e s t a b l i s h e d
.
I n th e T l
」
C m e r h o d
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a e e to n e 一 g l a e i a l a e e ti e a e id ( 16 : 4 : 0
.
3 ) w
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er u s e d a s d e v e l o p er a g e n t
.
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e i n th e H PL C m e t h o d
, a H y p e r s i l
B D S C
18 e o lu m n w a s u s e d w i t h a e e t o n i t r i le 一 w a t e r 一 p h o s p h o ir e a e i d ( 2 0 : 9 0 : 0
.
1 )
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.
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e te e t i n g w a v e le n g t h w
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.
T h e li n e a
r r a n g e w a s 2 0
.
3 1 一 2 10 . 3 1卜g · m l 一 ’ ( r = 0 . 9 9 9 9 ) a n d a v e r a g e
r e e o v e叮 w a s 9 9 . 57 % , R S D = 0 . 9 6% . T h e TL C m e t h o d w a s s p e e i if e a n d th e H P L C m e t h o d w a s a e e u r a t e a n d
r e li a b le w i rh g o o d
s e p a r a t i o n e if e i e n
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.
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q u a l i t y e o n t or l o f K a n路 a n g ar n u l e s .
K E Y W O R D S K
a n g g a n G r a n u l e s : T LC ; R h i
z o m a D叮o p te r i s C r a s s i r h i z o m a t i s ; H P L C : R a d ix p a e o n i a s R u b r a
抗感颗粒收载于 《中国药典》 2 0 0 0 年版 , 由
金银花 、 赤勺 、 绵马贯众 3 味中药制成 , 具有清热
解毒之功效 , 用于外感风热引起的发热 , 头痛 , 鼻
塞 , 喷嚏 , 咽痛 , 全身乏力 , 酸痛等症 。 标准中质
量控制只有金银花 的 T L C 鉴别项 。 本品中赤勺为
处方之臣药 , 且投料量较大 , 芍药昔为其主要活性
成分 ; 绵马贯众的易混品 、 伪品较多 。 为了更好地
控制该制剂的质量 , 本文对其质量标准进行 一了实验
研究 , 增加了绵马贯众的 T L C 鉴别方法及芍药昔
含量的 H PL C 测定法 , 为该成药的质量控制提供了
科学依据 。
1 仪器与试药
德国塞多利斯 B 2P l l D 电子分析天平 ; 上海
S B 3 2 0 0 超声提取器 ; 日本岛津 LC一 20 or A 高效液
相色谱仪 , C LA sS 一 V P 色谱数据处理工作站 ; 薄
层板 自制 。
芍药昔对照品 、 绵马贯众对照药材 ( 中国药
品生物制品检定所 ) 。 抗感颗粒为市售品 。 乙睛为
色谱纯 , 水为重蒸馏水 , 其它试剂均为分析纯 。
2 定性鉴别
2
.
1 供试品溶液的制备
取样品 10 9 , 置 10 o m l 烧杯中 , 加沸水 4 0 m l ,
搅拌使其溶解 , 滤过 , 滤液用盐酸酸化至 p H 值为
2 一 3 后 , 再置分液漏斗中 , 用 乙醚萃取 3 次 ( 15
m l
、
l o m l
、
s m l )
, 合并 乙 醚液 , 浓缩 至干 , 残渣
加氯仿 Zm l溶解 , 即得 。
2
.
2 对照药材溶液的制备
取绵马贯众对照药材 3 . 0 9 ,置 l o ml 烧杯 中 ,
加水 40 ml 加热至沸腾 ,保持微沸 40 分钟 , 滤过 ,取
滤液照供试品溶液的制备方法 , 制成对照药材溶液 。
2
.
3 阴性对照溶液的制备
取不含绵马贯众的阴性样品 , 按供试品溶液的
中国药事 0 0 2 5年第 9 1卷第 5期 · 9 1 2·
制备方法 , 制成阴性对照溶液 。
2
.
4 薄层层析
分别吸取上述三种溶液各 10闪 , 分别点于 同
一硅胶 G 薄层板上 , 以氯仿 一 丙酮 一 冰醋酸 ( 16
: :4 0
.
3 ) 为展开剂 , 展开 , 展距 15 c m , 取 出 ,
凉干 , 先喷 以 10 % 的磷钥 酸 乙 醇溶 液 , 再喷 以
0
.
4% 的氢氧化钠溶液 , 置 日光下检视 , 结果 见图
1
。 供试 品及对照 药材 色谱 在 fR : 0 . 80 、 0 . 67 、
0
.
53
、
0
.
37 处均显 4 个蓝色斑点 , 阴性对照溶液
无此斑点 。
O O
O O
O O
O O
O O
…1 2 3图 1 绵马贯众的薄层色谱图供试品溶液 ; 2 . 绵马贯众对照药材溶液 ; 3 . 阴性对照溶液
含量测定
色谱条件
色谱柱 : H y p e r s i l B D S C , 8 ( 4 . 6m m x 2 5 o m m ,
5 林m ) ; 流 动 相 : 乙 睛一水一磷 酸 ( 20 : 90 :
0
.
1 ) ; 流速 : 1 . o m l · m i n 一 ’ ; 柱温 : 3 5℃ ; 检测波
长 2 3 0 n m ; 进样量 10 闪。 在此条 件下 , 理论板数
高于 2 5 0 0 。
3
.
2 对照品溶液的配制
精密称取印℃干燥 h4 的芍药昔对照品 20 . 3l gm ,
置 10 时 量瓶中 , 加甲醇适量 , 振摇使溶解 , 并用甲
醇稀释至刻度 , 摇匀 , 作为对照品储备液 。
3
.
3 供试品溶液的制备
取本品适量研细 , 精密称取约 2 . 摊 , 置 50 ml
棕色量 瓶 中 , 加 甲醇 30 ml , 超声处理 40 m in , 放
冷 , 用甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 滤过 , 取续滤液作
为供试品溶液 。
3
.
4 干扰性试验
按抗感颗粒的处方和制法 , 制成不含赤勺的阴
性样品 , 并按供试品溶液的制备方法 , 进行处理和
测定 , 结果见图 2 。 由图可见 : 抗感颗粒的其它组
分对芍药昔的测定无干扰 。
.
3
刁 少
2 4 6 8 1 0 1 2 14 U m ! n 2 4 6 8 1 0 1 2 1 4 盯m 一n
图 2
二 对照品 ;
3
.
5 线性关系测定
精密量取对照品储备液 1 , 2 , 4 , 6 , 8 ,
抗感颗粒 H P L C 色谱图
b
. 样品 ; c , 阴性对照 ; 1 . 芍药背
10m l
分别置 or ml 量瓶 中 , 用 甲醇稀释至刻度 , 摇匀 。
按上述色谱条件进行测定 。 以峰面积值为纵坐标 ,
对照 品浓度为横坐标 , 绘制标准曲线 , 回归方程
为 : A = 1 19 8 8 . 9 C + 15 4 2 9 . 1 , r = 0 . 9 9 9 9 , 线性范
围为 2 0 . 3 1 一 2 0 3 . 1林g · m l 一 ` 。
3
.
6 精密度试验
取对照品储备液 , 重 复进样 5 次 , 峰面积的
RSD 为 0 . 8% 。
3
.
7 稳定性试验
取同一供试品溶液 , 分别于制备后 O , 1 , 4 ,
8
,
10
,
12 h 依法测定 , 结果 R SD 为 0 . 9% 。
3
.
8 重复性试验
取同一批样品 5 份 , 照 “ 3 . 3 ” 项方法制得所
需溶液 , 按上述色谱条件测定 , 结果芍药营平均含
量为 1 . 9 9 一m g · g 一 ’ , 尺s 刀 为 1 . 3 0% 。
3
.
9 加样 回收率试验
取已知芍药昔含量 的样 品 (批 号 0 3 0 4 03 , 芍
药昔 含量 为 1 9 9l m g · g 一 ’ ) 粉末 3 份 ( 每份约
2
. 飞 ) , 每份平行称取 3 次 , 分别置 50 ml 棕色量瓶
中 , 各加人对照品溶液 ( 9 9 8 . 0 林g · m l 一 ’ ) 1 m l ,
Zml
,
3ml
, 按供试品溶液制备方法处理 , 每份测定
5 次 , 结果见表 1 。
3
.
1 0 含量测定
取本品 , 按 3 . 3 项 下的方法制备供试品溶液 ;
另取对照 品溶液 ( 16 2 . 4 8协g · m l 一 ’ ) , 按 “ 3 . 1 ”
项下色谱条件进行测定 , 读取峰面积值 , 以外标法
计算含量 , 结果见表 2 。
·
2 9 2
· 中国药事 2 0 5 年第 19 卷第 5 期
高效液相色谱法测定木蝴蝶中黄答昔含量
史建玲 , 张春雨 ’ , 李 琦 (新疆博州药检所 , 博乐 8 334 0 新疆博州质量与计量检测所 )
摘要 : 用 高效液相色谱法测 定木蝴碟中黄答等的含量 。 采用 K r o m as il C I: 柱分离黄答普
醋酸 ( 5 0 : 5 0 : 1 ) 为流动相 , 检测波长为 2 8 O n m 。 线性范围 0 . 4 一 2 . 0 林g ( r = 0 . 9 9 9 9 9 ) ;
97
.
7 %
,
R SD = 0
.
70 % (
n 二 5 )
。 本方法简便 、 快速 , 可用 于木蝴蝶中黄答普的含量测 定 。
甲醇 一 水 一 冰
平均回收率为
关键词 : 高效液相色谱 ; 黄答普 ; 木蝴蝶
中图分类号 : R9 2 7 . 2 文献标识码 : A 文章编号 : 10 0 2 一 7 7 7 7 ( 2 0 0 5 ) 0 5 一 02 92 一 0 2
D e t e
mr in
a it o n o f B a i e a li n i n S e m
e n O r o x y l i b y H P L C
Sh i J i a n l i n g
,
Zh a n g C h u n y u
’ a n d L i Qi ( B o
z
h o u I n s t i tu t e fo r D ur g C o n tor l
,
B o l e
,
X inj ia n g A u t o n o m o u S n
e g i o n
,
5 3 3 4 0 ;
’ B o z h o u I n s t i ut te fo r Q
u al i ty a n d M e a s u ir n g C o n tor l
,
x inj i a n g A u to n o m o u s R e g i o n )
A B S T R A C T A H p LC m e t h o d w a s e s at b l i s h e d fo r t h e d e t e mr i
n a t io n o f B a i e a l i n i n S e m e n O
r o x y li
.
A K r o m a s i l C
,:
e o l u m n w a s u s e d w i t h m e t h a n o l 一 w at e r 一 g l a e i a l a e e ti e a e i d ( 50 : 5 0 “ 1 ) a s m o b i le p h a s e
.
T h e d e t e e t i n g
w a v e l e n gt h w a s 2 8O n m Th e l i n e ar r an g e w a s 0
.
4 一 2 . 0林g ( r = 0
.
9 9 9 9 9 ) a n d th e
a v e r a g e r e e o v e 即 w a s 9 7 . 7 7% ,
RDS
= 0
.
7 0% ( n = 5 )
.
T h e m
e t h o d w a
s s im p l e a n d
r a p i d
.
I t e o u ld b e u s
e
d i n t h
e
d e t e
r m i n a t i o n o f B a i e a l i n in
Se m e n O
r o x
y l i
.
K E Y W O R D S H P I
」
C : S e m e n O r o x y l i ; B a i e a l i n
次业年 之乌节之亚不之七不 之纷不之全不乏业布诬 ,不之茎`尔逆有泪多`洲么不之)气 受` i气亏宫布之竺布之全邓 它年 业不之失手之今不出尔李示业矛 出年业 `产亚不 业矛愈邓色尔李
表 1 加样回收率试验结果 ( n 二 5)
样品 中含
芍药许的
量 ( m g )
]
.
9 9 1
1
.
9 7 9
1
.
9 9 6
1
.
9 9 2
1
.
9 8 6
1
.
9 8 3
1
.
9 6 9
1
.
9 9 5
1
.
9 7 2
加入芍药
昔对照品
量 ( m g )
0
.
9 9 8
0
.
9 9 8
0
.
9 9 8
1
.
9 9 6
1
.
9 9 6
1
.
9 9 6
2
.
9 9 4
2
.
9 9 4
2 9 9 4
测得芍药
背的总量
( n , g )
2
.
9 9 1
2
.
9 7 3
2
.
9 84
3
.
9 4 2
3
.
9 8 5
3
.
9 7 1
4
.
9 6 0
4
.
9 5 6
4
.
9 9 8
回收率
( % )
1(洲) 2 0
9 9
. 日〕
9 9
. 《X )
9 7
.
70
10( )
.
15
9 9
.
6( )
9 9
.
90
9 8
.
90
10 1
.
0 7
平均 10 收率 邢D
( % ) (% )
9 9
.
57
表 2 样品含 t 测定结果 ( n 二 5)
批 号
0 1 120 3
0 2 0 5《拓
0 3 04 0 3
含量 ( m g · g 五5口 (% )
2
.
2 3 6
1
.
2 7 3
1
.
9 9 1
{
.
4 讨论
采用 T LC 法以氯仿 一 丙酮 一 冰醋酸 ( 1:6 4
0
.
3 )为展开剂 , 对本品 中的绵马贯众进行鉴别 , 专
属性较强 ,分离效果好 ,斑点清晰 ,且操作简便 。
提取溶剂 的选择 , 本文参考文献 [`二用 甲醇超
声提取制备样品溶液 , 可大大降低提取温度 , 简化
提取步骤 , 并且芍药昔提取较完全 , 色谱分离较
好 , 保留时间适中 。
提取时间的确定 , 比较了 2 0 , 4 0 , 6o m in 等不
同提取时间对提取效果的影响 , 结果不同提取时间
的提取率基本相同 , 故选择提取时间为 40 m in 。
流动相的选择 , 将甲醇一水 、 乙睛一水 、 甲醇
一磷酸二氢钾缓冲溶液 、 甲醇一异丙醇一醋酸一水
等系统与本色谱条件进行比较 , 结果 , 本色谱条件
的重现性好 , 芍药昔与杂质峰分离效果最佳 。
本方法简便快速 , 精密度高 , 分离度好 , 可用
于抗感颗粒的质量控制 , 故建议新版药典对该制剂
增加绵马贯众的薄层色谱鉴别及芍药昔的含量测定 。
参考文献 :
「1 1 中国药典 【S」 . 一部 , 20以〕 : 4 74